Фортранс побочные действия отзывы: ФОРТРАНС — отзывы о препарате от 70 пациентов после применения

Содержание

Фортранс 64 гр, №4, пор

Торговое название

Фортранс®

Международное непатентованное название

Нет

Лекарственная форма

Порошок для приготовления раствора для приема внутрь

Состав

Один однодозовый пакет содержит

активные  вещества: макрогол 4000 — 64,0 г, калия хлорид — 0,75 г, натрия хлорид — 1,46 г, натрия сульфат безводный — 5,70 г, натрия гидрокарбонат — 1,68 г, натрия сахарин – 0,1 г

Описание

Порошок белого цвета, легко растворимый в воде, горько-соленого вкуса

Фармакотерапевтическая группа

Cлабительные.  Осмотические слабительные.  Макрогол

Код АТХ А06AD15

Фармакологические свойства

Фармакокинетика

Макрогол 4000 не абсорбируется из желудочно-кишечного тракта и не подвергается метаболизму.

Фармакодинамика

Действие Фортранса® основано на сочетании высокомолекулярного полимера с изотоническим раствором электролитов. Макрогол 4000 препятствует всасыванию воды из желудка и кишечника и способствует ускоренной эвакуации кишечного содержимого путем частых дефекаций. Электролиты, содержащиеся в Фортрансе®, препятствуют нарушению водно-электролитного баланса организма.

Показания к применению

— подготовка к эндоскопическому или рентгенологическому исследованиям толстого кишечника

— подготовка к оперативным вмешательствам на толстом кишечнике

— симптоматическое лечение запоров.

Способ применения и дозы

Перорально.

Взрослым и детям старше 15 лет.

Каждый пакетик разводится в 1 литре воды. Помешивать до полного растворения порошка в воде. Примерная доза составляет 1 литр раствора на 15 — 20 кг массы тела, что соответствует в среднем 3 — 4 литрам.

Фортранс® может назначаться как в разовой дозе (4 литра вечером накануне обследования) или в раздельной дозировке (2 литра вечером и 2 литра на следующее утро; обычно рекомендуется, чтобы последний прием Фортранса® был за 3 — 4 часа до проведения процедуры).

Побочные действия

— редко —  аллергические реакции в виде сыпи, крапивницы, отеков, крайне редко — анафилактический шок

— тошнота, рвота на начальном этапе применения, которые, как правило, исчезают при продолжении применения

— ощущение вздутия живота

Противопоказания

— гиперчувствительность к компонентам препарата

— боль в животе неясной этиологии

— дегидратация, сердечная недостаточность

— запущенная форма рака или другие заболевания толстой кишки, приводящие к чрезмерной слабости слизистых

— склонность к развитию кишечной непроходимости или кишечная непроходимость

— детский возраст до 15 лет (из-за отсутствия клинических исследований).

Лекарственные взаимодействия

Диарея, вызванная применением препарата, может привести к нарушению абсорбции других одновременно принимаемых препаратов. В случае одновременного назначения Макрогола 4000 с другими лекарственными средствами его рекомендуется назначать через 2 часа после их приема

Особые указания

Назначение лекарственных средств для лечения запоров является дополнением к следующим общегигиеническим мерам и диетотерапии: употребление пищи, богатой растительной клетчаткой и достаточного количества жидкости, физическая активность и восстановление регулярного рефлекса дефекации.

Лицам пожилого возраста с различными сопутствующими заболеваниями рекомендуется применять препарат под наблюдением медицинского персонала.

Препарат не рекомендуется для длительного лечения.

Беременность и лактация

Следует соблюдать осторожность при назначении беременным женщинам. Использование Фортранса® во время беременности следует рассматривать, только если польза превышает риск.

Нет данных о  выделении Макрогола 4000 в грудное молоко.  Так как Макрогол 4000 существенно не всасывается из желудочно-кишечного тракта, Фортранс® может приниматься во время грудного вскармливания.

Особенности влияния лекарственного средства на способность управлять транспортным средством или потенциально опасными механизмами

Не влияет

Передозировка

Симптомы: диарея.

Лечение: отмена препарата (диарея прекращается самостоятельно через 1 — 2 суток после отмены препарата)

Форма выпуска и упаковка

Препарат помещают в пакетики из бумаги, ламинированной алюминиевой фольгой и полиэтиленом. 4 пакетика вместе с инструкцией по медицинскому применению на государственном и русском языках помещают в картонную коробку

Условия хранения

Хранить при температуре не выше 25°С

Хранить в недоступном для детей месте!

Срок хранения

5 лет

Не использовать по истечении срока годности, указанного на упаковке.

Условия отпуска из аптек

Без рецепта

Производитель

Бофур Ипсен Индастри, Франция

Владелец регистрационного удостоверения

Ипсен Фарма, Франция
 

ФОРТРАНС: инструкция, отзывы, аналоги, цена в аптеках

ФОРТРАНС: инструкция, отзывы, аналоги, цена в аптеках — Medcentre. com.ua
  1. Главная
  2. Лекарства
  3. Пищеварительный тракт и обмен веществ
  4. Слабительные препараты
  5. ФОРТРАНС
3.3

37 586 просмотров

Как вы оцениваете эффективность ФОРТРАНС?

☆ ☆ ☆ ☆ ☆




Фортранс относится к слабительным лекарственным средствам с осмотическим эффектом. Благодаря образованию водородных связей полиэтиленгликоля (макрогол 4000) с молекулами воды препарат позволяет задерживать воду в кишечнике. При этом наблюдается разжижение его содержимого со значительным увеличением объема, за счет чего развивается слабительный эффект. Фортранс полностью выделяется из кишечника со стулом, что подтверждено фармакокинетическими исследованиями. Действие препарата начинается через 1-1,5 часа и длится 2-5 часов. При повторном приеме препарата опорожнение кишечника наблюдается утром через 20-30 минут после второго приема. Фортранс не абсорбируется из кишечника, не проникает в системное кровообращение и не метаболизируется. Элиминируется кишечником в неизмененной форме.

Показания к применению

Назначается Фортранс для лаважа кишечника при подготовке и рентгенологическим или эндоскопическим исследованиям, а также перед хирургическими операциями на кишечнике.

Способ применения

Фортранс используется только для взрослых. Содержимое 1 пакетика необходимо развести 1 литром воды. Назначается из расчета 1 литр раствора на 15-20 кг веса тела пациента. В среднем необходимое количество раствора – 3-4 литра. Один стакан раствора фортранса принимают в течение 10 минут, затем 1 литр – за следующие 60 минут. Рассчитанную дозу фортранса можно принять однократно или в 2 приема (утром и вечером). Если запланированная процедура или операция состоится утром, то раствор выпивают вечером. Прием фортранса должен быть окончен за 3 часа до запланированной операции или процедуры.

Побочные действия

Побочные действия от применения препарата Фортранс могут возникнуть со стороны желудочно-кишечного тракта: в начале приема возможны рвота, тошнота (исчезают при дальнейшем лечении), вздутие живота.
Реакции гиперчувствительности: крапивница, сыпь, отеки.

Противопоказания

Противопоказаниями к применению препарата Фортранс являются: выраженное нарушение общего состояния больного (тяжелая сердечно-сосудистая недостаточность, дегидратация),  распространенная карцинома кишечника, заболевания кишечника с повреждением слизистой оболочки (неспецифический язвенный колит, болезнь Крона), возраст до 15 лет, подозреваемая или подтвержденная кишечная непроходимость.

Беременность

Применяется Фортранс при беременности и кормлении грудью только тогда, когда вероятная польза от применения фортранса превышает возможные риски для плода (ребенка).

Взаимодействие с другими лекарственными средствами

При приеме Фортранса следует учесть, что препарат замедляет всасывание любых лекарственных средств, назначаемых внутрь. Поэтому во время приема фортранса не следует принимать другие препараты перорально.

Передозировка

Симптомом передозировки Фортранса является диарея. Лечение проводят симптоматическими средствами.

Условия хранения

Температура 30°С. В месте, защищенном от действия влаги. Срок годности 5 лет. Рецептурный отпуск.

Форма выпуска

Порошок для приготовления перорального раствора. В картонной коробке 4 пакетика по 74 г.

Состав

Активные ингредиенты: сульфат натрия безводный (5,4 г), натрия бикарбонат (1,68 г), хлорид натрия (1,46 г), хлорид калия (0,74 г), макрогол 4000 (64 г).
Вспомогательные ингредиенты: сахаринат натрия.

Дополнительно

Для пациентов пожилого возраста необходим прием под строгим врачебным наблюдением. Препарат не содержит в составе сахара, поэтому может применяться больным сахарным диабетом. Не противопоказан при непереносимости галактозы.

Основні параметри


ФОРТРАНС отзывы

ФОРТРАНС аналоги

Аналоги подобраны по действующему веществу, показанию и способу применения

  • Инструкция по применению
    от 341 грн
    155158 просмотров

  • Инструкция по применению
    от 23 грн
    113417 просмотров

  • Инструкция по применению
    от 174 грн
    91609 просмотров

  • Инструкция по применению
    от 63 грн
    62484 просмотров

  • Инструкция по применению
    от 112 грн
    50978 просмотров

Все аналоги

Смотрите также

  • 5. 0 1 отзыв

    118 просмотров

  • 5.0 1 отзыв

    308 просмотров

  • 5.0 1 отзыв

    2459 просмотров

  • 5.0 2 отзыва

    1448 просмотров

  • 5.0 3 отзыва

    864 просмотров

  • 3.7 3 отзыва

    1756 просмотров

САМОЛЕЧЕНИЕ МОЖЕТ НАВРЕДИТЬ ВАШЕМУ ЗДОРОВЬЮ

Схема подготовки к колоноскопии препаратом «Фортранс»

весь список

Наличие противопоказаний необходимо выяснить у врача.

Если подготовка проводится с помощью препарата «Фортранс», отпадает необходимость в постановке очистительных клизм. За 2 дня до колоноскопии необходимо перейти на специальную (бесшлаковую) диету, исключив из рациона питания овощи и фрукты, картофель, зелень, ягоды, грибы, бобовые, чёрный хлеб. Разрешается: бульон, манная каша, яйцо, отварное мясо, варёная колбаса, рыба, сыр, масло, кисломолочные продукты, кроме творога.

Приём раствора «Фортранса» желательно начинать не раньше чем через 2 часа после еды. Для эффективной подготовки нужно приобрести в аптеке 3 или 4 пакета препарата. Четыре пакета необходимо приобретать тем пациентам, у которых имеются крупные размеры тела, запоры, спаечная болезнь брюшной полости, выявленное ранее удлинение или опущение толстой кишки (при пассаже бария по кишечнику, ирриго- или колоноскопии).

Если проведение колоноскопии планируется с 8:00 до 14:00

Накануне исследования можно легко пообедать, не позднее 13:00, и лучше не ужинать. Содержимое каждого пакета «Фортранс» растворить в 1 литре качественной питьевой воды комнатной температуры. С 15:00 до 19:00 накануне исследования необходимо выпить 3–4 л раствора «Фортранс», не более чем по ¼ стакана. Если стараться выпить побыстрее, то очищение кишечника будет неполным (раствор выйдет быстро и не успеет достаточно перемешаться с содержимым кишечника).

При стремительном употреблении велика также вероятность побочных действий в виде тошноты, рвоты. Чтоб легче переносить вкус «Фортранса», лучше заедать его лимоном, апельсином или любым фруктом (лучше кислым), но без косточек, которые могут остаться в кишке. При необходимости, для улучшения вкусовых свойств можно добавить в раствор сок лимона. Людям, чувствительным к приёму больших объёмов жидкости (тошнота, отрыжка и т. п.), рекомендуется за 1 час до начала подготовки принять 1 таблетку препарата мотилиум.

Спустя приблизительно 1,5–2 часа после приёма первого литра раствора «Фортранс», появится жидкий стул, что является закономерным следствием приёма этого препарата. Жидкий стул будет периодически появляться ещё несколько раз примерно до 21:00 — 22:00. После этого, как правило, позывы прекращаются, и подготовка считается завершённой.

На исследование необходимо явиться натощак в назначенное время (как исключение, утром можно принять 200–300 мл воды или чая, но не позднее, чем за 2 часа до исследования, если не планируется наркоз).

Если проведение колоноскопии планируется с 14:00 до 19:00

Накануне исследования можно завтракать, обедать и даже принять лёгкий ужин, но последний приём пищи должен быть не позднее 18:00. Не рекомендуется принимать газированные напитки. Содержимое каждого пакета «Фортранс» растворить в 1 литре кипячёной воды комнатной температуры. С 20:00 до 22:00 накануне исследования необходимо выпить 2 л раствора, за 1 час постепенно, не более чем по ¼ стакана, выпивается 1 л раствора. Это важно, если стараться выпить побыстрее, то очищение кишечника будет неполным (раствор выйдет быстро и не успеет достаточно перемешаться с содержимым кишечника).

Спустя приблизительно 1,5–2 часа после приёма первого литра раствора появится жидкий стул, что является закономерным следствием приёма этого препарата. Жидкий стул будет периодически повторяться ещё несколько раз примерно до 24:00. После этого, как правило, позывы на низ прекращаются, и первый этап подготовки считается завершённым. Перед сном накануне, а также в 7:00 в день исследования можно выпить до 300–400 мл воды без газа или некрепкого чая. В день исследования проводится второй этап подготовки — приём двух литров раствора «Фортранс» с 8:00 до 10:00.

После этого вновь несколько раз будет жидкий стул, который, как правило, прекращается к 13:00. При плохой переносимости препарата накануне допустимо заменить приём раствора в день исследования постановкой двух очистительных клизм объёмом 1,5–2,0 л каждая в 8:00 и 10:00. На исследование явиться натощак в назначенное время (как исключение, можно принять 200–300 мл воды или чая, но не позднее, чем за 2 часа до исследования, если не планируется наркоз).

Важно!

Нет необходимости голодать накануне вечером и в день исследования. Можно пить бульон, чай, минеральную воду без газа, сок.
В дни подготовки к колоноскопии возможен и даже необходим прием необходимых Вам лекарств за исключением препаратов железа и активированного угля.
При подготовке больных сахарным диабетом необходима консультация врача.

Полезные советы и рекомендации врачей

Посещение проктолога

Подготовка к посещению проктолога

Если Вы собрались на прием к проктологу, то нужно соответственно подготовить прямую кишку, то есть поставить очистительную клизму.

Тщательное очищение кишки от содержимого является важным условием для проведения качественной диагностики.

В случае если у Вас сильные боли в области заднего прохода или кровотечение — ставить клизму не нужно. Не травмируйте больные участки лишний раз. Врач проведет осмотр и без этой подготовки.

Очистительную клизму необходимо ставить, если врач будет проводить Вам какие-то специальные исследования (ректороманоскопию, ирригоскопию, колоноскопию).

В общем случае перед первичным осмотром пациент ставит примерно за 2 часа до приема две очистительные клизмы. Если Вы записаны на прием в вечернее время, а днем нет возможности подготовиться, то очистительную клизму можно поставить после утреннего стула.

Визит к проктологу не накладывает никаких ограничений в приеме пищи, единственное — не следует накануне употреблять продуктов, провоцирующих метеоризм (повышенное газообразование).

Для постановки очистительной клизмы используют кружку Эсмарха. Ее можно купить практически в любой аптеке

Для клизм используйте только воду из проверенных источников (такую, которую можно пить). Лучше использовать кипяченую воду. Температура воды — около 37-38 градусов. Более холодная вода значительно усиливает двигательную активность кишечника, вызывает неприятные болевые ощущения. Использовать для клизмы воду с температурой более 40 градусов опасно для здоровья.

Главное условие – вода из клизмы должна полностью выйти из организма вместе с каловыми массами.

Еще одно очень хорошее средство подготовки к исследованию – препарат ФОРТРАНС.

Прием по соответствующей схеме позволяет одинаково эффективно очистить все отделы кишечника.

Вначале этот препарат применяли для очищения кишечника перед оперативными вмешательствами, эндоскопическими процедурами, рентгенологическим исследованием толстого кишечника и т.п. Оказалось, что он хорошо переносится больными (не вызывает неприятных ощущений — ощущения жжения в области анального отверстия, боли в области живота, спазмов и метеоризма, не оказывает влияния на общее самочувствие пациентов). Поэтому данное лекарственное средство стали рекомендовать для очищения кишечника, которое можно проводить в домашних условиях без участия медицинского персонала.

Данный вид подготовки идеально подходит больным с заболеваниями печени, желчного пузыря и поджелудочной железы.

Противопоказаниями к применению препарата Фортранс является неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, непроходимость кишечника, боль в области живота неустановленной этиологии.

Подготовка к МР-энтерографии

Магнитно-резонансная энтерография (МР-энтерография) – малоинвазивная методика, позволяющая получать детальные изображения тонкой кишки пациента


Показанием к проведению МР-энтерографии является:
Данные МР-энтерографии также позволяют определить активность, остроту процесса, выбрать метод лечения, спланировать оперативное лечение.
Противопоказания

Наличие у пациента кардиостимулятора, металлических имплантов, клипированных аневризм головного мозга, металлических осколков, протезов, беременность.

Имеются противопоказания для использования Глюкагона: сахарный диабет, повышенный уровень сахара в крови (гипергликемия), опухоли поджелудочной железы (инсулинома (возможно развитие гипогликемической реакции)), опухоли надпочечников (феохромоцитома)

За 2-3 суток до проведения исследования рекомендуется перейти на бесшлаковую диету: исключить из рациона молочные продукты, черный хлеб, макаронные изделия, каши, овощи, фрукты, бобовые, шоколад, кондитерские изделия, кофе и газированные напитки; Рыбу и мясо нужно отваривать или готовить на пару.
Исследование проводится натощак, прием пищи прекращается за 4 часа до исследования. Если пациент страдает сахарным диабетом , он заранее должен сообщить об этом врачу. Если пациент принимает лекарственные препараты, он должен их взять с собой и принять после исследования.

Перед МР-энтерографией, для оптимального результата исследования, важно тщательно подготовить толстую кишку. Вы можете выбрать наиболее удобный для Вас способ очищения кишечника:

  • прием слабительного средства, рекомендованного лечащим доктором (препарат «Фортранс», «Эндофальк», «Пикопреп», «Лавакол» и др.
    ) или
  • методом мониторного очищения кишечника (проводится накануне дня исследования и в день исследования за 2 часа до процедуры)

Подготовка к МР-энтерографии препаратом Фортранс.

1. МР-энтерография назначена завтра утром. Обед сегодня не позднее 14 часов. Приём раствора начинается в 16 -17 часов. Пакетик препарата разводится в литре теплой кипяченой воды и выпивается на протяжении часа. Количество пакетиков «Фортранс» рассчитывается так: по 1 пакетику на каждые 20 кг веса пациента. Схема приема препарата указана в инструкции

2. Процедура будет проводиться завтра после обеда. Последний прием пищи сегодня до 16 часов. Половина порции Фортранса принимается накануне с 18-19 часов. Остальная доза употребляется на следующий день с 7 до 9 утра. Действие препарата прекращается через 3-5 часов после последнего приема.

Методика МР-энтерографии

Исследование занимает достаточно много времени. Пациент должен явиться за 1,5 часа до начала проведения МРТ.

При себе необходимо иметь направление на исследования, медицинские документы (выписку из истории болезни, результаты предыдущих исследований). За 1 час до исследования пациент начинает пить специальную контрастную жидкость (раствор маннитола). Это нужно для того, чтобы туго заполнить петли тонкой кишки, поэтому необходимо выпить не менее 1 литра препарата. Исследование проводится в положении лежа на спине. Общее время сканирования (нахождения в аппарате) составляет 45 минут. В ходе исследования пациенту внутримышечно вводят Глюкагон (препарат, который на короткое время снижает перистальтику кишечника), после чего получают изображения кишечника. В конце исследования, внутривенно вводят контрастное вещество и оценивают характер его накопления в стенки кишки и в окружающих тканях.

GoLytely, MiraLax (полиэтиленгликоль) дозировка, показания, взаимодействие, побочные эффекты и многое другое

Противопоказания

Гиперчувствительность; непроходимость желудочно-кишечного тракта, задержка желудка, токсический колит, перфорация кишечника, токсический мегаколон риск ишемического колита; не рекомендуется; рассмотреть возможность афтозных изъязвлений слизистой оболочки в результате подготовки кишечника, особенно при оценке результатов колоноскопии у пациентов с известным или подозреваемым воспалительным заболеванием кишечника которые разрешались с коррекцией водно-электролитных нарушений; соблюдать осторожность у пациентов с судорогами в анамнезе или у пациентов с повышенным риском судорог, в том числе при одновременном приеме препаратов, снижающих порог судорожной готовности, у пациентов, отказывающихся от алкоголя или бензодиазепинов, у пациентов с неизвестной или подозреваемой гипонатриемией или низкой осмоляльностью сыворотки

Применять с осторожностью и наблюдать за пациентами в бессознательном или полубессознательном состоянии с нарушенным рвотным рефлексом или другими нарушениями глотания или за теми, кто иным образом склонен к регургитации или аспирации во время введения; наблюдайте за этими пациентами во время введения, особенно при введении через назогастральный зонд

Избегайте применения у пациентов с непроходимостью кишечника, мегаколоном, перфорацией кишечника, язвенным колитом, токсическим колитом, задержкой желудка

Не показано для детей

При использовании ПЭГ в качестве слабительного , не давать более 1 недели

Сообщалось о дисбалансе электролитов при длительном применении

Риск водно-электролитных нарушений; нарушения электролитного баланса могут привести к аритмиям, судорогам и почечной недостаточности; пациенты должны поддерживать адекватную гидратацию до, во время и после лечения; провести лабораторный анализ после колоноскопии, если у пациента после лечения наблюдается обезвоживание или сильная рвота

Может вызвать аритмию; соблюдать осторожность у пациентов с риском сердечной аритмии, включая нестабильную стенокардию, застойную сердечную недостаточность, недавний ми, неконтролируемую аритмию или кардиомиопатию; можно рассмотреть ЭКГ до и после введения дозы у пациентов из группы риска

Не сочетать продукт с загустителями на основе крахмала; полиэтиленгликоль (ПЭГ), компонент смеси, при смешивании с загущенными крахмалом жидкостями снижает вязкость загущенной крахмалом жидкости; при смешивании препарата на основе ПЭГ, используемого по другому показанию, с предварительно загущенными жидкостями на основе крахмала, применяемыми у пациентов с дисфагией, сообщалось о разжижении жидкости и случаях удушья и потенциальной аспирации

Следует соблюдать осторожность у пациентов с почечной недостаточностью и/ или у пациентов, принимающих лекарства, которые могут неблагоприятно влиять на функцию почек, включая ингибиторы АПФ, НПВП, диуретики и БРА; поручить пациентам с почечной недостаточностью оставаться адекватно гидратированных; у этих пациентов могут быть рассмотрены предварительные и постдозовые лабораторные тесты (электролиты, креатинин, мочевина мочевины); обеспечить адекватную гидратацию и рассмотреть вопрос о лабораторных исследованиях

Непосредственное наблюдение за введением пациентам с риском аспирации

Продукты не предназначены для прямого приема внутрь, но требуют разбавления водой

Соблюдать осторожность у пациентов старше 60 лет; серьезные нежелательные явления зарегистрированы

XL Среда выполнения Fortran для AIX, V16.

1.0.1 Fix Pack (декабрь 2018 г.)

Аннотация

На этой странице содержится пакет Runtime Environment для использования с приложениями, разработанными с помощью компилятора IBM XL Fortran для AIX 16.1.

Описание загрузки

Если вы хотите запустить приложение, разработанное с помощью компилятора IBM XL Fortran для AIX 16.1, но у вас еще нет соответствующей версии компилятора или среды выполнения, вам необходимо установить пакет среды выполнения.Для получения дополнительной информации просмотрите Наборы файлов среды выполнения XL Fortran раздел Центра знаний IBM.

Содержание
Секции Описание

Раздел История изменений содержит обзор новых возможностей этого выпуска с описанием любых новых функций или улучшений, если они применимы.

Раздел Предварительные требования содержит важную информацию, которую необходимо просмотреть перед установкой этого выпуска.

В разделе Загрузка пакета содержится прямая ссылка для получения загружаемого пакета для установки в вашей среде.

В разделе Инструкции по установке приведены инструкции по установке, необходимые для применения этого выпуска в вашей среде.

Сопроводительная документация
Документ Описание

Нажмите, чтобы ознакомиться с подробными сведениями о системных требованиях для получения полного списка требований к оборудованию, поддерживаемых операционных систем, предварительных условий и дополнительного поддерживаемого программного обеспечения, а также сведений об уровне компонентов и ограничениях операционной системы.

Центр знаний IBM предоставляет точку входа в документацию по продукту. Вы можете просматривать, просматривать и искать в Интернете информацию, связанную с продуктом.

Вы также можете посетить XL Fortran для библиотеки документации AIX ознакомиться с дополнительной документацией.

Нажмите, чтобы просмотреть полный список дефектов (APAR), устраненных в этом выпуске, включая список устраненных дефектов для всего семейства версий.

Компиляторы IBM XL C, C++ и Fortran для форумов и блогов разработчиков серверов POWER.

Предпосылки

Необходимые условия:

Операционная система:

  • IBM AIX V7. 1 TL4
  • IBM AIX V7.2
  • IBM i V7.3 PASE V7.3

Место на диске:

Инструкции по установке

Ознакомьтесь с инструкциями по установке.

Положения и условия : Загружая, устанавливая, копируя, открывая или используя это программное обеспечение, вы соглашаетесь с положениями и условиями, изложенными в Лицензионном соглашении. Пожалуйста, ознакомьтесь с Лицензионное соглашение и Информация о лицензии документы, прежде чем продолжить загрузку или установку.

Инструкции по установке

Это программное обеспечение можно установить с помощью утилиты System Management and Installation Tool (SMIT).

Вы должны войти в систему как root или иметь права суперпользователя.

Чтобы установить это программное обеспечение с помощью интерфейса SMIT, выполните следующие действия:
 

  1. Загрузите нужный пакет.

  2. Распакуйте и распакуйте каждый пакет в отдельный пустой каталог с помощью следующей команды:

    zcat .tar.Z | смолка -xf -


  3. Выполните следующую команду:

    Смит install_latest

    Эта команда вызывает SMIT, который предоставляет управляемый с помощью меню пользовательский интерфейс для процесса установки.
    Сначала укажите устройство INPUT/каталог программного обеспечения , введя имя каталога, содержащего извлеченный пакет.


  4. Если вы прочитали лицензионное соглашение и согласны с его условиями, вы должны выбрать да рядом с Принять новые ЛИЦЕНЗИОННЫЕ соглашения? , чтобы продолжить установку.

  5. Значения по умолчанию можно изменить в соответствии с вашими предпочтениями.

Примечания:

  • Если вы устанавливаете оба пакета, перед установкой пакета утилит необходимо установить пакет среды выполнения.
  • Чтобы убедиться, что установлены все необходимые наборы файлов, оставьте значение по умолчанию ПРОГРАММНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ для установки как _all_latest ; в противном случае вам придется указывать наборы файлов по отдельности.
  • Вы можете предварительно просмотреть процесс установки без установки программного обеспечения, выбрав да рядом с Только предварительный просмотр? поле .
  • Нажмите Введите , когда вы закончите настройку параметров, чтобы начать процесс установки.
    Начинается установка, и по мере установки каждой части отображаются сообщения. Журнал установки хранится в файле $HOME/smit.log .
  • Если вы выберете _all_latest , SMIT попытается установить все наборы файлов среды выполнения. В результате вы можете увидеть статус неудачной установки для некоторых наборов файлов каталога сообщений из-за отсутствия необходимых компонентов. Игнорируйте эти ошибки, если вам не нужны каталоги сообщений среды выполнения для национальных языков.

Загрузить пакет

Пакет среды выполнения 16.1.0.1-IBM-xlfrte-AIX-FP001.tar.Z содержит следующие файлы:

xlfrte.aix61_16.1.0.0.bff
xlfrte.aix61_16.1.0.1.bff
xlfrte.msg.EN_US_16.1.0 .0.bff
xlfrte.msg.EN_US_16.1.0.1.bff
xlfrte.msg.JA_JP_16.1.0.0.bff
xlfrte.msg.JA_JP_16.1.0.1.bff
xlfrte.msg.Ja_JP_16.1.0.0 .bff
xlfrte.msg.Ja_JP_16.1.0.1.bff
xlfrte.msg.en_US_16.1.0.0.bff
xlfrte.msg.en_US_16.1.0.1.bff
xlfrte.msg.ja_JP_16.1.0.0.bff
xlfrte.msg.ja_JP_16.1.0.1.bff
xlfrte_16.1.0.0.bff
xlfrte_16. 1.0.1.bff
xlsmp.aix61.rte
xlsmp.msg.EN_US.rte
xlsmp.msg.En_US.rte
xlsmp.msg.JA_JP.rte
xlsmp.msg.Ja_JP. rte
xlsmp.msg.ZH_CN.rte
xlsmp.msg.Zh_CN.rte
xlsmp.msg.en_US.rte
xlsmp.msg.ja_JP.rte
xlsmp.msg.zh_CN.rte
xlsmp.rte

Насколько критично это исправление?

Оценка воздействия
Воздействие Описание

Корректирующий

Это отладочная версия.Он содержит исправления для дефектов, о которых сообщил клиент, и внутренних дефектов.

Проблемы решены

Дефекты устранены

Щелкните Список исправлений ссылку в оглавлении выше, чтобы просмотреть список проблем, решенных в этом выпуске.

История изменений

Что нового

Нет новых возможностей или функций.

Щелкните ссылку в столбце Параметры загрузки :

На

[{«DNLabel»:»16.1.0.1-IBM-xlfrte-AIX-FP001.tar.Z»,»DNDate»:»17 января 2019″,»DNLang»:»English»,»DNSize»:»75199155″, «DNPlat»:{«метка»:»AIX»,»код»:»PF002″},»DNURL»:»http://www.ibm.com/support/fixcentral/swg/quickorder?parent=ibm/Rational&product =ibm/Rational/XL+Fortran+Runtime&release=161.0.1&platform=AIX&function=fixid&fixids=xlfrte.16.1.0.01.aix71TL4-72.dec2018.ptf&downloadMethod=http»,»DNURL_FTP»:»»,»DDURL»:null}]

Техническая поддержка

Среда выполнения IBM XL Fortran для AIX не поддерживается как отдельный программный продукт.

Если вы подозреваете проблему с компонентом среды выполнения IBM XL Fortran при использовании его со сторонним приложением, обратитесь за поддержкой к поставщику приложения.

Полная поддержка (установка, поддержка дефектов и общие вопросы) для компонента среды IBM XL Fortran Runtime доступна с подпиской на программное обеспечение и соглашением о поддержке для Компиляторы Фортрана XL .

Для поддержки дефектов требуется подходящий тестовый пример; обзор технической заметки 1260804: подготовка тестового примера для поддержки компиляторов IBM XL. для деталей.

В зависимости от вашего приложения может также потребоваться установить пакет IBM XL Fortran для AIX 16.1 Utilities.
* Пакет Utilities содержит файлы, которые могут потребоваться некоторым сторонним приложениям.
* Загружайте и устанавливайте пакет служебных программ только по указанию поставщика приложения.

[{«Business Unit»:{«code»:»BU058″,»label»:»IBM Infrastructure w\/TPS»},»Product»:{«code»:»SSGh5D»,»label»:»XL Fortran для AIX»},»Компонент»:»Среда выполнения»,»Платформа»:[{«код»:»PF002″,»метка»:»AIX»}],»Версия»:»16. 1″,»Издание»:»»,»Направление деятельности»:{«code»:»LOB08″,»label»:»Cognitive Systems»}}]

границ | Разработка стабильного химерного IL-15 для транспрезентации антигенпрезентирующими клетками

Введение

Антиген-специфические CD8 + Т-клетки, образующиеся либо в результате естественной инфекции, либо в результате вакцинации, играют решающую роль в элиминации внутриклеточных патогенов, таких как как туберкулез, малярия, ВИЧ, гепатит С и грипп (1).В лечении рака противоопухолевая активность Т-клеток CD8 + и терапия Т-клетками CAR (химерный антигенный рецептор) открыли новые возможности. Генерация стволовых клеток памяти CD8 + (T SCM ) известна как идеальный источник для поддержания длительного противоопухолевого Т-клеточного ответа (2). Было показано, что IL-15 улучшает противоопухолевую активность Т-клеток, а также генерацию и самообновление T SCM (2). В то время как индукция надежного Т-клеточного ответа с помощью вакцин в некоторой степени достижима, образование Т-клеток памяти и их длительное поддержание, а также реактивация во время инфекционного заражения или повторного заражения очень сложны.В литературе документирована роль ИЛ-15 в преодолении вышеупомянутых проблем (3). ИЛ-15 в качестве адъюванта вакцины усиливает защитный иммунитет против инфекционных патогенов, включая вирус гриппа, Toxoplasma gondii , вирус простого герпеса , Trypanosoma cruzi и сложные внутриклеточные простейшие патогены, повышая выживаемость и улучшая цитотоксическую активность Т и NK-клетки, а также продукция IFN-γ (4–9). Было показано, что совместное введение плазмиды, экспрессирующей IL-15, вместе с ДНК-вакциной против ВИЧ приводит к более высокой частоте клеток CD8 + Tem (10).Сообщалось об улучшенной эффективности вакцины против ВИЧ gp160 (т. е. вакцины Vaccinia , экспрессирующей gp160 ВИЧ) за счет увеличения образования и поддержания долгоживущих Т-клеток CD8 + (11). Среди двенадцати противораковых иммунотерапевтических препаратов IL-15 занял первое место по версии Национального института рака, NIH, США в 1997 г. (12, 13). Поэтому проводится множество клинических испытаний, чтобы установить IL-15 в качестве адъюванта вакцины и важного биопрепарата для противораковой иммунотерапии (3). Однако использование его максимального терапевтического потенциала по-прежнему остается проблемой из-за его более короткого периода полураспада, плохой биодоступности и нестабильной природы.

Было принято несколько подходов для улучшения стабильности и периода полувыведения иммуномодуляторов, включая цитокины. Известно, что IL-15 естественным образом связывается со своим рецептором IL-15Rα и презентируется цис- или транс-образом в клетках, несущих рецептор IL-15Rβ/γ c (общая γ-цепь) (3), что побудило исследователей использовать IL-15Rα. 15Rα в качестве основы для стабилизации фрагмента IL-15. Мортье и др. связали IL-15 с IL-15Rα или с доменом суши (IL-15-связывающий домен IL-15Rα, sIL-15Rα) и образовали растворимые комплексы IL-15-IL-15Rα с целью связывания его с клетками, экспрессирующими IL-15Rβ /γ c, и тем самым стимулируя пролиферацию клеток и антиапоптотическую активность (14). В альтернативной стратегии IL-15 был нековалентно связан со слитыми белками IL-15Rα-IgG1, чтобы сделать общий комплекс более стабильным (15, 16). О тяжелой токсичности также сообщалось у мышей, получавших модифицированный IL-15, из-за гиперактивации NK-клеток (17).

Мы сконструировали химерный белок для достижения желаемой эффективности IL-15 с минимальными побочными эффектами. В дополнение к увеличению периода полужизни, наше исследование было направлено на повышение эффективности IL-15 в отношении усиления антиген-специфического ответа Т-клеток памяти исключительно путем направления IL-15 к Т-клеткам исключительно через АПК.Поскольку транспрезентация является доминирующим способом действия IL-15 и необходима для реактивации Т-клеток памяти CD8 + во время инфекционного заражения (18), мы стратегически разработали/структурировали стабильный и долгоживущий IL-15, который могут быть преимущественно представлены Т-лимфоцитам профессиональными АПК. Таким образом, IL-15 систематически трансформировали в Т-клеточно-центрический адъювант путем ковалентного связывания с тяжелой константной цепью IgG2/2a (IgHg2/2a), который должен был образовывать стабильный комплекс и быть нацеленным конкретно на АПК, таким образом представляя IL-15 Т-клеткам. клетки с комплексом MHC/p.Обе молекулы были слиты через линкер, чтобы избежать каких-либо стерических затруднений. Кроме того, в химерный IL-15 мы ввели мутацию N72D в дистальную область человеческого IL-15, чтобы улучшить его аффинность связывания с IL-15Rβ, присутствующим на Т-клетках. А чтобы отсрочить иммунный клиренс, мы ввели мутацию K322A (сайт связывания комплемента) в тяжелую константную цепь иммуноглобулина, чтобы увеличить время пребывания химерного IL-15 на периферии. Таким образом, структурированный химерный IL-15 при экспрессии в клетках CHO естественным образом образует димер IL-15-IgG2/2a.Он очень стабилен при Tm >70,00°C, а его период полувыведения из сыворотки увеличивается более чем в 40 раз. Наши данные также свидетельствуют о том, что сконструированный химерный IL-15 является биологически активным и будет генерировать устойчивые антиген-специфические Т-клеточные ответы.

Результаты

Сконструированный химерный IL-15 способствует димеризации:

In Silico Оценка

Превосходство гомодимерных биологических препаратов на основе Ig над их мономерными аналогами давно установлено (19–21). Однако добиться димеризации химерных молекул очень сложно.Поэтому мы сначала выполнили систематическую оценку in silico , чтобы выполнить условие гомодимеризации химерного IL-15 (22). Различные комбинации различных доменов Ig и последовательностей линкеров с IL-15 были слиты и представлены для предсказания образования гомодимера. Опробовав различные комбинации, мы обнаружили, что IL-15-GS-линкер-IgHg2/2a (рис. 1A, B) не только удовлетворяет требованиям для образования гомодимера, но также помогает сохранять свою нативную структуру, разделяя молекулы IL-15. и доступны для взаимодействия (рис. 1C).Затем мы оценили различные свойства гомодимерных химер и сравнили их с их мономерными формами, чтобы засвидетельствовать сформированную структуру. Благоприятные и разрешенные остатки на карте Рамачандрана были рассчитаны как 89,1 и 6,8% для мономера и 90,1 и 6,1% соответственно для гомодимерных структур (рис. 1D, E). Данные свидетельствуют о том, что инженерные сооружения являются благоприятными. Индексы нестабильности были оценены <40, что подтверждает стабильность сформированной структуры. Кроме того, оценка столкновения 0.00 свидетельствует об отсутствии неблагоприятного перекрытия электронных облаков. Это еще раз подтверждает, что упаковка белков плотная. Отклонения Cβ (0,00) и показатель MolProbity (95–99 процентиль) свидетельствуют о стабильности и полезности сконструированного химерного IL-15.

Рисунок 1 Химерный IL-15 на основе Ig. (A) Предполагаемая структура химерного IL-15 после ковалентного связывания IL-15 с IgHG2/2a. (B, C) Аминокислотные (AA) последовательности человеческого или мышиного IL-15 в сочетании с AA huIgHG2 или mIgHG2a (NtoC) были отправлены на I-TASSER (B) и сервер COTH (C) для предсказания мономерных и димерных структур соответственно. (D, E) Карта Рамачандрана мономерного химерного IL-15 (D) и димерного химерного IL-15 (E) , созданная путем отправки структур на сервер Rampage.

Химерный IL-15 обладает более высокой аффинностью связывания с IL-15 Rβ

Затем мы определили способность химерного IL-15 взаимодействовать со своим рецептором β (IL-15Rβ) посредством белок-белкового докинга. Количество водородных связей и солевых мостиков было выше при докинге химерного IL-15-рецептора по сравнению с нативным докингом IL-15-рецептора.Эти взаимодействия также предполагают, что часть IL-15 химеры способна эффективно взаимодействовать со своим рецептором β. Более того, мы обнаружили, что часть химеры IgG2/2a не взаимодействует с рецептором IL-15, а часть химеры IL-15 связывается исключительно со своим собственным рецептором β (22).

Одной из целей создания этого химерного IL-15 является облегчение эффективного связывания фрагмента IL-15 с Rβ IL-15. Чтобы проверить, улучшает ли сконструированная химера аффинность связывания IL-15 с Rβ, мы предсказали и сравнили это с нативным IL-15 и IL-15 с мутацией N72D.Мы оценили свободную энергию связывания (свободную энергию Гиббса, ΔG), поскольку алгоритм докинга обеспечивает оценку стыковки белок-белковых комплексов на основе ΔG. Меньшая энергия связи подтверждает стабильность белково-белкового комплекса. ΔG нативного IL-15 и N72D IL-15 с Rβ рассчитывали как -8,7 ккал моль -1 и -9,6 ккал моль -1 соответственно. С другой стороны, ΔG химерного ИЛ-15 с таким же Rβ составляла -73,2 ккал·моль -1 (таблица 1). На основании этих результатов химерный комплекс IL-15–Rβ считается более стабильным комплексом по сравнению с нативным комплексом IL-15–Rβ.

Таблица 1 Прогноз аффинности связывания.

Точно так же предсказание константы диссоциации (Kd) также предполагает, что химерный IL-15 будет связываться с рецептором β с более высокой аффинностью (Kd = 8,9E-55) по сравнению с нативным IL-15 (Kd = 4,5E-07). ) и N72D IL-15 (Kd = 9,0E-08) (табл. 1).

Клонирование генов константной тяжелой цепи IL-15 и IgG2 (IgHg2)

huIL-15 (505 п.н.; CDS с сигнальным пептидом; без стоп-кодона), mIL-15 (483 п.н.) (без стоп-кодона), huIgHg2 ( 981 п.н.; Ch2-Hinge-Ch3-Ch4; со стоп-кодоном) и константная тяжелая часть mIgHg2a (1007 п. н.; со стоп-кодоном) были отдельно клонированы в ПЦР2.1 вектор ТОПО. Полученные плазмиды расщепляли ферментом EcoRI для подтверждения наличия соответствующих вставок. Например, были получены две полосы, т.е. верхняя полоса в 3,9 т.п.н. и нижняя полоса в 505 п.н., представляющие вектор TOPO и вставку IL-15, соответственно, с вектором IL-15-TOPO (фиг. 2A). Дальнейшее подтверждение вставок осуществляли путем успешной амплификации вставки 505 п.н. с помощью ПЦР и секвенирования. Последовательности FASTA, полученные в результате секвенирования по Сэнгеру вставок IL-15 и IgHg2, сравнивали и обнаружили 100% сходство с исходными последовательностями с помощью выравнивания бласта NCBI и SIM.Точно так же было подтверждено клонирование mIL-15-TOPO, huIgG2-TOPO и mIgG2a-TOPO, где мы получили вставку 415, 999 и 1007 п.н. соответственно для mIL-15, huIgHg2 и mIgHg2a (рис. 2B-D).

Рисунок 2 Разработка химерного ИЛ-15. (A–D) В экспериментах с мокрой лабораторией гены IL-15 и IgHG2/2a мыши и человека были отдельно клонированы в вектор PCR2. 1 TOPO. Расщепление EcoRI соответствующего вектора показало две полосы, то есть пустой вектор (верхняя полоса), а также вставки: вставка huIL-15 (A) , huIgHG2 (B) , mIL-15 (C) и mIgHG2a. (Д) . (E, F) Мутация N72D в части huIL-15 (E) и мутация K322A в huIgG2 Fc (F) , введенная с помощью сайт-направленного мутагенеза, была подтверждена секвенированием по Сэнгеру. (G) Физическая карта стратегии Fusion, используемой в этом исследовании. (H) Гены huIL-15 и huIgHG2 последовательно встраивали в вектор IL-2-pcDNA3.1; рестрикционный анализ химерной конструкции IL-15 проводили с различными комбинациями рестрикционных ферментов для подтверждения наличия вставок.

Сайт-направленный мутагенез и конструирование слитых генов

В то время как основание IgG2/2a использовалось для презентации IL-15 АПК Т-клеткам, мы хотели улучшить сродство IL-15 с его рецептором β, обеспечивая оптимальную передачу сигналов Т-клетками. на Ил-15. Поскольку сообщалось, что мутантный IL-15 N72D показал более высокое сродство к своему рецептору β (23), мы ввели мутацию N72D в ген huIL-15 для достижения более высокого сродства. Точно так же мы ввели мутацию K322A в ген IgHg2, чтобы отсрочить опосредованный комплементом клиренс для усиления присутствия/удержания химерного IL-15.Как вышеупомянутые, так и развернутые мутации были подтверждены секвенированием по Сэнгеру (рис. 2E, F).

Вклад сигнального пептида IL-15 (SP) в подавление его экспрессии и плохую экспрессию в клетках млекопитающих хорошо известен (24, 25). Поэтому мы заменили SP IL-15 на SP IL-2 (24) для улучшения продукции химерного IL-15, и для этого вектор pcDNA3.1 был модифицирован, а сигнальный пептид IL-2 был вставлен сразу после промотора CMV. CDS мутантного IL-15 (342 п.н.; без сигнального пептида IL-15) и мутантный ген IgHg2 (993 п.н.) последовательно встраивали в модифицированную pcDNA после IL-2 SP для того, чтобы конечная вставка экспрессировалась как IL-2SP-IL- Химерный белок 15CDS-IgHg2 (рис. 2G).Полученную плазмиду подтверждали путем расщепления ее различными комбинациями рестрикционных ферментов, как показано на фиг. 2H, 342 п.н.: IL-15, 981 п.н.: IgHg2 и 1343: слитые гены, размер: плазмида с IL-2 SP. Эти фрагменты амплифицировали с помощью ПЦР и секвенировали для подтверждения последовательностей. Последовательности FASTA, полученные в результате секвенирования по Сэнгеру, сравнивали и обнаружили 100% сходство с помощью бласта NCBI и выравнивания SIM.

Создание стабильных клеточных линий, очистка и характеристика химерного IL-15

Линии клеток млекопитающих (CHO) трансфицировали конструкцией химерного IL-15 или pcDNA3.1 с использованием реагентов Lipofectamine LTX plus с трансфекцией плазмидой pEGFP-n1 в качестве положительного контроля. В клетках СНО, трансфицированных плазмидой pEGFP-n1, через 48 ч после трансфекции наблюдалась зеленая флуоресценция, что свидетельствует об успешной трансфекции. Наблюдалось почти двукратное увеличение экспрессии химерного IL-15 с IL-2SP по сравнению с химерным IL-15 с IL-15SP. На 3-й день после трансфекции клетки СНО подпитывали селективной средой, содержащей генетический антибиотик, и строили кривую уничтожения генетицином для клеток СНО; 400 мкг/мл генетицина были самой низкой концентрацией для уничтожения всех нетрансфицированных клеток в течение 7 дней.Результаты ELISA подтверждают успешное производство химерного IL-15 (рис. 3А). Интеграция трансфицированных генов в геном клеток CHO была обнаружена с помощью ПЦР-амплификации трансфицированных генов (IL-15 и IgG2) (фиг. 3B). Клетки CHO, экспрессирующие химерный IL-15, успешно поддерживали в селекционной среде в течение 60 дней, и химерный IL-15 очищали от бесклеточного супернатанта с помощью аффинной хроматографии с белком G. Очищенный препарат IL-15-IgHg2/2a показал две полосы с молекулярной массой ~98 кДа (заметные полосы) и ~49 кДа при невосстанавливающем SDS-PAGE (рис. 3C), тогда как с очищенного IL-15-IgHg2/2a препарат показал одну полосу с молекулярной массой ~ 49 кДа (рис. 3D) при снижении SDS-PAGE. Молекулярная масса, определенная с помощью SDS-PAGE гомодимерного химерного IL-15, была больше, чем молекулярная масса, рассчитанная (98 кДа) на основе аминокислотной последовательности слитых белков IL-15 и IgHg2/2a. Повышенная молекулярная масса может быть связана с гликозилированием белков, экспрессируемых клетками СНО. Продукция химерного IL-15 была подтверждена вестерн-блоттингом (рис. 3E) HH или MM, а данные денситометрии также свидетельствуют о том, что химерный IL-15 образует димерную структуру (рис. 3F).

Рисунок 3 Получение и очистка человеческого (HH) и мышиного (MM) химерного IL-15. (A) Сэндвич-ELISA супернатанта клеточных линий, трансфицированных химерой, выполняли в различные моменты времени для подтверждения получения стабильной клеточной линии. (B) ПЦР-амплификации трансфицированных генов из клеток CHO проводили в различные моменты времени с использованием специфических праймеров IL-15 и IgHG2/2a для подтверждения интеграции генов (лунка 4: лестница, 5: контроль (нетрансфицированная CHO) (C, D) Белки (HH: huIL-15 + huIgHG2 химера, MM: mIL-15 + химера mIgHG2a) очищали с использованием колонки Agarose G и загружали в SDS-PAGE в невосстанавливающем (C) и в восстанавливающих условиях (D) , предполагая образование димера (дорожка 1: лестница, 3 и 4: химера HH, 5 и 6: химера MM). (E) Вестерн-блот-анализ химеры HH и MM (дорожки 1 и 2: химера HH). (F) Денситометрический анализ предполагает преобладающее присутствие димерных форм химерного IL-15 (HH и MM). ***Р ≤ 0,001.

Связывание IL-15 с основанием IgHg2/2a увеличивает период полувыведения и уровни IL-15 в сыворотке

Мышам C57BL/6 внутрибрюшинно вводили 2,5 мкг/мышь нативного рекомбинантного IL-15 или химерного IL-15, восстановленного в PBS . Сыворотки собирали в разные моменты времени до и после введения IL-15.Наши результаты показывают, что период полураспада нативного IL-15 составляет ~1 час, тогда как период полураспада сконструированного химерного IL-15 составляет ~40 часов. Что касается полученных максимальных уровней в сыворотке, нативный IL-15 достиг пика через 30 минут после введения с концентрацией 73,5 нг/мл, тогда как химерный IL-15 достиг максимума через 7 часов после введения с концентрацией 1050–1100 нг/мл ( Рисунок 4А). Кроме того, корреляцию доступности химерного ИЛ-15 с его функциональной активностью проводили путем инкубации спленоцитов, выделенных от наивных мышей, с сывороткой, собранной в разные моменты времени. Повышенная экспрессия Bcl-2, STAT-3 и 5 была обнаружена с помощью анализа q-PCR (данные не показаны).

Рисунок 4 Характеристика химерного IL-15. (A) Комплексообразование IL-15 с IgHG2/2a увеличивает время полужизни и биодоступность экзогенного IL-15 в сыворотке. Мышам инъецировали различные биологические препараты и брали кровь с течением времени (0,25, 0,5, 1, 2, 4, 7, 24, 48, 72, 96, 110, 134 и 158 ч после лечения), а наличие биологических препаратов контролировали с помощью ELISA. . (B) SE-HPLC хроматограмма HH предполагает преобладающее присутствие димерной структуры. (C) Спектр кругового дихроизма показывает, что HH химерный IL-15 имеет правильную складчатую структуру. (D, E) Термограммы дифференциальной сканирующей калориметрии MM (D) и HH (E) химерного IL-15 изображают Tmax = 78,26 и 73,00°C, проанализированные путем загрузки белков на ДСК PerkinElmer Pyris1, предполагают химерный IL-15 обладает высокой стабильностью в природе.

Химерный IL-15 преимущественно образует димерную структуру

Эксклюзионную ВЭЖХ использовали для отделения димера химерного IL-15 от мономера.Колонку ВЭЖХ калибровали, используя стандартные белки (OVA и BSA) известной молекулярной массы. Результаты, полученные с помощью хроматограммы ВЭЖХ, четко указывают на присутствие димерных форм (рис. 4В).

Химерный IL-15 имеет правильно уложенную структуру

Вторичную структуру и укладку белка очищенного IL-15 определяли методом кругового дихроизма (CD). Наши данные свидетельствуют о различных структурных элементах, демонстрирующих характерные спектры CD (рис. 4C), а отрицательные полосы при 222 и 208 нм указывают на наличие α-спиральной структуры.Точно так же отрицательные полосы при 218 нм и положительные полосы при 195 нм свидетельствуют о четко выраженных антипараллельных β-складчатых листах (β-спирали) химерного IL-15. Кроме того, мы не наблюдали каких-либо отрицательных полос вблизи 195 нм, что подтверждает отсутствие неупорядоченных белков в спектрах КД химерного ИЛ-15 (рис. 4С).

Подтверждение термостабильности химерного ИЛ-15

Термическая и структурная стабильность химерного ИЛ-15 была подтверждена методом дифференциальной сканирующей калориметрии (ДСК). Значения средней точки теплового перехода (Tm) или температуры денатурации (Tmax) были получены путем запуска различных вариантов на дифференциальном сканирующем калориметре PerkinElmer Pyris1.Наши данные с более высокой Tm, как и другие (26–28), подтвердили повышенную конформационную стабильность химерного IL-15. Поскольку денатурация вызывает разворачивание белка и может привести к потере терапевтической активности (29), достижение более высокой температуры денатурации (Tmax) было стратегией, связанной с терапевтическим потенциалом фармацевтических препаратов. Значение Tmax для химерного IL-15 составило 73 и 78,26°C для вариантов MM (mIL-15 и mIgG2a) и HH (huIL-15 и huIgG2) соответственно (рис. 4D, E).Опять же, более высокая Tm обоих вариантов свидетельствует о стабильности белка.

Структурная целостность и функциональность химерного ИЛ-15

Эффективный биопрепарат сохраняет свои функции при хранении в течение 7–8 дней. В настоящее время произошел сдвиг в подходе к производству непосредственно инъецируемых терапевтических белков с лиофилизированной формы на жидкую форму. Поэтому крайне важно производить структурно и функционально стабильные терапевтические средства при хранении в течение месяцев и поддержании более длительного срока годности (30).Аликвоты 0,2 мл химерного ИЛ-15 хранили при 37°С с последующим их хранением при -20°С. Стабильность была подтверждена SDS-PAGE, что подтверждает структурную целостность химерного IL-15 до экспериментального периода 192 ч (Фиг. 5A–D). Кроме того, результаты сэндвич-ELISA также подтвердили структурную целостность/интактность химерного IL-15, поскольку не было обнаружено значительных изменений в абсорбции через 0 минут и через 192 ч (Фиг. 5E, F). Планшеты для ELISA покрывали анти-IL-15 для захвата антитела.Как известно, только если часть IL-15 химерного IL-15 имеет интактную структуру, она будет захвачена антителом против IL-15. Точно так же часть IgG2 была обнаружена антителом против IgG2 HRP (фиг. 5E). На основании наших данных мы подтвердили структурную целостность химерного ИЛ-15. Затем мы хотели проверить, сохраняет ли он свою функциональность в отношении взаимодействия с его рецептором, присутствующим на Т-клетках. Это было подтверждено с помощью сэндвич-ИФА, в котором планшеты были покрыты IL-15 Rβ, и едва ли наблюдались какие-либо существенные изменения в абсорбции (от 0 мин до 192 ч), что позволяет предположить, что химерный IL-15 был способен связываться со своим рецептором. и сохранил свою функциональность (рис. 5F).

Рисунок 5 Оценка срока годности. HH Chimeric IL-15 разделяли на аликвоты в несколько пробирок объемом 0,2 мл и хранили при 37°C. Пробирки извлекали в разные моменты времени и хранили при -20°С. (A–C) Анализ SDS-PAGE химер, собранных в разные моменты времени. (D) Денситометрический анализ химер, собранных в разные моменты времени. (E) Антитела к IL-15 и анти-IgG2 HRP на основе сэндвич-ELISA химер, собранных в разные моменты времени. (F) IL-15 Rβ на основе сэндвич-ELISA химеры, собранной в разные моменты времени.(Статистический анализ проводили в GraphPad Prism 6 с помощью теста множественных сравнений Тьюки, двухсторонний ANOVA. ****P ≤ 0,0001, нс, не значимо.

Иммуномодулирующая активность химерного IL-15

Биологическая активность химерный IL-15 тестировали в различных экспериментах in vitro и in vivo . Спленоциты мышей, иммунизированных OVA, инкубировали с культуральными супернатантами клеток CHO, трансфицированных химерным IL-15 (MM), для оценки модуляции Т-клеточного ответа потоком цитометрия.Мы обнаружили значительное (с 13,3 до 31,2%) увеличение числа клеток Tem (рис. 6A, B ) и большую частоту клеток, продуцирующих IFN-γ (в 2 раза) и IL-2 (в 1,5 раза) (рис. 6С, D ) .

Рисунок 6 Биологическая активность химерного ИЛ-15. (A, B) Репрезентативная проточная цитометрия проанализировала структуру спленоцитов, необработанных и обработанных химерным IL-15 (MM) (A) , и их процентное содержание (B) предполагает сдвиг/модуляцию Т-клеток при лечении . (C, D) Частота Te/em, Tcm и наивных клеток в контрольных лунках и лунках, обработанных химерным IL-15 (MM). (E–J) Анализ количественной ПЦР позволяет предположить, что химерный IL-15 (HH) способен активировать путь IL-15 и повышать экспрессию различных генов, участвующих в функционировании иммунных клеток, особенно Т-клеток. Экспрессия генов пути ИЛ-15 (Bcl-2, Stat3, Stat5, NF-kB, IL-15 Rβ, Rγ), Cpt-1a (ген, необходимый для преобразования эффекторных клеток в Т-клетки памяти), маркер клеточной пролиферации (Ki- 67), гены, ассоциированные с Т-клетками (IFN-γ, TNF-α, PI3K, ERK), гены активности NK-клеток (mTOR, E4BP4) и врожденные гены IRF-7, IFN-α, -β, были количественно определены с помощью количественной ПЦР.(Статистический анализ был выполнен в GraphPad Prism 6 с помощью теста множественных сравнений Тьюки, двухфакторный дисперсионный анализ. 90 226 p 90 227 < 0,05 считается статистически значимым). *P ≤ 0,05, **P ≤ 0,01, ***P ≤ 0,001, ****P ≤ 0,0001, нс, не значимо.

Биологическую активность дополнительно определяли с помощью РВМС человека, стимулированных (12 или 24 ч) химерным IL-15 (HH). qPCR-анализ различных генов показывает, что химерный IL-15 модулирует опосредованный IL-15 путь. Экспрессия опосредованного Bcl-2, Cpt-1 и IL-15 гена STAT3 была увеличена на 4, 1.5 и 1,5 раза соответственно (рис. 6Е). Кроме того, 2-кратное увеличение уровней экспрессии мРНК Ki-67 свидетельствует о том, что химерный IL-15 индуцирует пролиферацию клеток (фиг. 6F). Более того, опосредованное химерным IL-15 усиление ответов Т-клеток было подтверждено значительным усилением, наблюдаемым в уровнях транскриптов NF-kB, Akt, PI3k, ERK, IFN-γ и TNF-α. Более того, также наблюдалась более высокая экспрессия IL-15 Rγ и IL-15 Rβ (фиг. 6G, H) . Как факторы транскрипции, mTOR и E4BP4 имеют решающее значение для выживания/функции Т-клеток (31), мы видели, что РВМС, обработанные химерным IL-15, были способны активировать mTOR и E4BP4 (рис. 6I).Кроме того, известно, что IL-15 активирует IRF-7, ключевой регулятор врожденных реакций. Поэтому мы искали его экспрессию и обнаружили, что химерный IL-15 также активирует экспрессию IRF-7 и связанных с ним цитокинов IFN-α, IFN-β (рис. 6J).

Обсуждение

Интерлейкин (ИЛ)-15 является главным регулятором выживания, развития, гомеостаза и активации Т-, NK- и NK-Т-клеток. Это также необходимо для различных функций В-клеток, ДК, макрофагов и тучных клеток (3).IL-15 помогает поддерживать наивные, эффекторные Т-клетки и Т-клетки памяти и играет важную роль в генерации и реактивации Т-клеток, подвергшихся воздействию антигена (3, 32). Следует отметить, что присутствие IL-15 дает сигналы для долгосрочного поддержания антиген-специфических клеток памяти CD8 + Т-клеток в отсутствие антигенного заражения (33). Способность IL-15 реактивировать Т-клетки памяти CD8 + во время инфекционного заражения доказывает его адъювантность при разработке вакцин и иммунотерапии рака.Показано, что IL-15 регрессирует опухоли путем активации толерогенных клеток, инфильтрирующих опухоль (TIL) (34, 35). Сообщается, что IL-15 улучшает in vivo противоопухолевую активность адоптивно перенесенных CD8 + T-клеток и увеличивает число аутореактивных CD8 + T-клеток (36, 37). В настоящее время изучается потенциальная адъювантность IL-15 для борьбы с различными заболеваниями, включая ВИЧ, туберкулез и малярию (3, 5, 38, 39). Поэтому он привлек значительное внимание к изучению его терапевтического потенциала.Однако его короткий период полувыведения (40, 41) и низкая биодоступность ограничивают его терапевтическое применение. Кроме того, потребность в большем количестве для дозирования и частом графике дозирования для достижения оптимального терапевтического ответа (23) увеличивает риск побочных эффектов и экономической эффективности (41). Настоящее исследование представляет собой спланированную попытку повысить стабильность, улучшить период полураспада IL-15 путем создания химерного IL-15 с целью снижения стоимости лечения и минимизации побочных эффектов, связанных с его воспалительными реакциями.

Чтобы преодолеть вышеупомянутые ограничения, мы выбрали IgG2/2a в качестве основы для химеры IL-15. IgG2 и IgG1 имеют более высокий период полувыведения из кровотока (21 день), а IgG2 демонстрирует аффинность связывания с Fc-рецептором от умеренной до сильной. Эта активность ограничена в основном АПК, а не NK-клетками. IgG2 представляет IL-15 Т-клеткам CD8 + через APC, и его эффект отражается в надежном ответе Т-клеток памяти, специфичном для Ag, который необходим для разработки вакцин и противоопухолевой терапии.Транспрезентация улучшенного химерного IL-15 будет преимущественно ограничена Т-клетками за счет специфического связывания с APC и может не вызывать воспалительных реакций. IgG2 плохо активирует систему комплемента, и введение мутации K322A дополнительно минимизирует активацию комплемента и задерживает иммунный клиренс, что, в свою очередь, увеличивает время пребывания химерного IL-15.

Комплекс IL-15 (15) получают путем нековалентного взаимодействия IgG1-IL-15Rα и IL-15, но наш химерный IL-15 ковалентно слит с основанием Ig с использованием технологии рекомбинантной ДНК. Комплекс ИЛ-15 очень чувствителен к условиям хранения и транспортировки и легко распадается (нестабилен), образуя смесь белков. Однако наш химерный IL-15 представляет собой единую стабильную молекулу с меньшей чувствительностью к условиям хранения. Фактически, результаты, полученные в результате анализа ДСК, подтверждают нашу идею (рис. 4D, E).

Гомодимерные моноклональные антитела более эффективны, чем их мономерные аналоги (19–21). Кроме того, димеры более стабильны и устойчивы к протеолитическому расщеплению, чем мономеры.Кроме того, для максимального терапевтического ответа требуются низкие дозы и меньшая частота дозирования. Поэтому мы разработали и предсказали in silico конструкций химерного IL-15 для достижения димеризации. Мы подтвердили образование гомодимера с помощью in silico , а также экспериментов во влажной лаборатории. Наши данные показали, что наш химерный IL-15 имеет естественную тенденцию к образованию димеров, и это свойство химерного IL-15 делает его очень стабильным, и мы ожидаем, что биологический препарат будет очень эффективным.

Принимая во внимание нашу цель повышения эффективности IL-15, мы увеличили сродство IL-15 с его рецептором на Т-клетках в дополнение к его стабильности. Поэтому мы ввели мутацию N72D в IL-15, который, как известно, имеет более высокое сродство к IL-15Rβ, присутствующему на Т-клетках (23). Эта вставка мутации облегчит быстрое и целенаправленное представление IL-15.

Фармакокинетические исследования показали увеличенный (>40) период полураспада (время пребывания) сконструированного химерного IL-15.Особенно важно, что разумный уровень химерного IL-15 был обнаружен в сыворотке через 15 минут после инъекции. Это свидетельствует о быстрой и более длительной доступности биологических молекул для действия, а уровень химерного ИЛ-15 составлял 1050–1100 нг/мл через 7 ч после введения. Кроме того, период полураспада in vivo, термостабильность и срок годности любого биопрепарата одинаково важны для придания ему терапевтического и иммуногенного действия. Дифференциальный сканирующий калориметрический анализ подтверждает стабильность химерного IL-15 из-за его высокого значения Tmax. Более того, химерный ИЛ-15 дольше сохранял свою структурную целостность и функциональность при 37°С.

IL-15 активирует JAK1 и JAK3, которые фосфорилируют STAT3 и STAT5 соответственно. Это приводит к фосфорилированию тирозинкиназ, родственных Src, и активации антиапоптотического белка Bcl-2 (3). При оценке биологической активности химерного ИЛ-15 мы наблюдали значительное повышение уровней STAT3, STAT5 и Bcl-2 в РВМС человека. Это предполагает активацию типичного сигнального каскада IL-15 химерным IL-15.ИЛ-15, как сообщается, способствует экспрессии Cpt1a, митохондриального фермента, необходимого для превращения эффекторных Т-клеток в Т-клетки памяти (42) и поддержания длительного ответа Т-клеток против патогенов, поддерживая выживание CD8 + Т-клеток. (43). Наши результаты подтверждают постоянный вывод о значительном увеличении уровней транскриптов Cpt1a при инкубации РВМС человека с химерным IL-15 в течение 12/24 часов. Кроме того, мы наблюдали значительную индукцию IFN-α, -β, -γ, TNF-α; NF-κβ, AKT, PI3K, ERK, Receptor-β, -γ, mTOR, E4BP4, mcl-1 и SyK-1 для подтверждения иммуномодулирующей роли сконструированного химерного IL-15.

Для любой эффективной вакцины требуется генерация более высокой частоты Т-клеток памяти. Сильный ответ Т-клеток CD8 + является критическим требованием для борьбы со многими заболеваниями, такими как ВИЧ, туберкулез и малярия. Более того, реактивация проникающих в опухоль CD8 + Т-клеток имеет решающее значение для регрессии опухоли. Известно, что IL-15 играет центральную роль в опосредовании вышеуказанных ответов (3). Оценивали влияние ИЛ-15 на модуляцию Т-клеток в спленоцитах, обработанных химерным ИЛ-15.Мы видели, что CD8 + Т-клеточный ответ модулируется, чтобы играть важную роль в преобразовании более высоких частот клеток, экспрессирующих IFN-γ и IL-2 (фиг. 6C, D ) . Сходные результаты были достигнуты при введении pChimeric IL-15 с pOVA, которые увеличивают величину антиген-специфических эффекторных CD8 + Т-клеток и образование долгоживущих Т-клеток памяти. Наши предварительные результаты свидетельствуют о безопасности химерного ИЛ-15.

По сути, наши результаты показывают стабильный, долговременный и эффективно биодоступный сконструированный химерный IL-15.Химерный ИЛ-15 является биологически активным, обладающим иммуномодулирующей активностью. Таким образом, наши данные свидетельствуют о том, что химерный IL-15 можно использовать для индукции пролиферации CD8 + Т-клеток, их функции и продолжительности жизни. Кроме того, наш химерный IL-15 может быть хорошим адъювантом для разработки вакцины для нацеливания на внутриклеточные патогены и рак.

Экспериментальные процедуры

In Silico Оценка химерного IL-15

Аминокислотные последовательности доменов IL-15 и IgG2 человека, а также мыши (Ch2, Hinge, Ch3 и Ch4) были получены из белка Uniprot. база данных (44).Мономерная и димерная структуры для IL-15-IgG2 (химерный IL-15) были созданы сервером I-TASSER (45) и COTH (46) соответственно. Везде, где это было необходимо, предсказанные структуры улучшали различными способами, например, реконструкцией белкового остова (47, 48), добавлением водородов (49), фиксацией боковых цепей (50) и удалением стерических столкновений (51, 52). Кроме того, несколько подходов, например, kobamin (53), Modrefiner (54) и MDWeb (Amber, NAMD & Gromcas) (50) были приняты для минимизации энергии и молекулярной динамики для получения более качественных моделей структур.Графики Рамачандрана были сгенерированы Rampage (55) и Molprobity (49). Кроме того, значения QMEAN-, TM- и RMSD были рассчитаны сервером QMEAN (56–58), TM-score (59, 60) и сервером Superpose (61) соответственно. Инструмент ExPASy ProtParam (62) использовался для физико-химических анализов, включая период полураспада in vivo , индекс нестабильности (оценка стабильности белков), алифатический индекс и общее среднее гидропатичности (GRAVY) путем предоставления последовательностей в формы слияния. Сервер Chiron (51, 52) использовали для оценки стерических столкновений, водородных связей (неудовлетворительных), площади поверхности, доступной для растворителя, и объема пустот.Сервер Molprobity (49, 63) использовали для расчета показателей Clash, Poor rotamers, показателей MolProbity и отклонений Cβ. Стыковку химерного IL-15 с рецептором IL-15 β проводили с использованием сервера ZDOCK (64) и инструментов Chimera (65). Межмолекулярные водородные связи (связи между частью IL-15 химеры и рецептором β) рассчитывали с помощью команды FindHBonds инструмента Chimera (65) и команды межмолекулярных водородных связей программы Accelrys Discovery Studio Visualizer (66). Кроме того, солевые мостики оценивались с помощью опций Find Salt Bridges программы Accelrys Discovery Studio Visualizer и искались для межбелкового взаимодействия с помощью инструментов AutoDock (67).

Binding Affinity Prediction

Различные закрепленные структуры (белок-белковые комплексы) были отправлены на веб-сервер PRODIGY (предсказание энергии связывания PROtein) (68, 69) для предсказания связывания и идентификации биологических интерфейсов из закрепленных структур. Мы отправили структуру комплекса IL-15-IL-15 Tri-рецептор на указанный сервер и предсказали свободную энергию связывания (свободную энергию Гиббса, ΔG) и константу диссоциации (Kd) для Rα-цепи IL-15-IL-15, Цепь IL-15–IL-15 Rβ и цепь IL-15–IL-15 Rγ.

Исследование на животных

Самки мышей BALB/c и C57BL/6 были получены от Zydus Pharmaceuticals, Ahmedabad. Этих животных содержали в помещении для животных Института фармации Университета Нирма. Корм ( вволю ) и вода были доступны в помещении для животных. Все эксперименты проводились в соответствии с протоколом, одобренным Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Университета Нирма.

Одобрение этики и согласие на участие

Все методы проводились в соответствии с протоколом, одобренным Институциональным комитетом по этике Университета Нирма, Ахмадабад.Венозную кровь здоровых добровольцев собирали после получения информированного согласия в соответствии с рекомендациями ICMR, а РВМС использовали из гепаринизированной крови для выделения РНК и амплификации кДНК для цитокинов.

Амплификация IL-15 и константной тяжелой цепи IgG2 (IgHg2) из ​​человека и мыши

Амплификация генов huIL-15 и huIgHg2

Кровь здоровых добровольцев собирали во флакон с ЭДТА. РНК экстрагировали из 0,5 мл свежей крови с помощью набора для выделения РНК (Thermo Fisher Scientific).Экспрессию huGAPDH, huIL-15 и huIgHg2 определяли с помощью ОТ-ПЦР. Полноразмерный huIL-15 (505 п.н.; CDS с сигнальным пептидом; без стоп-кодона) и huIgHg2 (981 п.н.; Ch2-Hinge-Ch3-Ch4; со стоп-кодоном) амплифицировали с использованием специфических праймеров, состоящих из последовательностей распознавания рестрикционными ферментами ( Таблица 2).

Таблица 2 Последовательности праймеров, использованные для слитых конструкций в этом исследовании.

Амплификация гена mIL-15

Для индукции мРНК mIL-15 самкам мышей BALB/c внутривенно вводили Poly I:C (100 мкг/200 мкл PBS/мышь).Через четыре часа собирали спленоциты для выделения РНК с помощью набора для выделения РНК (Thermo Fisher Scientific, США). Экспрессию β-актина и mIL-15 определяли с помощью ОТ-ПЦР. Полноразмерный mIL-15 (483 п.н.) (без стоп-кодона) амплифицировали с использованием специфических праймеров, содержащих последовательности, распознаваемые ферментами рестрикции (таблица 2).

Амплификация гена mIgHg2a

РНК была выделена из 10-2.16 (ATCC ® TIB-93™, любезный подарок от проф. .Экспрессию mβ-актина и mIgHg2a определяли с помощью ОТ-ПЦР. Участок mIgHg2a (1007 п.н.) амплифицировали с использованием специфических праймеров, содержащих последовательности распознавания рестрикционными ферментами (таблица 2).

Химерная конструкция для экспрессии белка

Амплифицированные гены (IL-15 и IgHg2a) были отдельно клонированы в вектор PCR2.1 TOPO (Thermo Fisher Scientific). Мутации K322A в Fc IgG2 и мутации N72D в IL-15 вводили с помощью сайт-направленного мутагенеза (Agilent). Сигнальный пептид IL-2 (SP) был вставлен в pcDNA3.1 вектор после промотора CMV с использованием GeneArt Service, Thermo Fisher Scientific, США. Гены IL-15 CDS и IgHg2 последовательно вставляли в вектор IL-2-pcDNA3.1 для получения конструкции IL-2SP-N72DIL-15CDS-K322AIgHg2-pcDNA3.1 (химерный IL-15). Все конструкции для клонирования, мутагенеза и слияния были подтверждены секвенированием по Сэнгеру.

Экспрессия слитого белка IL-15-IgG2/2a в клетках СНО, создание стабильных клеточных линий, очистка и характеристика химерного IL-15 (положительный контроль), конструкция химерного IL-15 или pcDNA3.1 вектор с использованием реагентов Lipofectamine LTX plus (Thermo Fisher Scientific). Секрецию химерного IL-15 количественно определяли методом сэндвич-ELISA. Вкратце, 96-луночные планшеты с высоким связыванием (Corning) покрывали захватывающими антителами против huIL-15, анти-mIL-15 (Thermo Fisher Scientific, США) или рекомбинантным рецептором IL-15 β (R&D) и инкубировали в течение ночи. при 4°С. Планшеты промывали, а затем блокировали, используя PBS/1% BSA/0,2% Tween 20 (200 мкл/лунку) на 2 ч при комнатной температуре. После инкубации блокирующий раствор удаляли.В лунки добавляли бесклеточный супернатант (100 мкл/лунку) и планшеты инкубировали в течение 2 ч при комнатной температуре. После промывки PBS/0,05% Tween 20 в лунки добавляли биотинилированные анти-IL-15 Ab (Peprotech) или анти-IgG2 HRP-меченые антитела (Thermo Fisher Scientific; Abcam) (100 мкл/лунку; разведения 1:1000).

и инкубировали в течение 1 ч при комнатной температуре. Авидин-HRP-ABTS (Peprotech) или TMB-H 2 O 2 (Thermo Fisher Scientific, США) использовали в качестве субстрата для развития анализа, реакцию останавливали с помощью 0.16M H 2 SO 4 . Планшеты считывали при OD 405 или OD 450 нм.

Генерация стабильной клеточной линии

Вектор pcDNA3.1 экспрессирует ген neo, который кодирует фермент аминогликозид-3’-фосфотрансферазу. Этот фермент делает клетки млекопитающих устойчивыми к генетическим антибиотикам. Поэтому для скрининга трансфицированных колоний использовали антибиотик генетицин (G418) (Thermo Fisher Scientific). Прежде чем приступить к получению стабильных клеточных линий, необходимо провести анализ кривой уничтожения, чтобы определить минимальную эффективную концентрацию G418, необходимую для уничтожения нерезистентных (или нетрансфицированных) клеток.10 6 клеток СНО на лунку обрабатывали различными концентрациями G418, т. е. от 100 до 800 мкг/мл, и регулярно проверяли рост и количество клеток. Отмечали минимальную концентрацию, необходимую для уничтожения всех нетрансфицированных клеток в течение 7 дней, и использовали ее для создания стабильной клеточной линии. Клетки CHO трансфицировали по отдельности различными химерными конструкциями IL-15. Через 24 ч после трансфекции среду меняли и проверяли на жизнеспособность клеток. Через 72 ч после трансфекции среду удаляли, клетки промывали PBS и к клеткам добавляли среду для селекции, содержащую антибиотик генетин.Трансфицированные клетки проявляли устойчивость к генетицину и хорошо росли в селекционных средах. Секрецию химерного IL-15 обычно измеряли с помощью ELISA, SDS-PAGE и вестерн-блоттинга. Интеграцию трансфицированных генов в геном СНО определяли с помощью ПЦР-амплификации трансфицированных генов (т.е. IL-15 и IgG2). Для этого обычно выделяли РНК из трансфицированных и нетрансфицированных клеток СНО и синтезировали кДНК.

Очистка химерного IL-15

Поскольку это терапевтический белок на основе Ig, для очистки/концентрации белка использовали аффинную хроматографию (Merck Millipore). 200 мкл смолы Protein G (50% взвеси) добавляли к основанию обменного устройства. Буфер для хранения удаляли путем центрифугирования устройства при 1000× g в течение 1 мин. Добавляли около 500 мкл 1x Bind/Wash Buffer и центрифугировали при 1000 g в течение 1 мин. Приблизительно ~9 мл бесклеточного супернатанта добавляли на шарики, смешивали со смолой с помощью пипетки и инкубировали при осторожном перемешивании в течение 1 ч при комнатной температуре. Устройство центрифугировали при 1000× g в течение 1 минуты для удаления несвязавшихся белков. Около 1.Добавляли 5 мл связующего/промывающего буфера и центрифугировали при 1000× г в течение 1 минуты для удаления примесей. Добавляли около 1 мл элюирующего буфера и смешивали со смолой. Связанный белок (т.е. химерный IL-15) элюировали и собирали в свежую пробирку путем вращения устройства при 4000× г в течение 10 мин. Элюированный белок смешивали с 75 мкл нейтрализующего буфера для корректировки рН.

Определение образования димера

Очищенный химерный IL-15 загружали в SDS-PAGE в невосстанавливающих или восстанавливающих условиях для подтверждения образования димера. Для окрашивания белковых полос использовали краситель кумасси. Для сравнения образования димера и мономера проводили денситометрический анализ. Наличие химерного IL-15 также было подтверждено вестерн-блоттингом.

Вестерн-блоттинг

Для подтверждения наличия химерных белков IL-15 проводили вестерн-блоттинг прямыми непрямыми методами. В непрямом методе в качестве первичного антитела использовали антитело IgG1 к IL-15, а в качестве вторичного антитела использовали антитело, меченное IgG1-HRP.Устройство для переноса геля iBlot ® 2 (сухой перенос, Thermo Fishier Scientific) использовали для переноса белка на нитроцеллюлозную мембрану из геля. Затем мембрану с перенесенными белками обрабатывали для развития блотов либо с помощью iBind Flex Western Device (согласно рекомендациям производителя), либо по ручному протоколу. Мембрану блокировали 3% BSA в течение 2 часов при комнатной температуре, а затем инкубировали в течение ночи с антителом IgG1 к IL-15 (первичное антитело). На следующий день мембрану промывали и инкубировали со вторичным антителом, меченным анти-IgG1-HRP, в течение 2 часов.Блоты проявляли либо с использованием набора ECL, либо с помощью TMB-для вестерн-блоттинга.

ВЭЖХ-анализ

Аналитическая эксклюзионная ВЭЖХ была проведена для очищенного химерного IL-15 с использованием прибора Agilent 1260 Infinity, оснащенного УФ-детектором, для дальнейшего подтверждения присутствия димерных форм. Около 20 мкл 1 мкг/мл химерного IL-15, разведенного в PBS, вводили в колонку Zorbax Bio Series GF-250 с размерами 9,4 (внутренний диаметр) × 250 мм (Agilent Technologies). В качестве подвижной фазы использовали фосфатно-солевой буфер и поддерживали скорость потока 1 мл/мин.Программа выполнялась в течение 45 мин. В качестве стандартов использовали OVA и BSA. Хроматограммы анализировали в открытой лаборатории (Agilent) и представляли в виде перекрывающихся пиков химерного IL-15, OVA и BSA.

Спектры кругового дихроизма

Спектры КД химерного IL-15 снимали при комнатной температуре (25°C) на спектрометре JASCO Model J-720 в IIT Gandhinagar. Использовалась прямоугольная кварцевая ячейка с длиной оптического пути 0,1 мм. Пустое сканирование проводили от 260 до 195 нм с дважды дистиллированной водой, профильтрованной через фильтр 0,22 мкм.Скорость сканирования и полоса пропускания были установлены на 50 нм/мин и 2 нм соответственно. Было взято три накопления или повторения.

Фармакокинетический анализ

Определение периода полураспада химерного IL-15

Мышам внутрибрюшинно вводили 2,5 мкг/мышь huIL-15, mIL-15 (2,5 мкг) или различные варианты химерного IL-15 и брали кровь в различные моменты времени (0,25, 0,5, 1, 2, 4, 7, 24, 48, 72, 96, 110, 134 и 158 ч после лечения), и для контроля уровня инъецированных биопрепаратов в сыворотке мыши выполняли ИФА в соответствии с протокол обсуждался ранее.Период полувыведения различных биопрепаратов из сыворотки рассчитывали с помощью медицинского калькулятора, предоставленного Корнельским университетом, в соответствии с приведенными инструкциями (40, 70). Среднее время пребывания рассчитывали с помощью программ Phoenix WinNonLin и PKsolver (71).

Оценка стабильности сконструированного химерного IL-15

Измерения термостабильности проводились с использованием дифференциального сканирующего калориметра Microcal-VP в MBU-IISC Bangalore в соответствии с рекомендациями производителя. Приблизительно 6 мл образцов белков с концентрацией 1 мг/мл осторожно вводили в ячейку для образцов, а PBS использовали в качестве эталона, который впрыскивали в эталонную ячейку.Опыт проводили в интервале температур 25–125°С в токе азота (расход 20 мл/мин, скорость нагрева 1°С/мин). Для различных вариантов химерного IL-15 определяли среднюю точку теплового перехода (Tm) или температуру денатурации (Tmax) или Tpeak.

Срок годности химерного IL-15

Химерный IL-15 разделяли на аликвоты в несколько пробирок по 0,2 мл и хранили при 37°C. Пробирки извлекали в различные моменты времени, т.е. 0, 0,5, 1, 2, 4, 7, 10, 12, 24, 36, 48, 60, 72, 84, 96, 108, 120, 132, 144, 156. , 168, 180 и 192 ч и хранили при -20°C.Эти фракции загружали в SDS-PAGE для проверки структурной целостности или способности химерного IL-15 сохранять свою структуру. Денситометрию проводили для определения соотношения димер: мономер. Сэндвич-ELISA проводили для проверки интактности обоих белков-партнеров и для проверки способности химерного IL-15 сохранять свою функциональность (аффинность связывания с его рецептором). Способность химерного IL-15 сохранять свою эффективность тестировали с помощью анализов in vitro . Спленоциты инкубировали с вышеуказанными фракциями в течение 12 ч (1 мкг/фракция/лунка).Через 12 ч обработки выделяли РНК и синтезировали кДНК. Для количественного определения транскриптов экспрессии Bcl-2, STAT-3, -5A и cpt-1a был проведен анализ КПЦР.

Проточная цитометрия для окрашивания клеточной поверхности

Селезенку мышей C57BL/6, иммунизированных OVA, собирали и измельчали ​​для приготовления суспензии отдельных клеток. Эритроциты лизировали с помощью лизирующего раствора RBS 2 мл ACK (аммоний-хлорид калия). Клетки подсчитывали с помощью автоматического счетчика клеток Countess II (Thermo Fisher Scientific) и 2×10 6 клеток инкубировали с бесклеточным супернатантом временно трансфицированных химерной конструкцией IL-15 или нетрансфицированных и обрабатывали для окрашивания поверхности клеток. После инкубации клетки осаждали и затем ресуспендировали в оставшейся жидкости. Клетки инкубировали с нормальной мышиной сывороткой (C57BL/6), действующей как Fc-блок, в течение 10 мин при 4°C. После этого к клеткам добавляли флуоресцентные антитела к поверхностным маркерам и инкубировали при 4°С в течение 20 мин. Использовали антитела против CD3 (BD, клон 145-2C11), CD8 (BD, клон 53-6.7), CD44 (BD, клон IM7), CD62L (BD, клон mel-14). Затем клетки дважды промывали буфером FACS при 400 г в течение 5 минут при 4°C.Наконец, клетки ресуспендировали в 1% параформальдегиде (PFA) перед сбором в проточном цитометре. Окрашенные клетки получали на машине FACS canto-II компании BD Bioscience в лаборатории Supratech Micropath, Ахмадабад, Гуджарат. Анализ данных был выполнен с использованием программного обеспечения FlowJovX.

Определение биологической активности химерного IL-15

РВМС выделяли из крови человека с использованием Histopaque 1077. Конечные плотности 10 6 клеток/мл в RPMI с 10% сывороткой распределяли в 6-луночные планшеты в равных концентрациях. и то же самое инкубировали с супернатантом CHO, трансфицированным химерными конструкциями, или различными концентрациями очищенного химерного белка IL-15 (0.5 мкг, 1 мкг или 2 мкг/мл). Клетки собирали и выделяли РНК после 12 часов инкубации. Получали кДНК и проводили количественную ПЦР для измерения уровней экспрессии различных генов, участвующих в пути IL-15 и модуляции Т-клеток. Точно так же мы оценили активность химерного белка в спленоцитах с помощью анализа экспрессии генов. Кроме того, с помощью проточной цитометрии измеряли клеточный ответ и внутриклеточные цитокины.

Анализ данных

Анализ данных проточного цитометра был выполнен с использованием программного обеспечения FlowJo vX.Статистический анализ проводили в GraphPad Prism 6 с помощью теста множественных сравнений Тьюки, двухфакторного дисперсионного анализа. p<0,05 считается статистически значимым.

Заявление о доступности данных

Наборы данных, представленные в этой статье, не всегда доступны, поскольку это не противоречит интересам владельцев патентов. Однако, за исключением клонированных продуктов, остальные данные могут быть предоставлены по запросу соответствующему автору. Запросы на доступ к наборам данных следует направлять Сарату К.Далай, sarat.dalai@nirmauni.ac.in.

Заявление об этике

Исследования с участием людей были рассмотрены и одобрены Институциональным этическим комитетом Университета Нирма, Ахмадабад, Гуаджарт, Индия-382481. Пациенты/участники предоставили письменное информированное согласие на участие в этом исследовании. Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Университета Нирма, Ахмадабад, Гуджарат, Индия-382481.

Авторские вклады

MP провела эксперименты и проанализировала данные.Нью-Йорк помогал в проведении экспериментов. СКД руководил исследованием. MP, NY и SKD написали рукопись. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Конфликт интересов

MP, NY и SD имеют право собственности на патент, поданный на улучшенный химерный IL-15 [номер индийского патента: E-2/2703/2017/MUM; Приложение. Номер: 201721010096 (опубликовано)].

Благодарности

Мы признательны DBT (Департамент биотехнологии), Govt. Индии (BT/PR7857/BRB/10/1215/2013) и GSBTM (Биотехнологическая миссия штата Гуджарат), Govt.штата Гуджарат (GSBTM/JDR&D/608/2020/455) за исследовательские гранты SD; DBT и CSIR (Совет по научным и промышленным исследованиям) для стипендий в Нью-Йорке и DST (Департамент науки и технологий) Govt. Индии за стипендию INSPIRE для члена парламента. Авторы также признают Департамент высшего образования, Govt. Мадхья-Прадеш и правительство. Колледж Манавар. Спасибо проф. Нилаб Шастри, Калифорнийский университет в Беркли, за 10-2,16 ячеек (ATCC® TIB-93™) и доктору Радживу Тьяги, IMTECH, Чандигарх, за критическое прочтение и редактирование рукописи.

Ссылки

1. Шарп М., Маунт Н. Генетически модифицированные Т-клетки в терапии рака: возможности и проблемы. Dis Models & Mech (2015) 8:337. doi: 10.1242/dmm.018036

Полный текст CrossRef | Google Scholar

2. Пилипов К., Роберто А., Редерер М., Вальдманн Т.А., Мавилио Д., Лугли Э. IL-15 и стволовые клетки Т-клеток в иммунотерапии рака на основе Т-клеток. Cancer Res (2015) 75:5187–93. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-15-1498

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

4.Эйкхофф С.С., Васконселос Дж.Р., Салливан Н.Л., Блажевич А., Бруна-Ромеро О., Родригес М.М. и соавт. Совместное введение плазмидной ДНК, кодирующей IL-15, улучшает долгосрочную защиту генетической вакцины против Trypanosoma cruzi. PloS Negl Trop Dis (2011) 5:e983. doi: 10.1371/journal.pntd.0000983

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

5. Kutzler MA, Robinson TM, Chattergoon MA, Choo DK, Choo AY, Choe PY, et al. Коиммунизация оптимизированной плазмидой IL-15 приводит к усилению функции и увеличению продолжительности жизни Т-клеток CD8, которые частично не зависят от помощи Т-клеток CD4. J Immunol (2005) 175:112–23. doi: 10. 4049/jimmunol.175.1.112

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

6. Фаваз Л.М., Шариф-Аскари Э., Менезес Дж. Повышающая регуляция цитотоксической активности NK посредством индукции IL-15 различными вирусами: сравнительное исследование. J Immunol (1999) 163:4473–80.

Реферат PubMed | Google Scholar

7. Перера П.Ю., Личи Дж.Х., Вальдманн Т.А., Перера Л.П. Роль интерлейкина-15 в воспалении и иммунных реакциях на инфекцию: значение для его терапевтического использования. Microbes Infect (2012) 14:247–61. doi: 10.1016/j.micinf.2011.10.006

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

8. Ferretti S, Bonneau O, Dubois GR, Jones CE, Trifilieff A. IL-17, продуцируемый лимфоцитами и нейтрофилами, необходим для индуцированной липополисахаридами нейтрофилии дыхательных путей: IL-15 как возможный триггер. J Immunol (2003) 170:2106–12. doi: 10.4049/jimmunol.170.4.2106

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

9. Bannwart CF, Nakaira ET, Sartori A, Peraçoli MTS. Интерлейкин-15: его роль в микробных инфекциях. J Venom Anim Toxins Incl Trop Dis (2007) 13:562–75. doi: 10.1590/S1678-

007000300002

Полный текст CrossRef | Google Scholar

10. Li S, Qi X, Gao Y, Hao Y, Cui L, Ruan L, et al. ИЛ-15 увеличивает частоту эффекторных клеток памяти CD8+ Т-клеток у макак-резусов, иммунизированных вакциной против ВИЧ. Cell Mol Immunol (2010) 7:491–4. doi: 10.1038/cmi.2010.44

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

11.О С, Берзофски Дж. А., Берк Д. С., Вальдманн Т. А., Перера Л. П. Совместное введение векторов вакцины против ВИЧ с вирусами коровьей оспы, экспрессирующими IL-15, но не IL-2, индуцирует длительный клеточный иммунитет. Proc Natl Acad Sci U S A (2003) 100:3392–7. doi: 10.1073/pnas.06305

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

14. Mortier E, Quemener A, Vusio P, Lorenzen I, Boublik Y, Grotzinger J, et al. Растворимый рецептор интерлейкина-15 альфа (IL-15R альфа)-суши в качестве селективного и мощного агониста действия IL-15 через IL-15R бета/гамма.Слитые белки гиперагониста IL-15 x IL-15R альфа. J Biol Chem (2006) 281:1612–9. doi: 10.1074/jbc.M508624200

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

15. Дюбуа С., Патель Х.Дж., Чжан М., Вальдманн Т.А., Мюллер Дж.Р. Предварительная ассоциация IL-15 с IL-15R альфа-IgG1-Fc усиливает его активность в отношении пролиферации NK и CD8+/CD44high Т-клеток и его противоопухолевое действие. J Immunol (2008) 180:2099–106. doi: 10.4049/jimmunol.180.4.2099

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

16.Рубинштейн М.П., ​​Ковар М., Пуртон Дж.Ф., Чо Дж.Х., Бойман О., Сурх К.Д. и др. Превращение IL-15 в суперагонист путем связывания с растворимым IL-15R{альфа}. Proc Natl Acad Sci U S A (2006) 103:9166–71. doi: 10.1073/pnas.0600240103

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

17. Guo Y, Luan L, Rabacal W, Bohannon JK, Fensterheim BA, Hernandez A, et al. Иммунотоксичность, опосредованная суперагонистом IL-15: роль NK-клеток и IFN-γ. J Immunol (2015) 195(5):2353–64.doi: 10.4049/jimmunol.1500300

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

18. Yajima T, Yoshihara K, Nakazato K, Kumabe S, Koyasu S, Sad S, et al. IL-15 регулирует сокращение CD8+ Т-клеток во время первичной инфекции. J Immunol (2006) 176:507–15. doi: 10.4049/jimmunol.176.1.507

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

19. Вольф Э.А., Шрайбер Г.Дж., Косанд В.Л., Рафф Х.В. Гомодимеры моноклональных антител: усиление противоопухолевой активности у мышей nude. Cancer Res (1993) 53:2560–5.

Реферат PubMed | Google Scholar

20. Гети М.А., Подар Э.М., Ильген А., Гордон Б.Е., Ур Дж.В., Витетта Э.С. Гомодимеризация опухолереактивных моноклональных антител заметно увеличивает их способность вызывать остановку роста или апоптоз опухолевых клеток. Proc Natl Acad Sci U S A (1997) 94:7509–14. doi: 10.1073/pnas.94.14.7509

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

21. Гети М.А., Брайт Х., Витетта Э.С.Гомодимеры, но не мономеры ритуксана (химерного анти-CD20) индуцируют апоптоз в клетках В-лимфомы человека и проявляют синергизм с химиотерапевтическим агентом и иммунотоксином. Кровь (2001) 97:1392–8. doi: 10.1182/blood.V97.5.1392

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

22. Маной П., Навин Ю., Далай С.К. Влияние длины и аминокислотного состава на образование димеров химеры на основе иммуноглобулина. Curr Pharm Des (2018) 24(11):1211–23. дои: 10.2174/1381612823666171018115206

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

24. Waldmann TA, Tagaya Y. Многогранная регуляция экспрессии интерлейкина-15 и роль этого цитокина в дифференцировке NK-клеток и ответе хозяина на внутриклеточные патогены. Annu Rev Immunol (1999) 17:19–49. doi: 10.1146/annurev.immunol.17.1.19

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

25. Ward A, Anderson M, Craggs RI, Maltby J, Grahames C, Davies RA, et al.Экспрессия E. coli и очистка IL-15 человека и яванского макака. Protein Expr Purif (2009) 68:42–8. doi: 10.1016/j.pep.2009.05.004

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

26. Куэто М., Дорта М.Дж., Мунгия О., Ллабрес М. Ас: Новый подход к оценке стабильности составов белковых растворов с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии. Int J Pharm (2003) 252:159–66. doi: 10.1016/S0378-5173(02)00627-0

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

27.He X, Cao W, Zhao Z, Zhang C. Анализ белкового состава и антиоксидантной активности гидролизатов Paphia undulate. J Food Nutr Res (2013) 1:30–6. doi: 10.12691/jfnr-1-3-3

CrossRef Полный текст | Google Scholar

28. Чиу М.Х., Преннер Э.Дж. Дифференциальная сканирующая калориметрия: бесценный инструмент для детальной термодинамической характеристики макромолекул и их взаимодействий. J Pharm Bioallied Sci (2011) 3:39–59. дои: 10.4103/0975-7406.76463

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

29. Weiss WFIV, Gabrielson JP, Al-Azzam W, Chen G, Davis DL, Das TK, et al. Принятие технических решений с использованием данных структуры более высокого порядка: перспективы характеристики структуры более высокого порядка в биофармацевтической промышленности. J Pharm Sci 105:3465–70. doi: 10.1016/j.xphs.2016.09.003

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

30. Вебстер С. Фармацевтическая технология.Прогнозирование стабильности терапевтических белков при длительном хранении. (2013). 37(11):37.

Google Scholar

32. Кокаджи А.И., Хокли Д.Л., Кейн К.П. Транспрезентация IL-15 усиливает активацию CD8+ Т-клеток и необходима для оптимального ответа CD8+ Т-клеток центральной памяти. J Immunol (2008) 180:4391–401. doi: 10.4049/jimmunol.180.7.4391

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

33. Becker TC, Wherry EJ, Boone D, Murali-Krishna K, Antia R, Ma A, et al.Интерлейкин 15 необходим для пролиферативного обновления вирусспецифических Т-клеток памяти CD8. J Exp Med (2002) 195:1541–8. doi: 10.1084/jem.20020369

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

34. Liu RB, Engels B, Schreiber K, Ciszewski C, Schietinger A, Schreiber H, et al. IL-15 в микроокружении опухоли вызывает отторжение больших образовавшихся опухолей Т-клетками неродственным Т-клеточным рецептором зависимым образом. Proc Natl Acad Sci (2013) 110:8158–63.doi: 10.1073/pnas.1301022110

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

35. Уген К.Е., Куцлер М.А., Марреро Б., Вестовер Дж., Коппола Д., Вайнер Д.Б. и др. Регрессия подкожных опухолей меланомы B16 после внутриопухолевой доставки экспрессирующей IL-15 плазмиды с последующей электропорацией in vivo. Cancer Gene Ther (2006) 13:969–74. doi: 10.1038/sj.cgt.7700973

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

36. Данило Пальяри С.Ф., Ландольфи Р., Чианчи Р.Роль IL-15 в раке человека: друг или враг? Int Trends In Immun (2013) 1:8.

Google Scholar

37. Meazza R, Azzarone B, Orengo AM, Ferrini S. Роль цитокинов с общей гамма-цепью в развитии и функционировании NK-клеток: перспективы иммунотерапии. J Biomed Biotechnol (2011) 2011:16. doi: 10.1155/2011/861920

Полный текст CrossRef | Google Scholar

38. Параса В.Р., Сикхамани Р., Раджа А. Влияние рекомбинантных цитокинов на экспрессию рецепторов естественных клеток-киллеров у пациентов с туберкулезом и/или ВИЧ-инфекцией. PloS One (2012) 7:e37448. doi: 10.1371/journal.pone.0037448

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

39. Инг Р., Грос П., Стивенсон М.М. Интерлейкин-15 усиливает врожденный и адаптивный иммунный ответ на инфекцию малярии на стадии крови у мышей. Infect Immun (2005) 73:3172–7. doi: 10.1128/IAI.73.5.3172-3177.2005

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

41. Berger C, Berger M, Hackman RC, Gough M, Elliott C, Jensen MC, et al.Безопасность и иммунологические эффекты введения IL-15 у нечеловеческих приматов. Кровь (2009) 114:2417–26. doi: 10.1182/blood-2008-12-189266

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

42. van der Windt GJW, Everts B, Chang C-H, Curtis JD, Freitas TC, Amiel E, et al. Митохондриальная дыхательная способность является критическим регулятором развития памяти CD8 (+) T-клеток. Иммунитет (2012) 36:68–78. doi: 10.1016/j.immuni.2011.12.007

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

43.Хан К.П., Чжу С., Лю Б., Дженг Э., Конг Л., Йовандич Д.Л. и др. IL-15: Комплекс суперагонистов рецептора альфа IL-15: коэкспрессия высокого уровня в рекомбинантных клетках млекопитающих, очистка и характеристика. Цитокин (2011) 56:804–10. doi: 10.1016/j.cyto.2011.09.028

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

46. Мукерджи С., Чжан Ю. Прогнозирование структуры белковых комплексов с помощью многомерных потоков и рекомбинации шаблонов. Структура (камб) (2011) 19: 955–66.doi: 10.1016/j.str.2011.04.006

CrossRef Полный текст | Google Scholar

47. Холм Л., Сандер С. Алгоритм базы данных для генерации координат белковой цепи и боковой цепи из приложения C-альфа-трассировки для построения модели и обнаружения ошибок координат. J Mol Biol (1991) 218:183–94. doi: 10.1016/0022-2836(91)

-8

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

48. Мур Б.Л., Келли Л.А., Барбер Дж., Мюррей Дж.В., Макдональд Дж.Т.Высококачественная реконструкция белкового остова из альфа-углеродов с использованием смешанных моделей Гаусса. J Comput Chem (2013) 34:1881–9. doi: 10.1002/jcc.23330

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

49. Chen VB, Arendall WB,3, Headd JJ, Keedy DA, Immormino RM, Kapral GJ, et al. MolProbity: проверка структуры всех атомов для макромолекулярной кристаллографии. Acta Crystallogr D Biol Crystallogr (2010) 66:12–21. doi: 10.1107/S049073

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

50.Госпиталь А, Андрио П., Феноллоса С., Чичин-Сайн Д., Ороско М., Гелпи Дж.Л. MDWeb и MDMoby: интегрированная веб-платформа для моделирования молекулярной динамики. Биоинформатика (2012) 28:1278–9. doi: 10.1093/bioinformatics/bts139

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

52. Кота П., Дин Ф., Рамачандран С., Дохолян Н.В. Gaia: автоматизированная оценка качества моделей структуры белков. Биоинформатика (2011) 27:2209–15. doi: 10.1093/bioinformatics/btr374

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

53.Родригес Дж. П., Левитт М., Чопра Г. КоБаМИН: веб-сервер минимизации, основанный на знаниях, для уточнения структуры белка. Nucleic Acids Res (2012) 40:W323–328. doi: 10.1093/nar/gks376

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

54. Сюй Д., Чжан Ю. Повышение физического реализма и структурной точности моделей белков путем двухэтапной минимизации энергии на атомном уровне. Biophys J (2011) 101:2525–34. doi: 10.1016/j.bpj.2011.10.024

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

58.Бенкерт П., Биазини М., Шведе Т. К оценке абсолютного качества моделей структуры отдельных белков. Биоинформатика (2011) 27:343–50. doi: 10.1093/bioinformatics/btq662

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

61. Майти Р., Ван Домселар Г.Х., Чжан Х., Уишарт Д.С. SuperPose: простой сервер для сложной структурной суперпозиции. Nucleic Acids Res (2004) 32:W590–594. doi: 10.1093/nar/gkh577

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

62. Уилкинс М.Р., Гастайгер Э., Байрох А., Санчес Дж.К., Уильямс К.Л., Аппель Р.Д. и соавт. Инструменты идентификации и анализа белков на сервере ExPASy. Methods Mol Biol (1999) 112:531–52. doi: 10.1385/1-59259-584-7:531

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

63. Ловелл С.К., Дэвис И.В., Арендал В.Б.,3, де Баккер П.И., Уорд Дж.М., Присант М.Г. и др. Проверка структуры с помощью геометрии Calpha: отклонение phi, psi и Cbeta. Белки (2003) 50:437–50. дои: 10.1002/прот.10286

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

65. Pettersen EF, Goddard TD, Huang CC, Couch GS, Greenblatt DM, Meng EC, et al. UCSF Chimera — система визуализации для поисковых исследований и анализа. J Comput Chem (2004) 25:1605–12. doi: 10.1002/jcc.20084

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

66. Dassault Systèmes BIOVIA. Среда моделирования Discovery Studio, выпуск 4. 5, Сан-Диего: Dassault Systèmes. (2015).

Google Scholar

67. Саннер М.Ф. Python: язык программирования для интеграции и разработки программного обеспечения. J Mol Graph Model (1999) 17:57–61.

Реферат PubMed | Google Scholar

68. Rodrigues JP, Xue LC, Kastritis PL, Bonvin AM, Vangone A. PRODIGY: веб-сервер для прогнозирования аффинности связывания белково-белковых комплексов. Биоинформатика (2016) 32:3676–8. doi: 10.1093/bioinformatics/btw514

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

71.Zhang Y, Huo M, Zhou J, Xie S. PKSolver: надстройка для фармакокинетического и фармакодинамического анализа данных в Microsoft Excel. Программы вычислительных методов BioMed (2010) 99:306–14. doi: 10.1016/j.cmpb.2010.01.007

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Гормональная терапия для транс- и гендерно-различных пациентов в условиях общей практики

Врачи общей практики (ВОП) по всей Австралии с высокой вероятностью сталкиваются с трансгендерными, гендерно разнообразными и небинарными (TGDNB) пациентами в своей повседневной практике. По оценкам Всемирной организации здравоохранения, до 0,5% населения мира идентифицируют себя как трансгендеры или представители разных полов. 1 В Австралии 2,3% учащихся 10–12 классов были идентифицированы как трансгендерные и гендерно неоднородные по результатам национального обследования сексуального здоровья в 2018 году. 2

В последние годы было достигнуто много достижений в области здоровья трансгендеров. К ним относятся:

  • признание того, что гендерное разнообразие не является расстройством психического здоровья 3,4
  • переход от обязательной психиатрической экспертизы к более современным моделям помощи, ориентированным на пациента 5
  • понимание разнообразия гендерных идентичностей, включая идентичности вне бинарной системы. 6,7

Пациенты с TGDNB могут обращаться к своим врачам общей практики с просьбой об уходе, подтверждающем гендерную принадлежность, и это может включать запрос на введение гормонов, подтверждающих гендерную принадлежность. Стало ясно, что снижение барьеров на пути к здравоохранению и более ранний доступ к гормонам, подтверждающим гендер, улучшают показатели здоровья и благополучие людей TGDNB. 8,9 Однако значительное число людей в сообществе TGDNB не имеют доступа к надлежащим и своевременным медицинским услугам.В недавнем общенациональном опросе лиц TGDNB более половины респондентов сообщили о своем доступе к гендерно-подтверждающей помощи как об «хорошем», «плохом» или «отсутствующем». 10

врача общей практики по всей Австралии идеально подходят для оказания гендерно-подтверждающей помощи пациентам с TGDNB. В большинстве случаев гормоны, подтверждающие пол, можно назначать и контролировать в условиях первичной медико-санитарной помощи. Было разработано несколько местных ресурсов, чтобы помочь врачам общей практики назначать гормональную терапию. Доступны мероприятия по обучению и профессиональному развитию, а также рекомендуется наставничество со стороны коллеги с опытом работы в этой области.

Общие принципы назначения гормонов, подтверждающих пол

Общие принципы назначения гормонов, подтверждающих пол, можно резюмировать следующим образом.

  • Цель гормональной терапии, подтверждающей пол, — привести внешний вид в соответствие с гендерной идентичностью, чтобы уменьшить дистресс и улучшить самочувствие.
  • Гормональная терапия должна подбираться индивидуально – универсального решения для всех не существует.
  • При назначении гормональной терапии важно начинать с низких доз и постепенно повышать дозу.
  • Подтверждающая гендер гормональная терапия обычно, но не всегда, проводится на протяжении всей жизни. Некоторые пациенты прекращают прием гормонов после того, как произошли желаемые изменения.
Модель ухода на основе информированного согласия

В 2017 г. Медицинский центр гендерного разнообразия Equinox в Мельбурне (Thorne Harbour Health) выпустил первое австралийское руководство по модели лечения на основе «информированного согласия», Протоколы начала гормональной терапии для транс- и гендерно-различных пациентов . 5 Руководство основано на аналогичном протоколе, успешно внедренном в США. 11 Это руководство одобрено Австралийской профессиональной ассоциацией трансгендерного здоровья (AusPATH) и Гендерной клиникой Monash Health, Виктория. В соответствии с моделью информированного согласия лечащий врач общей практики является основным поставщиком медицинских услуг. Особое внимание уделяется самоопределению, ориентированному на пациента уходу и поддержке психического здоровья. Психологическая поддержка может быть оказана консультантом, врачом общей практики, психологом, психиатром или другим специалистом в зависимости от потребностей пациента.Если пациент не может дать информированное согласие или у него серьезные проблемы с нестабильным психическим здоровьем, такие как активный психоз, рекомендуется психиатрическое обследование до начала приема гормонов, подтверждающих пол. Депрессия и тревога распространены в популяции TGDNB и не являются противопоказанием к началу приема гормонов, подтверждающих пол.

Прежде чем начинать прием гормонов, подтверждающих пол, важно подтвердить наличие гендерного несоответствия в анамнезе. Это определяется пациентом самостоятельно.Пациент обычно описывает стойкое несоответствие между своей гендерной идентичностью и полом, назначенным ему при рождении. Важно уделять время консультированию пациента по поводу гормональной терапии и изучению его психосоциальной ситуации и поддержки. Это может быть рассмотрено за относительно короткое время или может потребовать нескольких консультаций. Необходимое время зависит от уровня опыта лечащего врача общей практики и сложности представления.

Визиты перед поступлением на работу предоставляют бесценную возможность для оказания профилактической помощи, скрининга сексуального здоровья и общего медицинского осмотра.Предлагаемый контрольный список для использования до начала приема гормонов, подтверждающих пол, приведен ниже.

  • Подтверждение гендерного несоответствия в анамнезе (по выбору пациента).
  • Соберите полный медицинский анамнез и семейный анамнез, чтобы исключить противопоказания к гормональной терапии.
  • Проведите оценку психического здоровья и предложите направление для консультации или поддержки равных.
  • Изучите идеи, опасения и ожидания пациента
    • Каковы их цели?
    • Есть ли у них какие-либо опасения?
    • Каковы их ожидания? Они реалистичны?
  • Обсудите ожидаемые изменения в результате применения гормонов и ожидаемые сроки изменений.
  • Обсудите возможные осложнения и побочные эффекты половых гормонов.
  • Проверьте исходное артериальное давление и индекс массы тела.
  • Организуйте базовые анализы крови, включая фолликулостимулирующий гормон, лютеинизирующий гормон, эстрадиол, общий тестостерон, общий анализ крови, мочевину и электролиты, а также тесты функции печени. Рассмотрите возможность назначения гликированного гемоглобина и липидов натощак, если возраст пациента >40 лет или если присутствуют дополнительные факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний.
  • Предложите направление на криоконсервацию спермы до начала приема феминизирующих гормонов.
  • Оцените и задокументируйте способность давать информированное согласие.

После начала приема гормонов, подтверждающих пол, необходим регулярный клинический осмотр. Посещения должны включать обзор психического здоровья, анализы крови, кровяное давление, индекс массы тела, консультирование и рекомендации.

Феминизирующие гормоны

Наиболее часто назначаемым феминизирующим гормоном для людей с TGDNB в Австралии является валерат эстрадиола. 12 Типичные дозы приведены в таблице 1. Этинилэстрадиол больше не является предпочтительным вариантом из-за опасений, что он может привести к более высокому риску тромбообразования. 13,14 Трансдермальный эстрадиол является еще одним вариантом и предпочтительнее перорального эстрадиола для пациентов старше 40 лет и лиц с факторами риска тромбоэмболических заболеваний. Многие пациенты предпочитают подкожные имплантаты с эстрадиолом; однако доступ к этим продуктам в Австралии может быть затруднен, и они могут быть непомерно дорогими с финансовой точки зрения, поскольку они не включены в Программу льгот для фармацевтов (PBS). Пациентов следует предупредить о том, что физические изменения при приеме эстрогена, скорее всего, будут медленными и будут различаться у разных людей.

Ранние изменения при приеме эстрогена включают:

  • спокойнее настроение
  • более мягкая кожа
  • снижение либидо
  • эректильная дисфункция.

Изменения, происходящие в течение следующих шести-двенадцати месяцев, включают:

  • перераспределение жира в организме (более пышная форма тела)
  • снижение мышечной массы
  • уменьшение объема яичек
  • Развитие груди
  • (может занять до трех лет).

Эстроген не влияет на голос. Если их голос причиняет беспокойство, пациентке может быть предложено направление к логопеду для терапии голосовой феминизации.

Таблица 1. Феминизирующие гормоны
Женский гормон Типичная начальная доза Типичная поддерживающая доза Список PBS Практические советы
Эстрадиола валерат таблетки; эстрадиол таблетки 2 мг в день 6–8 мг в день Да
  • Принимать один раз в день или в два приема.
Пластыри с эстрадиолом 25–50 мкг в течение 24 часов один раз в неделю или каждые 3–4 дня 100–200 мкг в течение 24 часов один раз в неделю или каждые 3–4 дня Да
  • Нанесите на чистую сухую кожу нижней части живота или ягодиц.
  • Может возникнуть раздражение кожи.
  • В теплом влажном климате заплаты могут не прилипать.
Пакетик с гелем эстрадиола 1 мг в день 1–2 мг в день Да
  • Нанесите на область размером с ладонь в нижней части живота или бедра.Если гель наносится на большую площадь поверхности тела, это может снизить эффективность.
Имплантат эстрадиола 100 мг (подкожно) 100 мг гранул подкожно каждые
6–9 месяцев
  • Имплантат можно приобрести в аптеке.
  • Имплантаты с эстрадиолом не одобрены TGA.
  • Одноразовые троакары можно приобрести в Интернете.
PBS, Схема фармацевтических льгот; TGA, Управление терапевтических товаров
Побочные эффекты

Побочные эффекты эстрадиола аналогичны побочным эффектам пероральных противозачаточных таблеток. Могут возникнуть тошнота и увеличение веса. Более серьезные побочные эффекты включают тромбоз глубоких вен, камни в желчном пузыре, бесплодие и нарушение функции печени. Фертильность снижается вскоре после начала приема эстрогенов из-за снижения сперматогенеза и атрофии семенных канальцев. 15 Криоконсервация спермы должна быть обсуждена до начала введения гормонов, подтверждающих пол. Курильщиков следует предупредить о кумулятивном риске тромбоза от курения и оказать им поддержку в отказе от курения.

Мониторинг

Анализы крови следует проводить раз в три месяца в течение первого года, затем раз в шесть-двенадцать месяцев в более долгосрочной перспективе для проверки уровня эстрадиола и тестостерона, функции печени, мочевины и электролитов и полного исследования крови. Продолжаются споры об оптимальном диапазоне уровней эстрадиола в этих условиях.В качестве общего руководства разумным является уровень эстрадиола в диапазоне 300–800 пмоль/л для цисфеминного (нетрансгендерного) женского пола. Между уровнями эстрадиола могут быть значительные различия, и важно не слишком зацикливаться на «уровнях». Если пациент доволен тем, как проходит его переход, нет необходимости корректировать дозу. Важно следить за тем, чтобы уровни эстрадиола не были слишком высокими (> 1000 пмоль/л), так как это может предрасполагать пациента к более высокому риску побочных эффектов.Небинарные пациенты могут предпочесть целевой уровень эстрадиола между мужским и женским диапазоном.

Терапия эстрогенами обычно снижает уровень тестостерона, но часто не до желаемого уровня. В этом случае врач общей практики может рассмотреть возможность назначения антиандрогенов.

Антиандрогены

Антиандрогены обычно назначают вместе с эстрадиолом для снижения уровня тестостерона. Наиболее часто назначаемыми антиандрогенами при смене пола в Австралии являются спиронолактон и ацетат ципротерона. 12

Типичные дозы приведены в Таблице 2. Ципротерона ацетат является более сильным антиандрогеном, чем спиронолактон 16 , и обладает прогестагенными свойствами. В настоящее время проводится австралийское исследование для определения оптимальной дозы ацетата ципротерона в этих условиях (д-р Дж. Дин, «GoLoCypro: титрование минимальной эффективной дозы ацетата ципротерона для лечения транс- и гендерно-различных людей, которым требуются феминизирующие гормоны [2019–2021]»). , Университет Квинсленда).

Некоторые люди предпочитают не принимать антиандрогены, в том числе те, кто хочет сохранить эректильную функцию.

Пациентов, принимающих антиандрогены, следует предупредить о том, что физические изменения, вероятно, будут медленными и будут различаться у разных людей.

Эффекты антиандрогенов включают:

  • замедление роста волос на теле
  • уменьшение прыщей
  • снижение либидо
  • эректильная дисфункция.

Волосы на лице обычно сохраняются.Могут быть показаны лазерные или электролизные процедуры.

Таблица 2. Антиандрогены
Антиандроген Типичная начальная доза Типичная поддерживающая доза Список PBS Практические советы
Таблетки спиронолактона 50 мг в день 100–200 мг в день Да
  • Мониторинг электролитов и постурального артериального давления.
Таблетки ципротерона ацетата 12,5–25 мг в день 12,5–50 мг в день Да
  • Мониторинг функции печени и настроения.
PBS, Схема фармацевтических льгот
Побочные эффекты

Пациенты часто сообщают об утомлении после начала приема антиандрогенов. Спиронолактон обычно хорошо переносится, но может вызывать гиперкалиемию, постуральную гипотензию и диурез. Ципротерона ацетат может усугубить депрессию. Сообщалось о гепатотоксичности и менингиоме 17 при применении высоких доз ципротерона.

Мониторинг

Людям, которым необходим уровень цисженского гормона, гормональная терапия должна быть направлена ​​на достижение уровня общего тестостерона <2 нмоль/л. Важно каждые шесть месяцев контролировать электролиты и функциональные пробы печени. Спиронолактон блокирует периферические рецепторы тестостерона и, следовательно, может быть клинически эффективным даже при измеренном уровне тестостерона в сыворотке выше целевого.Важно лечить пациента в соответствии с его целями и не слишком зацикливаться на «уровнях».

Некоторые пациенты с TGDNB выбирают орхидэктомию, чтобы избежать необходимости в антиандрогенах. В этом случае важно продолжать прием эстрадиола для защиты костей.

Прогестерон

Прогестерон рутинно назначался трансфеминным пациенткам в прошлые годы, когда стандартом лечения были комбинированные оральные контрацептивы. В последние годы предпочтительным вариантом стал эстрадиол, реже назначают прогестерон.Доказательств эффективности прогестерона в этих условиях недостаточно. Как ни странно, многие пациенты сообщают о росте груди при приеме прогестерона, особенно при приеме в течение первых двух лет смены пола. При назначении прогестерона можно рассмотреть микронизированный продукт, такой как прометрий 100 мг перорально в день. Это, вероятно, будет иметь меньше неблагоприятных метаболических эффектов, чем синтетический прогестерон. Нет необходимости циклировать прогестерон. Пациентов следует предупредить о возможном седативном эффекте этого продукта и рекомендовать принимать его в ночное время натощак.

Маскулинизирующие гормоны

Наиболее часто назначаемым маскулинизирующим гормоном для подтверждения пола в Австралии является ундеканоат тестостерона. 12 Другие варианты включают инъекции депо-тестостерона раз в две недели и трансдермальные препараты, описанные в таблице 3. Инъекции раз в две недели стали менее популярными в последние годы из-за результирующих пиков и спадов уровней тестостерона и потенциальной лабильности настроения. Трансдермальный тестостерон является хорошим вариантом для пациентов, которые боятся игл или предпочитают удобство местного продукта.Гели имеют тенденцию быть липкими, и для их впитывания может потребоваться несколько минут.

В отличие от феминизирующих гормонов, тестостерон может вызывать физические изменения относительно быстро, и пациентов следует консультировать по этому поводу. В течение шести месяцев после начала приема маскулинизирующих гормонов внешний вид пациентки обычно сильно меняется.

Ранние изменения при приеме тестостерона включают:

  • прыщи
  • жирная кожа
  • повышенное либидо
  • увеличение размера клитора.

Изменения, происходящие в течение следующих шести-двенадцати месяцев, включают:

  • аменорея
  • перераспределение жира в организме
  • рост мышц
  • увеличение волос на теле и лице
  • углубление голоса.
Таблица 3. Маскулинизирующие гормоны
Маскулинизирующий гормон Типичная начальная доза Типичная поддерживающая доза Список PBS Практические советы
Ундеканоат тестостерона для инъекций 1000 мг IMI, причем первые две дозы вводятся с интервалом в шесть недель в качестве нагрузочной дозы 1000 мг ИМИ каждые 12 недель Да, требуются полномочия
  • Введение проводят через медленную глубокую ИМИ в верхний наружный квадрант ягодицы с помощью иглы 21G.
  • При выборе длины иглы следует учитывать размер пациента.
  • При подкожном введении может возникнуть болезненная шишка вокруг места инъекции.
  • Самостоятельное администрирование не рекомендуется.
Энантат тестостерона для инъекций; инъекции сложных эфиров тестостерона 125 мг ИМИ каждые две недели 250 мг ИМИ каждые две недели
  • Введение осуществляется через медленную глубокую ИМИ в верхний наружный квадрант ягодицы или переднебоковую часть бедра с помощью иглы 21G.
  • Относительно прост в управлении; пациенты могут предпочесть самоуправление.
Пакетики с тестостероновым гелем 1% (50 мг/5 г) Один пакетик каждый день или через день Один пакетик в день Да, требуются полномочия
  • Продукт потенциально может быть передан партнерам.
  • Эти препараты легко титровать.
  • Эти препараты полезны для пациентов, которым требуются низкие дозы для частичной маскулинизации.
  • Тестостероновый крем 2% в наличии; однако субсидии PBS нет.
Набор для помпы с гелем тестостерона (12,5 мг/нажатие) 1–2 насоса в день Четыре насоса в день
Крем с тестостероном
5% (50 мг/мл)
1–2 мл в день 2 мл в день
ИМИ, внутримышечная инъекция; PBS, Схема фармацевтических льгот
Побочные эффекты

Побочные эффекты тестостерона включают увеличение веса, андрогенную алопецию, апноэ во сне и полицитемию. Угревая сыпь является обычным явлением, особенно в течение первых двух лет после начала приема тестостерона. 18 В этом контексте можно использовать обычные меры лечения акне, включая местную терапию, тетрациклины или направление на изотретиноин.

Огрубление голоса при приеме тестостерона обычно необратимо. Некоторые пациенты сообщают об «голосовой усталости» при приеме тестостерона, 19 , которая представляет собой усталость и охриплость голоса, усиливающуюся в течение дня. Это особенно актуально для профессий, где требуется голосовая проекция, и может быть рассмотрен вопрос о направлении к специалисту по патологии речи.

Часто встречается раздражение влагалища из-за атрофического вагинита. Вагинальный пессарий с эстрадиолом два раза в неделю по 10 мкг может быть приемлем для пациентки и часто уменьшает симптомы.

Из-за беспокойства по поводу фертильности пациенткам с TGDNB часто советуют заморозить ооциты до смены пола. Вероятно, в этом нет необходимости, поскольку овуляция и менструация обычно возобновляются после прекращения приема тестостерона. 15,20 Многие трансмаскулинные люди временно отказываются от тестостерона, чтобы создать семью, либо путем сбора и донорства яйцеклеток, либо вынашивания биологического ребенка. 15

Мониторинг

Рекомендуется раз в шесть месяцев проверять общий анализ крови, функцию печени и уровень тестостерона. После начала приема тестостерона уровни гемоглобина и гематокрита обычно повышаются. 21 Если уровень гематокрита превышает 0,5 (50%), у пациента может быть повышен риск тромбоза. Стратегии снижения уровня гематокрита включают увеличение интервала между инъекциями, снижение дозы или переход на альтернативный продукт тестостерона.Если полицитемия сохраняется, рекомендуется направление к гематологу для лечебной венесекции.

Для пациентов, которым требуется уровень тестостерона в диапазоне cismale (нетрансгендерные мужчины), гормональная терапия должна быть направлена ​​на минимальный уровень общего тестостерона 10–15 нмоль/л. Уровни обычно проверяют непосредственно перед инъекцией тестостерона или через 24 часа после применения трансдермального препарата. Отсутствуют данные о долгосрочных эффектах тестостерона в условиях TGDNB. Пациентам следует рекомендовать бросить курить, регулярно заниматься спортом и оптимизировать индекс массы тела.Важно контролировать липиды, особенно если присутствуют другие факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний.

Если к концу интервала между инъекциями возникает раздражительность или усталость, следует рассмотреть вопрос о сокращении интервала между инъекциями.

Не следует полагаться на тестостерон в качестве средства контрацепции, так как может произойти прорывная овуляция. Тем не менее, противозачаточные средства, содержащие эстроген, обычно следует избегать для трансмужских пациентов. Полезное заявление с изложением вариантов контрацепции для людей с TGDNB доступно на факультете сексуального и репродуктивного здоровья, Великобритания. 22

Дети и подростки

Пациентам в возрасте до 16 лет назначение блокаторов полового созревания и гормонов, подтверждающих половую принадлежность, обычно проводится в третичном учреждении. Имеются австралийские стандарты ухода и руководства по лечению транс- и гендерно-разнородных детей и подростков. 23 Обычно приходится ждать долгое время. Врачи общей практики могут помочь этим пациентам, предоставив безопасную, инклюзивную и гостеприимную среду для практики и предложив поддержку в области психического здоровья.У пациенток с дисфорией, связанной с менструацией, назначение норэтистерона по 5 мг перорально два раза в день может вызвать временную аменорею и уменьшить дистресс.

Заключение

В области здоровья трансгендеров достигнуто много успехов. Гендерное разнообразие больше не считается расстройством психического здоровья, и были разработаны новые способы лечения. Врачи общей практики идеально подходят для оказания гендерно-подтверждающей помощи в учреждениях первичной медико-санитарной помощи.

Ключевые точки
  • Врачи общей практики часто сталкиваются с пациентами с TGDNB в своей повседневной практике.
  • Врачи общей практики могут инициировать введение гормонов, подтверждающих пол, для взрослых в рамках «модели лечения на основе информированного согласия» в большинстве случаев.
  • Существует несколько ресурсов, помогающих врачам общей практики повысить квалификацию в назначении и мониторинге гормонов, подтверждающих пол.
Ресурсы

Конкурирующие интересы: П.С. был соавтором «Руководства по информированному согласию» в 2017 г. (Протоколы начала гормональной терапии для транс- и гендерно-различных пациентов). Это руководство было написано группой врачей общей практики и других специалистов, работающих в этой области, а также представителями сообщества.Руководство было одобрено Австралийской профессиональной ассоциацией трансгендерного здоровья (AusPATH) и Гендерной клиникой Monash Health.

Происхождение и экспертная оценка: заказ, внешняя экспертная оценка.

Финансирование: нет.

Благодарности
Автор хотел бы поблагодарить доктора Ника Зильберштейна и доктора Эмму Эллис за корректуру рукописи. Автор признает, что они живут и работают на земле Ларракии, и признает людей Ларракии традиционными хранителями Дарвина и внешнего региона Дарвина.

Подтверждающая пол гормональная терапия на основе эстрогенов: лекарства и что ожидать

Большинство людей, вероятно, слышали о гормоне эстрогене. Эстроген — это гормон, который мы все вырабатываем естественным образом, но в разных организмах он вырабатывается в разном количестве. Это один из половых стероидных гормонов, участвующих в развитии различных физических изменений, классически связанных с половым созреванием (например, рост волос, изменение голоса и частей тела).

Если вы трансгендер (широкий термин, обычно описывающий кого-то, чья гендерная идентичность отличается от пола, назначенного при рождении), эстроген может быть частью вашей гормональной терапии, подтверждающей пол.Сюда входят гендерно неконформные и небинарные люди. Терапия на основе эстрогена также может быть важной терапией для интерсексуалов. Здесь мы рассмотрим уход, подтверждающий гендер, и то, как он может выглядеть для тех, кто использует терапию на основе эстрогена.

AdvertisementAdvertisement

Что такое гендерно-подтверждающий уход?

Гендерно-подтверждающая помощь, модель, подробно обсуждаемая транс-телемедицинской компанией Plume, по своей сути является именно тем, на что она похожа: здравоохранение, которое подтверждает, что вы живете подлинно в своем гендере.Раньше уход за трансгендерными людьми часто следовал устаревшей универсальной схеме, когда поставщик диктовал один и тот же набор гормонов и операций для каждого трансгендера, обращающегося за медицинской помощью. Вместо этого уход, подтверждающий гендер, позволяет каждому человеку добиваться только тех вмешательств, которые он желает для подтверждения своей гендерной идентичности.

В рамках лечения, подтверждающего пол, назначается гормональная терапия, подтверждающая пол (GAHT), для поощрения физических изменений в организме, чтобы помочь людям прожить свое подлинное «я» с учетом своей гендерной идентичности или ее отсутствия. Исследования показали, что гендерно-подтверждающая модель ухода улучшает состояние здоровья трансгендерных людей. Фактически, это считается стандартом лечения и поддерживается как медицинская необходимость почти всеми крупными медицинскими ассоциациями в Соединенных Штатах, включая Американскую медицинскую ассоциацию, Американскую академию семейных врачей и Американскую психиатрическую ассоциацию.

GAHT и заместительная гормональная терапия

Поскольку GAHT и заместительную гормональную терапию (ЗГТ) часто путают или используют как взаимозаменяемые, давайте уделим немного времени, чтобы провести различие между ними.

Заместительная гормональная терапия классически описывает процесс назначения гормонов цисгендерным людям, то есть лицам, чья гендерная идентичность совпадает с полом, назначенным им при рождении, часто для облегчения симптомов гормонального дисбаланса. Например, цисгендерным женщинам в постменопаузе могут быть назначены эстрогены для облегчения приливов.

Термин «ЗГТ» часто используется транс-сообществом для описания процесса гормональной терапии, подтверждающей пол. Тем не менее, GAHT является более точным описанием использования гормонов трансгендерами, потому что технически ничего не «заменяется».Медицинское сообщество, занимающееся трансгендерными людьми, отказывается от слова «ЗГТ» и вместо этого использует «ГАТ», чтобы не смешивать разные терапевтические практики.

Кто обычно использует GAHT на основе эстрогена?

Ответ: Для GAHT на основе эстрогена не требуется однозначной гендерной идентичности. Но в целом его обычно назначают трансженщинам, а также трансфеминным, небинарным и интерсексуальным людям.

AdvertisementAdvertisement

Терапия, используемая при ГАГТ на основе эстрогенов

Эстрогены, блокаторы тестостерона или блокаторы андрогенов и прогестерон — это большие группы терапий, которые обычно используются при ГАГТ на основе эстрогенов. Каждая группа препаратов может вводиться в различных дозировках и способами.

Эндокринное общество, Калифорнийский университет в Сан-Франциско и Всемирная профессиональная ассоциация трансгендерного здоровья опубликовали клинические рекомендации по использованию лекарств для ГАГТ. Здесь мы рассмотрим различные доступные варианты и чего ожидать от каждой терапии.

Терапия эстрогенами

Эстрогены являются краеугольным камнем ГАГТ на основе эстрогенов. В ГАГТ на основе эстрогена используется биоидентичный эстроген (также известный как 17-бета-эстрадиол).Термин «биоидентичный» используется для описания гормональной терапии, которая по структуре идентична гормонам, вырабатываемым нашим собственным организмом.

Мы кратко сравним три основных метода приема эстрогена, которые вам могут прописать — таблетку, инъекцию и пластырь — и соответствующие дозировки. Обратите внимание, что все дозы, указанные ниже, являются примерами начальных диапазонов. Ваша конкретная доза будет скорректирована на основе индивидуального разговора с вашим поставщиком.

1) Таблетка

Хотя таблетки эстрадиола предназначены для перорального приема, в ГАГТ обычно рекомендуется принимать их сублингвально (растворяя под языком).Сублингвальный путь считается потенциально более безопасным, чем проглатывание таблетки. Ваш фармацевт может быть незнаком с сублингвальным методом — это нормально! Если ваш поставщик рекомендует этот метод, просто сообщите своему фармацевту, что вы обсудили его со своим врачом.

Начальная доза таблеток эстрадиола обычно составляет от 2 до 4 мг в день. С текущими скидками GoodRx терапия может стоить всего от 8 до 15 долларов в месяц.

2) Инъекции

Чаще всего инъекции эстрадиола делают в верхнюю наружную часть бедра (внутримышечно), но также возможна инъекция под кожу (подкожно) в нижнюю часть живота или бедер, если имеется достаточно кожи или жира там. Существует два распространенных типа инъекционных биоидентичных эстрогенов: эстрадиола валерат (торговая марка Delestrogen) и эстрадиола ципионат (торговая марка Depo-Estradiol).

Не во всех аптеках есть эстрадиол для инъекций, поэтому лучше предварительно позвонить, чтобы убедиться в его наличии. Если вы не можете его найти, у вас всегда есть возможность переключиться на планшет или патч.

Дозировка валерата эстрадиола, например, может составлять от 6 мг до 8 мг (от 0,3 мл до 0,4 мл) один раз в неделю, и ее можно корректировать в зависимости от индивидуальных целей.Со скидкой GoodRx флакон с концентрацией 20 мг/мл обычно будет стоить около 50 долларов за непатентованную версию.

Примерная доза депо-эстрадиола может составлять от 1,5 до 2 мг (от 0,3 до 0,4 мл) один раз в неделю. В настоящее время он доступен только как торговая марка без более дешевой универсальной версии. С GoodRx флакон может стоить всего 120 долларов США, исходя из текущих цен со скидкой GoodRx.

3) Пластырь

Эстрадиол также доступен в виде пластыря, который вы наносите на кожу, один или два раза в неделю.Согласно рекомендациям UCSF, пластырь является наиболее безопасной и предпочтительной формой эстрадиола с точки зрения риска свертывания крови и для использования активными курильщиками. Стоит отметить, что для некоторых людей патч трудно держать. Это также может иногда вызывать раздражение кожи.

Пластырь с максимальной дозой составляет 0,1 мг в день, и большинство людей используют один или два пластыря за раз. В зависимости от дозы месячный запас может стоить всего 30 долларов США, исходя из текущих цен GoodRx.

Чего ожидать от терапии эстрогенами

Большинство людей впервые начинают замечать изменения от эстрогена, такие как увеличение груди и болезненность сосков, примерно через 2–3 месяца после начала (независимо от метода). Психическое здоровье, особенно тревога и депрессия, также могут улучшиться вскоре после начала приема эстрогена. Некоторые другие изменения, которые происходят более постепенно, могут включать:

  • Перераспределение телесного жира на внешнюю часть тела (включая бедра, бедра и ягодицы)

  • Более мягкую и менее жирную кожу замедление роста грубых волос на теле и лице

  • Снижение либидо (полового влечения) и сексуальной функции

  • Уменьшение размеров некоторых частей гениталий от 2 до 5 лет, но они продолжают принимать его и после этого, чтобы сохранить произошедшие изменения и сохранить здоровье костей.

    Что касается рисков, связанных с эстрогеном, то исторически существовали разногласия по поводу возможного повышенного риска образования тромбов. Известно, что некоторые формы эстрогена, такие как премарин (который производится из лошадиной мочи) и этинилэстрадиол (например, в противозачаточных таблетках), вызывают образование тромбов.

    Связь между биоидентичным 17-бета-эстрадиолом и образованием тромбов не столь очевидна. Существует возможная связь между эстрогеном и тромбами, сердечным приступом и инсультом, но исследования, которые предполагают это, осложняются тем фактом, что они не рассматривают конкретные используемые формы эстрогена.Последовательно, данные, кажется, предполагают, что риск повышается с более высокими уровнями 17-бета-эстрадиола в крови. В целом может быть небольшой повышенный риск образования тромбов, инсульта или сердечного приступа, поэтому рекомендуется поддерживать уровень эстрогена в диапазоне от 50 до 200 пг/мл, чтобы свести к минимуму этот риск. Ваш врач будет следить за вашими уровнями, чтобы убедиться, что вы остаетесь в безопасном для вас диапазоне.

    Последним риском терапии эстрогенами является бесплодие. Со временем эстроген вызывает падение уровня тестостерона в организме, что затем вызывает изменения в других частях тела, которые важны для наступления беременности. Если для вас важно сохранить фертильность (иметь детей с собственным генетическим материалом), специалист по репродукции может помочь вам заморозить генетический материал, который впоследствии можно будет использовать для беременности.

    Терапия блокаторами тестостерона или блокаторами андрогенов

    Тестостерон — это разновидность андрогена, еще одного полового гормона, который вырабатывается во всех организмах в различных количествах. Лекарства для терапии блокаторами тестостерона часто называют блокаторами тестостерона («Т») или блокаторами андрогенов.Хотя Т-блокаторы являются одним из видов терапии, которую можно использовать с эстрогеном при ГАГТ, решение о том, использовать их или нет, очень индивидуально. Некоторые люди не принимают ни одного, один или несколько Т-блокаторов одновременно, в зависимости от их личной ситуации.

    Т-блокаторы по-разному блокируют эффекты тестостерона, но, как правило, напрямую не снижают уровень тестостерона. Важно знать, что эстроген (блокаторы тестостерона , а не ) в первую очередь снижает уровень тестостерона в организме.Одним из способов действия Т-блокаторов является прямая блокировка рецепторов тестостерона, белков, с которыми обычно взаимодействует тестостерон для активации определенных биологических процессов. Или они могут блокировать превращение тестостерона в дигидротестостерон (ДГТ), более сильную форму тестостерона.

    Наиболее распространенные Т-блокаторы, используемые при ГАГТ, включают спиронолактон, или сокращенно «спиро», и блокаторы ДГТ, такие как финастерид и дутастерид. Мы кратко сравним каждый из этих препаратов ниже. Опять же, все перечисленные дозы являются примерными начальными диапазонами и корректируются на основе индивидуального разговора с вашим врачом.

    1) Спиронолактон («спиро»)

    Спиронолактон – это прямой блокатор рецепторов андрогенов, который можно использовать в качестве добавки к эстрогену. Это также мочегонное средство, что означает, что вы можете чаще мочиться, и это может повысить уровень калия, поэтому вам нужно будет сдать анализ крови, пока вы принимаете спиро, чтобы убедиться, что уровень калия не повышается. слишком высоко. Он также может снизить кровяное давление и, как сообщается, вызывает депрессию и туман в голове.

    Типичная начальная доза спиронолактона составляет одну таблетку 50 мг в день, принимаемую перорально, и при необходимости ее можно увеличить.В настоящее время самая низкая цена за 30 таблеток спиронолактона 50 мг составляет около 9 долларов США со скидкой GoodRx.

    2) Финастерид и дутастерид 

    Финастерид и дутастерид блокируют превращение тестостерона в дигидротестостерон или ДГТ, более сильную форму тестостерона в организме. Дутастерид может быть более эффективным в блокировании эффектов тестостерона, чем финастерид.

    Поскольку дигидротестостерон играет большую роль в выпадении волос на голове, финастерид также назначают для лечения выпадения волос помимо поддерживающего пол ухода. Для тех, кто обеспокоен выпадением волос на голове или обеспокоен побочными эффектами спиро, финастерид может быть хорошим вариантом.

    Типичная начальная доза финастерида составляет 5 мг в день. Он также выпускается в таблетках по 1 мг для людей, которые предпочитают более низкую дозу. Самая низкая цена GoodRx за 30 таблеток дозировкой 1 мг или 5 мг составляет от 8 до 9 долларов США, исходя из текущих скидок. Дутастерид обычно назначают по одной капсуле 0,5 мг в день. Самая низкая цена GoodRx за 30 планшетов в настоящее время составляет около 15 долларов.

    Чего ожидать от терапии тестостероном или блокаторами андрогенов

    Использование терапии Т-блокаторами для подавления эффектов тестостерона может позволить эстрогену работать быстрее, в то время как уровень тестостерона постепенно снижается. Эффекты этих методов лечения в сочетании с эстрогеном могут значительно различаться. Вообще говоря, изменения, которые вы должны ожидать, аналогичны описанным выше при терапии эстрогенами, хотя, возможно, немного быстрее.

    РекламаРеклама

    Терапия прогестероном

    Прогестерон — еще один гормон, который можно использовать как часть ГАГТ на основе эстрогена.GAHT обычно использует биоидентичный прогестерон, называемый микронизированным прогестероном или прометрием (торговая марка).

    Чего ожидать от терапии прогестероном

    К сожалению, у нас нет никаких доказательств того, что прогестерон вызывает значительные изменения в уходе, подтверждающем гендер, в основном потому, что исследования не проводились. В то время как исследования отсутствуют, есть немало людей, которые считают, что это помогает в таких вещах, как развитие груди, в том числе округление груди и развитие ареол, добавление полноты в область бедер и, возможно, улучшение настроения и повышение либидо.Судя по текущим данным, это кажется безопасным.

    Некоторые риски и побочные эффекты терапии прогестероном включают сонливость, тошноту и случайное увеличение веса. Существует также риск андрогенизирующих эффектов (т. е. тестостероноподобных изменений, таких как рост грубых или темных волос на лице или акне), поскольку некоторые синтетические формы прогестерона производятся из гормонов того же семейства, что и тестостерон. Микронизированный прогестерон с меньшей вероятностью, чем другие формы синтетического прогестерона, вызывает эти андрогенизирующие эффекты.

    Как узнать больше

    Если вы хотите узнать больше о GAHT на основе эстрогена, лучше всего начать с разговора со своим лечащим врачом. Однако, если у вас его нет, вы можете найти местного поставщика услуг по подтверждению пола рядом с вами, посетив каталог поставщиков WPATH или проверив, живете ли вы в штате, охватываемом Plume, телемедицинской компанией, предоставляющей услуги по подтверждению пола. сделано трансгендерами и для них.

    Plume предлагает мобильное приложение, в котором вы можете проконсультироваться с врачом, разработать индивидуальный план лечения и заказать доставку рецептов на дом за фиксированную ежемесячную плату в размере 99 долларов США (страховка не требуется). Вы можете узнать больше об услугах Plume GAHT на их веб-сайте.

    – – –

    Соавторы: Rachel Percelay , Алисса Биллингсли, PharmD

    Подпишитесь и сохраните советы по сохранению рецепта. Введите свой адрес электронной почты, чтобы зарегистрироваться.

    Регистрируясь, я соглашаюсь с Условиями и Политикой конфиденциальности GoodRx и получаю маркетинговые сообщения от GoodRx.

    Предотвращение сопутствующих заболеваний у трансгендерных пациентов

    Мелани А.Мейсон, DAT, LAT, ATC, и Эмма Най, DAT, LAT, ATC

    Трансгендеры сталкиваются с серьезными препятствиями на пути к качественному медицинскому обслуживанию и сталкиваются с неравенством в состоянии здоровья в рамках своего непрерывного ухода. 1 Исследования показали, что от 25 до 30 процентов трансгендерных людей отказываются от медицинской помощи из-за их гендерной идентичности. 2,3 Кроме того, 90 процентов взрослых трансгендеров, опрошенных в 2019 году, обращались за медицинской помощью только в случае крайней необходимости. 4

    Спортивный тренер играет жизненно важную роль в снижении барьеров для доступа к качественному медицинскому обслуживанию для всех пациентов, включая трансгендеров. Этический кодекс NATA гласит: «Члены должны оказывать пациентам качественную помощь независимо от их расы, религии, возраста, пола, этнического или национального происхождения, инвалидности, состояния здоровья, социально-экономического статуса, сексуальной ориентации или гендерной идентичности». 5

    Однако примерно половина спортивных тренеров чувствуют себя компетентными в использовании соответствующей терминологии с трансгендерными пациентами, а спортивные тренеры не считают себя компетентными в консультировании трансгендерных пациентов по влиянию гормональной терапии на участие в занятиях спортом или по вопросам психического здоровья. 6

    Консультативный комитет NATA LGBTQ+ собрал ключевые моменты, которые должны знать спортивные тренеры о медицинском обслуживании трансгендеров, а также ресурсы для улучшения их знаний, осведомленности и ухода за пациентами для этой группы населения.

    Ресурс по уходу за трансгендерными пациентами

    • Сообщение в блоге NATA Now: «Уход за пациентами-трансгендерами», опубликованное в апреле 2021 года после того, как NATA выпустила заявление для членов в поддержку трансгендерной молодежи, описывает ресурсы NATA для трансгендеров, доступные членам.

    Что нужно знать о гормональной терапии

    • Трансгендерные женщины имеют широкий спектр вариантов гормональной терапии, что затрудняет отслеживание их биохимических показателей. 7
    • Не все трансгендерные пациенты проходят гормональную терапию или операцию по подтверждению пола.
    • У трансгендерных женщин уровень тестостерона сравним с таковым у цисгендерных женщин. 8
    • После перехода биометрические показатели напоминают гендерную идентичность трансгендерной женщины в сравнении с их полом при рождении. 9
    • Пациенты-трансгендеры могут столкнуться с изменениями веса и состава тела, изменением профиля липидов и артериального давления, а также расстройствами пищевого поведения. 10
    • Трансгендерные женщины имеют более высокий риск ишемического инсульта и сердечно-сосудистых заболеваний. 11
    • Гормональная терапия для трансгендеров повышает риск плохого сна. 12

    Ресурсы по гормональной терапии для АТ

    Что нужно знать о психическом здоровье и трансгендерах

    • Студенты-трансгендеры сообщили о более высоком уровне расстройств пищевого поведения по сравнению со своими цисгендерными сверстниками. 13
    • Трансгендерные студенты колледжей в три-четыре раза чаще имеют суицидальные мысли и попытки. 12
    • Следует проводить скрининг трансгендерных учащихся на предмет нарушений сна и настроения. 12

    Ресурсы по психическому здоровью LGBTQIA+

    Кроме того, AT могут внедрять обучение пациентов, программы питания и образовательные программы расширения прав и возможностей для трансгендеров, чтобы поощрять и мотивировать их к участию в профилактических мерах, помогающих справиться с осложнениями и побочными эффектами, с которыми они могут столкнуться во время и после перехода. 14

    Межпрофессиональное сотрудничество также имеет жизненно важное значение для обеспечения доступа трансгендеров к безопасному уходу в переходный период. AT должен выступать в качестве защитника и искать ресурсы и образование в отношении гормональной терапии, чтобы уменьшить сопутствующие заболевания у трансгендерных пациентов.

    Ресурсы для расширения возможностей и обучения

    Чтобы получить дополнительную информацию или узнать больше о том, как AT используют исследования для улучшения ухода за пациентами, прочитайте октябрь Новости NATA , доступный онлайн только для членов.

    Каталожные номера

    1. Ranji U, Beamesderfer A, Kates J, Salganicoff A. Здоровье и доступ к уходу и страховому покрытию для лесбиянок, геев, бисексуалов и трансгендеров в США Menlo Park, CA: Kaiser Family Foundation; 2018. https://www.kff.org/disparities-policy/issuebrief/healthand-access-to-ca….
    2. Мизра С., Руни С. Дискриминация не позволяет представителям ЛГБТК обращаться за медицинской помощью. Центр американского прогресса. https://www.americanprogress.org/issues/lgbt/news/2018/01/18/445130/dismission-prevents-lgbtq-people-accessing-health-care/. Опубликовано в 2018 г.
    3. Джеффи К.Д., Шайрс Д.А., Струмса Д. Дискриминация и несвоевременная медицинская помощь трансгендерным женщинам и мужчинам. Медицинское обслуживание. 2016;54(11), 1010-1016. doi: 10.1097/MLR.0000000000000583
    4. Льюис Н.Дж.В., Батра П., Мисиолек Б.А. и др. Беспокойство трансгендерных/гендерно неконформных взрослых и действия по преодолению дискриминации, связанные с дискриминацией: актуальность для фармацевта. Am J Health Syst Pharm. 2019; 76(8):512-20. дои: 10.1093/ajhp/zxz023
    5. Этический кодекс НАТА. Обновлено в марте 2018 г. По состоянию на 12 мая 2021 г. https://www.nata.org/membership/about-membership/member-resources/code-of-ethics
    6. Вален Д.Р., Най Э.А., Роджерс С.М. и др. Компетентность, образование и восприятие спортивных тренеров в отношении ухода за трансгендерными студентами-спортсменами. J Атл Поезд. 2020; 55(11), 1142-1152. дои: 10.4085/1062-6050-147-19.
    7. Печать ЖЖ. Обзор физических и метаболических эффектов кросс-половой гормональной терапии при лечении гендерной дисфории. Энн Клин Биохим. 2016; 53(1), 10-20. дои: 10.1177/0004563215587763
    8. Gooren LJ, Bunck MC. Транссексуалы и соревновательный спорт. Eur J Эндокринол. 2004 г.; 151(4), 425-429. doi: 10.1530/eje.0.1510425
    9. Lapauw B, Taes Y, Simoens S, et al. Состав тела, объемные и площадные параметры костей у транссексуалов из мужчины в женщину. Кость. 2008 г.; 43(6), 1016-21. doi: 10.1016/j.bone.2008.09.001
    10. Linsenmeyer WR, Rahman R. Диета и рекомендации по питанию трансгендерного мужчины FtM: история болезни. J Am Coll Health . 2018; 66(7), 533-536. дои: 10.1080/07448481.2018.1431917
    11. Коннелли П.Дж., Мари Фрил Э., Перри С. и др. Подтверждающая пол гормональная терапия, здоровье сосудов и сердечно-сосудистые заболевания у трансгендерных взрослых. Гипертония. 2019; 74(6), 1266-1274. doi: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.119.13080.
    12. Herschner S, Jansen EC, Gavidia R, et al. Ассоциации между трансгендерной идентичностью, сном, психическим здоровьем и суицидальными наклонностями среди североамериканской когорты студентов колледжей. Естественный научный сон. 2021; 13, 383-398. doi: 10.2147/NSS.S286131
    13. Diemer EW, Grant JD, Munn-Chernoff MA, et al. Гендерная идентичность, сексуальная ориентация и пищевая патология в национальной выборке студентов колледжей. Дж. Здоровье подростков. 2015;57(2):144–149. doi: 10.1016/j.jadohealth.2015.03.003
    14. Асади М., Табари Ф., Хагани С. и др. Влияние обучения, основанного на модели расширения прав и возможностей, на качество жизни трансгендерных людей, проходящих гормональную терапию: рандомизированное клиническое исследование. J Семейная медицина. 9(6), 2794-2800. дои: 10.4103/jfmpc.jfmpc_1201_19

    Инженерные прецизионные наночастицы для доставки лекарств

  • 1.

    Офис пресс-секретаря Белого дома. Национальная инициатива по нанотехнологиям: путь к следующей промышленной революции. Белый дом https://clintonwhitehouse4.archives.gov/WH/New/html/20000121_4.html (2000).

  • 2.

    Kou, L. et al. Направляемая транспортером доставка наночастиц для улучшения проникновения лекарственного средства через клеточные барьеры и воздействия лекарственного средства на селективные типы клеток. Перед. Фармакол. 9 , 1–16 (2018).

    Google Scholar

  • 3.

    Бланко, Э., Шен, Х. и Феррари, М. Принципы дизайна наночастиц для преодоления биологических барьеров на пути доставки лекарств. Нац. Биотехнолог. 33 , 941–951 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 4.

    Митраготри, С.и другие. Исследования доставки лекарств для будущего: расширение нано горизонтов и дальше. Дж. Контроль. Выпуск 246 , 183–184 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 5.

    Wechsler, M.E., Vela Ramirez, J.E. & Peppas, N.A. 110 лет: доставка лекарств с помощью наночастиц для лечения болезни Альцгеймера: преодоление гематоэнцефалического барьера. Индивидуальный инж. хим. Рез. 58 , 15079–15087 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 6. ​​

    Хуа, С., де Матос, М.Б.К., Метселаар, Дж.М. и Сторм, Г. Текущие тенденции и проблемы в клиническом воплощении наномедицинских препаратов в виде наночастиц: пути для трансляционной разработки и коммерциализации. Перед. Фармакол. 9 , 790 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 7.

    Ансельмо, А. К. и Митраготри, С. Наночастицы в клинике: обновление. Биоинж. Перевод Мед. 4 , 1–16 (2019). В этом обзоре всесторонне рассматриваются новейшие системы НП, которые в настоящее время клинически одобрены или проходят клинические испытания .

    Google Scholar

  • 8.

    Вагнер, А. М., Гран, М. П. и Пеппас, Н. А. Разработка нового поколения интеллектуальных биосовместимых носителей для доставки белков и пептидов. Акта Фарм. Грех. B 8 , 147–164 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 9.

    Калвер, Х. Р., Клегг, Дж. Р. и Пеппас, Н. А. Гидрогели, реагирующие на аналиты: интеллектуальные материалы для биодатчиков и доставки лекарств. Согл. хим. Рез. 50 , 170–178 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 10.

    Руан, С. и др. Чувствительные к металлопротеиназе уменьшающиеся в размере наночастицы матрикса для глубокого проникновения в опухоль и высвобождения доксорубицина, вызываемого рН. Биоматериалы 60 , 100–110 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 11.

    Clegg, J.R. et al. Синтетические сети с настраиваемой чувствительностью, биодеградацией и молекулярным распознаванием для приложений точной медицины. Науч. Доп. 5 , eaax7946 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 12.

    Cheng, Q. et al. Наночастицы селективного нацеливания на органы (SORT) для доставки тканеспецифичной мРНК и редактирования генов CRISPR-Cas. Нац. нанотехнологии. 15 , 313–320 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 13.

    Коллинз, Ф. С. и Вармус, Х.Новая инициатива в области точной медицины. Н. англ. Дж. Мед. 372 , 793–795 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 14.

    Fonseca-Santos, B., Gremião, M.P.D. & Chorilli, M. Системы доставки лекарств на основе нанотехнологий для лечения болезни Альцгеймера. Междунар. Дж. Наномед. 10 , 4981–5003 (2015).

    КАС Google Scholar

  • 15.

    Sercombe, L. et al. Достижения и проблемы доставки лекарств с помощью липосом. Перед. Фармакол . 6 , 286 (2015).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 16.

    Фентон, О.С., Олафсон, К.Н., Пиллаи, П.С., Митчелл, М.Дж. и Лангер, Р. Достижения в области биоматериалов для доставки лекарств. Доп. Матер. 30 , 1705328 (2018).

    Google Scholar

  • 17.

    Сарфраз, М. и др. Разработка наноразмерной липосомальной лекарственной формы с двойной нагрузкой с помощью модернизированного метода инъекций этанола и ее доклинические фармакокинетические исследования. Фармацевтика 10 , 1–22 (2018).

    Google Scholar

  • 18.

    Седиги М. и др. Быстрая оптимизация характеристик липосом с использованием комбинированного подхода микрофлюидики и дизайна эксперимента. Делив наркотиков. Перевод Рез. 9 , 404–413 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 19.

    Аляутдин Р., Халин И., Нафиза М.И., Харон М.Х., Кузнецов Д. Наносистемы доставки лекарств и гематоэнцефалический барьер. Междунар. Дж. Наномед. 9 , 795–811 (2014).

    КАС Google Scholar

  • 20.

    Леунг А.К., Там Ю.Ю.К., Чен С., Хафез И.М. и Каллис П.Р. Микрожидкостное смешивание: общий метод инкапсуляции макромолекул в системы липидных наночастиц. J. Phys. хим. B 119 , 8698–8706 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 21.

    Cheng, X. & Lee, R. J. Роль вспомогательных липидов в липидных наночастицах (LNP), предназначенных для доставки олигонуклеотидов. Доп. Наркотик Делив. 99 , 129–137 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 22.

    Кулкарни Дж.A., Witzigmann, D., Leung, J., Tam, YYC и Cullis, P.R. О роли вспомогательных липидов в составах липидных наночастиц siRNA. Наномасштаб 11 , 21733–21739 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 23.

    Berraondo, P., Martini, P.G.V., Avila, M.A. & Fontanellas, A. Терапия РНК-мессенджером при редких генетических метаболических заболеваниях. Гут 68 , 1323–1330 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 24.

    Вхора, И., Лалани, Р., Бхатт, П., Патил, С. и Мисра, А. Липидно-нуклеиновые наночастицы новых ионизируемых липидов для системной доставки гена BMP-9 в костный мозг мезенхимальные стволовые клетки для остеоиндукции. Междунар. Дж. Фарм. 563 , 324–336 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 25.

    Патель С., Райалс Р. К., Веллер К. К., Пеннеси М. Э. и Сахай Г. Липидные наночастицы для доставки матричной РНК в заднюю часть глаза. Дж. Контроль. отн. 303 , 91–100 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 26.

    Brown, S.B., Wang, L., Jungels, R.R. & Sharma, B. Влияние фрагментов, нацеленных на хрящ, на биораспределение наночастиц в здоровых суставах и суставах с остеоартритом. Акта Биоматер. 101 , 469–483 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 27.

    Zhang, C. X. et al. Митохондриально-направленная система доставки циклоспорина А для лечения реперфузионного повреждения миокарда при ишемии крыс. Ж. Нанобиотехнологии. 17 , 1–16 (2019).

    Google Scholar

  • 28.

    Ле, З. и др. Противораковые наночастицы на основе дубильной кислоты с водородными связями для улучшения пероральной химиотерапии. Приложение ACS Матер. Интерфейсы 10 , 42186–42197 (2018 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 29.

    He, C. et al. Кинетика высвобождения siRNA из полимерных наночастиц коррелирует с эффективностью RNAi и терапией воспаления при пероральной доставке. Акта Биоматер. 103 , 213–222 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 30.

    Чжан, Л. и др. Полимерно-белковая сборка с помощью микрожидкости для изготовления гомогенных функциональных наночастиц. Матер. науч. англ. C 111 , 110768 (2020).

    КАС Google Scholar

  • 31.

    Caldorera-Moore, M., Vela Ramirez, J.E. & Peppas, N.A. Транспорт и доставка интерферона-α через эпителиальные плотные соединения с помощью pH-чувствительных наночастиц поли(метакриловой кислоты с привитым этиленгликолем). Дж. Мишень для наркотиков. 27 , 582–589 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 32.

    Knight, F.C. et al. Иммунизация слизистых оболочек pH-чувствительной вакциной на основе наночастиц индуцирует защитные CD8 + резидентных в легких Т-клеток памяти. ACS Nano 13 , 10939–10960 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 33.

    Strand, M.S. et al. Прецизионная доставка RAS-ингибирующей siRNA к раку, вызванному KRAS, с помощью наночастиц на основе пептидов. Oncotarget 10 , 4761–4775 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 34.

    Jose, S. et al. Наночастицы доцетаксел-PLGA, конъюгированные с трансферрином, для нацеливания на опухоль: влияние на клеточный цикл MCF-7. Полимеры 11 , 1905 (2019).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 35.

    Лю, X. и др. Глюкоза и H 2 O 2 полимерные мицеллы с двойным откликом для саморегулируемого высвобождения инсулина. Приложение ACS Био Матер. 3 , 1598–1606 (2020).

    КАС Google Scholar

  • 36.

    Афшарзаде М., Хашеми М., Мохтарзаде А., Абноус К. и Рамезани М. Последние достижения в области систем совместной доставки на основе полимерных наночастиц для лечения рака. Артиф.Клетки Наномед. Биотехнолог. 46 , 1095–1110 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 37.

    Patra, J.K. et al. Наносистемы доставки лекарств: последние разработки и перспективы на будущее. Ж. Нанобиотехнологии. 16 , 71 (2018).

    Google Scholar

  • 38.

    Volpatti, L. R. et al. Наночастицы, реагирующие на глюкозу, для быстрой и продолжительной саморегулируемой доставки инсулина. ACS Nano 14 , 488–497 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 39.

    Ридо Э., Димова Р., Швилле П., Вурм Ф. Р. и Ландфестер К. Липосомы и полимерсомы: сравнительный обзор имитации клеток. Хим. соц. Ред. 47 , 8572–8610 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 40.

    Шае Д.и другие. Эндосомолитические полимерсомы повышают активность циклических динуклеотидных агонистов STING для усиления иммунотерапии рака. Нац. нанотехнологии. 14 , 269–278 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 41.

    Zelmer, C. et al. Специфическое для органелл нацеливание полимерсом в ядро ​​клетки. Проц. Натл акад. науч. США 117 , 2770–2778 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 42.

    Ли, Ю.-В. и другие. Открытое рандомизированное параллельное исследование фазы II для оценки эффективности и безопасности не содержащей кремофора полимерной мицеллярной композиции паклитаксела в качестве препарата первой линии для лечения рака яичников: исследование Корейской группы гинекологической онкологии (KGOG-3021). Рак Res. Обращаться. 50 , 195–203 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 43.

    Xu, L., Zhang, H. & Wu, Y. Дендример продвигается вперед для доставки терапевтических средств в центральную нервную систему. ACS Хим. Неврологи. 5 , 2–13 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 44.

    Mendes, L.P., Pan, J. & Torchilin, V.P. Дендримеры как наноносители для доставки нуклеиновых кислот и лекарств в терапии рака. Молекулы 22 , 1401 (2017).

    Google Scholar

  • 45.

    Каннан Р. М., Нэнси Э., Каннан С. и Томалия Д.A. Новые концепции наномедицины на основе дендримеров: от принципов проектирования до клинических применений. Дж. Междунар. Мед. 276 , 579–617 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 46.

    Menjoge, A.R., Kannan, R.M. & Tomalia, D.A. Лекарственные препараты и конъюгаты изображений на основе дендримера: вопросы проектирования для наномедицинских приложений. Препарат Дисков. Сегодня 15 , 171–185 (2010).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 47.

    Цао, С.-Дж. и другие. Наночастицы: пероральная доставка белковых и пептидных препаратов. AAPS PharmSciTech 20 , 190 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 48.

    Tian, ​​H. et al. Однородные наночастицы ядро-оболочка с покрытием из тиолированной гиалуроновой кислоты для улучшения пероральной доставки инсулина. Доп. Здоровьеc. Матер. 7 , 1–12 (2018).

    Google Scholar

  • 49.

    Valcourt, D.M., Dang, M.N., Scully, M.A. & Day, E.S. Опосредованная наночастицами совместная доставка антител Notch-1 и ABT-737 как действенная стратегия лечения тройного негативного рака молочной железы. ACS Nano 14 , 3378–3388 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 50.

    Ян В., Лян Х., Ма С., Ван Д. и Хуанг Дж. Фототермическая терапия на основе золотых наночастиц: разработка и применение для эффективного лечения рака. Сустейн. Матер. Технол. 22 , e00109 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 51.

    Wang, J., Potocny, A.M., Rosenthal, J. & Day, E.S. Конъюгаты золота с нанооболочкой и линейным тетрапирролом для двойной фотодинамической и фототермической терапии, активируемой в ближней инфракрасной области. САУ Омега 5 , 926–940 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 52.

    Бобо, Д., Робинсон, К. Дж., Ислам, Дж., Турехт, К. Дж. и Корри, С. Р. Лекарства на основе наночастиц: обзор одобренных FDA материалов и клинических испытаний на сегодняшний день. Фарм. Рез. 33 , 2373–2387 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 53.

    Ариас, Л. С. и др. Наночастицы оксида железа для биомедицинских применений: перспективы синтеза, лекарств, антимикробной активности и токсичности. Антибиотики 7 , 46 (2018).

    Центральный пабмед Google Scholar

  • 54.

    Хуанг, К.-В. и другие. Высокоэффективные и опухолеселективные наночастицы для двунаправленной иммуногенной терапии рака. Науч. Доп. 6 , eaax5032 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 55.

    Xu, C., Nam, J., Hong, H., Xu, Y. & Moon, J.J. Фотодинамическая терапия под контролем позитронно-эмиссионной томографии с биоразлагаемыми мезопористыми наночастицами кремнезема для персонализированной иммунотерапии рака. ACS Nano 13 , 12148–12161 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 56.

    Вагнер, А. М., Найп, Дж. М., Орив, Г. и Пеппас, Н. А. Квантовые точки в биомедицинских приложениях. Акта Биоматер. 94 , 44–63 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 57.

    Zhang, Y., Meng, S., Ding, J., Peng, Q. & Yu, Y. Координированные переходным металлом графитовые точки нитрида углерода в качестве чувствительного и удобного флуоресцентного зонда для β-амилоидного пептида обнаружение. Аналитик 144 , 504–511 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 58.

    Маншиан, Б. Б., Хименес, Дж., Химмельрайх, У. и Соенен, С. Дж. Персонализированная медицина и последующее терапевтическое воздействие посредством использования токсичности квантовых точек. Биоматериалы 127 , 1–12 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 59.

    Агуадо, Б. А., Грим, Дж. К., Росалес, А.М., Уотсон-Каппс, Дж. Дж. и Ансет, К. С. Разработка прецизионных биоматериалов для персонализированной медицины. Науч. Перевод Мед. 10 , 8645 (2018).

    Google Scholar

  • 60.

    van der Meel, R. et al. Умная наномедицина рака. Нац. нанотехнологии. 14 , 1007–1017 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 61.

    Scheetz, L. et al. Разработка иммунотерапии рака, специфичной для пациента. Нац. Биомед. англ. 3 , 768–782 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 62.

    Папи, М. и др. Преобразование персонализированной биомолекулярной короны наночешуек оксида графена в высокопроизводительный диагностический тест для раннего выявления рака. Наномасштаб 11 , 15339–15346 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 63.

    Shaban, M., Hasanzadeh, M. & Solhi, E. An Fe 3 O 4 /PEDOT:PSS нанокомпозит в качестве усовершенствованного электропроводящего материала для биосенсорного определения простатического специфического антигена в необработанных образцы плазмы человека. Анал. Методы 11 , 5661–5672 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 64.

    Чжан Т. и др. Синергетический эффект нанолистов Au-COF и искусственных ромбических додекаэдров пероксидазы Au@ZIF-8(NiPd) для усиления сигнала для обнаружения биомаркеров. Наномасштаб 11 , 20221–20227 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 65.

    Каур, А., Шимони, О. и Уоллах, М. Новый скрининговый тест на целиакию с использованием наночастиц золота, функционализированных пептидами. Мир Дж.Гастроэнтерол. 24 , 5379–5390 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 66.

    Tan, T. et al. Фототермия, опосредованная биоинспирированными липопротеинами, ремоделирует строму опухоли, чтобы улучшить доступность вторых наночастиц раковых клеток. Нац. коммун. 10 , 3322 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 67.

    Wilson, R.A. et al. МикроРНК-регуляция эндотелиального TREX1 перепрограммирует микроокружение опухоли. Нац. коммун. 7 , 13597 (2016).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 68.

    Papa, A.L. et al. Агрегаты наночастиц, чувствительные к ультразвуку, для адресной доставки лекарств. Биоматериалы 139 , 187–194 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 69.

    Чен, К. и др. Фототермическая терапия способствует инфильтрации опухоли и противоопухолевой активности CAR Т-клеток. Доп. Матер. 31 , e1

    2 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 70.

    Patel, R.B. et al. Разработка противораковой вакцины in situ с помощью комбинированного облучения и наночастиц, покрытых бактериальной мембраной. Доп. Матер. 31 , e16 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 71.

    Вильгельм, С. и др. Анализ доставки наночастиц к опухолям. Нац. Преподобный Матер. 1 , 16014 (2016). В этом всестороннем анализе литературы по введению NP за период с 2005 по 2015 гг. было обнаружено, что в солидную опухоль доставляется в среднем только 0,7% введенной дозы NP, а также исследованы возможные причины этой неэффективности .

    КАС Google Scholar

  • 72.

    Прапорщик, Л.М., Коне Р. и Хейнс Дж. Пероральная доставка лекарств с помощью полимерных наночастиц: слизистые барьеры желудочно-кишечного тракта. Доп. Наркотик Делив. 64 , 557–570 (2012). В этом обзоре тщательно исследуются барьеры желудочно-кишечного тракта и более глубоко исследуется их влияние на перорально вводимые НЧ .

    КАС пабмед Google Scholar

  • 73.

    Nag, O.K. & Delehanty, JB. Активное клеточное и субклеточное нацеливание наночастиц для доставки лекарств. Фармацевтика 11 , 543 (2019).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 74.

    Олива, Н. и др. Регуляция характеристик материала дендример/декстран измененным микроокружением ткани при воспалении и неоплазии. Науч. Перевод Мед. 7 , 272ra11 (2015). В этом исследовании изучается влияние заболевания на микроокружение ткани и обнаруживается, что в состояниях канцерогенеза и воспаления взаимодействия между тканью и материалом изменяются, даже когда используются проверенные биоматериалы .

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 75.

    Гер, П. и Целльнер, Р. Биологическая реакция на наноразмерные частицы: молекулярные и клеточные аспекты и методологические подходы (Springer, 2019).

  • 76.

    Hoshyar, N., Gray, S., Han, H. & Bao, G. Влияние размера наночастиц на фармакокинетику in vivo и клеточное взаимодействие. Наномедицина 11 , 673–692 (2016). В этом обзоре представлено влияние размера NP на клеточное поглощение, биораспределение и фармакокинетику, а также представлены модели для интерпретации этого результата .

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 77.

    Wang, X. Y., Ishida, T. & Kiwada, H. Анти-PEG IgM, вырабатываемые инъекцией липосом, участвуют в усиленном клиренсе крови последующей дозы пегилированных липосом. Дж.Контроль. отн. 119 , 236–244 (2007).

    КАС Google Scholar

  • 78.

    McSweeney, M.D. et al. Минимальная физиологически обоснованная фармакокинетическая модель, которая предсказывает опосредованный анти-ПЭГ IgG клиренс пегилированных препаратов у человека и мыши. Дж. Контроль. отн. 284 , 171–178 (2018).

    КАС Google Scholar

  • 79.

    Ян, К.и другие. Анализ ранее существовавших антител IgG и IgM против полиэтиленгликоля (ПЭГ) в общей популяции. Анал. хим. 88 , 11804–11812 (2016).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 80.

    Chen, B.M. et al. Измерение ранее существовавших антител IgG и IgM к полиэтиленгликолю у здоровых людей. Анал. хим. 88 , 10661–10666 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 81.

    Hu, C.M.J. et al. Биоинтерфейс наночастиц путем маскировки мембраны тромбоцитов. Природа 526 , 118–121 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 82.

    Wibroe, P.P. et al. Обход побочных реакций на инъекции наночастиц за счет модификации формы и прикрепления к эритроцитам. Нац. нанотехнологии. 12 , 589–594 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 83.

    Anselmo, A.C. et al. Тромбоцитоподобные наночастицы: имитируют форму, гибкость и биологию поверхности тромбоцитов для устранения повреждений сосудов. ACS Nano 8 , 11243–11253 (2014).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 84.

    Паланикумар, Л. и др. Высокостабильные полимерные наночастицы, реагирующие на рН, для адресной доставки противоопухолевых терапевтических средств. Комм. биол. 3 , 95 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 85.

    Tanaka, R. et al. Пушистые наночастицы: синтез и характеристика сшитых наночастиц, опосредованных наноэмульсией, и их устойчивая стабильность in vivo. Полим.хим. 11 , 4408–4416 (2020).

    КАС Google Scholar

  • 86.

    Джарвис, М. и др. Отсоединение лигандов от поверхности наночастиц при контакте с потоком и эндотелиальными клетками: оценка с использованием микрожидкостных устройств. Биоинж. Перевод Мед. 3 , 148–155 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 87.

    Hosta-Rigau, L. & Städler, B. Напряжение сдвига и его влияние на взаимодействие клеток миобластов с наноразмерными носителями для доставки лекарств. Мол. фарм. 10 , 2707–2712 (2013).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 88.

    Хор С.Ю. и др. Выяснение влияния размера, химического состава поверхности и динамического потока на клеточную ассоциацию наночастиц, полученных в результате самосборки, вызванной полимеризацией. Малый 14 , 1–13 (2018).

    Google Scholar

  • 89.

    Cooley, M. et al. Влияние размера и формы частиц на их окантовку и адгезию к стенке: последствия для дизайна средств доставки лекарств в масштабе от нано до микро. Nanoscale 10 , 15350–15364 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 90.

    Питер, С. и Махмуди, М. Системы доставки лекарств (World Scientific, 2017).

  • 91.

    Da Silva-Candal, A. et al. Эффект формы при активном нацеливании наночастиц на воспаленный эндотелий головного мозга в статических и потоковых условиях. Дж. Контроль. отн. 309 , 94–105 (2019). В этой работе изучается влияние формы на эффективность нацеливания NP в кровотоке, при этом стержнеобразные частицы демонстрируют лучшее накопление, чем сферические .

    Google Scholar

  • 92.

    Uhl, C.G., Gao, Y., Zhou, S. & Liu, Y. Влияние формы на транспорт полимерных наночастиц в кровеносном сосуде. RSC Adv. 8 , 8089–8100 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 93.

    Малота З., Гловацки Дж., Садовски В. и Костур М. Численный анализ влияния скорости кровотока, частоты сердечных сокращений, геометрии сосудов и степени стеноза на показатели коронарной гемодинамики. BMC Cardiovasc. Беспорядок. 18 , 1–16 (2018).

    Google Scholar

  • 94.

    Chacón-Lozsán, F., et al. Гемодинамическая коррекция высокого кровяного давления. Тер. Доп. Кардиол. 1 , 73–79 (2017).

    Google Scholar

  • 95.

    Tenzer, S. et al. Быстрое образование белковой короны плазмы критически влияет на патофизиологию наночастиц. Нац. нанотехнологии. 8 , 772–781 (2013).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 96.

    Cox, A. et al. Эволюция белковой короны наночастиц через гематоэнцефалический барьер. ACS Nano 12 , 7292–7300 (2018 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 97.

    Schwartz, S. Неудовлетворенные потребности в разработке наночастиц для точной медицины. Наномедицина 12 , 271–274 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 98.

    фон Рёмелинг, К., Цзян, В., Чан, С.К., Вайсман, И.Л. и Ким, Б.Ю.С. Преодоление барьеров на пути к прецизионной наномедицине рака. Тенденции биотехнологии. 35 , 159–171 (2017).

    Google Scholar

  • 99.

    Чен Д., Параят Н., Ганеш С., Ван В. и Амиджи М. Роль белковой короны, обогащенной аполипопротеином и витронектином, на липидных наночастицах для адресной доставки и трансфекции олигонуклеотидов в естественных условиях в моделях опухолей мышей. Наномасштаб 11 , 18806–18824 (2019). В этом исследовании анализируется влияние состава NP на белковую корону и результирующую специфичную для опухоли доставку, показывая, что содержание ПЭГ может влиять на исход, и подчеркивая способность особенностей дизайна NP определять биораспределение .

    КАС пабмед Google Scholar

  • 100.

    Fornaguera, C. et al. На перенацеливание in vivo наночастиц поли(β-аминоэфира) (OM-PBAE) влияет белковая корона. Доп. Здоровьеc. Матер. 8 , 1–11 (2019).

    Google Scholar

  • 101.

    Bertrand, N. et al. Механизм понимания образования белковой короны in vivo на полимерных наночастицах и влияние на фармакокинетику. Нац. коммун. 8 , 777 (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 102.

    Yeo, E.L.L., Cheah, JUJ, Thong, PSP, Soo, K.C. & Kah, J.C.Y. Золотые наностержни, покрытые короной белка аполипопротеина E, для доставки лекарств. Приложение ACS Нано Матер. 2 , 6220–6229 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 103.

    Дал Магро, Р. и др. ApoE-модифицированные твердые липидные наночастицы: осуществимая стратегия преодоления гематоэнцефалического барьера. Дж. Контроль. отн. 249 , 103–110 (2017).

    КАС Google Scholar

  • 104.

    Dong, Y. et al. Липопептидные наночастицы для эффективной и селективной доставки миРНК грызунам и приматам. Проц. Натл акад. науч. США 111 , 3955–3960 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 105.

    Ки, Дж. и др. Мягкие дискоидальные полимерные наноконструкции противостоят поглощению макрофагами и усиливают нацеливание на сосуды в опухолях. ACS Nano 9 , 11628–11641 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 106.

    Hui, Y. et al. Роль механических свойств наночастиц в доставке лекарств от рака. ACS Nano 13 , 7410–7424 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 107.

    Ниццеро, С., Зимис, А. и Феррари, М. Транспортные барьеры и онкофизика в лечении рака. Trends Cancer 4 , 277–280 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 108.

    Кумар, С., Ансельмо, А.С., Банерджи, А., Закревски, М. и Митраготри, С. Зависимый от формы и размера иммунный ответ на наночастицы, несущие антиген. Дж. Контроль. отн. 220 , 141–148 (2015).

    КАС Google Scholar

  • 109.

    Xie X., Liao J., Shao X., Li Q. & Lin Y. Влияние формы на поглощение клетками наночастиц золота в форме звезд, стержней и треугольников . Науч. 7 , 1–9 (2017).

    Google Scholar

  • 110.

    Ван, В., Гаус, К., Тилли, Р. Д. и Гудинг, Дж. Дж. Влияние формы наночастиц на клеточную интернализацию и транспорт: что говорят нам различные методы анализа? Матер.Гориз. 6 , 1538–1547 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 111.

    Гарапати, А. и Чемпион, Дж. А. Форма частиц, иммобилизованных лигандом, доминирует и усиливает цитокиновый ответ макрофагов на лиганды. PLoS One 14 , 12–14 (2019).

    Google Scholar

  • 112.

    Ganson, N.J. et al. Существовавшие ранее антитела против полиэтиленгликоля связаны с аллергическими реакциями при первом контакте с пегнивакогином, пегилированным РНК-аптамером. J. Аллергическая клиника. Иммунол. 137 , 1610–1613.e7 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 113.

    Povsic, T.J. et al. Ранее существовавшие анти-ПЭГ-антитела связаны с тяжелыми немедленными аллергическими реакциями на пегнивакогин, пегилированный аптамер. J. Аллергическая клиника. Иммунол. 138 , 1712–1715 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 114.

    Zhong, Q., Merkel, O.M., Reineke, JJ & da Rocha, S.R.P. Влияние пути введения и пегилирования поли(амидоаминовых) дендримеров на их системное и легочное клеточное биораспределение. Мол. фарм. 13 , 1866–1878 (2016).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 115.

    Battaglia, L. et al. Липидные наночастицы для интраназального введения: применение для доставки из носа в мозг. Экспертное заключение. Наркотик Делив. 15 , 369–378 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 116.

    Dölen, Y. et al. Путь введения нановакцины имеет решающее значение для получения подходящей помощи клеток iNKt для надежного противоопухолевого Т- и В-клеточного ответа. Онкоиммунология 9 , 1738813 (2020).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 117.

    МакЛеннан, Д. Н., Портер, С. Дж. Х. и Чарман, С. А. Подкожная доставка лекарств и роль лимфатических сосудов. Препарат Дисков. Сегодня техн. 2 , 89–96 (2005).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 118.

    Dong, W. et al. Сравнительное исследование мукоадгезивных и проникающих в слизь наночастиц на основе фосфолипидного комплекса для преодоления слизистого барьера при ингаляционной доставке байкалеина. Акта Фарм.Грех. B 10 , 1576–1585 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 119.

    Конус Р.А. Барьерные свойства слизи. Доп. Наркотик Делив. 61 , 75–85 (2009).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 120.

    Wu, L. et al. Количественное сравнение трех широко используемых методов введения в легкие in vivo с использованием вдыхаемых наночастиц с радиоактивной меткой. евро. Дж. Фарм. Биофарм. 152 , 108–115 (2020). В этом исследовании исследуются три широко используемых пути введения в легкие на моделях мышей, показывая, что путь введения влияет на биораспределение полимерных NP, и выдвигая на первый план другие способы гетерогенной доставки NP .

    КАС пабмед Google Scholar

  • 121.

    Pant, K. et al. Активное нацеливание на дендритные полиглицерины для диагностической визуализации рака. Малый 16 , 13. (2019).

    Google Scholar

  • 122.

    Yi, Y. et al. Связанные с глюкозой субмерные полиионные комплексы длиной менее 50 нм, собранные из золотых наночастиц для адресной доставки миРНК к клеткам, подобным стволовым клеткам рака молочной железы, сверхэкспрессирующим переносчик глюкозы 1. Дж. Контроль. Выпуск 295 , 268–277 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 123.

    Ян, Ю. и др. Нанопрепараты двойного действия на основе прямого конъюгата двух чисто природных лигандов для мощной химиотерапии опухолей яичников. Приложение ACS Матер. Интерфейсы 11 , 46548–46557 (2019 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 124.

    Ахмад, А., Хан, Ф., Мишра, Р. К. и Хан, Р. Прецизионная нанотерапия рака: развивающаяся роль многофункциональных наночастиц для активного нацеливания на рак. J. Med. хим. 62 , 10475–10496 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 125.

    Du, Y., Liu, X., Liang, Q., Liang, XJ & Tian, ​​J. Оптимизация и дизайн магнитных ферритовых наночастиц с равномерным распределением опухоли для высокочувствительных характеристик MRI/MPI и улучшенных магнитных гипертермическая терапия. Нано Летт. 19 , 3618–3626 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 126.

    Хонг, С. Т. и др. Улучшение противоракового эффекта афатиниба и микроРНК с помощью липидных полимерных наночастиц, конъюгированных с двойными рН-чувствительными и нацеливающими пептидами. Ж. Нанобиотехнологии. 17 , 89 (2019).

    Google Scholar

  • 127.

    Saraiva, C. et al. Доставка лекарств в мозг с помощью наночастиц: преодоление гематоэнцефалического барьера для лечения нейродегенеративных заболеваний. Дж. Контроль. Выпуск 235 , 34–47 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 128.

    Zhou, Q. et al. Активируемый ферментом конъюгат полимер-лекарственное средство увеличивает проникновение в опухоль и эффективность лечения. Нац. нанотехнологии. 14 , 799–809 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 129.

    Sindhwani, S. et al. Попадание наночастиц в солидные опухоли. Нац. Матер. 19 , 566–575 (2020). Это новаторское исследование показывает, что межэндотелиальные промежутки не ответственны за проникновение NP в солидные опухоли, как считалось ранее, но вместо этого обнаруживается, что до 97% NPs активно проникают в опухоли через эндотелиальные клетки .

    КАС пабмед Google Scholar

  • 130.

    Johnsen, K.B. et al. Модулирование плотности антител изменяет поглощение и транспорт через гематоэнцефалический барьер как наночастиц золота, нацеленных на рецептор трансферрина, так и липосомального груза. Дж. Контроль. Выпуск 295 , 237–249 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 131.

    Соуза Ф., Даливал Х.К., Гаттакцека Ф., Сарменто Б. и Амиджи М.М. Усиление антиангиогенного действия бевацизумаба при лечении глиобластомы при интраназальном введении в виде полимерных наночастиц. Дж. Контроль. Выпуск 309 , 37–47 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 132.

    Musumeci, T., Bonaccorso, A. & Puglisi, G. Болезнь эпилепсии и доставка полимерных наночастиц из носа в мозг: обзор. Фармацевтика 11 , 118 (2019).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 133.

    Bruinsmann, F.A. et al. Назальная доставка противоопухолевых препаратов для лечения глиобластомы: доклинические и клинические испытания. Молекулы 24 , 4312 (2019).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 134.

    Lamson, N.G., Berger, A., Fein, K.C. & Whitehead, K.A. Анионные наночастицы обеспечивают пероральную доставку белков за счет повышения проницаемости кишечника. Нац. Биомед. англ. 4 , 84–96 (2020). В этой работе исследуются неорганические НЧ для пероральной доставки белков и обнаруживаются свойства, необходимые для усиления проникновения в кишечник за счет открытия плотных соединений, которые включают отрицательный заряд и небольшой размер .

    КАС пабмед Google Scholar

  • 135.

    Банерджи А., Ци Дж., Гогой Р., Вонг Дж. и Митраготри С. Роль размера, формы и химии поверхности наночастиц в пероральной доставке лекарств. Дж. Контроль. Выпуск 238 , 176–185 (2016).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 136.

    Йонг, Дж. М., Мантай, Дж., Ченг, Ю.и Влласалиу, Д. Доставка наночастиц через эпителий кишечника через транспортный путь трансферрина. Фармацевтика 11 , 298 (2019).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 137.

    Zhang, S. et al. Наночастицы БСА, модифицированные N -ацетилцистеином, для улучшения стабильности и мукоадгезии куркумина в желудочно-кишечном тракте. Дж. Агрик. Пищевая хим. 67 , 9371–9381 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 138.

    Zheng, N. et al. Наностержни из мезопористого кремнезема для улучшения всасывания лекарств при пероральном приеме. Артиф. Клетки Наномед. Биотехнолог. 46 , 1132–1140 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 139.

    Li, D. et al. Влияние геометрии частиц на желудочно-кишечный транзит и абсорбцию после перорального введения. Приложение ACS Матер. Интерфейсы 9 , 42492–42502 (2017 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 140.

    Zhuang, J. et al. Влияние формы наночастиц на двусторонний экзоцитоз из клеток Caco-2. Подбородок. хим. лат. 29 , 1815–1818 (2018).

    КАС Google Scholar

  • 141.

    Берарди, А. и Балделли Бомбелли, Ф.Оральная доставка наночастиц — не забываем про белковую корону. Экспертное заключение. Наркотик Делив. 16 , 563–566 (2019).

    ПабМед Google Scholar

  • 142.

    Дуран-Лобато, М., Ниу, З. и Алонсо, М. Дж. Пероральное введение биологических препаратов для прецизионной медицины. Доп. Матер. 32 , e15 (2019).

    ПабМед Google Scholar

  • 143.

    Kruse, C.R. et al. Влияние pH на жизнеспособность клеток, миграцию клеток, пролиферацию клеток, закрытие ран и реэпителизацию ран: исследование in vitro и in vivo. Регенерация раны. 25 , 260–269 (2017).

    ПабМед Google Scholar

  • 144.

    Hathaway, H. et al. Термическое высвобождение бактериофага эндолизина CHAPK и бактериоцина лизостафина для борьбы с устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA). Дж. Контроль. Выпуск 245 , 108–115 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 145.

    Holme, M. N. et al. Лентикулярные везикулы, чувствительные к сдвиговым нагрузкам, для адресной доставки лекарств. Нац. нанотехнологии. 7 , 536–543 (2012).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 146.

    Sykes, E.A. et al.Адаптация дизайна наночастиц для борьбы с раком на основе патофизиологии опухоли. Проц. Натл акад. науч. США 113 , E1142–E1151 (2016 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 147.

    Zan, Y., Dai, Z., Liang, L., Deng, Y. & Dong, L. Совместная доставка плантамаджозида и сорафениба с помощью многофункциональной наночастицы для борьбы с лекарственной устойчивостью гепатоцеллюлярной карциному путем перепрограммирования гипоксического микроокружения опухоли. Делив наркотиков. 26 , 1080–1091 (2019). Эта работа фокусируется на системе NP, которая может перепрограммировать микроокружение опухоли, работая над устранением лекарственной устойчивости опухолевых клеток и повышением чувствительности пациентов к существующим препаратам первой линии .

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 148.

    Dai, Q. et al. Количественная оценка доставки наночастиц, покрытых лигандом, к раковым клеткам в солидных опухолях. ACS Nano 12 , 8423–8435 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 149.

    Witten, J. & Ribbeck, K. Частица в паутине: транспорт через биологические гидрогели. Наномасштаб 9 , 8080–8095 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 150.

    Нагель, Г., Соуза-Эрвес, А., Wedepohl, S. & Calderón, M. Многостадийные наногели, чувствительные к металлопротеиназе Matrix, способствуют транспорту лекарств в трехмерной модели опухоли. Тераностика 10 , 91–108 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 151.

    Прайс, Л. С. Л., Стерн, С. Т., Дил, А. М., Кабанов, А. В. и Замбони, В. К. Повторный анализ доставки наночастиц в опухоль с использованием классических фармакокинетических показателей. Науч.Доп. 6 , eaay9249 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 152.

    Lee, H. et al. 64 Cu-MM-302 Позитронно-эмиссионная томография позволяет количественно оценить изменчивость повышенной проницаемости и удерживания наночастиц в зависимости от ответа на лечение у пациентов с метастатическим раком молочной железы. клин. Рак рез. 23 , 4190–4202 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 153.

    Дин, Дж. и др. Разработаны наномедицины с улучшенным проникновением в опухоль. Nano Сегодня 29 , 100800 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 154.

    Wadajkar, A.S. et al. Сниженная неспецифическая адгезия, наночастицы, нацеленные на рецепторы (DART), демонстрируют улучшенную дисперсию, клеточное поглощение и удержание в опухоли при инвазивных глиомах. Дж. Контроль. Выпуск 267 , 144–153 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 155.

    Нэнси, Э.А. и др. Плотное покрытие из полиэтиленгликоля улучшает проникновение крупных полимерных наночастиц в ткани головного мозга. Науч. Перевод Мед. 4 , 149ra119 (2012).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 156.

    Stephen, Z.R. et al. МРТ-оценка с временным разрешением усиленной конвекцией доставки целевых и нецелевых наночастиц в мышиной модели глиобластомы человека. Рак Res. 79 , 4776–4786 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 157.

    Fahy, J. V. & Dickey, B. F. Функция и дисфункция слизи дыхательных путей. Н. англ. Дж. Мед. 363 , 2233–2247 (2010).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 158.

    Ливраги-Бутрико, А. и др. Вклад концентрации слизи и секретируемых муцинов Muc5ac и Muc5b в патогенез мукообструктивного заболевания легких. Иммунол слизистых оболочек. 10 , 395–407 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 159.

    Ho, L.W.C., Liu, Y., Han, R., Bai, Q. & Choi, C.H.J. Нано-клеточные взаимодействия некатионных бионаноматериалов. Согл. хим. Рез. 52 , 1519–1530 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 160.

    Behzadi, S. et al.Клеточное поглощение наночастиц: путешествие внутрь клетки. Хим. соц. 46 , 4218–4244 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 161.

    Trimble, W. S. & Grinstein, S. Барьеры для свободной диффузии белков и липидов в плазматической мембране. J. Cell Biol. 208 , 259–271 (2015).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 162.

    Foroozandeh, P. & Aziz, A.A. Понимание клеточного поглощения и внутриклеточного перемещения наночастиц. Наноразмерный рез. лат. 13 , 339 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 163.

    Zhang, L. et al. Влияние формы наночастиц на проникновение опухоли в монослои по сравнению со сфероидами. Мол. фарм. 16 , 2902–2911 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 164.

    Lunnoo, T., Assawakhajornsak, J. & Puangmali, T. Изучение in silico поглощения наночастиц золота клеткой млекопитающего: взаимодействие размера, формы, поверхностного заряда и агрегации. J. Phys. хим. C. 123 , 3801–3810 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 165.

    Zhang, L. et al. Химио-лучевая терапия опухолей палочковидными и сферическими золотыми нанозондами: форма и активное нацеливание имеют значение. Тераностика 9 , 1893–1908 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 166.

    Dzuricky, M., Xiong, S., Weber, P. & Chilkoti, A. Авидность и поглощение клетками полипептидных мицелл, нацеленных на интегрин, сильно зависят от формы. Нано Летт. 19 , 6124–6132 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 167.

    Шан, Л., Ниенхаус, К. и Ниенхаус, Г.U. Сконструированные наночастицы, взаимодействующие с клетками: размер имеет значение. Ж. Нанобиотехнологии. 12 , 5 (2014).

    Google Scholar

  • 168.

    Чжан, Л., Чен, Х., Се, Дж., Бектон, М. и Ван, X. Взаимодействие жесткости наночастиц и их способности перемещаться через клеточную мембрану. J. Phys. хим. B 123 , 8923–8930 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 169.

    Hocking, K.M. et al. Модуляция сигнальных путей с помощью нанотехнологий влияет на физиологические реакции в интактной сосудистой ткани. Ткань Eng. Часть A 25 , 416–426 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 170.

    Shahin, M., Safaei-Nikouei, N. & Lavasanifar, A. Полимерные мицеллы для pH-зависимой доставки цисплатина. J. Drug Target 22 , 629–637 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 171.

    Chen, L. Q. et al. Нанотоксичность наночастиц серебра по отношению к эритроцитам: адсорбция в зависимости от размера, поглощение и гемолитическая активность. Хим. Рез. Токсикол. 28 , 501–509 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 172.

    Юэ Дж., Фелисиано Т.Дж., Ли В., Ли А. и Одом Т.В.Влияние размера и формы наночастиц золота на клеточное поглощение и внутриклеточное распределение наноконструкций миРНК. Биоконъюг. хим. 28 , 1791–1800 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 173.

    Chen, G. et al. Биоразлагаемая нанокапсула доставляет рибонуклеопротеиновый комплекс Cas9 для редактирования генома in vivo. Нац. нанотехнологии. 14 , 974–980 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 174.

    Miao, L. et al. Доставка мРНК-вакцин с гетероциклическими липидами повышает противоопухолевую эффективность за счет STING-опосредованной активации иммунных клеток. Нац. Биотехнолог. 37 , 1174–1185 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 175.

    Maugeri, M. et al. Связь между эндосомальным побегом LNP-мРНК и загрузкой в ​​EV для транспорта в другие клетки. Нац. коммун. 10 , 4333 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 176.

    Almeida, A. P. B. et al. Мукопепроницаемые липоплексы, модифицированные ПЭГ и гиалуроновой кислотой, для направленной на CD44 локальной доставки миРНК в легкие. Дж. Биоматер. заявл. 34 , 617–630 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 177.

    Whitehead, K.A. et al. Разлагаемые липидные наночастицы с предсказуемой активностью доставки миРНК in vivo. Нац. коммун. 5 , 4277 (2014).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 178.

    Oberli, M.A. et al. Липидные наночастицы способствовали доставке мРНК для мощной иммунотерапии рака. Нано Летт. 17 , 1326–1335 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 179.

    Kaczmarek, J.C. et al. Оптимизация разлагаемых полимерно-липидных наночастиц для мощной системной доставки мРНК в эндотелий легких и иммунные клетки. Нано Летт. 18 , 6449–6454 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 180.

    Wei, L., Zhao, Y., Hu, X. & Tang, L. Окислительно-восстановительный поликонденсатный неоэпитоп для улучшенной персонализированной противораковой вакцины. АКЦ Цент.науч. 6 , 404–412 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 181.

    Gao, Y. et al. Полиплекс с двойной реакцией на pH/окислительно-восстановительный потенциал с эффективным эндосомальным ускользанием для совместной доставки миРНК и доксорубицина против устойчивых к лекарствам раковых клеток. Приложение ACS Матер. Интерфейсы 11 , 16296–16310 (2019 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 182.

    Юань, П. и др. Ориентация на митохондрии, внутриклеточная доставка нативных белков с использованием биоразлагаемых наночастиц кремнезема. Анжю. хим. 131 , 7739–7743 (2019).

    Google Scholar

  • 183.

    Ямада Ю., Фукуда Ю., Сасаки Д., Маруяма М. и Харашима Х. Разработка наночастицы, которая высвобождает нуклеиновые кислоты в ответ на митохондриальную среду. Митохондрия 52 , 67–74 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 184.

    Foroozandeh, P., Aziz, A.A. & Mahmoudi, M. Влияние возраста клеток на поглощение и токсичность наночастиц: упускаемый из виду фактор нанобиоинтерфейса. Приложение ACS Матер. Интерфейсы 11 , 39672–39687 (2019 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 185.

    Серпушан В. и др. Влияние клеточного пола на поглощение наночастиц: упускаемый из виду фактор нанобиоинтерфейса. ACS Nano 12 , 2253–2266 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 186.

    Dong, Y. et al. Направленное блокирование лизосомальной деградации miR328 с помощью щелочных экзосом повышает чувствительность клеток хронического лейкоза к иматинибу. Заяв. микробиол. Биотехнолог. 103 , 9569–9582 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 187.

    Ян, X. и др. Доставка препаратов платины (II) с объемными лигандами в транс-геометрии для преодоления лекарственной устойчивости к цисплатину. Матер. науч. англ. C. 96 , 96–104 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 188.

    Мураками М. и др. Улучшение активности и эффективности лекарств за счет субклеточного нацеливания, опосредованного наноносителем. Науч. Перевод Мед. 3 , 64ra2 (2011).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 189.

    Американское онкологическое общество. Факты и цифры о раке, 2019 г. (ACS, 2019).

  • 190.

    Долби, М., Кри, И. А., Чаллонер, Б. Р., Гош, С. и Терстон, Д. Э. Подход точной медицины к терапии рака: часть 1 — солидные опухоли. Фарм. J. https://doi.org/10.1211/PJ.2019.20207119 (2019).

    Артикул Google Scholar

  • 191.

    Hauschild, A. et al. Отдаленные результаты у пациентов с метастатической меланомой с мутацией BRAF V600, получающих монотерапию дабрафенибом: анализ клинических испытаний фазы 2 и 3. евро. Дж. Рак 125 , 114–120 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 192.

    Chapman, P.B. et al. Улучшение выживаемости при применении вемурафениба при меланоме с мутацией BRAF V600E. Н. англ. Дж. Мед. 364 , 2507–2516 (2011).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 193.

    Оу, В. и др. Гибридные наночастицы, нацеленные на регуляторные Т-клетки, в сочетании с блокировкой иммунных контрольных точек для иммунотерапии рака. Дж. Контроль. отн. 281 , 84–96 (2018).

    КАС Google Scholar

  • 194.

    Lyon, R. P. et al. Самогидролизующиеся малеимиды улучшают стабильность и фармакологические свойства конъюгатов антитело-лекарственное средство. Нац. Биотехнолог. 32 , 1059–1062 (2014).

    КАС Google Scholar

  • 195.

    Рома-Родригес, К., Мендес, Р., Баптиста, П.В. и Фернандес, А.Р. Ориентация на микроокружение опухоли для лечения рака. Междунар. Дж. Мол. науч. 20 , 840 (2019).

    КАС ПабМед Центральный Google Scholar

  • 196.

    Rao, L. et al. Наночастицы, покрытые мембраной раковых клеток, для персонализированной терапии в моделях ксенотрансплантатов, полученных от пациентов. Доп. Функц. Матер. 29 , 1

    1 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 197.

    He, Z., Zhang, Y. & Feng, N. Наноразмерные активные адресные системы доставки лекарств с покрытием из клеточных мембран, направляющиеся к опухолевым клеткам: обзор. Матер. науч. англ. С. 106 , 110298 (2020).

    КАС Google Scholar

  • 198.

    Wang, Y., Luan, Z., Zhao, C., Bai, C. & Yang, K. Целевая доставка селективного ингибитора CSF-1R к макрофагам, ассоциированным с опухолью, через гибридную мембрану эритроцитов и раковых клеток, замаскированную рН-чувствительные сополимерные мицеллы для иммунотерапии рака. евро. Дж. Фарм. науч. 142 , 105136 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 199.

    Li, R., He, Y., Zhang, S., Qin, J. & Wang, J. Наночастицы на основе клеточных мембран: новая биомиметическая платформа для диагностики и лечения опухолей. Акта Фарм. Грех. B 8 , 14–22 (2018).

    ПабМед Google Scholar

  • 200.

    Карлссон, Дж. и др. Разработаны наночастицы для системной доставки миРНК к злокачественным опухолям головного мозга. Наномасштаб 11 , 20045–20057 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 201.

    Рамчандани, Д. и др. Доставка наночастиц миметика миР-708 нарушает метастазирование рака молочной железы. Мол. Рак Тер. 18 , 579–591 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 202.

    Zhang, Y.R. et al. Стратегии улучшения проникновения нанолекарств в опухоль за счет дизайна наночастиц. Wiley Interdiscip. Преподобный Наномед. Нанобиотехнология. 11 , 1–12 (2019).

    Google Scholar

  • 203.

    Xu, C. et al. Биоразлагаемые нанотераностики с гипертермийно-индуцированной пузырьковой способностью для химио-фототермальной терапии под ультразвуковым контролем. Междунар. Дж. Наномед. 14 , 7141–7153 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 204.

    Li, H.J. et al. Сгруппированные наночастицы, реагирующие на раздражители, для улучшения проникновения в опухоль и терапевтической эффективности. Проц. Натл акад. науч. США 113 , 4164–4169 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 205.

    Wang, D. et al. Разработка наночастиц для локальной активации Т-клеток в микроокружении опухоли. Науч. Иммунол. 4 , 1–14 (2019).

    Google Scholar

  • 206.

    Ким, К. С., Дункан, Б., Креран, Б. и Ротелло, В. М. Инициируемые наночастицы как терапевтические средства. Nano Today 8 , 439–447 (2013).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 207.

    Wong, C. et al. Многоступенчатая система доставки наночастиц для глубокого проникновения в опухолевую ткань. Проц. Натл акад. науч. США 108 , 2426–2431 (2011).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 208.

    Lim, W. Q., Phua, S. Z. F. & Zhao, Y. Редокс-чувствительный полимерный нанокомплекс для доставки цитотоксического белка и химиотерапевтических средств. Приложение ACS Матер. Интерфейсы 11 , 31638–31648 (2019 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 209.

    Маннарис, К. и др. Акустически чувствительные нанокапли полидопамина: новый тераностический агент. Ультрасон. Сонохем. 60 , 104782 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 210.

    Riley, R. S. et al. Оценка механизмов запускаемого светом высвобождения миРНК из нанооболочек для временного контроля над регуляцией генов. Нано Летт. 18 , 3565–3570 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 211.

    Дарива, К.Г., Коэльо, Дж.Ф.Дж. и Серра, А.С. Наночастицы, инициируемые светом в ближней инфракрасной области, с использованием фоторасщепления синглетного кислорода для систем доставки лекарств. Дж. Контроль. отн. 294 , 337–354 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 212.

    Shi, H. et al. Запрограммированная совместная доставка нанопрепаратов платины и гемцитабина кластерным наноносителем для прецизионной химиотерапии опухолей НМРЛ. Дж. Матер.хим. B 8 , 332–342 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 213.

    Li, H.J. et al. Интеллектуальные супраструктуры со сверхвысокой чувствительностью к pH для нацеливания на кислую микросреду опухоли: мгновенное изменение размера и улучшенное проникновение в опухоль. ACS Nano 10 , 6753–6761 (2016). Это исследование демонстрирует использование pH-зависимого изменения размера частиц в микроокружении опухоли для облегчения экстравазации и накопления NP .

    КАС пабмед Google Scholar

  • 214.

    Chen, W.H., Luo, G.F. & Zhang, X.Z. Последние достижения в субклеточной таргетной терапии рака на основе функциональных материалов. Доп. Матер. 31 , 1–39 (2019).

    Google Scholar

  • 215.

    Госвами У. и др. Наночастицы трансферрина-нанокластера меди-доксорубицина в качестве таргетного тераностического нанопрепарата для лечения рака. Приложение ACS Матер. Интерфейсы 10 , 3282–3294 (2018 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 216.

    Qiao, Y. et al. Нанотерапевтические средства, реагирующие на стимулы, для точной доставки лекарств и терапии рака. Wiley Interdiscip. Преподобный Наномед. Нанобиотехнология. 11 , 1–20 (2019).

    Google Scholar

  • 217.

    Джин, К., Дэн, Ю., Chen, X. & Ji, J. Рациональный дизайн наномедицины рака для одновременной скрытой поверхности и усиленного клеточного поглощения. ACS Nano 13 , 954–977 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 218.

    Fang, Y. et al. Расщепляемое ПЭГилирование: стратегия преодоления «дилеммы ПЭГ» в эффективной доставке лекарств. Делив наркотиков. 24 , 22–32 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 219.

    Guo, F. et al. Запускаемые матриксом металлопротеины, проникающие в клетки модифицированные пептидом звездообразные наночастицы для нацеливания на опухоль и терапии рака. Ж. Нанобиотехнологии. 18 , 48 (2020).

    КАС Google Scholar

  • 220.

    Ино, Дж. Иммунотерапия на протяжении многих лет. Дж. Доп. Практика. Онкол. 8 , 747–753 (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 221.

    Маршалл, Х. Т. и Джамгоз, М. Б. А. Иммуноонкология: новые цели и комбинированная терапия. Перед. Онкол. 8 , 1–29 (2018).

    Google Scholar

  • 222.

    Urbanavicius, D., Alvarez, T.,such, G.K., Johnston, A.P.R. & Mintern, J.D. Потенциал вакцин с наночастицами для лечения рака. Мол. Иммунол. 98 , 2–7 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 223.

    Truex, N.L. et al. Автоматизированный проточный синтез пептидов опухолевых неоантигенов для персонализированной иммунотерапии. Науч. Респ. 10 , 723 (2020).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 224.

    Guo, Y., Lei, K. & Tang, L. Доставка неоантигенной вакцины для персонализированной противоопухолевой иммунотерапии. Перед. Иммунол. 9 , 1499 (2018).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 225.

    Домброски, Дж. А., Джоцана, Н., Крюс, Д. В., Чжан, З. и Кинг, М. Р. Изготовление и характеристика нанолизата опухоли в качестве профилактической вакцины против рака молочной железы. Ленгмюр 36 , 6531–6539 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 226.

    Gu, P. et al. Рациональный дизайн систем доставки вакцин с наночастицами PLGA для улучшения иммунных реакций. Мол. фарм. 16 , 5000–5012 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 227.

    Firdessa-Fite, R. & Creusot, R. J. Наночастицы в сравнении с дендритными клетками в качестве носителей для доставки мРНК, кодирующей несколько эпитопов, для иммунотерапии. Мол. тер. Методы клин. Дев. 16 , 50–62 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 228.

    Соэма, П. К., Виллемс, Г.J., Jiskoot, W., Amorij, JP и Kersten, G.F. Прогнозирование влияния липосомального состава липидов на размер липосом, дзета-потенциал и липосом-индуцированное созревание дендритных клеток с использованием подхода к планированию экспериментов. евро. Дж. Фарм. Биофарм. 94 , 427–435 (2015).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 229.

    Cao, F., Yan, M., Liu, Y., Liu, L. & Ma, G. Фототермически контролируемые MHC класса I ограничивают ответы CD8+ T-клеток, вызванные гиалуроновой кислотой, украшенной золотыми наночастицами в качестве вакцина для иммунотерапии рака. Доп. Здоровьеc. Матер. 7 , 1–12 (2018).

    Google Scholar

  • 230.

    An, M., Li, M., Xi, J. & Liu, H. Наночастицы кремнезема в качестве платформы для доставки вакцины в лимфатические узлы. Приложение ACS Матер. Интерфейсы 9 , 23466–23475 (2017 г.).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 231.

    Фонтана Ф., Лю Д., Хирвонен Дж.& Сантос, Х.А. Доставка терапевтических средств с помощью наночастиц: что нового в иммунотерапии рака? Wiley Interdiscip. Преподобный Наномед. Нанобиотехнология. 9 , 1–26 (2017).

    Google Scholar

  • 232.

    Tran, T.H. et al. Наночастицы для иммунотерапии на основе дендритных клеток. Междунар. Дж. Фарм. 542 , 253–265 (2018).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 233.

    Grippin, A.J., Sayour, E.J. & Mitchell, D.A. Трансляционная инженерия наночастиц для противораковых вакцин. Онкоиммунология 6 , e12

    (2017).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 234.

    Liu, J., Miao, L., Sui, J., Hao, Y. & Huang, G. Противораковые вакцины на основе наночастиц: особенности конструкции и последние достижения. Азиатский Дж. Фарм. науч. 15 , 576–590 (2019).

    ПабМед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 235.

    Tostanoski, L.H., Gosselin, E.A. & Jewell, C.M. Разработка толерантности с использованием биоматериалов для нацеливания и контроля антигенпрезентирующих клеток. Дисков. Мед. 21 , 403–410 (2016).

    ПабМед Google Scholar

  • 236.

    Zupančič, E. et al. Рациональный дизайн наночастиц для нацеливания на антигенпрезентирующие клетки и улучшенное примирование Т-клеток. Дж. Контроль. отн. 258 , 182–195 (2017).

    Google Scholar

  • 237.

    Macri, C., Dumont, C., Johnston, A.P.R. & Mintern, J.D. Нацеливание на дендритные клетки: многообещающая стратегия повышения эффективности вакцины. клин. Перевод Иммунол. 5 , e66–e68 (2016).

    Google Scholar

  • 238.

    Zhang, F. et al. Генетическое программирование макрофагов на выполнение противоопухолевых функций с помощью целевых наноносителей мРНК. Нац. коммун. 10 , 3974 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 239.

    Li, K. et al. Поляризация фенотипа макрофагов, ассоциированных с опухолью, с помощью пористых полых наночастиц железа для иммунотерапии опухолей in vivo. Наномасштаб 12 , 130–144 (2020).

    ПабМед Google Scholar

  • 240.

    Чавес-Сантоской, А.В. и др. Адаптация иммунного ответа путем нацеливания на рецепторы лектина С-типа на альвеолярных макрофагах с использованием «патогеноподобных» амфифильных полиангидридных наночастиц. Биоматериалы 33 , 4762–4772 (2012).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 241.

    Zhang, C. et al. Направленная доставка антигена к дендритной клетке с помощью функционализированных наночастиц альгината для иммунотерапии рака. Дж. Контроль. Выпуск 256 , 170–181 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 242.

    Chen, W.C. et al. Доставка антигена к макрофагам с использованием липосомальных наночастиц, нацеленных на сиалоадгезин/CD169. PLoS One 7 , 1–9 (2012).

    КАС Google Scholar

  • 243.

    Татар А.С. и др. Нацеленные на CD19, рамановские пометки золотых наноурчинов в качестве тераностических агентов против острого лимфобластного лейкоза. Коллоидный прибой. B Биоинтерфейсы 184 , 110478 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 244.

    Qian, Y. et al. Нацеливание на дендритные клетки в лимфатических узлах с помощью нановакцины на основе антигенных пептидов для иммунотерапии рака. Биоматериалы 98 , 171–183 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 245.

    Пирсон, Р.М., Кейси Л.М., Хьюз К.Р., Миллер С.Д. и Ши Л.Д. Перепрограммирование иммунных клеток in vivo: технологии индукции антиген-специфической толерантности. Доп. Наркотик Делив. 114 , 240–255 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 246.

    Singh, A. & Peppas, N.A. Гидрогели и каркасы для иммуномодуляции. Доп. Матер. 26 , 6530–6541 (2014).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 247.

    Марлой, М., Лоулер, С.Э. и Бергер, Г. Текущий патент и клинический статус агонистов стимуляторов генов интерферона (STING) для иммунотерапии рака. Фарм. Пат. Анальный. 8 , 87–90 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 248.

    Liu, Y. et al. Вдыхаемый агонист STING в виде наночастиц в сочетании с лучевой терапией обеспечивает долгосрочный контроль над метастазами в легких. Нац. коммун. 10 , 1–15 (2019).

    Google Scholar

  • 249.

    Cheng, N. et al. Активатор STING, содержащий наночастицы, усиливает противоопухолевый иммунитет в нечувствительных к PD-L1 моделях тройного негативного рака молочной железы. JCI Insight 3 , 1–20 (2018).

    Google Scholar

  • 250.

    Wilson, D. R. et al. Биоразлагаемые наночастицы агонистов STING для усиления иммунотерапии рака. Наномед. нанотехнологии. биол. Мед. 14 , 237–246 (2018).

    КАС Google Scholar

  • 251.

    Schmid, D. et al. Наночастицы, нацеленные на Т-клетки, фокусируют доставку иммунотерапии на улучшение противоопухолевого иммунитета. Нац. коммун. 8 , 1–11 (2017).

    КАС Google Scholar

  • 252.

    Ван, К., Йе, Ю., Хочу, Г. М., Садегифар, Х.& Gu, Z. Усиленная иммунотерапия рака путем доставки антитела против PD1 с помощью пластыря с микроиглами. Нано Летт. 16 , 2334–2340 (2016).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 253.

    Wang, C., Sun, W., Wright, G., Wang, A. Z. & Gu, Z. Иммунотерапия рака, вызванная воспалением, путем запрограммированной доставки CpG и антитела против PD1. Доп. Матер. 28 , 8912–8920 (2016).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 254.

    Дэн Х. и Чжан З. Применение нанотехнологий для блокады иммунных контрольных точек при лечении рака. Дж. Контроль. отн. 290 , 28–45 (2018).

    КАС Google Scholar

  • 255.

    Dunn, Z. S., Mac, J. & Wang, P. Т-клеточная иммунотерапия, усиленная дизайнерскими биоматериалами. Биоматериалы 217 , 119265 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 256.

    Хики, Дж. В., Висенте, Ф. П., Ховард, Г. П., Мао, Х. К. и Шнек, Дж. П. Биологически вдохновленный дизайн искусственных антигенпрезентирующих клеток с наночастицами для иммуномодуляции. Нано Летт. 17 , 7045–7054 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 257.

    Саншайн, Дж. К., Перика, К., Шнек, Дж. П. и Грин, Дж. Дж. Зависимость активации Т-клеток CD8 + от формы частиц с помощью искусственных антигенпрезентирующих клеток. Биоматериалы 35 , 269–277 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 258.

    Billingsley, M. et al. Доставка мРНК, опосредованная ионизируемыми липидными наночастицами, для инженерии человеческих Т-клеток CAR. Нано Летт. 20 , 1578–1589 (2020).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 259.

    Smith, T. T. et al. Программирование in situ специфических для лейкемии Т-клеток с использованием синтетических наноносителей ДНК. Нац. нанотехнологии. 12 , 813–822 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 260.

    Pozsgay, J., Szekanecz, Z. & Sármay, G. Антиген-специфическая иммунотерапия при ревматических заболеваниях. Нац. Преподобный Ревматол. 13 , 525–537 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 261.

    Юнг, Х.Х. и др. Полимерные наночастицы, содержащие как антиген, так и витамин D3, вызывают антигенспецифическое подавление иммунитета. Иммунная сеть. 19 , 1–12 (2019).

    КАС Google Scholar

  • 262.

    Pang, L., Macauley, M.S., Arlian, B.M., Nycholat, C.M. & Paulson, J.C. Инкапсулирование иммунодепрессанта усиливает индукцию толерантности с помощью толерогенных липосом, взаимодействующих с Siglec. ChemBioChem 18 , 1226–1233 (2017).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 263.

    Horwitz, DA, Bickerton, S., Koss, M., Fahmy, TM & La Cava, A. Подавление мышиной волчанки клетками CD4 + и CD8 + T reg , Наночастицы, нацеленные на Т-клетки, нагруженные интерлейкином-2 и трансформирующим фактором роста β. Артрит Ревматолог. 71 , 632–640 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 264.

    Ху Т. и др. pVAX1-A20 облегчает колит у мышей, активируя регуляторные Т-клетки. Коп. Дис печени. 51 , 790–797 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 265.

    Шахзад К.А. и др. Дизайн и оптимизация частиц PLGA для доставки иммуномодулирующих препаратов для предотвращения отторжения аллотрансплантата кожи. Иммунол. Вкладывать деньги. 49 , 840–857 (2019).

    ПабМед Google Scholar

  • 266.

    Ли, Р. и др. Продолжительное высвобождение иммунодепрессанта с помощью каркаса из гидрогеля, закрепляющего наночастицы, улучшило выживаемость трансплантированных стволовых клеток и регенерацию тканей. Тераностика 8 , 878–893 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 267.

    Zhang, Y. et al. In situ перепрофилирование дендритных клеток с помощью наномедицины на основе CRISPR/Cas9 для индуцирования толерантности к трансплантату. Биоматериалы 217 , 119302 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 268.

    Инь Х., Кауфман К.Дж. и Андерсон Д.Г. Технологии доставки для редактирования генома. Нац. Преподобный Друг Дисков. 16 , 387–399 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 269.

    Yin, H. et al. Невирусные векторы для генной терапии. Нац. Преподобный Жене. 15 , 541–555 (2014).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 270.

    Райли, Р. С., Джун, К. Х., Лангер, Р. и Митчелл, М. Дж. Технологии доставки для иммунотерапии рака. Нац. Преподобный Друг Дисков. 18 , 175–196 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 271.

    Cavazzana-Calvo, M. et al. Генная терапия тяжелого комбинированного иммунодефицита человека (SCID)-X1. Наука 288 , 669–672 (2000).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 272.

    Hacein-Bey-Abina, S. et al. Связанная с LMO2 клональная пролиферация Т-клеток у двух пациентов после генной терапии SCID-X1. Наука 302 , 1181–1185 (2003).

    Google Scholar

  • 273.

    Уайтхед, К. А., Лангер, Р. и Андерсон, Д.G. Разрушение барьеров: успехи в доставке миРНК. Нац. Преподобный Друг Дисков. 8 , 129–138 (2009).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 274.

    Semple, S.C. et al. Рациональный дизайн катионных липидов для доставки миРНК. Нац. Биотехнолог. 28 , 172–176 (2010).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 275.

    Дэвис, М.Э. и др. Доказательства наличия РНК-интерференции у людей при системном введении миРНК с помощью целевых наночастиц. Природа 464 , 1067–1070 (2010).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 276.

    Mangraviti, A. et al. Полимерные наночастицы для невирусной генной терапии увеличивают выживаемость опухоли головного мозга in vivo. ACS Nano 9 , 1236–1249 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 277.

    Саретт, С. М. и др. Липофильная миРНК нацелена на альбумин in situ и способствует биодоступности, проникновению в опухоль и молчанию генов без переносчиков. Проц. Натл акад. науч. США 114 , E6490–E6497 (2017).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 278.

    He, Y. et al. Полиэтиленимин/ДНК-полиплексы с чувствительными к редукции производными гиалуроновой кислоты защищают от адресной доставки генов. Биоматериалы 34 , 1235–1245 (2013).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 279.

    Xu, C. F. et al. Рациональные конструкции систем доставки CRISPR–Cas in vivo. Доп. Наркотик Делив. Ред. https://doi.org/10.1016/j.addr.2019.11.005 (2019 г.).

    Артикул пабмед Google Scholar

  • 280.

    Maule, G. et al. Аллель-специфическая репарация мутаций сплайсинга при муковисцидозе посредством редактирования генома AsCas12a. Нац. коммун. 10 , 3556 (2019).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 281.

    Moss, R. B. et al. Повторный аэрозольный AAV-CFTR для лечения муковисцидоза: рандомизированное плацебо-контролируемое исследование фазы 2B. Гул. Джин Тер. 18 , 726–732 (2007).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 282.

    Alton, E.W.F.W. et al. Повторное распыление невирусной генной терапии CFTR у пациентов с муковисцидозом: рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование фазы 2b. Ланцет Респир. Мед. 3 , 684–691 (2015).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 283.

    Guan, S. et al. Самособирающиеся наночастицы пептид-полоксамин позволяют восстанавливать геном in vitro и in vivo при муковисцидозе. Нац. нанотехнологии. 14 , 287–297 (2019).

    КАС пабмед Google Scholar

  • 284.

    Robinson, E. et al. Химически модифицированная мРНК, доставляемая липидными наночастицами, восстанавливает секрецию хлоридов при муковисцидозе. Мол. тер. 26 , 2034–2046 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 285.

    Виттен Дж., Самад Т. и Риббек К. Избирательная проницаемость слизистых барьеров. Курс. мнение Биотехнолог. 52 , 124–133 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 286.

    Patel, A.K. et al. Ингаляционные полиплексы мРНК в наноформулах для продукции белка в эпителии легких. Доп. Матер. 31 , 1805116 (2019).

    Google Scholar

  • 287.

    Сук, Дж. С. и др. Генная терапия легких с помощью сильно уплотненных наночастиц ДНК, которые преодолевают слизистый барьер. Дж. Контроль. отн. 178 , 8–17 (2014).

    КАС Google Scholar

  • 288.

    Deweerdt, S. Исправление находится в утробе матери. Природа 564 , 6–8 (2018).

    Google Scholar

  • 289.

    Massaro, G. et al. Фетальная генная терапия нейродегенеративных заболеваний младенцев. Нац. Мед. 24 , 1317–1323 (2018).

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google Scholar

  • 290.

    Ricciardi, A.S. et al. Доставка наночастиц внутриутробно для редактирования генома в конкретном месте. Нац. коммун. 9 , 1–11 (2018).

    КАС Google Scholar

  • 291.

    Кастер Дж. М., Патель А. Н., Чжан Т. и Ван А.Исследовательские наномедицины в 2016 году: обзор нанотерапевтических средств, которые в настоящее время проходят клинические испытания. Wiley Interdiscip. Преподобный Наномед. Нанобиотехнология. 9 , 1416 (2017).

    Google Scholar

  • 292.

    Wu, S. et al. Быстрое безметочное выделение циркулирующих опухолевых клеток из периферической крови пациентов с использованием электрически заряженных наночастиц Fe 3 O 4 . Приложение ACS Матер.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.