Как разогнать лимфу и избавиться от целлюлита

Довольно часто люди, которые борятся с отечностями и лишним весом, интересуются: “Как разогнать лимфу и избавиться от целлюлита?” С этой проблемой также могут столкнуться и довольно худенькие женщины, а причиной этому может стать плохой отток жидкости из организма. На это влияет гормональный дисбаланс, скачки веса, генетическая предрасположенность, сидячий образ жизни, нарушения в питании, курение и др.

Способы разогнать лимфу

Существует несколько способов, как разогнать лимфу, которые могут проводиться в домашних условиях или косметологических центрах. Свою эффективность показали следующие методы:

1. Рациональное питание, употребление продуктов полезных для лимфы;
2. Употребление фиточаев;
3. Употребление витаминных коктейлей, водорослей спирулина и ламинария;
4. Применение Омега-3;
5. Исключение из питания спиртных напитков,большого количества соли, колбас и копченостей;
6. Восстановление питьевого баланса;
7. Лимфодренажное обертывание;
8. Лимфодренажные упражнения для ног и тела;
9. Лимфодренажный массаж;
10. Баня, ванна с теплой водой и морской солью;
11. Избежание носки тесной одежды;
12. Физическая нагрузка и специальная гимнастика;
13. Здоровый сон и забота об эмоциональном здоровье.

Особенности лимфодренажного массажа

Одной из самых популярных и эффективных салонных процедур, направленных на избавление от целлюлита, является лимфодренажный массаж. Косметическим эффектом обладает поверхностный массаж.  Глубокий лимфодренаж позволяет устранить застои лимфы, а также улучшить кровообращение. Количество процедур тем или иным способом напрямую зависит от вида массажа и индивидуальных особенностей клиента. Лимфодренажный массаж может быть ручным и аппаратным. Второй, в свою очередь, бывает нескольких видов:

• Прессотерапия – воздействие сжатого воздуха с помощью специального костюма, ускоряющее движение лимфы;
• Вакуумный массаж – производится специальными насадками на аппарате, которые обеспечивают отток лимфы;
• Микротоковый дренаж – с помощью электроимпульсов стимулируются капилляры и верхние слои эпидермиса.

Лимфодренажный массаж хорошо сочетается с другими методиками. Перед выбором той или иной процедуры необходимо предварительно проконсультироваться с врачом и специалистом косметологического центра, что поможет найти комплексный подход для решения проблемы. Разогнав лимфу, можно избавиться от целлюлита и добиться хорошего эффекта в кратчайшие сроки.

Центр эстетической медицины — «Lazerini» проводит все необходимые процедуры только на современном оборудовании и безболезненно. Записывайтесь прямо сейчас по телефону: Харьков: (066) 787-81-81; (095)-781-71-71. Киев: (095) 565-61-61; (096) 565-61-61; (093) 565-61-61.

Как разогнать лимфу за три дня в домашних условиях

Достаточная гидратация помогает чистить лимфу.
Фото: pixabay.com

Детокс лимфатической системы можно легко провести самостоятельно.

Если в лимфе случился застой

Лимфатическая система состоит из тканей и органов, отвечающих за естественное выведение из организма шлаков, токсинов. Также ее задача транспортировка лимфатической жидкости, а с ней и лейкоцитов, которые играют важную роль в борьбе с инфекциями. Из-за застоя лимфы защита организма снижается.

4 основные причины застоя лимфы:

1. Стресс. Нервы считаются причиной около 80% всех хронических заболеваний, в том числе и перегрузки лимфы.

2. Пищеварение. Проблемы с пищеварением могут раздражать кишечник, из-за чего происходит скопление и застой лимфы. Это имеет решающее значение для лимфотока, детоксикации и иммунитета.

3. Дефицит йода. Йод помогает смягчить воздействие токсичной среды и поддерживает лимфатическую систему на клеточном уровне.

4. Плотная одежда. Например, жесткие бюстгальтеры могут препятствовать нормальному лимфатическому потоку. Со временем это может вызвать увеличение лимфатических узлов и даже рак груди.

Три дня на детокс

В домашних условиях можно легко почистить лимфу. Желательно три дня провести дома, чтобы уделить себе достаточно внимания. Почувствуйте разницу в самочувствии после лимфатической детоксикации и продолжайте ее выполнять по необходимости.

• Пейте много жидкости. Лимфа на 95% состоит из воды, поэтому вода необходима для ее здоровья. Вода, свежевыжатые соки, травяные чаи и бульоны помогают лимфатической системе. Для более глубокого очищения добавляйте в жидкости лимон.

• Травы. Многие травяные чаи доказали свою эффективность для здоровья лимфы, среди них: корень лопуха, эхинацея, красный клевер.

• Упражнения. Прыжки на малом или большом батуте 15-20 минут в день помогают открыть лимфатические клапаны для улучшения кровообращения.

• Быстрая ходьба. Важно, чтобы тело двигалось и легкие работали. Ходите, как минимум 45-60 минут каждый день.

• Ноги вверх. Поднятие ног вверх, лежа вдоль стены, активирует лимфатические клапаны для вывода токсинов, помогает лучше спать.

• Лимфодренажный массаж. С помощью специального массажа, который можно делать самому, помогите лимфе разогнаться.

• Больше стойте. Много сидеть вредно для оттока лимфатической жидкости. Больше стойте и ходите в течение дня, чтобы облегчить отток лимфы.

• Контрастный душ. Когда моетесь, переключайте воду с горячей на холодную, чтобы взбодрить лимфу.

• Чистка сухой кожи щеткой. Чистка кожи щеткой из натуральной щетины с длинной ручкой, не только помогает увеличить лимфоток, но и улучшает работу органов.

• Глубокое дыхание. Упражнения на глубокое дыхание способствуют оттоку лимфы, и легкие лучше перекачивают лимфатическую жидкость.

Как разогнать застой лимфы в домашних условиях

С помощью легкого массажа можно улучшить отток лимфы

Фото: pixabay.com

Мануальный лимфодренаж способствует вымыванию токсинов, улучшению кровообращения и укреплению иммунитета.

Помоги себе сам

Представленный Эмилем Воддером метод лимфатического массажа помогает уменьшить отечность и поправить свое здоровье. Разгоняемая движениями рук лимфатическая жидкость быстрее удаляет токсины и шлаки, поглощает жиры и поддерживает баланс жидкости в организме.

Одна из особенностей мануального лимфодренажа в том, что его можно делать самостоятельно. Но, этот метод может быть противопоказан тем, кто страдает:

• хронической сердечной недостаточностью;

• проблемами с почками;

• инфекционными заболеваниями;

• тромбозом;

• раком.

Легкими движениями рук

Лимфатический массаж делают плавно. Легкого прикосновения достаточно, чтобы стимулировать поток жидкости через лимфатическую систему.

Жесткое массирование может повредить волокна лимфы, которые восстанавливаются в течение суток. Избегайте массирования участков тела с опухшей кожей, покраснениями. Воздействие на них может распространить воспалительный процесс.

Как подготовить лимфатические узлы к массажу (можете выполнять эти движения просто, чтобы размять лимфу):

• Разместите указательные и средние пальцы рук по обе стороны шеи, чуть выше ключицы. Осторожно проведите пальцами по направлению к центру ключицы и обратно, чтобы активировать надключичный узел.

• Положите ладони каждой руки по обе стороны шеи ниже ушей. Здесь расположены миндалины и шейные лимфатические узлы. Проведите ладонями вниз, а затем снова вверх, чтобы активировать их.

• Поместите руки около линии роста волос вдоль затылка, затем осторожно проведите ими по шее к позвоночнику, чтобы подготовить затылочные узлы.

• Положите ладонь под подмышку и осторожно водите ею вверх и вниз по телу. Проделайте это для обеих подмышек.

Подробную технику лимфодренажа Эмиля Воддера легко найти в открытых источниках.

Ранее «Кубанские новости» рассказали, как избавиться от морщин с помощью распаривания лица.

Петербуржцам показали упражнения, которые улучшают циркуляцию лимфы

Нарушение сна, отечность и лишний вес могут свидетельствовать о нарушениях в лимфатической системе.

Лимфа — это жидкость, которая очищает организм от токсинов и бактерий. Если она циркулирует медленно, иммунитет ослабевает. Специалист по физическому развитию Маргарита Алексеева поделилась в эфире телеканала «Санкт-Петербург», как разогнать лимфу после новогодних праздников.

«Лимфатическая система у нас не замкнутая. И в ней нет главного мотора, как в кровеносной. В кровеносной сердце, которое кровь разгоняет. В лимфатической системе этого насоса или мотора нет. Поэтому есть такое понятие — разогнать лимфу».

Особенно актуально для тех, кто новогодние праздники провел достаточно пассивно. Профессиональный тренер заверила, что эти упражнения для всех, независимо от пола и возраста.

Сначала сжимаем-разжимаем пальцы на руках и ногах, стоя на коврике.

Следующее задание: стопы вместе. колени прижимаем друг к другу, бедра сжимаем. Встаем на носочки и опускаемся. Это упражнение на равновесие. Во время его выполнения подключаются мышцы пресса, спины.

Снова садимся и сжимаем-разжимаем пальцы. Делаем круговые движения кистями рук и ног. Затем — волнообразные.

По словам Маргариты Алексеевой, такие упражнения можно делать и утром, и днем, и вечером. Лучше всего выполнять упражнения ежедневно по 10-15 минут — это будет эффективнее, чем по часу раз в неделю.

Те же движения пальцами и кистями повторяем лежа. Важно задействовать мелкие мышцы, которые редко работают. Именно в них начинается застой лимфы и отеки.

Вытягиваем руки и ноги вверх, сильно трясем ими, поворачиваем голову то влево, то вправо, быстро моргаем, аккуратно двигаем нижней челюстью. В конце занятия — легкая растяжка.

«Эти упражнения отлично подходят не только для разгона лимфы, но и для того, чтобы мягко выйти из режима каникул и плавно войти в рабочий режим».

Другие выпуски программы «Утро в Петербурге» смотрите на сайте телеканала «Санкт-Петербург».

Подписывайтесь на нас:

Фото и видео: телеканал «Санкт-Петербург»

Как разогнать лимфу: 8 простых лимфодренажных упражнений для всего тела

Причины застоя лимфы
Симптомы
Чем это опасно
Правила и упражнения для всего тела
Лимфодренажная зарядка: видео
Упражнения для ног
Массаж сухой щеткой: видео
Лимфодренаж лица
Противопоказания

Лимфатическую систему часто относят к кровеносной, у нее также есть свои сосуды. Еще у нее есть точно знакомые всем лимфоузлы, о которых обычно вспоминают во время болезни и их воспаления. Все верно, ведь эта система отвечает за вывод токсинов в организме, защиту от попадания чужеродных бактерий, а при заболевании их скапливается слишком много.

Но лимфатическая система влияет не только на наше здоровье, а еще на внешний вид. Отеки, которые мы так не любим — показатель нарушения именно в ней. Лимфа — жидкость, которая течет по организму и очищает клетки, забирая из них все вредное, питая необходимыми веществами и выводя это вредное из организма. Лимфоузлы служат своего рода фильтром, в котором все токсины обезвреживаются.

Нарушения ее работы приводят к тому, что все эти токсины остаются внутри нас и, конечно, начинают негативно влиять на наше здоровье. Застой лимфы приводит к болезням, появлению отечности и акне, также он может привести к лишнему весу, так как замедляет обмен веществ и вывод лишней жидкости. В общем, ничего приятного.

Сбои в системе можно предотвратить, если регулярно заниматься профилактикой. Для этого нужны упражнения, чтобы разогнать лимфу, и несколько полезных привычек.

Не пропустите

Причины застоя лимфы

Лимфоток обеспечивают мышцы, поэтому самая частая причина проблем с ним — отсутствие физической активности (или ее нехватка). Сидячая или стоячая работа, малоподвижный образ жизни — все это может сказаться на работе лимфатической системы.

Также среди причин могут быть проблемы со здоровьем: инфекционные заболевания, проникновения в лимфатическую систему паразитов, хроническая венозная недостаточность, болезни сердца и почек, онкология, травмы, которые затронули подкожный слой клеток и новообразования в мягких тканях.

Симптомы застоя

На проблемы с лимфой могут указывать, прежде всего, отеки разной степени (лица, ног), болевые ощущения на коже при прикосновении, общая слабость, снижение аппетита, резкий уход веса, небольшой повышение температуры.

Также о нарушении говорят лимфоузлы. Их важно регулярно осматриваться. Если узлы увеличились и болят при нажатии, если на их месте изменился оттенок кожи, это может быть признаком патологии.

При тяжелой стадии проблем с лимфатической системой могут возникнуть судороги, кожа натянута, на ней исчезает рисунок сосудов, при надавливании на отек остаются вмятины, также прикосновение к коже несет болезненные ощущения, могут начаться проблемы с движением суставов.

Не пропустите

Чем это опасно

Лимфатическая система влияет на работу многих систем нашего организма.

Нарушения в ней сказываются на:

1. Весе. Во-первых, замедляется метаболизм, во-вторых, скапливается лишняя жидкость.
2. Внешнем виде. Повышается склонность к отекам из-за лишней жидкости. Чаще всего они появляются на лице (появляются мешки, второй подбородок, овал «расплывается») и ногах (из-за гравитации там скапливается больше всего жидкости)
3. Чистоте кожи. Акне также может быть признаком нарушений в оттоке лимфы. Если грязь и токсины плохо выходят, даже лучшее очищение снаружи не поможет сделать кожу хорошей.
4. Состоянии лимфоузлов. Вплоть до серьезных заболеваний (например, лимфаденита или даже онкологии — лимфомы).
5. Иммунной системе. Дело опять же в медленном выходе токсичных веществ. Частые болезни — возможные признаки проблем с лимфатической системой.

Чтобы не допустить этого, лучше заниматься профилактикой нарушений.

Правила и упражнения для лимфодренажа всего тела

Для профилактики застоев, прежде всего, стоит соблюдать несколько простых привычек:

• Питание. Обязательно включай в рацион клетчатку. Она ускоряет метаболизм, способствует выведению шлаков. Клечаткой богаты зеленые овощи, цельнозерновые мучные изделия, крупы, бобовые, ягоды, фрукты. Лимфу хорошо разгоняют имбирь, чеснок, морская капуста.
• Питье. Необходимо пить достаточное количество жидкости (в среднем 2 л в день). Недостаток приводит к тому, что она остается в организме «про запас» и плохо выводит токсины. Но вот пить перед сном не нужно. Иначе есть шанс проснуться с отеками.
• Физическая нагрузка. Она необходимо, причем, регулярно. Не обязательно заниматься в спортзале. Частых прогулок может быть достаточно. А лучше всего выбрать любой спорт по душе, чтобы он не воспринимался, как мучение и пересиливание себя.
• Эмоциональное состояние. Стрессы сильно сказываются на лимфосистеме. Важно высыпаться и стараться поддерживать позитивный настрой, радовать себя хотя бы мелочами.
• Удобные одежда и обувь. Не злоупотребляй слишком тесными предметами гардероба. Старайся, чтобы тебе было, прежде всего, комфортно.
• Баня. Поход в нее отлично выводит все токсины и лишнюю жидкость, а еще прекрасно расслабляет. Если париться с веником, то получится дополнительный дренажный массаж.
• Массаж. Самостоятельный или в салоне — он поможет ускорить отток лимфы. Существует много методик. Одна из самых популярных — массаж сухой щеткой. О нем — читай ниже.

Не пропустите

Упражнения

• Прыжки. Делать их лучше всего по утрам, чтобы взбодриться. Прыжки не должны быть высокими, не обязательно высоко поднимать ноги. Важно прыгать быстро и часто, приземляться на всю стопу. В идеале нужно сделать 100 прыжков. Можно с паузами.
• Кошечка. Встань на четвереньки, поочередно выгибай спину наружу и прогибайся обратно. Делать можно, пока есть силы.
• Березка. Ляг на спину, подставь руки на поясницу, согни в локтях, обопрись на лопатки, подними прямые ноги наверх. Задержись на несколько секунд.
• Скручивания. Они не только живот проработают, но также лимфоток улучшат. Ляг на спину, ноги выпрями. Поочередно сгибай по одной в коленях и прижимай к груди. Упражнение рекомендуется делать быстро, но важно, чтобы дыхание не сбилось. Повтори от 20 до 50 раз.

Лимфодренажная зарядка: видео

Как разогнать лимфу на ногах: упражнения

• Перекатывания на стопах. Встань ровно. Перекатывайся с пятки на носок, поднимаясь на него на пару секунд. Сделай 20 повторов.
• Толчки пятками. Встань ровно. Приподними пятки (не выше 5 см) и достаточно сильно опусти их на пол. Повторяй в течение 60 секунд. Упражнение очень помогает вечером снять усталость с ног.
• Вибрация. Ляг на спину. Подними ноги и руки. Ноги немного согни в коленях. Тряси конечностями будто в вибрационном режиме в течение 1-2 минут.
• Лягушка. Сядь, согни ноги в коленях, разведи их, соединив стопы. Положи руки на колени и дави на них  — быстро, но не слишком активно, без болевых ощущений. Повтори 20 раз.

Массаж сухой щеткой для ног: видео

Лимфодренаж лица

Существует несколько техник. Предлагаем одну из них.

Выполнять массаж рекомендуется каждый день или, как минимум, курсами по несколько дней. Лучше после нанесения крема, чтобы не растягивать кожу. Движения должны быть без сильного нажима.

1. Начни с легких поглаживаний лба пальцами — от центра к вискам. Повтори 10 раз.
2. Указательными пальцами проведи под глазами (по косточкам) от переносицы к вискам — 10 раз.
3. Указательными пальцами двигайся около губ: от середины верхней губы в стороны, от уголков вверх и в стороны, от центра подбородка вдоль губ вверх и в стороны. 10 раз.
4. От верха лба скользящими движениями перемещайся вниз по лицу, а также шее. 10 раз. Такое упражнение направит отток лимфы вниз, снизит вероятность появления отечности, подтянет кожу.

Техника массажа лица: видео

Противопоказания

Несмотря на всю пользу в некоторых случаях лимфодренаж противопоказан. Его нельзя делать во время беременности, в период кормления грудью, при острых воспалительных заболеваниях, тромбофлебите, лимфаденопатии, лимфадените и онкологии. Следует быть осторожным с массажем при повышенном давлении. В любом случае всегда лучше сначала проконсультироваться с врачом.

Автор

Юлия Шепелева

Редактор рубрик «Здоровье», «Фитнес», «Диеты», «Отношения»

11 способов расшевелить лимфу | Vegetarian.ru

Для многих остается загадкой, что такое лимфа, ведь ее невозможно разглядеть. Но современные технологии очень помогли нам в этом. У большинства людей присутствует застой лимфы. Что же это значит? 

В процессе жизнедеятельности клетка выделяет особую жидкость, в которой сконцентрированы токсины, жировые эмульсии, растворы белков и т.д. Также в ней есть лимфоциты, которые обезвреживают раковые клетки. Эта жидкость и есть лимфа. 

Лимфатические узлы очищают лимфу от вирусов, токсинов и бактерий, поднимая тем самым иммунитет человека. Эта задача – главная среди функций, выполняемых лимфатической системой. Благодаря ее работе межтканевая жидкость очищается и перераспределяется в организме человека. Происходит это с помощью целой системы лимфоузлов. В них из капилляров попадают излишки жидкости из межтканевого пространства. 

На первом этапе эта жидкость проходит первоначальное очищение в более мелких лимфоузлах. Затем по крупным сосудам лимфа переходит на следующую ступень очищения, в лимфатические узлы покрупнее. Продукты очистки (отмершие клетки, бактерии, вирусы) при застое лимфы не могут достичь печени – фабрики переработки отходов и конечного звена процесса очищения. Они оседают в лимфоузлах, вызывая их увеличение, частично выводятся через кожу, слизистую глаз и дыхательных путей человека. 

Причины замедления циркуляции лимфы в организме человека:

Замедление тока лимфы, проблемы с выведением токсинов и остатков жизнедеятельности болезнетворных вирусов и бактерий могут быть связаны со следующими причинами:

·       Длительное психоэмоциональное напряжение, стресс. Многие врачи считают стрессовый фактор причиной подавляющего большинства патологий органов и систем человека.
·       Дисбаланс пищеварительной системы. Лимфоидная ткань кишечника при нарушении рациона питания становится не в состоянии выполнять функции очищения.
·       Йододефицит. Он влияет на эндокринную систему, тесно связанную с лимфатической, в результате чего организм становится беззащитным перед токсинами, блокируется ток лимфы. 

Что же делать и как расшевелить лимфу? Есть несколько эффективных способов. Можете выбрать несколько, а можете подключить все. Ведь от этого напрямую зависит ваше здоровье. 

1)Чистка лимфы с помощью воды. Пейте больше! Без достаточного количества воды в организме лимфатическая жидкость не сможет протекать нормально. Помимо обычной воды употребляйте свежевыжатые соки.

2)Для улучшения лимфотока побольше двигайтесь. Различные физические упражнения гарантируют правильную работу лимфатической системы. Даже ежедневная 20-минутная зарядка значительно улучшит состояние.

3) Ешьте больше свежих фруктов на голодный желудок.

Ферменты и кислоты в фруктах являются мощным средством для очистки лимфы. Употребление их натощак улучшает пищеварение и дает максимальную выгоду для лимфотока. Большинство фруктов перевариваются в течение 30 минут и быстро улучшают ваше самочувствие.

4) Зелень отлично справляется с очищением лимфы. Содержание хлорофилла в зелени и овощах зеленого цвета помогает очистить кровь и лимфу.

5) Сауна и баня. Раз в неделю можно побаловать лимфу, ведь смена температур очень благотворно на нее влияет.
6) Попробуйте провести терапию с горячим-холодным душем. В течение нескольких минут вы сначала включаете горячую воду, и кровеносные сосуды расширяются, потом включаете холодную, и сосуды начинают сужаться, тем самым ускоряя лимфоток. Избегайте этой процедуры, если у вас проблемы с сердечно-сосудистой системой, а также во время беременности.

7) Запишитесь на специальный массаж, улучшающий лимфоток. Исследования показали, что он может способствовать очистке до 78% застоя лимфы. Такой массаж называется лимфодренажным, так как он вытесняет токсины и направляет лимфоток в нужном направлении. Главное, чтобы массаж был нежным, потому что слишком сильное давление хоть и благоприятно сказывается на мышцы, но никак не на лимфатическую систему.

8) Используйте специальную щетку для улучшения лимфотока. По сухой коже перед принятием душа от ног к туловищу, от пальцев к груди работайте в том же направлении, что и ваша лимфатическая система. Можно ознакомиться с ее схемой в интернете.

9) Прием травяных чаев для улучшения лимфотока. Проконсультируйтесь со специалистом, чтобы он помог составить травяной комплекс, учитывая ваши заболевания и курсы лечения, если вы их проходите. Или же купите готовые сборы. Избегайте приема трав во время беременности и в период лактации, а также не принимайте один и тот же вид трав долгое время, не посоветовавшись с врачом.

10) Не пейте газировку, энергетические и сокосодержащие напитки, которые засоряют лимфоток. Они содержат большое количество сахара, который затрудняет работу лимфатической системы, поэтому откажитесь от них в пользу сахара, содержащегося во фруктах.

11) Практикуйте дыхательные упражнения. Наше тело имеет в три раза больше лимфатической жидкости, чем крови. Глубокое дыхание работает подобно насосу, разгоняя лимфу. Это способствует скорейшей очистке лимфы. Дышите глубже и поможете печени справиться с токсинами намного быстрее. 

Желаю здоровье вам и вашей лимфе! 

Как разогнать лимфу на лице и ногах посоветовали медики | Здоровье

Разогнать лимфу на лице и ногах необходимо, прежде всего, тем, кто безуспешно борется с лишним весом, страдает от отёков и частых простудных заболеваний. Именно они являются главными признаками застоя в лимфатической системе организма. Эффективными методами борьбы с ней станут также сбалансированное питание, активный образ жизни и специальный лимфодренажный массаж.

Способы улучшения лимфотока на ногах

Разогнать лимфу помогут несложные упражнения, делать которые необходимо регулярно

1. Толчки пятками. В положении стоя необходимо приподняться на носках на 5 см и резко опуститься на пятки, так, чтобы почувствовать сотрясение в ногах. Повторять упражнение необходимо в течение 1 минуты по 50-60 раз.
2. Вибрация конечностей. Для его выполнения следует лечь на пол и поднять руки и ноги под углом 60 градусов. Затем в течение 3 минут, следует мелко трясти расслабленными конечностями, не опуская их.
3. Выгибание спины, известное под названием «кошечка», следует выполнять стоя на четвереньках. Необходимо попеременно выгибать спину и максимально прогибать её в пояснице.
4. Стойка на лопатках («Берёзка») поможет усилить отток лимфы из ног.

Эффективно разгоняют лимфу аэробные упражнения с невысокой нагрузкой. Например, езда на велосипеде или ходьба в среднем или быстром темпе. При этом, пульс должен быть не менее 110 ударов в секунду.

Как разогнать лимфу на лице

Для разгона лимфы на лице лучше обратиться к профессионалу. Если такой возможности нет, можно самостоятельно выполнить несложный массаж по следующей схеме:

Массаж поможет снизить застой лимфы, уменьшить отёчность в области глаз и носогубных складок. Если выполнять его каждый день, уйдут не только утренние отёки, но и улучшиться тонус кожи, а также снизиться интенсивность воспалительных процессов (например, возникновение акне).

Главные методы разгона лимфы во всём организме

Застой лимфы негативно влияет на здоровье человека:

• снижается иммунитет;
• ухудшается состояние кожи;
• появляются воспалительные процессы;
• не удаётся снизить вес;
• появляются отёки;
• нарушается работа сердца.

К таким последствиям приводит продолжительная низкая физическая активность, неправильное питание, а также неудобная обувь и тесная одежда. Прежде всего, ухудшение лимфотока отражается на нижних конечностях и лице, поскольку именно там скапливается наибольшее количество жидкости.

Чтобы разогнать лимфу во всём организме следует

1. Употреблять в пищу продукты богатые клетчаткой, а также арбуз, кабачки, тыкву, капусту любых сортов, зелень, льняное масло.
2. Максимально снизить употребление кофе, алкоголя, табака, колбас и консервов.
3. Пить много чистой воды из расчёта 30 мл на 1 кг веса. Исключить сладкие фруктовые соки. Лучше заменить его крепким зелёным чаем или отваром кипрея.
4. Ежедневно ходить по 30-50 мин в интенсивном темпе.
5. Отказаться от лифта в пользу пеших подъёмов по лестнице.
6. 2-3 раза в неделю устраивать силовые тренировки.
7. Посещать криопроцедуры или применять холодный душ.
8. 1 раз в неделю посещать баню.
9. Стараться избегать стрессов и негативных эмоций.
10. Принимать гормональные препараты только под контролем врача.

Здоровый образ жизни, сбалансированное питание и гармоничный эмоциональный фон помогут разогнать лимфу в организме значительно более эффективно, чем медикаментозные препараты или сомнительные народные советы. Главное, применять все средства комплексно и регулярно.

7 способов улучшить вашу лимфатическую систему

С приближением зимы самое время начать заботиться о себе, чтобы предотвратить такие болезни, как простуда и грипп. Один из способов сделать это — перезагрузить лимфатическую систему, которая отвечает за транспортировку токсинов и отходов из ваших клеток. Вот 7 способов убедиться, что ваша лимфатическая система находится в отличной форме и готова справиться с этими зимними неприятностями:

1) Задание

Приближается зима.Будь готов.

Движение мышц — это то, что заставляет лимфатическую систему функционировать, поэтому вы должны быть активными и продолжать двигаться. В холодные зимние месяцы люди становятся вялыми и остаются дома. Плохой ход. Запишитесь в тренажерный зал, купите беговую дорожку или сотрите пыль со своих Speedos и посетите крытый бассейн с подогревом — любое упражнение является хорошим упражнением и поможет с лимфатическим дренажом. Прыжки на батуте и занятия йогой особенно эффективны для очищения лимфатической системы.

2) Чуг h3O

Лимфатической системе требуется хороший запас жидкости, чтобы вымыть токсины из ваших клеток.Старайтесь выпивать не менее двух литров воды в день. Долька лимона, который является щелочным фруктом, станет отличным дополнением. Травяные чаи без кофеина — еще один фантастический способ согреться и избежать обезвоживания.

3) Попробуйте лимфодренажный массаж своими руками

Стимулируйте лимфатические узлы, нежно массируя сердце. Используйте только легкий массаж, так как лимфатические сосуды находятся под кожей.

* Для вашего лица : Положите руки по обеим сторонам лица так, чтобы кончики пальцев указывали на макушку, большие пальцы рук по бокам шеи и уши между указательным и средним пальцами.Слегка прижмите руки к салфетке, затем нежно массируйте назад, чтобы растянуть ткань.

* Для ног: Слегка помассируйте складку, где верхняя часть ноги соприкасается с телом. Положите ладонь на обе стороны бедра, прямо вверху, и осторожно погрузитесь в ткань. Не поднимая рук, поднимите ткань вверх растягивающими движениями. Медленно опускайтесь по всей длине ноги, уделяя особое внимание узлам за коленом.

Чтобы узнать больше о техниках лимфатического массажа своими руками, ознакомьтесь с этой статьей.

4) Инвестируйте в массаж

Регулярный лечебный массаж и миотерапия помогают очистить организм от токсинов и стимулируют кровоснабжение мышц. Таким образом они укрепляют лимфатическую систему. После массажа обязательно выпейте много воды, чтобы вывести токсины из организма.

5) Используйте валик из поролона

Эти удобные устройства отлично подходят для увеличения притока крови к мышцам, перемещения лимфатической жидкости и помощи организму в удалении отходов.Они также помогают разрушить спайки тканей, которые могут стать причиной стянутости и травм. В магазине Muscle Freedom есть поролоновые ролики, и наши терапевты могут показать вам упражнения, чтобы получить от ролика максимальную отдачу.

6) Откажитесь от бюстгальтера

Бюстгальтеры на косточках могут остановить нормальный лимфатический поток в груди, в которой находится большое количество лимфатической ткани. Избегайте бюстгальтеров или, по крайней мере, без косточек.

7) Сухая чистка

Отшелушивание под теплым душем — отличный способ стимулировать лимфатическую систему и дать ей заряд энергии.Используйте сухую щетку с грубой щетиной и проведите по коже в направлении сердца, чтобы стимулировать движение лимфы и крови в нижележащих органах и тканях.

Чтобы узнать больше о лимфатическом дренаже или преимуществах лечебного массажа и миотерапии, свяжитесь с командой по телефону Muscle Freedom . Расположенный в пригороде Бейсайд Блэк-Рок в Мельбурне, Muscle Freedom предлагает широкий спектр процедур, включая миотерапию, спортивный массаж, терапию триггерной точки, сухие иглы и миофасциальные банки.Звоните по телефону 03 9598 4873.

Преимущества лимфатической массажной терапии

В Sense Massage Therapy у нас есть терапевты, которые специализируются на различных видах массажа, и мы подумали, что было бы здорово продемонстрировать некоторые из многих других способов, которыми массаж может принести пользу телу за пределами офиса.

Один из видов массажа, который может быть чрезвычайно полезным и хорошо известен своими лечебными свойствами, направлен на стимуляцию лимфатической системы.

Когда наше тело работает так, как должно, мы никогда не замечаем нашу лимфатическую систему; пока он не столкнется с проблемами, многие из нас могут даже не узнать, что это такое.

Итак, что такое лимфатическая система?

Лимфатическая система — это сеть внутри тела, которая помогает отводить токсины и нежелательные вещества, транспортируя лимфу, содержащую белые кровеносные сосуды, которые помогают нам бороться с инфекциями. Эта лимфа транспортируется по лимфатическим сосудам (подобно венам).

Это всего лишь один из тех сложных и удивительных процессов, которые происходят в нашем организме ежедневно: перемещение необходимого количества жидкости по всему телу, помощь в сопротивлении инфекциям и удаление отходов из мышечных тканей.

Но некоторые состояния здоровья и даже генетика могут привести к нарушению потока жидкости между различными лимфатическими узлами организма, вызывая закупорку и накопление на обычных внутренних путях. Это приводит к так называемой лимфедемой.

Что такое лимфедема?

Потенциально серьезное заболевание, называемое лимфедемой, может вызывать ряд симптомов: боль и отек, иногда чувство усталости или жжения, даже течь или синяки.Если не лечить, это может привести к инфекции, обезображиванию, необратимому повреждению кожи и даже потере подвижности пальцев рук и ног.

Хирургическое вмешательство, травма или некоторые паразиты могут играть роль в появлении лимфедемы, но одной из наиболее частых причин является лечение рака, включая лучевую или химиотерапию. Некоторые операции, связанные с раком, такие как мастэктомия, могут потребовать удаления по крайней мере одного лимфатического узла — процедуры, которая может значительно изменить поток жидкости по лимфатическим путям.

Снизить или контролировать объем отека и улучшить кровообращение можно с помощью различных шагов, таких как рукава, компрессионные бинты или определенные типы одежды. Пациентам с хронической лимфедемой также может быть полезно регулярно посещать врача для дренирования с помощью специального жидкостного насоса.

Но, конечно же, невероятно эффективный способ улучшить кровообращение и восстановить работу системы — это лимфатический массаж.

Лимфатический массаж

Лечебный массаж лимфедемы отличается от массажей в стиле спа, которые предназначены для комфорта, или лечебных массажей, которые предназначены для расслабления и стимуляции мышц.

Вместо этого массаж лимфедемы требует легкого, нежного прикосновения, чтобы помочь рассеять и отвести жидкость и уменьшить закупорку в системе лимфатических узлов. Эта процедура улучшает и стимулирует лимфатические сосуды и пути, а иногда перенаправляет их через заблокированные участки или вокруг них, облегчая их отток в остальную часть тела, как и предполагалось.

Традиционный массаж, особенно более быстрый или требующий более сильного давления, на самом деле может увеличить накопление жидкости и ухудшить симптомы.

Лимфатический массаж, также называемый мануальным лимфодренажем, на самом деле рекомендуется проводить только лицам, прошедшим обучение и сертификацию в соответствии с надлежащим стилем и техникой, в том числе медицинскими работниками, специалистами, называемыми терапевтами по лимфедеме, физиотерапевтами или массажистами.

Процедура массажа лимфедемы

В процессе массажа лимфедемы терапевт обычно использует медленные движения и давление кончиков пальцев, чтобы вручную переместить жидкость к сердцу, а затем легкими движениями перемещать ее к рукам, а затем к плечам.Цель — минимальное давление и сохранение всего движения в одном направлении.

В некоторых случаях пациентов могут попросить сделать себе ограниченный лимфатический массаж. Например, в дни сразу после операции, прежде чем они смогут посетить врача или специалиста, пациента могут научить некоторым базовым методам, которые позволят ему перемещать лимфатические жидкости вручную, чтобы убедиться, что они не застаиваются в своем теле.

Пациенты, живущие в сельской местности или с ограниченным страхованием, могут не иметь регулярного доступа к лимфатическому специалисту, поэтому их или их семью / опекунов иногда также обучают основным упражнениям, чтобы поддерживать движение жидкости и откачивать вручную до тех пор, пока они не смогут или не получат разрешение на лечение. сертифицированный терапевт.

Самомассаж или массаж от квалифицированного специалиста также могут включать использование силы тяжести — все, что может потребоваться пациенту, — это лечь и удерживать руку или руки в воздухе в течение определенного времени. Иногда поднятие руки вверх может помочь в дренировании, даже если это не массаж.

Получение дополнительной помощи

Если вам или вашим знакомым может быть полезен массаж с лимфедемой, или если вы страдаете лимфедемой и хотите узнать больше, нажмите здесь.

Важно помнить, что если вы страдаете лимфедемой, вы не одиноки.

По данным NHS, около 200 000 человек в Великобритании страдают той или иной формой лимфедемы, и эта тенденция, вероятно, будет продолжаться до тех пор, пока заболеваемость раком будет влиять на миллионы людей. Рак груди, рак мозга или рак ткани шеи также имеют более высокие шансы вызвать лимфедему, чем другие виды рака.

Поскольку лимфедема также может быть вызвана травмой или травмой, у бывших военнослужащих также выше риск появления симптомов.

Каким бы ни был спусковой механизм, ключом к предотвращению лимфедемы является поддержание циркуляции жидкости. В противном случае может накапливаться жидкость, что может вызвать разного рода физический дискомфорт, начиная от невозможности носить часы или браслет и заканчивая иногда опасными состояниями, такими как сепсис.

Ваш поставщик медицинских услуг, общественный медицинский центр или местное агентство по уходу на дому может располагать информацией о других ресурсах, в том числе о любых сертифицированных терапевтах по лечению лимфедемы в вашем районе, или вы можете связаться с нами, чтобы мы могли связать вас с одним из наших обученных терапевты, совершенно бесплатно.Эти обученные люди могут не только проводить лимфатический массаж, но и предоставить другие подробности о хроническом заболевании, местных группах поддержки или даже о рекомендуемой одежде.

Национальная сеть лимфедемы также предлагает информацию о ресурсах, таких как поставщики и терапевты, знакомые с болезнью, а также доступ к аккредитованным программам обучения для людей, желающих стать терапевтами.

Мы надеемся, что эта статья оказалась для вас полезной и интересной, и если вы хотите узнать больше о некоторых других методах лечения, которым обучены многие наши терапевты, свяжитесь с нами.

Эта статья написана в сотрудничестве с Above and Beyond HC, службой домашнего здравоохранения и хосписа, которая также предоставляет сертифицированных терапевтов по лечению лимфедемы. Изображение взято из видео Learn Massage здесь.

Знаменитости получают, и вам стоит?

Детокс. Омоложение. Противовоспалительное средство. Снимите стресс. Вот некоторые из самых модных словечек современной велнес-культуры.

Это также термины, которые использовались в моих недавних разговорах о лимфатическом массаже, оздоровительной практике, которая существует уже несколько десятилетий, но стала мейнстримом (с помощью ритмических рук и машин) здесь в 2020 году.

Помимо того, что это красивый ямбический пентаметр, который вызывает у меня неприятные ощущения, что делает лимфатический массаж таким особенным? Почему из лечения пациентов с сердечными заболеваниями и раком он превратился в одобренную Goop основу высококлассных спа-салонов и моделей купальников? И более того: что такое лимфатический массаж и стоит ли он ваших денег, поскольку он может варьироваться от 50 до 350 долларов за сеанс? Давайте рассмотрим.

Начните с основ: что такое лимфатическая система?

Сеть тканей и органов, известная как лимфатическая система, «подобна иммунному сосуду тела», — говорит Джошуа Скаллан, доцент Медицинского колледжа Университета Южной Флориды, чья лаборатория специализируется на биологии лимфатических сосудов.

Лимфатическая система поддерживает баланс жидкости, поскольку она транспортирует вещества, борющиеся с инфекциями, и удаляет ненужные материалы. По словам Скаллана, область лимфатических исследований в последнее время «резко выросла» благодаря достижениям в области генетических технологий. В то же время, кажется, неспециалисты проявили интерес к иммунному сосуду своего тела. Согласно Yelp, упоминания «лимфодренажа» увеличились на 36% за последний год, поскольку центры, предлагающие лечение, появляются по всему Лос-Анджелесу и Нью-Йорку.Знаменитые фитнес-тренеры, в том числе Лорен Э. Клебан из LEKFIT и Трейси Андерсон, проводят уроки прыжков на батуте, потому что, как говорит Клебан, это «один из лучших способов активировать лимфатическую систему».

Зачем делать лимфатический массаж?

Пока Основная цель типичного шведского массажа — снять мышечное напряжение, цель лимфатического массажа — ускорить транспортировку лимфы (жидкости с лейкоцитами) по системе лимфатических сосудов.

Один особый стиль ручного лимфатического массажа, Техника Воддера, существует со времен тезки доктора Р.Эмиль Воддер использовал его на юге Франции в 30-х годах.

Энн Брэмхэм, основательница Совета по сертификации продвинутой спа-терапии и образования, преподает технику Воддера в течение 25 лет. Она считает, что это лечение «становится популярным в последнее время», потому что оно позволяет достичь того, чего ищут энтузиасты хорошего самочувствия: детоксикации.

«Это действительно привлекает внимание, потому что предлагает естественное омоложение», — говорит Брэмхэм, который среди преимуществ лечения называет улучшение цвета кожи, более глубокий сон и улучшение пищеварения.

Массаж работает «как вакуум, который вытягивает все отходы клеточного вещества из тканей (посредством) техники легкого давления и ритмичного растяжения и освобождения тканей».

По словам Скаллана, лимфатический массаж в первую очередь работает как лечение лимфедемы, состояния, иногда вызываемого химиотерапией, когда жидкость скапливается в тканях и вызывает отек. Но Брамхан считает, что массаж подходит «всем» и заставляет пациентов чувствовать себя лучше и «легче».

На что похож лимфатический массаж?

Вы знаете, что у вас мурашки по коже, когда кто-то роняет вам на голову стальные когти массажера для кожи головы? Что-то вроде этого ощущается при лимфодренажном массаже всего тела.

Свой первый я купил в Shape House в Санта-Монике, оздоровительном бутике, одобренном знаменитостями (покупателями являются звезды от Селены Гомес до LL Cool J). Shape House предлагает лимфатический массаж с момента своего открытия в 2012 году и рекомендует сочетать 55-минутный сеанс (65 долларов США) с его фирменным 55-минутным сеансом потоотделения (также 65 долларов США), что я и сделал.

Вот где мне нужно сообщить об отказе от ответственности: утром в день приема я проснулся с низкой температурой и головной болью, поэтому я обратился за неотложной помощью, чтобы пройти тест на грипп, который оказался отрицательным.После того, как врач заверил меня, что у меня нет инфекционных заболеваний, я отправился на прием.

Но сначала я сделал снимки «до», потому что знаменитые массажисты научили меня этому. Вежливые женщины, работающие в Shape House, позаботились о том, чтобы я не стеснялась позировать перед их стеной, залитой искусственной травой, и изображать дольки апельсина.

Самое сложное, мое лечение могло начаться. Для лимфатического массажа Shape House предлагает аппарат (в отличие от человека-терапевта), который выглядит как ярко-синий космический костюм, разделенный на части ног, формы рук и пояс, который пристегивается ко мне.Когда массажер продолжал работать, мне казалось, что мои конечности сделаны из игрушек-водяных змей 90-х годов, а машина была парой рук, которые должны были медленно сжимать мои руки и ноги, чтобы мои наполненные гелем придатки не могли выскользнуть из его хватки. Мне казалось, что удав проглотил мое тело, но очень комфортно. Ощущение теплого покалывания в затылке. Я вышел спокойным.

Мой сеанс пота после массажа был не таким мечтательным и медитативным.Позже я узнал, что у меня поднялась температура, что неудивительно из-за того, что я провел под утепленным одеялом, потому что больной (даже если врач настаивает, что у него нет гриппа) не должен проводить час, будучи несчастным и потным.

Так тебе становится легче и легче?

Хотя на моих фотографиях «после» всего тела изображен обильно вспотевший человек, который в остальном очень похож на сухого человека из двух часов ранее (и не настолько отличается, чтобы я мог поделиться своими смущающими фотографиями здесь), я чувствовал иначе после моего лечения.Я почувствовал, что это за слово? Легче! Я чувствовал себя менее опухшим, а также настолько дзен, что не мог нервничать. Моя кожа выглядела яркой и влажной, и я обычно не из тех, кто использует эти слова для описания чего-то другого, кроме травы. Я даже сделал селфи в ванной, потому что подумал, что у меня красивое лицо.

Я выгляжу как сотня баксов? Не совсем, но я рекомендую один раз попробовать лимфатический сеанс, возможно, когда вы сможете получить скидку для первого пользователя (как я, по общему признанию, сделал). После этого в Интернете есть множество бесплатных видео, которые показывают, как делать себе массаж (что я тоже делал).

После лечения я действительно страдал от чего-то, что очень напоминало грипп. Но моя кожа продолжала выглядеть, осмелюсь сказать, сияющей в течение нескольких недель. И в то время месяца, когда у меня обычно самый большой вздутие живота, почему-то это не так. Если бы только лимфатический массаж вылечил мой неприятный кашель.

Пищевые эмульгаторы — обзор

3.1 Эмульгирование и стабилизация

SE производятся коммерчески как пищевые эмульгаторы с начала 1960-х годов. Они широко используются в качестве добавок (E473) в пищевой промышленности, а также были отмечены как хорошие эмульгирующие и стабилизирующие агенты в фармацевтической области.Таблица 4 суммирует возможную применимость SE в качестве эмульгаторов и стабилизаторов в обычных и современных системах доставки лекарств.

Таблица 4. Применимость СЭ в качестве эмульгаторов в различных системах рецептур.

Состав	Ссылка
Эмульсии, суспензии	Akoh (1992), Yokoi et al. (2005)
Микроэмульсии	Thevenin et al. (1996), Bolzinger-Thevenin et al.(1999), Гарти и др. (1999), Fanun (2008a, b, 2009a, b)
Пузырьки	Mollee et al. (2000), Honeywell-Nguyen и Bouwstra (2003), Honeywell-Nguyen et al. (2003)
Микросферы, микрочастицы	Miyazaki et al. (2006), Youan et al. (2003), Youan (2004)
Наночастицы, липидные наночастицы	Zimmermann and Müller (2001), Wissing and Müller (2003), Lippacher et al. (2004), Арика и др. (2006), Huang and Moriyoshi (2008)
Наноэмульсии, наносуспензии, нанодисперсии	Tagekami et al.(2008), Piao et al. (2008), Tahara et al. (2008), Klang et al. (2011)

В 1992 г. Akoh исследовал эмульгирующие свойства полиэфиров и SE и обнаружил, что они могут использоваться в пищевых продуктах, косметике и фармацевтических продуктах в виде эмульгаторов типа «масло в воде» или «без масла». Thevenin et al. (1996) изучали микроэмульсионные системы SE / со-поверхностно-активное вещество для трансдермальной доставки. Bolzinger-Thevenin et al. (1999) охарактеризовали содержащую SE микроэмульсионную систему с помощью электронной микроскопии трещин при замораживании и экспериментов по малоугловому рассеянию нейтронов.В том же году Garti et al. (1999) рассмотрели поведение SE в микроэмульсионных системах . Применимость СЭ в микроэмульсиях до сих пор широко изучается. Например, Fanun, 2008a, b; Фанун (2008a, b, 2009a, b) исследовал различные микроэмульсионные системы, содержащие SE, которые можно использовать в пищевых продуктах, косметике и фармацевтике.

SE также можно использовать для образования различных везикул в качестве систем доставки лекарств. Например, Mollee et al. (2000) получали стабильные обращенные везикулы в масле, используя пальмитат сахарозы в качестве поверхностно-активного вещества.Эти везикулы продемонстрировали высокую эффективность инкапсулирования для p -аминобензойной кислоты и холестерина. Honeywell-Nguyen и Bouwstra (2003) и Honeywell-Nguyen et al. (2003) также получали везикулы с помощью SE. Они образовали эластичные пузырьки с лауратом сахарозы и ПЭГ-8-L в качестве поверхностно-активных веществ, содержащих перголид (2003) или ротиготин (2003) для трансдермальной доставки.

Миядзаки и др. (2006) приготовили микросфер путем испарения эмульсионного растворителя с DK-F10 (0: 5: 11: 84 Mono: Di: Tri: Polyester, HLB: 1) в качестве эмульгатора.Youan et al. (2003) также использовали SE, DK-F50 (34: 46: 17: 3 Моно: Ди: Три: Полиэстер, HLB: 6), DK-F70 (39: 45: 12: 4 Моно: Ди: Три: Полиэстер. , HLB: 8), DK-F110 (52: 36: 10: 2 Моно: Ди: Три: Полиэстер, HLB: 11), DK-F140 (61: 30: 7: 2 Моно: Ди: Три: Полиэстер, HLB : 13) и DK-F160 (72: 23: 5: 0 Моно: Ди: Три: Полиэстер, HLB: 16) в качестве поверхностно-активных веществ в способе испарения растворителя для получения микрочастиц. Их результаты показали, что при концентрации поверхностно-активного вещества 0,05% (мас. / Об.) SEs со значениями HLB 6-15 давали дискретные и сферические микрочастицы с более высокой эффективностью инкапсуляции по сравнению с контролями, поливиниловым спиртом и полоксамером 188.Эта же группа также описала метод распылительной сушки, включающий использование SE для образования микрочастиц (Youan, 2004). С помощью этого метода супероксиддисмутаза была эффективно инкапсулирована в биоразлагаемые микрочастицы.

SE также можно использовать для стабилизации водных суспензий . Yokoi et al. (2005) продемонстрировали, что СЭ ингибируют рост кристаллов и зародышеобразование аморфного цефдиторена пивоксила, что улучшает физико-химическую стабильность суспензии.

В последнее время наблюдается большой интерес к формированию различных наносистем в фармацевтической технологии.SE могут использоваться в качестве эмульгаторов и стабилизаторов в наноэмульсиях, наносуспензиях или твердых липидных наночастицах (SLN). Стабильность электролита и pH СЛУ, содержащих SE, была исследована Циммерманном и Мюллером (2001). Wissing и Müller (2003) получили SLN, содержащий стеарат сахарозы, и исследовали его эффекты in vivo . Lippacher et al. (2004) использовали стеарат сахарозы в качестве эмульгатора в SLN. Они разработали полутвердый продукт, который предоставляет новую возможность для местного применения за счет использования системы SLN.SE-содержащие липидные наночастицы могут быть дополнительно получены путем инъекции растворителя или ультразвуковой эмульгирования (Arica et al., 2006). Piao et al. (2008) сформулировали наносуспензию твердого вещества в масле для трансдермальной доставки диклофенака натрия, используя SEs ER190 (эрукат сахарозы, 0% моноэфир, HLB: 1) и ER290 (эрукат сахарозы, 2% сложный моноэфир, HLB: 2). Tagekami et al. (2008) применили СЭ в липидной наноэмульсии для повышения стабильности. Гидрофобный эрукат сахарозы использовали в качестве поверхностно-активного вещества для приготовления нанодисперсии твердого вещества в масле для чрескожной доставки белка (Tahara et al., 2008). Хуанг и Мориёши (2008) пришли к выводу, что СЭ можно применять в качестве стабилизирующих агентов в сверхкритических технологиях. Они приготовили наночастицы лидокаина и предотвратили быстрый рост кристаллов препарата за счет добавления стеарата сахарозы и регулирования pH. Система эмульгатора, содержащая смесь SE, способна образовывать многослойные жидкокристаллические сети, которые обладают превосходным профилем безопасности и демонстрируют широкий спектр применения в составах (Luu et al., 2010). Klang et al.(2011) разработали наноэмульсии с улучшенной структурой и долговременной стабильностью, используя натуральный стеарат сахарозы (S970, 50% моноэфир, HLB: 9) в качестве единственного поверхностно-активного вещества. В их исследовании тщательное сравнение между новыми наноэмульсиями на основе стеарата сахарозы и соответствующими наноэмульсиями на основе лецитина показало, что SE превосходит с точки зрения эффективности эмульгирования, образования капель и физической и химической стабильности.

Химиотерапия плоскоклеточного рака полости рта

Sujuan Zeng, ^{1, & ast;} Shiqi Liu, ^{1, 2, & ast;} Yintao Lan, ³ Ting Qiu, ³ Mengyu Zhou, ³ Weijian Gao, ³ Wenyan Huang, ¹ Lihong Ge, ^{1, 4} Jian Zhang ¹

¹ Отделение педодонтии, Стоматологическая больница, входящая в состав Медицинского университета Гуанчжоу, Ключевая лаборатория фундаментальных и прикладных исследований оральной регенеративной медицины в Гуанчжоу, Гуандун, Китайская Народная Республика; ² Отделение стоматологии, больница Тайхэ, Институт болезней полости рта, Школа стоматологии, Медицинский университет Хубэй, Хубэй, Китайская Народная Республика; ³ Департамент биомедицинской инженерии, Школа фундаментальных медицинских наук, Шестая дочерняя больница Медицинского университета Гуанчжоу, Народная больница Цинюань, Медицинский университет Гуанчжоу, Гуандун, Китайская Народная Республика; ⁴ Отделение детской стоматологии, Стоматологическая больница Пекинского университета, Пекин, Китайская Народная Республика

Справочная информация: Плоскоклеточный рак головы и шеи является шестым по распространенности раком в мире, 40% из которых возникает в полости рта. .Хотя уровень ранней диагностики и лечения OSCC значительно улучшился, пятилетняя выживаемость продвинутых пациентов остается неудовлетворительной. Однако перед нами стоят основные задачи: как поставить ранний и точный диагноз и как разработать эффективное лечение. Химио-фототермальная терапия на основе наночастиц оказалась многообещающим неинвазивным подходом к лечению плоскоклеточного рака полости рта.
Методы: В этом исследовании мы попытались разработать и синтезировать полифункциональные модифицированные гиалуроновой кислотой (HA) золотые наностержни / мезопористые наночастицы на основе диоксида кремния, загруженные гидрохлоридом доксорубицина (DOX) для совместной химиофотермической терапии под руководством фотоакустической визуализации (PAI).
Результаты: Полученный нанокомпозит демонстрирует благоприятную биосовместимость, относительно низкую цитотоксичность, идеальную способность загрузки лекарственного средства и сильные сигналы PAI. Кроме того, они показали отличную эффективность фототермического преобразования 49,02% для фототермической терапии (ФТТ). Более того, эксперименты in vivo и in vitro показали, что синергетическая химиофотермическая терапия имеет лучшие терапевтические эффекты, чем одна химиотерапия или PTT ( P [email protected] _{2 Наночастицы} -HA могут быстро накапливаться на участках опухоли и достигать полной абляции опухолей в сочетании с ближним инфракрасным лазерным излучением без явных побочных эффектов на нормальные ткани.
Заключение: Наше исследование убедительно демонстрирует потенциал DOX– [email protected] ₂ -HA в качестве многофункциональной платформы в фототермической химиотерапии под контролем PAI плоскоклеточного рака полости рта.

Ключевые слова: золотые наностержни, покрытые мезопористым диоксидом кремния, фотоакустическая визуализация, химиофотермическая терапия, плоскоклеточный рак полости рта

Введение

До сих пор рак продолжает оставаться мировым злокачественным заболеванием и основной причиной смерти. ^1–3 Рак головы и шеи является шестой по величине злокачественной опухолью в мире, из которых 40% встречается в полости рта и почти 90% классифицируется как плоскоклеточный рак полости рта (OSCC). ⁴ На ранних стадиях рака эффективную роль могут сыграть лучевая терапия и хирургия. В то время как на поздних стадиях рака обычно требуется сочетание хирургического вмешательства, химиотерапии и лучевой терапии. ⁵ OSCC можно предотвратить и излечить на ранней стадии, но большинство случаев можно диагностировать только на поздней стадии.Кроме того, от современной терапии сложно добиться рационального эффекта и ее прогноз ужасен. ^6,7 5-летняя выживаемость пациентов с запущенным OSCC все еще неудовлетворительна, что в основном связано с трудностями ранней диагностики, легким рецидивом после лечения, крупными системными побочными эффектами и т. Д. ^8–10 делает OSCC одним из наиболее серьезных заболеваний и остаются проблемой глобального здравоохранения, несмотря на несколько достижений в области диагностики и терапии OSCC. ¹¹

В настоящее время точная медицина и таргетная терапия становятся все более популярными среди противоопухолевых методов лечения. ¹² С быстрым развитием современных технологий визуализации фотоакустическая визуализация (PAI) представляет собой новый неионизирующий и неинвазивный диагностический метод, который позволяет визуализировать ткани с высоким разрешением и разрешением по глубине. ^13–15 Относительно недавно появилось много сообщений об использовании PAI в области ротовой полости. В диагностике и оценке лечебного эффекта OSCC, PAI играет важную роль, особенно в локализации областей опухоли и обнаружении метастатических лимфатических узлов. ^16–18 Другой характерной особенностью PAI является то, что он дает возможность сочетать диагностику с лечением, например, фототермической терапией (PTT). ^19–22 PTT — это терапевтический метод, который использует технологию целевого распознавания для сбора материалов с превосходной эффективностью фототермического преобразования вблизи опухолевой ткани и преобразует световую энергию в тепловую энергию для уничтожения раковых клеток под действием излучения ближнего инфракрасного диапазона. ^23–25 Следовательно, как многообещающий заменитель эффективного лечения рака он привлек значительное внимание.Из-за физиологической сложности серьезных заболеваний, таких как рак, текущие разработки мягко сместились с акцента на монотерапию на комбинированные или множественные методы лечения, поскольку синергия терапевтических агентов или методов приводит к показной суперсаддиве (а именно «1 + 1> 2») терапевтические эффекты. ²⁶

Раковая наномедицина считается относительно новой междисциплинарной областью исследований, включающей химию, инженерию, доставку лекарств и медицину, направленную на содействие более широкому развитию диагностики и лечения рака. ^27–30 Наночастицы золота (наночастицы Au) — это обычно используемые наночастицы, которые широко используются в PAI, PTT и целевой доставке лекарств из-за их простого метода синтеза, высокого выхода, стабильных химических свойств и регулируемого поверхностного плазмонного резонанса. ^31–36 Тем не менее, низкая нагрузочная способность противоопухолевых препаратов не позволяла использовать наночастицы Au в клинических целях. Наночастицы мезопористого диоксида кремния в качестве системы доставки лекарств с высокой удельной площадью поверхности, большим объемом пор, легкой модификацией поверхности, хорошей биосовместимостью и удобной загрузкой лекарственного средства широко используются для покрытия золотых наностержней с целью улучшения долгосрочной стабильности, гидрофильности и способность доставки лекарств. ^37–40 Что еще более важно, мезопористое покрытие из диоксида кремния — хороший способ преодолеть токсичность металлических наночастиц, поскольку оболочка из диоксида кремния обладает биохимической стабильностью и коррозионной стойкостью в экстремальных условиях. ^41–43

При лечении рака таргетные противоопухолевые препараты могут быть более эффективными, чем обычная химиотерапия. ⁴⁴ Гиалуроновая кислота (НА) — это природный, биоразлагаемый и неиммуногенный полимер с высоким сродством к рецептору CD44, который, как было доказано, участвует в различных биологических действиях опухоли, включая пролиферацию, прогрессирование и метастазирование опухоли. ^45,46 Оболочка HA обертывает лекарство, чтобы играть защитную роль, повышает стабильность лекарственного средства и обеспечивает замедленное высвобождение лекарственного средства. ^47,48 При этом были успешно получены покрытые мезопористым кремнеземом золотые наночастицы с большим объемом пор, которые могут быть использованы для химиофотермической синергетической терапии опухоли. Превосходная эффективность фототермического преобразования и фотоакустический (PA) сигнал высокого разрешения были получены одновременно с помощью синтезированной системы наноматериалов золота.Между тем, доксорубицин гидрохлорид (DOX), эффективное противоопухолевое химиотерапевтическое лекарство, был загружен в мезопористый диоксид кремния [email protected] ₂ посредством электростатического взаимодействия, а именно сил Ван-дер-Ваальса. ^49–51 молекул НА были связаны с [email protected] ₂ наночастиц через амидные связи. Подводя итог, можно сказать, что наши наночастицы DOX- [email protected] ₂ -HA показали отличные перспективы в качестве эффективной платформы для нацеливания на опухоли и химиофотермической синергетической терапии рака полости рта под контролем PAI.

Детали эксперимента

Материалы

Боргидрид натрия (NaBH ₄ ), HAuCl ₄ Тригидрат хлорозавровой кислоты (HAuCl ₄ · 3H ₂ O), бромид цетилтриметиламмония (CTAB), нитрат серебра (AgNO6 _{3 (TEOS) и 3-аминопропилтриэтоксисилан (APTES) были приобретены в Shanghai Sigma-Aldrich. DOX и HA были получены от Ruixi Biological Technology Co., Ltd. Набор для подсчета клеток-8 (CCK-8) был приобретен в Dojindo Laboratories (Япония).Набор LIVE / DEAD Viability / Cytotoxicity Kit был получен от Shanghai Bestbio Biotechnology Co. Ltd. получены из Американской коллекции типовых культур (АТСС). Во всех экспериментах использовалась деионизированная вода (марка Millipore Milli-Q) с удельным сопротивлением 18,2 МОм.}

Синтез наночастиц AuNR

В зависимости от опубликованной программы были синтезированы AuNR и внесены некоторые незначительные модификации. ⁵² Во-первых, семена Au, покрытые CTAB, были получены путем химического восстановления HAuCl ₄ с помощью NaBH ₄ . 7,5 мл 0,1 M CTAB смешивали с 250 мкл 0,01 M HAuCl ₄ , и объем фиксировали на 9,4 мл путем добавления воды. Затем к вышеупомянутому смешанному раствору добавляли 0,6 мл ледяного водного раствора NaBH ₄ (0,01 М) для образования затравок нано-золота, которые перемешивали в течение 2 минут и помещали при 30 ° C на 2 часа. Семена сразу сформировались и использовались в течение 2-5 часов.Раствор для выращивания для владельцев состоит из 200 мл 0,1 M CTAB, 10 мл 0,01 M HAuCl ₄ , 0,8 мл 10 мм AgNO ₃ , 4 мл 0,5 MH ₂ SO ₄ и 1,6 мкл 0,1 М аскорбиновой кислоты. После добавления 500 мкл вышеуказанных обработанных семян, перемешивания в течение двух минут и затем выдерживания при 30 ° C в течение ночи. Затем наночастицы собирали центрифугированием и дважды промывали деионизированной водой со скоростью 8000 об / мин в течение 20 минут каждый раз. Наконец, владельцев диспергировали в 250 мл деионизированной воды.

Синтез [электронной почты]

₂ Наночастиц

Добавьте определенное количество CTAB (0,8 мм) к 250 мл AuNR, полученным выше, и pH повысили до 10 с помощью 0,1 м раствора NaOH, затем перемешивали при 33 ° C в течение получаса для хорошего перемешивания. После этого этапа 750 мкл 20% реагента TEOS, разбавленного метанолом, добавляли к раствору владельца три раза с интервалом в полчаса. После реакции в течение 24 ч полученных хозяев собирали центрифугированием (12000 об / мин, 30 мин).Дважды промывали водой и этанолом и, наконец, диспергировали в 20 мл этанола.

Синтез [электронной почты]

₂ -NH ₂ Наночастицы

Для приготовления амино-модифицированных наночастиц ([email protected] ₂ -NH ₂ ), 50 мкл 3-аминопропилтриэтоксисилана (APTES) было добавлено к вышеупомянутому [email protected] ₂ раствор этанола при 60 ° C в течение 24 ч. Затем его центрифугировали и трижды промывали этанолом. Чтобы удалить поверхностно-активное вещество CTAB, остающееся в порах, [email protected] ₂ -NH ₂ диспергировали в 20 мл этанольного раствора нитрата аммония (8 мг / мл ^-1 ), кипятили с обратным холодильником в течение ночи, затем центрифугировали и промывали. дважды.

Синтез [электронной почты]

₂ Наночастиц

Количество DOX, загруженного в наночастицы [email protected] ₂ -NH ₂ , определяли с помощью спектрофотометра UV-Vis. DOX (20 мл, 1 мг мл ^-1 ) смешивали с наночастицами [email protected] ₂ -NH ₂ (16 мл, 2,5 мг мл ^-1 ) и перемешивали при 30 ° C в течение 24 час После центрифугирования были получены нагруженные DOX [email protected] ₂ -NH ₂ наночастиц, которые трижды промывали деионизированной водой для удаления адсорбированного на поверхности DOX.Свободный DOX в супернатанте определяли спектрофотометром UV-Vis при 480 нм. Эффективность загрузки DOX (LE) рассчитывалась по формуле 1:

Синтез [защищен по электронной почте]

₂ -HA наночастиц

Сначала 20 мг HA диспергировали в 15 мл деионизированной воды и гидратировали в течение 24 часов, а затем смешивали 8 мг EDC и 5 мг NHS и перемешивали в течение 4 часов для активации карбоксильной группы HA. Наконец, [email protected] ₂ добавляли к раствору HA, перемешивали в течение 24 часов, и конечный продукт мог быть получен после промывки на центрифуге.

Характеристика

Морфология и размер полученных наночастиц были охарактеризованы с помощью просвечивающей электронной микроскопии (ПЭМ) (JEM 1400, JEOM, Япония). Согласно инструкциям в руководстве по эксплуатации производителя, используйте анализатор дзета-потенциала (Malvern, UK) для обнаружения распределения дзета-потенциала. Спектры поглощения свободных Dox, AuNR, [email protected] ₂ -NH ₂ , [email protected] ₂ , [email protected] ₂ -HA были получены с использованием спектрометра видимого диапазона (UV-2600, Симадзу, Япония).Лазерное конфокальное сканирование изображений получали с использованием лазерно-конфокального сканирования изображений (Zeiss LSM780, Оберкохен, Германия). Фотоакустическая характеристика (PA) проводилась с помощью самодельной системы мультиспектральной PA-микроскопии (MSPAM).

Эксперименты по высвобождению лекарств

Три части приготовленных [email protected] наночастиц ₂ -HA в равном количестве диспергировали при pH = 5,0 PBS (1,0 мл) и переносили в длительные полупроницаемые диализные мешки при 37 ° C. Количество DOX, высвобожденного в раствор, определяли путем измерения оптической плотности при 480 нм с помощью спектрофотометра UV-Vis через выбранные интервалы времени.Чтобы доказать, что лазерное облучение и лечение гиалуронидазой могут вызывать высвобождение лекарства, были проведены другие эксперименты с использованием тех же процедур. Погрузите образец в PBS с облучением в ближней инфракрасной области (NIR) (808 нм, 2,0 Вт · см ^-2 ) на 5 мин или растворите его в PBS, содержащем гиалуронидазу. Концентрацию DOX в супернатанте оценивали спектрофотометром UV-Vis.

Эксперименты по фототермическому эффекту

Фототермический эффект наночастиц [email protected] ₂ -HA изучался с помощью лазера с длиной волны 808 нм.В качестве источника света использовалось лазерное оборудование с длиной волны 808 нм с регулируемой выходной мощностью (0,5–2 Вт / см ^–2 ) и [электронная почта защищена] ₂ -HA наночастиц (0–200 мкг / мл ^–1 ) с различные концентрации были диспергированы в трубке EP. Используйте цифровой термометр для отслеживания изменений температуры в реальном времени каждые 10 с. Между тем, [email protected] ₂ -HA облучали лазером с длиной волны 808 нм в течение 600 с, а затем естественным образом охлаждали в течение 600 с для оценки фотостабильности.Весь процесс повторялся пять раз. Кроме того, изменение температуры [защищенных по электронной почте] наночастиц ₂ -HA регистрировали при лазерном облучении с длиной волны 808 нм (2,0 Вт · см, ^-2, ) до достижения постоянной температуры. Эффективность фототермического преобразования (η) рассчитывалась по методу Ропера.

Эксперименты с PAI in vitro

Характеристики PA [защищенных по электронной почте] наночастиц ₂ -HA оценивались с помощью нашей системы MSPAM. В нашей системе MSPAM ( Рисунок S1 ) источником энергии для возбуждения материалов был наносекундный импульсный лазер OPO с настраиваемой длиной волны (Continuum, США) и ультразвуковой преобразователь с центральной частотой 25 МГц (Olympus, США). для обнаружения генерируемого акустического сигнала.Кусок медной проволоки был пропитан твердой моделью из агара и затем визуализирован нашей системой MSPAM. Как показано на рис. S2 , самая глубокая глубина медного провода, которую можно было отобразить, может достигать 2,3 мм. Этот результат подтверждает глубину визуализации нашей системы MSPAM. Кроме того, полная ширина на полувысоте (FWHM) функции рассеяния линии (LSF), определяющей латеральное разрешение системы PAI, составляет 37,6 мкм ( Рисунок S3 ). Чтобы проверить линейность сигнала PA в зависимости от [email protected] ₂ -HA наночастиц, 0.2 мл водной суспензии наночастиц ₂ -HA [email protected] с различными концентрациями Au (0, 0,2, 0,4, 0,8 и 1,0 мг мл ^-1 ) добавляли в контейнер с агар-фантомом и оценивали с помощью нашего MSPAM. система. ^53,54 Полное PA-изображение фантома было получено при 808 нм.

Культура клеток

Клеточная линия плоскоклеточной карциномы человеческого языка CAL-27 была выбрана для экспериментов in vitro и in vivo в этом исследовании. Клеточная линия кератиноцитов ротовой полости человека была выбрана для эксперимента in vitro в этом исследовании.Клетки HOK культивировали в среде DMEM с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) в увлажненном инкубаторе (37 ° C, 5% CO ₂ ). Клетки HOK культивировали в среде DMEM: F-12 с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) и 1% пенициллина и стрептомицина в увлажненном инкубаторе (37 ° C, 5% CO ₂ ).

Эксперименты по поглощению клетками

Для исследования способности поглощения [email protected] _{2 наночастиц} -HA, клетки CAL-27 и HOK высевали в 12-луночный планшет на 24 ч, по 2 × 10 ⁵ клеток на каждую лунку.Затем культуральную среду удаляли и [email protected] ₂ наночастиц, [email protected] ₂ -HA наночастиц добавляли в лунку на 2, 4, 8 и 12 часов. Интенсивность флуоресценции клеток измеряли с помощью проточной цитометрии, чтобы исследовать корреляцию поглощения концентрации наночастиц и времени инкубации. Аналогичным образом клетки CAL-27 высевали на чашку со стеклянным дном диаметром 35 мм на 24 часа. Затем наночастицы ₂ -HA добавляли в чашки и инкубировали в течение 2, 4 и 8 часов соответственно.После этого клетки окрашивали DAPI. После 20 мин инкубации клетки трижды промывали PBS, а затем фиксировали 4% параформальдегидом в течение 30 мин при комнатной температуре. Наконец, клетки просматривали под конфокальным микроскопом.

Оценка цитотоксичности in vitro в отношении клеток HOK и клеток CAL-27

Цитотоксичность пустых [защищенных по электронной почте] _{2 наночастиц} -HA, свободных DOX и нагруженных DOX [защита электронной почты] _{2 наночастиц} -HA оценивали с помощью набора для подсчета клеток-8.Клетки HOK высевали в 96-луночный планшет при плотности 3 × 10 ⁴ на лунку и инкубировали в атмосфере 95% воздуха и 5% CO ₂ при 37 ° C с 10% фетальной бычьей сывороткой и 1 % пенициллина и стрептомицина в течение 24 часов. Клетки Cal-27 высевали в 96-луночный планшет при плотности 5 × 10 ⁴ на лунку и инкубировали в атмосфере 95% воздуха и 5% CO ₂ при 37 ° C с 10% фетальной бычьей сывороткой. на 24 ч. Затем добавляли различные концентрации пустых [защищенных по электронной почте] наночастиц, свободных DOX и загруженных DOX [защищенных по электронной почте] ₂ -HA наночастиц, соответственно.В другом планшете суспензии [защищенных по электронной почте] наночастиц ₂ -HA и [защищенных по электронной почте] наночастиц ₂ -HA с различными концентрациями добавляли в клетки CAL-27 с помощью облучения лазером NIR с длиной волны 808 нм в течение 5 мин. В один ряд 96-луночного планшета добавляли культуральную среду только в качестве холостого контроля. В каждую лунку добавляли десять микролитров реагента CCK-8, затем инкубировали в течение 2 часов и считывали значение OD при 450 нм с помощью считывающего устройства для микропланшетов. Жизнеспособность клеток рассчитывалась по проценту значения OD исследуемой группы по сравнению с контрольной группой.

Анализ жизнеспособности живых / мертвых клеток

клеток CAL-27 культивировали в 48-луночном планшете в течение 24 часов, [email protected] суспензию ₂ -HA добавляли в чашки, совместно инкубированные в течение еще 6 часов. Затем клетки CAL-27 облучали лазером с длиной волны 808 нм в течение 5 мин. Затем клетки окрашивали ацетометоксилом казеина (кальцеин-AM) и иодидом пропидия (PI) в течение 15 мин. Флуоресцентные изображения клеток получали с помощью флуоресцентного микроскопа. Λ _ex / λ _em кальцеина-AM и PI составляли 499/515 нм и 495/635 нм, соответственно.

Модель животных и опухолей

Самок голых мышей BALB / c (возраст 4-6 недель) были приобретены в Guangdong Medical Laboratory Animal Center Co., Ltd. Комитет по уходу за животными и их использованию Медицинского университета Гуанчжоу (GY2019-009). Модель опухоли мышей с ксенотрансплантатом OSCC человека была создана путем инъекции 0,1 мл суспензии клеток CAL-27 (4 × 10 ⁶ ) в правый бок самок голых мышей BALB / c.

Мышей использовали для последующих экспериментов до тех пор, пока размер опухоли не достиг приблизительно 80 мм ³ , и объем опухоли рассчитывали согласно следующему уравнению: объем опухоли ( ³ мм) = 0,5 × (длина опухоли) × (опухоль ширина). ² Мыши с ксенотрансплантатом были случайным образом разделены на четыре группы: контрольная группа (инъецированная PBS), группа LASER, группа D [электронная почта защищена] ₂ -HA группа (инъекция 0,2 мл [электронная почта защищена] ₂ — HA, 1 мг / мл ^-1 , на основе иона золота) и [электронная почта защищена] ₂ -HA + LASER группа (инъекция 0.2 мл [защита электронной почты] ₂ -HA, 1 мг мл ^-1 , на основе иона золота). Наночастицы и PBS вводили внутривенно через хвостовую вену. ⁵⁵ Здесь группы лечения PTT были подвергнуты облучению лазером NIR (плотность мощности лазера, 2 Вт см ^-2 ) в течение 5 минут через 8 часов после инъекции.

Эксперименты с PAI in vivo

Для оценки фотоакустических характеристик in vivo [email protected] ₂ -HA для подкожной опухоли CAL-27 голым мышам с опухолью CAL-27 внутривенно вводили предварительно приготовленные наночастицы (200 мкл, 1 мл). мг мл ^-1 ).Что касается PAI, мышей с опухолями вводили внутривенно водный раствор наночастиц под наркоз (с помощью 1% пентобарбитала натрия). PA-изображения очага опухоли были получены в разные интервалы времени (0, 2, 4, 8, 12 и 24 ч) и зафиксированы нашей системой MSPAM с лазерным возбуждением 845 нм.

Гистологические исследования

Для гистологического исследования ткани и опухоли мышей собирали сразу после умерщвления мышей. После этого использовали 4% раствор параформальдегида для фиксации окрашивания гематоксилином и эозином (H&E).Все срезы исследовали с помощью инвертированного светового микроскопа.

Статистический анализ

Данные были проанализированы с помощью дисперсионного анализа (односторонний дисперсионный анализ) с использованием программного обеспечения GraphPad Prism 9 для оценки различий между тестовыми группами. Статистическая значимость была определена как p <0,05. Все данные были представлены как среднее значение ± стандартное отклонение (SD). Все цифры, представленные в этой статье, были получены в результате пяти независимых экспериментов с аналогичными результатами.

Результат и обсуждение

Изготовление [email protected] наночастиц ₂ -HA поясняется на Рисунке 1.Во-первых, мы построили AuNR, покрытые наночастицами мезопористого кремнезема. Затем противоопухолевый препарат DOX был загружен в наночастицы [email protected] ₂ посредством электростатического взаимодействия. Наконец, амин, функционирующий [email protected] ₂ методом пост-прививки, был присоединен к HA посредством EDC-опосредованной реакции амидирования, образуя [email protected] ₂ -HA наночастиц для фототермических и химиотерапевтических применений. Между тем, специфичный для рецептора CD44 эндоцитоз наночастиц также был продемонстрирован на рисунке 1.Когда [email protected] ₂ -HA наночастиц были введены в модель опухоли, конъюгированные молекулы HA могли заставить [email protected] ₂ -HA специфически доставлять в раковые клетки с помощью CD44-HA. Впоследствии оболочка НА была способна разрушаться гиалуронидазой, что запускало высвобождение DOX. Под воздействием БИК-излучения могут быть запущены PAI и фототермическая химиотерапия [email protected] наночастиц ₂ -HA, что привело к синергетическому эффекту для уничтожения раковых клеток.В этом исследовании мы предположили, что загруженное лекарство [email protected] ₂ будет эффективно достигать опухолевого участка за счет эффекта EPR и специфического связывания CD44 с опухолевыми клетками. После связывания с CD44 наночастицы будут интернализованы посредством рецептор-опосредованного эндоцитоза, что, как мы надеемся, приведет к быстрой деградации наночастиц под действием Hyal-1 и резкому высвобождению противоракового препарата для повышения терапевтической эффективности.

Рисунок 1 Схематическое изображение приготовления HA-модифицированных хозяев, покрытых мезопористых наночастиц диоксида кремния в качестве носителя DOX для фотоакустической визуализации (PAI) и фототермической химиотерапии опухолей.

Синтез и характеристика [электронной почты]

₂ -HA

Приготовление AuNR проводилось методом выращивания, опосредованного семенами, который рассматривался как простой и экономичный метод приготовления нанокомпозита. ⁵⁶ Морфология и размер свежеприготовленных AuNR были охарактеризованы с помощью ПЭМ, который показан на рисунке 2A. Изображение ПЭМ показало, что свежеприготовленные AuNR имели форму стержня и очень однородный размер.Соотношение сторон высококачественных AuNR составляло 3,8 (средняя ширина 18 ± 3 нм; длина 75 ± 8 нм). Как показано на рис. S4A , подготовленные хозяева имеют слабую поперечную плазмонную полосу при 510 нм и сильную продольную плазмонную полосу при 750 нм. Однако AuNR требовали дальнейших модификаций в качестве платформ доставки лекарств. Наночастицы мезопористого диоксида кремния широко используются для покрытия AuNR для достижения долгосрочной стабильности, гидрофильности и способности доставки лекарств. ⁵⁷ Как показано на рисунке 2B, ПЭМ-изображение подготовленных [защищенных по электронной почте] наночастиц ₂ ядро-оболочка показало, что владельцы были покрыты оболочками из мезопористого диоксида кремния (толщиной 16 нм), что дает возможность [защищена по электронной почте] ₂ для использования в качестве обычного носителя лекарств.Однако из-за как увеличения показателя преломления окружающей среды, так и изменения геометрической формы наночастиц, ^58,59 пик продольного поверхностного плазмонного резонанса показал небольшое красное смещение (40 нм) после покрытия из диоксида кремния ( Рисунки S4B). и 2E). После добавления DOX и HA оболочка DOX- [email protected] ₂ -HA была немного толще, чем у [email protected] ₂ из-за покрытия HA (рис. 2C). После того, как DOX был поглощен на поверхности нанокомпозита, спектр поглощения DOX- [email protected] ₂ имел небольшой пик около 480 нм, расположенный в том же месте, что и свободный DOX (рис. 2D).Кроме того, как показано на рисунке 2E, при адсорбции DOX наблюдалось дополнительное красное смещение, сопровождающее небольшое затухание полосы. Все результаты показали, что DOX был успешно загружен на поверхность наноносителя на основе AuNR с кэпом mSiO ₂ . Поверхностный заряд наночастиц контролировался прибором динамического светорассеяния (рис. 2F). Поверхностный заряд AuNR составлял +41,16 мг, поскольку молекулы CTAB служили поверхностно-активными веществами игрока. После присоединения мезопористого диоксида кремния потенциал уменьшился до -13.68 мВ, потому что сам мезопористый диоксид кремния был отрицательно заряжен, а потенциал вырос до +28,9 мВ из-за его положительного заряда при подключении к -NH ₂ . После прививки НА посредством ковалентной конъюгации к поверхности [email protected] ₂ дзета-потенциал составлял -34,1 МВ. Этот эффект предполагает, что [адрес электронной почты защищен] ₂ был успешно изменен HA. Как показано на фигуре Рисунок S5 , явления агрегации не было обнаружено после хранения в PBS и среде крови в разные моменты времени, и он оставался темно-коричневым, что привело к стабильности [защищенных по электронной почте] наночастиц ₂ -HA.

Фототермический эффект in vitro

Учитывая, что владельцы обладают коэффициентами поглощения, фототермическая эффективность нанокомпозитов на основе AuNR была дополнительно оценена in vitro с помощью диодного лазера с длиной волны 808 нм. Как показано на фиг. 3A, эффективность фототермического преобразования [email protected] ₂ -HA при различных концентрациях была оценена при облучении лазером 808 нм в течение 5 минут (2 Вт / см ^-2 ). Температура водной суспензии [email protected] ₂ -HA быстро повышалась при увеличении времени лазерного облучения или увеличивающейся концентрации [email protected] ₂ -HA водной ( Рисунок S6A — C ).После освещения 600 с конечная температура водной суспензии [email protected] ₂ -HA увеличивалась на 26,3 ° C при концентрации 200 мкг / мл ^-1 . Между тем, прирост температуры чистой воды незначителен, о чем можно визуально судить по инфракрасным тепловым изображениям готовых продуктов (рис. 3C). Кроме того, эффективность фототермического преобразования стержневого [защищенного по электронной почте] ₂ -HA, очевидно, зависела от мощности лазера (рис. 3B).[Электронная почта защищена] ₂ -HA продемонстрировала превосходную химическую стабильность и стабильные характеристики фототермического преобразования. Стабильность фототермического эффекта оценивалась с помощью пяти циклов включения / выключения лазера. Как показано на рисунках 3D и S6D , температура водной суспензии [защищена по электронной почте] ₂ -HA (100 мкг мл ^-1 , 200 мкг мл ^-1 ) может все еще достигать аналогичного уровня после повторного Облучение NIR лазером в течение пяти циклов, что указывает на привлекательную фототермическую стабильность и возможность повторного использования [email protected] ₂ -HA во время лазерного воздействия на большие расстояния.Эффективность фототермического преобразования (η) является важным параметром, используемым для оценки фототермических агентов. На основе кривой нагрева-охлаждения на Рисунке 3E эффективность фототермического преобразования [email protected] ₂ -HA была рассчитана и составила 49,02% с помощью метода количественной оценки Ропера, ⁶⁰ , что было выше, чем сообщалось ранее. наноматериалы фототермической конверсии, в том числе наночастицы Ag ₂ S (28,35%), ⁶¹ нанокластеры золота (30,0%), ⁶² наноклетки золота (41.7%) ⁶³ и так далее. Благодаря своей выдающейся эффективности фототермического преобразования и фототермической стабильности [email protected] ₂ -HA с высокой фототермической эффективностью имеет большой потенциал PTT при умеренных температурах.

Рисунок 3 Оценка повышения температуры и высвобождение лекарственного средства [email protected] 2 нанокомпозитов на основе . ( A ) Изменение температуры водного раствора [email protected] 2 -HA при облучении лазером NIR (2.0 Вт · см −2 , 808 нм). ( B ) Повышение температуры в водном растворе [email protected] 2 -HA (1,0 мл, 200 мкг мл -1 ) при воздействии лазера NIR в зависимости от плотности мощности. ( C ) ИК-термографические карты полостей, содержащих водный раствор 2 -HA [электронная почта], подвергнутых 10-минутному облучению в ближней инфракрасной области (2,0 Вт / см, -2 , 808 нм). ( D ) Температурная динамика водного раствора [email protected] 2 -HA (1.0 мл, 200 мкг мл -1 ) в течение пяти циклов включения / выключения лазера при облучении лазером NIR (2 Вт · см -2 , 808 нм). ( E ) Фототермический отклик [email protected] 2 -HA водный раствор (1,0 мл, 200 мкг мл -1 ), облученный лазером NIR (2,0 Вт · см -2 , 808 нм) до достижения стабилизированной температуры, а затем выключили лазер. ( F ) Профили высвобождения DOX из [электронная почта] 2 -HA в PBS при различных значениях pH. Данные выражены как среднее ± S D (n = 3).*** P <0,001.

Выпуск DOX из [адрес электронной почты]

₂ -HA

Была построена стандартная кривая DOX (, рисунок S7, ), и концентрация образца была определена на основе стандартной кривой DOX. Нагрузочная способность [email protected] ₂ была оценена путем измерения концентрации DOX в растворе до и после загрузки в наночастицы с помощью спектрофотометра UV-Vis при 480 нм и способности загружать лекарство [email protected] ₂ -HA было 8.0% ± 0,9%. Далее оценивали поведение при высвобождении DOX [защищенных по электронной почте] наночастиц ₂ -HA. Как показано на Рисунке 3F, приблизительно 24,3% DOX высвобождается из [защищенных электронной почтой] наночастиц ₂ -HA в течение 24 часов. Этот результат показал высокое сродство и последующее прочное удерживание поверхности [защищенных электронной почтой] наночастиц ₂ -HA по отношению к молекулам DOX, что полезно для предотвращения преждевременного высвобождения и приводит к устойчивому терапевтическому эффекту in vivo. Чтобы лучше понять влияние NIR-излучения на характеристики высвобождения DOX, [email protected] дисперсию наночастиц ₂ -HA облучали лазером с длиной волны 808 нм (2 Вт · см ^-2 , 5 мин).Как показано на Рисунке 3F, почти 62,3% молекул DOX в конечном итоге были высвобождены из наночастиц ₂ -HA [email protected]. Быстрое высвобождение DOX происходило в основном из-за быстрого повышения температуры [email protected] ₂ дисперсии под БИК-излучением, что способствует тепловому движению молекулы DOX и выходу молекул DOX из мезоканалов [email protected] ₂ наночастицы. ⁶⁴ Кроме того, быстрое высвобождение DOX наблюдалось при pH = 5.0 с гиалуронидазой, а совокупное количество DOX значительно увеличилось до 70,6% в течение 24 часов. Этот эффект может быть связан с тем, что гиалуронидаза показала свою способность расщеплять ГК на мелкие фрагменты и способствовать высвобождению лекарственного средства. Все результаты продемонстрировали, что [защищенный по электронной почте] ₂ -HA может обеспечивать высвобождение с двойным ответом на гиаловый / ближний ИК-спектр, что позволяет минимизировать лекарственную стимуляцию нормальных клеток и повысить противоопухолевую эффективность.

In vitro PAI [защищенный адрес электронной почты]

₂

Высокий коэффициент поглощения [электронной почты] ₂ NIR области делает их эффективными контрастными веществами для PAI.Как показано на рисунке 4A, сигнал PA [защищенных по электронной почте] растворов ₂ усиливался с увеличением концентрации наночастиц, что свидетельствует о зависимости от концентрации. Количественный результат показал хорошо коррелированную линейную зависимость на Фигуре 4В (R ² = 0,97592). Эти результаты позволяют предположить, что [email protected] ₂ являются отличными кандидатами в качестве положительных контрастных агентов PAI.

Рисунок 4 ИАИ и комбинированная терапия in vitro.( A ) PA изображения с разными [email] концентрациями 2 . ( B ) PA линейная зависимость интенсивностей сигналов PA с различными [email protected] 2 концентрациями. ( C ) Относительная жизнеспособность клеток HOK после инкубации с различными концентрациями DOX, [защита электронной почты] 2 и [защита электронной почты] 2 -HA в течение 24 часов. * P <0,05; ** P <0,01; *** P <0,001.( D ) Относительная жизнеспособность клеток CAL-27 после инкубации с различными концентрациями DOX, [электронная почта] 2 и [электронная почта защищена] 2 -HA в течение 24 часов с последующим облучением лазером 808 нм ( 1 Вт см −2 ) в течение 5 мин. ** P <0,01; *** P <0,001. ( E ) Изображения под флуоресцентным микроскопом кальцеина AM (зеленая флуоресценция, живые клетки) и йодида пропидия (PI, красная флуоресценция, мертвые клетки) клеток CAL-27, инкубированных с PBS, LASER, [электронная почта защищена] 2 -HA и [защита электронной почты] 2 -HA + ЛАЗЕР (100 мкг мл -1 ).Масштабная линейка составляет 100 мкм.

Химио-фототермальная терапия in vitro

Благодаря превосходному фототермическому эффекту и исключительной способности загружать DOX [адрес электронной почты] ₂ -HA, его биологические возможности были исследованы. Биосовместимость [email protected] ₂ -HA первоначально была проверена на клетках HOK с помощью стандартного анализа CCK-8 in vitro. Никакой отчетливой цитотоксичности у HOK не наблюдалось даже при более высоких концентрациях до 200 мкг / мл ^-1 после 24 часов лечения [email protected] ₂ -HA в нашем протестированном диапазоне доз, что указывает на превосходную биосовместимость холостого опыта [электронная почта защищенный] ₂ -HA (Рисунок 4C).Чтобы дополнительно подтвердить синергетический терапевтический эффект [защищенный по электронной почте] ₂ -HA, клетки CAL-27 инкубировали с [защищенным по электронной почте] ₂ -HA, свободным DOX и [защищенным по электронной почте] ₂ -HA в различных концентрациях . Цитотоксичность группы [email protected] ₂ -HA была значительно ниже, чем у группы свободного DOX при эквивалентной концентрации DOX, что следует отнести к замедленному высвобождению молекул DOX. Как показано на фиг. 4D, жизнеспособность клеток CAL-27, инкубированных с [email protected] ₂ -HA без облучения лазером NIR, поддерживалась выше 72.76% в этом широком диапазоне концентраций, что еще раз демонстрирует их внутреннюю биосовместимость. Такая низкая цитотоксичность [email protected] ₂ -HA подтолкнула нас к оценке их потенциального терапевтического воздействия на опухолевые клетки посредством желаемого стимула. Однако жизнеспособность клеток резко снижалась с увеличением концентрации материалов из-за комбинированного эффекта индуцированной гипертермии и высвобождения противоопухолевого препарата DOX из жидкого PCM. Напротив, жизнеспособность клеток группы [email protected] ₂ -HA + LASER значительно снизилась.Более 90% раковых клеток были убиты при концентрации частиц 25 мкг / мл ^-1 , когда концентрация частиц увеличилась до 50 мкг / мл ^-1 , почти все клетки CAL-27 были уничтожены. Подводя итог, можно сказать, что [email protected] ₂ -HA + LASER-облучение имело исключительный синергетический терапевтический эффект. Для дальнейшего исследования эффективности фототермической терапии [email protected] ₂ -HA in vitro, клетки CAL-27, культивированные в [email protected] ₂ -HA в разное время, облучали лазером на 808 нм (1 Вт см ⁻² ).Клетки совместно окрашивали кальцеином AM и иодидом пропидия и фотографировали с помощью флуоресцентной микроскопии. Как показано на рисунке 4E, результаты конфокальных флуоресцентных изображений показывают, что летальный эффект фототерапии сохраняется в соответствии с результатами CCK-8.

Способность захвата сотовой связи

Чтобы проверить, что [защищено по электронной почте] наночастицы ₂ -HA могут быть фагоцитированы, были проведены эксперименты по поглощению клетками с помощью клеток HOK и CAL-27, инкубированных с градиентной концентрацией [электронная почта защищена] ₂ -HA в течение различных периодов времени ( 0, 2, 4 и 8 ч).Интенсивность флуоресценции и содержание внутриклеточного DOX контролировали с помощью проточной цитометрии. Как показано на рис. 5A – D, интенсивность флуоресценции DOX значительно увеличивалась при увеличении времени совместной инкубации или повышении концентрации материалов, демонстрируя, что клеточное поглощение можно легко контролировать, регулируя эти параметры. Эти результаты показывают, что ячейки CAL-27 могут принимать [защищенная электронная почта] ₂ -HA. Как первичный рецептор НА, CD44 представляет собой гликопротеин клеточной поверхности, который участвует в различных формах рака и участвует в экстравазации и миграции опухолевых клеток.Клетки CAL-27 экспрессируют высокие уровни CD44, так что ₂ -НА, накопившаяся в НА, опосредует поглощение опухолевыми клетками.

Рис. 5 Исследование поглощения сотовой связи. ( A ) Интенсивность внутриклеточной флуоресценции DOX клеток HOK, измеренная с помощью проточной цитометрии после инкубации клеток со 100 мкг мл -1 [электронная почта защищена] 2 -HA в течение 0, 2, 4 и 8 часов. ( B ) Интенсивность внутриклеточной флуоресценции DOX клеток CAL-27, измеренная с помощью проточной цитометрии после инкубации клеток со 100 мкг мл -1 [электронная почта защищена] 2 -HA в течение 0, 2, 4 и 8 часов.( C ) Интенсивность внутриклеточной флуоресценции DOX клеток HOK, измеренная с помощью проточной цитометрии после инкубации клеток с [email protected] 2 -HA в течение 8 часов. ( D ) Интенсивность внутриклеточной флуоресценции DOX клеток CAL-27, измеренная с помощью проточной цитометрии после инкубации клеток с [email protected] 2 -HA в течение 8 часов. ( E ) Изображения клеток CAL-27 с помощью конфокального лазерного сканирующего микроскопа (CLSM), показывающие совместную локализацию ядра и DOX, снятые через 2, 4, 8 ч после инкубации клеток с [электронная почта защищена] 2 -HA при 37 ° C.Ядро окрашено DAPI. Масштабная линейка составляет 20 мкм.

Для дальнейшего изучения зависящего от времени поглощения клетками и поведения внутриклеточного высвобождения загруженного DOX [электронная почта защищена] ₂ -HA, CLSM-изображения клеток CAL-27, инкубированных с загруженным DOX [электронная почта защищена] ₂ -HA в разные моменты времени (2, 4 и 8 ч) были собраны. Как показано на рисунке 5E, изображения CLSM были получены для красной флуоресценции DOX и синей флуоресценции DAPI после окрашивания ядер.С увеличением времени инкубации количество молекул DOX, собранных в ядре клетки, постепенно увеличивалось, что позволяет предположить, что наночастицы, нагруженные DOX, могут способствовать клеточной интернализации и окончательной доставке DOX к ядрам клетки. Можно сделать вывод, что [email protected] ₂ -HA имеет большой потенциал в качестве многообещающего наноносителя для введения лекарств против раковых клеток полости рта.

In vivo PAI [защищенный адрес электронной почты]

₂ -HA

Воспользуйтесь преимуществом высокой абсорбции NIR, [email protected] ₂ -HA также можно использовать в качестве контрастного агента в PAI, который обеспечивает локальное распределение наночастиц в области опухоли.Как показано на фиг. 6A, мышей-носителей опухоли CAL-27 с объемом опухоли приблизительно 100 мм ³ были случайным образом разделены на четыре группы по пять мышей в каждой группе. Под руководством PAI [email protected] суспензии ₂ -HA (200 мкл, 1 мг / мл ^-1 ) вводили мышам с опухолью путем инъекции в хвостовую вену. Сигналы ПА в области опухоли регистрировались в разные моменты времени (0, 2, 4, 8, 12, 24 ч). Как показано на фиг. 6B и C, сигнал PA постепенно увеличивался в течение первых 8 часов после инъекции в месте опухоли, а затем снижался, что указывало на то, что максимальное обогащение наночастицами в области опухоли было достигнуто через 8 часов после инъекции.

Рисунок 6 In vivo PAI и PTT мышей с опухолью CAL-27. ( A ) Схема развития мышей с опухолью CAL-27 и химиофотермическая терапия. ( B ) PAI в области опухоли после внутривенного введения [email protected] 2 -HA регистрируют в разные моменты времени после внутривенного введения. ( C ) Интенсивность PA в области опухоли после внутривенного введения [email protected] 2 -HA записывают в разные моменты времени после внутривенного введения.( D ) Фототермические изображения мышей с опухолью CAL-27, которым вводили PBS и [электронная почта защищена] 2 -HA (200 мкл, 1 мг / мл -1 ) при облучении лазером NIR (808 нм, 2 Вт см -2 ) в течение 5 минут через 6 часов после инъекции. ( E ) Репрезентативные фотографии мышей с опухолью CAL-27 в разные дни до (0 дней) и после (4, 8, 12, 16 и 20 дней) различных обработок. ( F ) Средняя масса тела мышей из каждой группы после различных обработок: (1) контроль, без обработки; (2) [защищенный адрес электронной почты] 2 -HA, только ввод [защищенный адрес электронной почты] 2 -HA; (3) ЛАЗЕР, облучение только лазером; (4) [защита электронной почты] 2 -HA + ЛАЗЕР, инъекция [защита электронной почты] 2 -HA и облучение лазером.( G ) Относительные объемы опухолей после вышеуказанного лечения, приведенные к их исходным объемам. ** P <0,01; *** P <0,001.

Химиофотермическая терапия in vivo

Вдохновленный превосходным накоплением и противоопухолевым действием in vitro [email protected] ₂ -HA, эффективность терапии in vivo была дополнительно оценена на мышах. После инъекции суспензии частиц через хвостовую вену опухоли полностью подвергаются воздействию лазера с длиной волны 808 нм через 8 часов после инъекции.Температура участка опухоли в группе [email protected] ₂ -HA увеличилась с 28,6 до 55,7 ° C после лазерного облучения (рис. 6D), в то время как температура мышей в группе PBS не увеличилась значительно через 5 минут. лазерного облучения. Как показано на Фигуре 6E, цифровые фотографии опухолей на 12-й день после лечения показывают, что опухоли в группе [email protected] ₂ -HA + LASER полностью удалены. Кривые массы тела четырех групп не показали значительных отличий друг от друга, что означает, что лечение не влияло на нормальное развитие мышей во время нашего эксперимента (фигура 6F).Мы обнаружили, что объем опухолей в контрольных группах быстро увеличивался во время эксперимента (рисунки 6G и 7A). Для сравнения, группы [email protected] ₂ -HA и PBS + LASER показали более медленную скорость роста опухоли, чем контрольные группы, что означает, что терапевтический эффект однократной химиотерапии или только PTT был ограничен. Когда мышей, которым вводили [email protected] ₂ -HA, подвергались воздействию лазера, рост опухоли значительно подавлялся в течение первых 12 дней. Более того, опухоли постепенно удаляли в последние 8 дней эксперимента, что показало, что [email protected] ₂ -HA + LASER имел лучшую противоопухолевую и терапевтическую эффективность, чем любая другая группа, а также синергетический эффект PTT и химиотерапия эффективна.Эти результаты довольно хорошо согласуются с кривыми роста опухоли. Как показано на Фигуре 7B, регистрировали время наблюдения за этими обработанными мышами. После облучения NIR-светом группа [email protected] ₂ -HA была лучшей с точки зрения выживаемости среди всех экспериментальных групп. Сюй и соавторы обнаружили, что многофункциональная наноплатформа, загруженная DOX, использовалась для лечения опухолевой модели рака груди у мышей, напротив, группа химиофотермической терапии показала лучшую противоопухолевую эффективность. ⁶⁵ Кроме того, окрашивание срезов опухоли H&E показало, что большинство клеток в опухолях мышей из группы [email protected] ₂ -HA + LASER были серьезно повреждены, в то время как клетки в опухолях мышей из другой группы лечения группы были уничтожены лишь частично (Рисунки 7C и S8 ). Приведенные выше результаты показали, что [email protected] ₂ -HA обладал хорошими фототермическими свойствами и мог проводить эффективную химиофотермическую терапию. Для дальнейшего подтверждения биосовместимости [email protected] ₂ -HA мышей вскрывали в течение 30 дней после лечения, а их опухоли и основные органы подвергали гистологическому анализу.Как показано на Фигуре 7D, не было очевидного повреждения органов и воспаления по сравнению с группой, получавшей PBS. Безопасность и низкая токсичность [email protected] ₂ -HA также оказались хорошими. Эти результаты показали, что наночастицы ₂ -HA могут служить эффективной платформой для химиофотермической терапии рака in vivo с относительно низкой системной токсичностью.

Фиг. 7 Противоопухолевая активность in vivo различных типов мышей с опухолью CAL-27.( A ) Оптические изображения рассеченных опухолей мышей с опухолью CAL-27 в различных группах лечения на 30-й день после умерщвления мышей. ( B ) Кривые выживаемости мышей с опухолью CAL-27 в различных группах после обработки облучением NIR-светом. ( C ) Гистологический срез опухоли, окрашенный гематоксилином и эозином после внутривенного введения [email protected] 2 -HA. Масштабная линейка составляет 100 мкм. ( D ) Гистологический срез жизненно важных органов (сердце, печень, селезенка, легкие и почки), окрашенный гематоксилином и эозином после внутривенного введения [email protected] 2 -HA.Масштабная линейка составляет 100 мкм.

Заключение

В заключение, мы успешно создали новый [адрес электронной почты] ₂ -HA, который обладает сверхвысоким сильным сигналом PAI, заметным фототермическим преобразованием и способностью загружать лекарственные средства. Эксперименты на клетках in vitro и in vivo на животных показали, что [email protected] ₂ -HA может одновременно оказывать химиотерапевтический и фототермический эффект под воздействием лазерного излучения. В целом, эта [электронная почта] платформа PTT ₂ -HA в сочетании с химиотерапией продемонстрировала огромный потенциал в качестве нанотерано-диагностического средства для диагностики и лечения высокоточной терапии рака.Однако животная модель нашего исследования представляет собой модель обратно-внематочной трансплантированной опухоли у мышей с опухолью, которая в основном ограничена несовершенством устройства визуализации и устройства для лечения. В дальнейшем мы будем совершенствовать экспериментальное оборудование и проводить комплексные исследования по диагностике и лечению первичного рака полости рта.

Благодарности

Это исследование поддержано Гуандунским фондом фундаментальных и прикладных фундаментальных исследований (2020A1515011104), проектом Гуандунского научно-технологического плана (2020A1414010329), проектом Гуанчжоуского научно-технологического плана (202102020140), проектом Гуанчжоу Ливаньского научно-технологического плана. (2015) и Национальный фонд естественных наук Китая (11704082).

Раскрытие информации

Авторы сообщили об отсутствии конфликта интересов в этой работе.

Список литературы

1. Карлайл Дж. У., Рамалингам СС. Знаменательный год для иммунотерапии и таргетной терапии. Нат Рев Клин Онкол . 2019; 16 (2): 79–80. DOI: 10.1038 / s41571-018-0138-4

2. Li C, Zhang Y, Li Z, et al. Светочувствительные биоразлагаемые наногрески для тераностики рака. Adv Mater . 2018; 30 (8). DOI: 10.1002 / adma.201706150

3. Ли И, Данг Дж, Лян Цюй, Инь Л.Термочувствительная доставка окиси углерода (СО) ускоряет метаболическое истощение раковых клеток в сторону изменения устойчивости к химиотерапии. ACS Cent Sci . 2019; 5 (6): 1044–1058. DOI: 10.1021 / acscentsci.9b00216

4. Ротенберг С.М., Эллисен Л.В. Молекулярный патогенез плоскоклеточного рака головы и шеи. Дж Клин Инвест . 2012. 122 (6): 1951–1957. DOI: 10.1172 / jci59889

5. Чи А.С., Дэй Т.А., Невилл Б.В. Рак полости рта и плоскоклеточный рак ротоглотки — обновленная информация. CA Cancer J Clin . 2015; 65 (5): 401–421. DOI: 10.3322 / caac.21293

6. Графтон-Кларк С., Чен К.В., Уилкок Дж. Диагностика и задержки направления в первичную медико-санитарную помощь по поводу плоскоклеточного рака полости рта: систематический обзор. Br J Gen Pract . 2019; 69 (679): e112 – e126. DOI: 10.3399 / bjgp18X700205

7. Лусада-Фернандес Ф., Рападо-Гонсалес О., Лопес-Седрун Дж. Л., Лопес-Лопес Р., Муйнело-Ромай Л., Суарес-Кункейро М. М.. Жидкая биопсия при раке полости рта. Int J Mol Sci . 2018; 19 (6): 1704.DOI: 10.3390 / ijms1⁰⁴

8. Гош Р.Д., Паттатейил А., Ройчоудхури С. Функциональный ландшафт дисрегулируемых микроРНК при плоскоклеточной карциноме полости рта: клинические последствия. Передний Oncol . 2020; 10: 619. DOI: 10.3389 / fonc.2020.00619

9. Косуги А., Касахара М., Ян Л., Накамура-Такахаши А., Шибахара Т., Мори Т. Метод диагностики новообразований по количественному значению флуоресценции. Научная репутация . 2019; 9 (1): 7833. DOI: 10.1038 / s41598-019-44287-z

10.Wezgowiec J, Wieczynska A, Wieckiewicz W, et al. Польский прополис — химический состав и биологические эффекты в раковых клетках и макрофагах языка. Молекулы . 2020; 25 (10): 2426. DOI: 10.3390 / молекулы25102426

11. Брей Ф., Ферли Дж., Сурджоматарам И., Сигель Р.Л., Торре Л.А., Джемаль А. Глобальная статистика рака 2018: оценки GLOBOCAN заболеваемости и смертности от 36 видов рака в 185 странах во всем мире. CA Cancer J Clin . 2018; 68 (6): 394–424. DOI: 10.3322 / caac.21492

12.Li C, Liu S, Yan R, Han N, Wong KK, Li L. Ось CD54-NOTCh2 контролирует инициирование опухоли и функции раковых стволовых клеток при раке простаты человека. Тераностика . 2017; 7 (1): 67–80. DOI: 10.7150 / thno.16752

13. Грол Дж., Шелленберг М., Дреер К., Майер-Хайн Л. Глубокое обучение для биомедицинской фотоакустической визуализации: обзор. Фотоакустика . 2021; 22: 100241. DOI: 10.1016 / j.pacs.2021.100241

14. Борода П. Биомедицинская фотоакустическая визуализация. Интерфейс Focus .2011. 1 (4): 602–631. DOI: 10.1098 / rsfs.2011.0028

15. Hoelen CG, de Mul FF, Pongers R, Dekker A. Трехмерная фотоакустическая визуализация кровеносных сосудов в ткани. Опт. Письмо . 1998. 23 (8): 648–650. DOI: 10.1364 / ol.23.000648

16. Xiong J, Feng J, Qiu L, et al. Наночастицы PLGA, нагруженные SDF-1, для целевой фотоакустической визуализации и фототермической терапии метастатических лимфатических узлов при плоскоклеточной карциноме языка. Int J Pharm . 2019; 554: 93–104. DOI: 10.1016 / j.ijpharm.2018.10.064

17. Фатакдавала Х, Поти С., Чжоу Ф. и др. Мультимодальная визуализация рака полости рта in vivo с использованием времени жизни флуоресценции, фотоакустических и ультразвуковых методов. Биомед Опт Экспресс . 2013. 4 (9): 1724–1741. DOI: 10.1364 / BOE.4.001724

18. Muhanna N, Jin CS, Huynh E, et al. Фототераностические наночастицы порфирина позволяют визуализировать и целенаправленно лечить рак головы и шеи на клинически значимых моделях. Тераностика . 2015; 5 (12): 1428–1443.DOI: 10.7150 / thno.13451

19. Табиш Т.А., Дей П., Моска С. и др. Интеллектуальные золотые наноструктуры для световой тераностики рака: сочетание оптической диагностики с фототермической терапией. Научно-исследовательский центр . 2020; 7 (15): 11. DOI: 10.1002 / advs.2011

20. Sun J, Li Y, Teng Y, Wang S, Guo J, Wang C. Высвобождение ингибитора HSP90 под контролем ближнего инфракрасного диапазона из полого мезопористого наноуглерода для синергетической фототермической терапии опухолей под контролем фотоакустической визуализации. Наноразмер .2020; 12 (27): 14775–14787. DOI: 10.1039 / d0nr02896g

21. Цай К., Чжан В., Чжан Дж., Ли Х., Хан Х., Чжай Т. Дизайн полых золотых наностержней с регулируемым соотношением сторон для мультимодальной визуализации и комбинированной химио-фототермической терапии во втором окне ближнего инфракрасного диапазона. Интерфейсы приложения ACS Mater . 2018; 10 (43): 36703–36710. DOI: 10.1021 / acsami.8b12758

22. He Y, Wan J, Yang Y, et al. Многофункциональные покрытые полипирролом мезопористые нанокомпозиты TiO2 для фототермических, сонодинамических и химиотерапевтических процедур и двухрежимной ультразвуковой / фотоакустической визуализации опухолей. Adv Healthc Mater . 2019; 8 (9): e1801254. DOI: 10.1002 / adhm.201801254

23. Хирш Л. Р., Стаффорд Р. Дж., Бэнксон Дж. А. и др. Термотерапия опухолей в ближнем инфракрасном диапазоне с помощью наноболочки под контролем магнитного резонанса. Proc Natl Acad Sci U S A . 2003. 100 (23): 13549–13554. DOI: 10.1073 / pnas.2232479100

24. Чу К.Ф., Дюпюи Д.Е. Термическая абляция опухолей: биологические механизмы и достижения в терапии. Нат Рев Рак . 2014. 14 (3): 199–208. DOI: 10.1038 / nrc3672

25.Нам Дж., Сон С., Очил Л. Дж., Куай Р., Швендеман А., Мун Дж. Дж. Комбинация химиофотермической терапии вызывает противоопухолевый иммунитет против метастатического рака на поздних стадиях. Нац Коммуна . 2018; 9 (1): 1074. DOI: 10.1038 / s41467-018-03473-9

26. Поустчи Ф., Амани Х., Ахмадиан З. и др. Комбинированная терапия смертельных заболеваний инъекционными гидрогелями: от концепции до медицинского применения. Adv Healthc Mater . 2021; 10 (3): e2001571. DOI: 10.1002 / adhm.202001571

27. Шринивас ПР, Баркер П., Шривастава С.Нанотехнологии в раннем обнаружении рака. Лаборатория Инвест . 2002. 82 (5): 657–662. DOI: 10.1038 / labinvest.3780460

28. Форрест М.Л., Вон С.Й., Малик А.В., Квон Г.С. Высвобождение in vitro ингибитора mTOR рапамицина из мицелл поли (этиленгликоль) -b-поли (эпсилон-капролактон). J Control Release . 2006. 110 (2): 370–377. DOI: 10.1016 / j.jconrel.2005.10.008

29. Ван М., Тану М. Нацеливание наночастиц на рак. Pharmacol Res . 2010. 62 (2): 90–99.DOI: 10.1016 / j.phrs.2010.03.005

30. Yingchoncharoen P, Kalinowski DS, Richardson DR. Системы доставки лекарств на основе липидов в терапии рака: что есть и что еще предстоит. Pharmacol Rev . 2016; 68 (3): 701–787. DOI: 10.1124 / пр.115.012070

31. Qiu L, Larson TA, Vitkin E, et al. Этикетки со светорассеиванием из золотых наностержней для биомедицинской визуализации. Биомед Опт Экспресс . 2010. 1 (1): 135–142. DOI: 10.1364 / BOE.1.000135

32. Джабин Ф., Наджам-уль-Хак М., Джавид Р., Хак С.В., Бонн Г.К.Au-наноматериалы как лучший выбор для фототермической терапии в ближнем инфракрасном диапазоне. Молекулы . 2014. 19 (12): 20580–20593. DOI: 10,3390 / молекулы1

580

33. Беджинс Б., Алькудия А., Агилера-Веласкес Р. и др. Разработка высокостабилизированных нанокомпозитных красок на основе биоразлагаемой полимерной матрицы и наночастиц золота для струйной печати. Научная репутация . 2019; 9 (1): 16097. DOI: 10.1038 / s41598-019-52314-2

34. Беджинс Б., Алькудия А., Агилера-Веласкес Р. и др. Авторская поправка: разработка высокостабилизированных нанокомпозитных красок на основе биоразлагаемой полимерной матрицы и наночастиц золота для струйной печати. Научная репутация . 2020; 10 (1): 19793. DOI: 10.1038 / s41598-020-76435-1

35. Liu L, Xie HJ, Mu LM, et al. Функциональные наностержни хлорина и золота позволяют лечить рак груди с помощью фототермической / фотодинамической терапии. Int J Nanomedicine . 2018; 13: 8119–8135. DOI: 10.2147 / IJN.S186974

36. Ян З., Сонг Дж., Дай Й. и др. Самосборка полупроводниково-плазмонных наночастиц золота с улучшенными оптическими свойствами для фотоакустической визуализации и фототермической терапии. Тераностика .2017; 7 (8): 2177–2185. DOI: 10.7150 / thno.20545

37. Zhang K, Zhou D, Wang Z, Zhang Y, He P. Гибридные мезопористые наносферы кремнезема, модифицированные поли (NIPAM-co-AA) для доставки лекарств. Нанотехнологии . 2019; 30 (35): 355604. DOI: 10.1088 / 1361-6528 / ab209d

38. Кумар Б., Мурали А., Бхарат А.Б., Гири С. Нанокомпозиты с повышающим преобразованием, модифицированные гуаровой камедью, для лечения колоректального рака посредством ферментативно-зависимого высвобождения лекарственного средства и фотодинамической терапии под действием БИК. Нанотехнологии .2019; 30 (31): 315102. DOI: 10.1088 / 1361-6528 / ab116e

39. Li Z, Zhang Y, Feng N. Мезопористые наночастицы кремнезема: синтез, классификация, загрузка лекарств, фармакокинетика, биосовместимость и применение в доставке лекарств. Заключение Эксперта Доставка лекарств . 2019; 16 (3): 219–237. DOI: 10.1080 / 17425247.2019.1575806

40. Рамасами Т., Руттала Х.Б., Сундарамурти П. и др. Мультимодальная наноплатформа с нанооболочкой селена [защищена по электронной почте] для чувствительной к ближнему инфракрасному излучению химио-фототермической терапии против метастатического рака молочной железы. NPG Asia Mater . 2018; 10 (4): 197–216. DOI: 10.1038 / s41427-018-0034-5

41. Тарн Д., Эшли К.Э., Сюэ М., Карнес Е.К., Цинк Д.И., Бринкер С.Дж. Наноносители из мезопористых наночастиц кремнезема: биофункциональность и биосовместимость. Acc Chem Res . 2013. 46 (3): 792–801. DOI: 10.1021 / ar3000986

42. Ли Дж. Э., Ли Н., Ким Х и др. Однородные мезопористые наночастицы диоксида кремния, легированные красителем, украшенные множеством нанокристаллов магнетита для одновременной улучшенной магнитно-резонансной томографии, флуоресцентной визуализации и доставки лекарств. Дж. Ам Хем Соц . 2010. 132 (2): 552–557. DOI: 10.1021 / ja_3q

43. Fang Z, Li X, Xu Z, et al. Модифицированные гиалуроновой кислотой мезопористые суперпарамагнитные наночастицы Fe3O4, покрытые диоксидом кремния, для адресной доставки лекарств. Int J Nanomedicine . 2019; 14: 5785–5797. DOI: 10.2147 / IJN.S213974

44. Фонг Ю.Т., Чен Ч., Чен Дж. П. Внутриопухолевая доставка доксорубицина на фолат-конъюгированном оксиде графена путем формирования термочувствительного гидрогеля in-situ для терапии рака груди. Наноматериалы .2017; 7 (11). DOI: 10.3390 / nano7110388

45. Чен Дж, Чжоу Дж, Лу Дж, Сюн Х, Ши Х, Гонг Л. Значение экспрессии CD44 при раке головы и шеи: системный обзор и метаанализ. BMC Рак . 2014; 14:15. DOI: 10.1186 / 1471-2407-14-15

46. Ван З., Сау С., Алсааб Х.О., Айер А.К. Направленная CD44 платформа доставки наномицеллярной нагрузки для избирательного противоракового действия и опухолеспецифической визуализации тройного отрицательного рака молочной железы. Наномедицина . 2018; 14 (4): 1441–1454.DOI: 10.1016 / j.nano.2018.04.004

47. Huang S, Li C, Wang W, et al. Опосредованные пептидом A54 функционализированные золотые наноклетки для адресной доставки DOX в качестве комбинированной фототермической химиотерапии рака печени. Int J Nanomedicine . 2017; 12: 5163–5176. DOI: 10.2147 / IJN.S131089

48. Рамасами Т., Руттала Х.Б., Гупта Б. и др. Интеллектуальные химические наноразмерные системы доставки лекарств для системных приложений: всесторонний обзор. J Control Release . 2017; 258: 226–253.DOI: 10.1016 / j.jconrel.2017.04.043

49. Holub AR, Huo A, Patel K, Thakore V, Chhibber P, Erogbogbo F. Оценка преимуществ и недостатков быстро созданных сверхбольших трехмерных сфероидов рака молочной железы: исследования с химиотерапевтическими средствами и наночастицами. Int J Mol Sci . 2020; 21 (12): 4413. DOI: 10.3390 / ijms21124413

50. Сингх Н., Саллем Ф., Мирджолет С. и др. Модифицированные полидофамином суперпарамагнитные наночастицы оксида железа в качестве многофункционального наноносителя для целенаправленного лечения рака простаты. Наноматериалы . 2019; 9 (2): 138. DOI: 10.3390 / nano38

51. Li L, He S, Yu L и др. Кодовая доставка DOX и миРНК наночастицами фолат-биотин-кватернизованного крахмала для содействия синергетическому подавлению клеток рака легких человека. Доставка лекарств . 2019; 26 (1): 499–508. DOI: 10.1080 / 10717544.2019.1606363

52. Ван Л., Лю Ю., Ли В. и др. Селективное нацеливание золотых наностержней на митохондрии раковых клеток: значение для терапии рака. Nano Lett .2011. 11 (2): 772–780. DOI: 10.1021 / nl103992v

53. Чжан Дж., Чен Х. Б., Чжоу Т. и др. Точки из полупроводящего полимера на основе PIID-DTBT с широким и сильным оптическим поглощением в области видимого света: высокоэффективные контрастные вещества для многомасштабной и многоспектральной фотоакустической визуализации. Нано Рес . 2017; 10 (1): 64–76. DOI: 10.1007 / s12274-016-1266-8

54. Chen HB, Zhang J, Chang KW и др. Высокоабсорбирующие мультиспектральные полимерные наночастицы ближнего инфракрасного диапазона из одной сопряженной основы для фотоакустической визуализации и фототермической терапии. Биоматериалы . 2017; 144: 42–52. DOI: 10.1016 / j.biomaterials.2017.08.007

55. Ruttala HB, Ramasamy T., Ruttala RRT, et al. Мультиметаллические наночастицы ZnCuO, нацеленные на митохондрии, и IR780 для эффективного фотодинамического и фототермического лечения рака. J Mater Sci Technol . 2021. 86: 139–150. DOI: 10.1016 / j.jmst.2021.01.035

56. Никообахт Б., Эль-Сайед М. Механизм получения и роста золотых наностержней (NR) с использованием метода роста, опосредованного семенами. Chem Mater .2003; 15 (10): 1957–1962. DOI: 10,1021 / см020732l

57. Хуан В.Т., Чан М.Х., Чен Х, Сяо М., Лю Р.С. Тераностический нанопузырьк, инкапсулирующий гибридную наносистему с повышающим преобразованием плазмонов для лечения рака. Тераностика . 2020; 10 (2): 782–796. DOI: 10.7150 / thno.38684

58. Энглебьен П, Ван Хунакер А, Верхас М, Хлебцов Н.Г. Достижения в области высокопроизводительного скрининга: мониторинг биомолекулярного взаимодействия в режиме реального времени с коллоидными металлическими наночастицами. Грохот с высокой пропускной способностью Comb Chem .2003. 6 (8): 777–787. DOI: 10.2174/138620703771826955

59. Сигель Дж., Крайкар Р., Кольска З., Гнатович В., Сворчик В. Отжиг наноструктур золота, напыленных на политетрафторэтилен. Nanoscale Res Lett . 2011; 6: 588. DOI: 10.1186 / 1556-276X-6-588

60. Ропер Д.К., Ан В., Хёпфнер М. Микромасштабная теплопередача, передаваемая поверхностными плазмонными резонансными наночастицами золота. J Phys Chem C Интерфейсы для нанометров . 2007. 111 (9): 3636–3641. DOI: 10.1021 / jp064341w

61.Ли С, Ян XQ, Ан Дж и др. Интеллектуальный наноноситель, управляемый светом в ближней инфракрасной области, с обратимым полипептидным клапаном для направленной флюоресцентно-фотоакустической бимодальной химиофотермической терапии под контролем визуализации. Тераностика . 2019; 9 (25): 7666–7679. DOI: 10.7150 / thno.37047

62. Ким Дж., Чун Ш., Аморнкитбамрунг Л. и др. Кластеры наночастиц золота для исследования терапевтической эффективности против рака простаты под воздействием ближнего инфракрасного излучения. Нано Конверг .2020; 7 (1): 5. DOI: 10.1186 / s40580-019-0216-z

63. Xu X, Chong Y, Liu X и ​​др. Многофункциональные нанотераностические золотые наноклетки для радио / фотодинамической / фототермической синергетической терапии под управлением фотоакустической визуализации. Acta Biomater . 2019; 84: 328–338. DOI: 10.1016 / j.actbio.2018.11.043

64. Wang LM, Sun Q, Wang X и др. Использование полых углеродных наносфер в качестве индуцированного светом генератора свободных радикалов для преодоления устойчивости к химиотерапии. Дж. Ам Хем Соц . 2015; 137 (5): 1947–1955.DOI: 10.1021 / ja511560b

65. Xu C, Feng Q, Yang H, et al. Управляемая светом система доставки мезенхимальных стволовых клеток для фотоакустической визуализации и химиофотермической терапии тройного отрицательного рака молочной железы. Научно-исследовательский центр . 2018; 5 (10): 1800382. DOI: 10.1002 / advs.201800382

Криптококкоз |

Криптококкоз у кошек

Отредактировано в ноябре 2016 г.

Руководство по криптококкозу у кошек было впервые опубликовано в J Feline Med Surg 2013, 15: 611-618 by Maria Grazia Pennisi et al.Настоящие правила были обновлены Марией Грацией Пенниси.

Сводка

Криптококкоз — наиболее распространенное системное грибковое заболевание кошек во всем мире; это вызвано комплексом видов C. neoformans-C.gattii , который включает восемь генотипов и несколько подтипов (штаммов) с различным географическим распространением, патогенностью и чувствительностью к антимикробным препаратам. Криптококкоз — незаразное, редкое или спорадическое заболевание; кошки заражаются зараженной окружающей средой.

Прогноз в большинстве случаев благоприятный при условии, что диагноз поставлен достаточно рано (до распространения или до развития необратимых поражений), а пациенты и владельцы сотрудничают, чтобы обеспечить длительный курс лечения (месяцы) и последующее наблюдение (годы).

Базидиоспоры представляют собой инфекционные разрастания криптококка , поскольку они проникают в дыхательную систему и вызывают первичную инфекцию. Бессимптомная колонизация дыхательных путей встречается чаще, чем клиническое заболевание.Птичьи гуано, особенно голубиный помет, создают благоприятные условия для размножения C. neoformans , но оба вида Cryptococcus связаны с гниющей растительностью, такой как листья эвкалипта.

Криптококкоз, вызываемый C. neoformans или C. gattii , клинически неотличим. Заболевание может проявляться в нескольких различных клинических формах, включая назальную форму, форму ЦНС (которая может происходить из носовой формы или возникать независимо), кожную форму и системную форму.Постулируются географические различия в распространенности некоторых клинических проявлений как следствие распределения генотипов с разной вирулентностью.

Простым и надежным тестом для диагностики криптококкоза является обнаружение антигена в биологических жидкостях. В качестве альтернативы образцы биопсии могут быть взяты из очагов поражения и отправлены на цитологию, посев, гистопатологию и ПЦР. Только изоляция и ПЦР дают возможность идентифицировать участвующие виды и генотип.

Руководства по лечению не установлены, и выбор подходящего противогрибкового препарата зависит от многих факторов, в том числе от согласия владельца. Амфотерицин B, кетоконазол, флуконазол и итраконазол использовались для лечения кошек. Хирургическое удаление любых узелков, расположенных на коже, слизистой оболочке носа или полости рта, является ценным подспорьем у кошек, проходящих медикаментозное лечение. Как правило, лечение рекомендуется до получения отрицательного результата теста на антиген.

Присутствие птичьих гуано, особенно голубиного помета, и некоторых гниющих растительных субстратов, таких как листья эвкалипта, можно рассматривать как фактор риска, но эффективных профилактических мер продемонстрировано не было.Вакцины недоступны.

Свойства агента

Криптококкоз кошек (КК), обнаруженный более века назад, представляет собой незаразное системное грибковое заболевание, передающееся из загрязненной окружающей среды. По этой причине это не считается зоонозом; животные могут служить дозорным хозяином.

FC вызывается базидиомицетными дрожжами из рода Cryptococcus , принадлежащих к C. neoformans-C.gattii комплекс . Предыдущая классификация выделила пять серотипов (A, B, C, D, AD) в соответствии с антигенными характеристиками капсульного полисахарида (Sykes and Malik, 2012). Обновленная номенклатура, основанная также на генотипировании, различает два основных вида, поражающих кошек: C. neoformans , включая разновидности C. n. вар. grubii (бывший серотип A) и C. n. вар. neoformans (бывший серотип D) — и C. gattii (бывшие серотипы B и C). Согласно молекулярной характеристике изоляты из C. neoformans-C. Комплекс gattii включает восемь генотипов и несколько подтипов (штаммов) с различным географическим распространением, патогенностью и чувствительностью к антимикробным препаратам (Lester et al., 2011).

Инфекционные пропагулы небольшого размера, такие как базидиоспоры (<2 мкм) и высушенные дрожжевые клетки (<3 мкм), легко распространяются воздушным потоком и могут проникать в дыхательную систему, где происходит первичная инфекция.Гриб может дифференцироваться на несколько морфологических форм, включая дрожжи, хламидоспоры, псевдогифы и гифы, при определенных условиях, но обычно он присутствует в дрожжевой форме у млекопитающих-хозяев, размножаясь путем митоза в тканях животных (Alspaugh et al., 2000; Lin and Heitman, 2006 г.).

Редко сообщалось о других видах: C. albidus , который может поражать кошек с ослабленным иммунитетом, и C. magnus , выделенный у кошек, страдающих отитом (Kano et al., 2004, 2008).

Эпидемиология

Криптококкоз поражает людей, кошек, собак, хорьков, лошадей, коз, овец, крупный рогатый скот, дельфинов, птиц, коал и других сумчатых животных (Sykes and Malik, 2012). Он распространен во всем мире и чаще встречается у кошек, чем у собак (McGill et al., 2009).

К сожалению, Cryptococcus обычно не идентифицируется на видовом и молекулярном уровне при рутинном диагностическом отборе проб, а данные о болезни кошек в Европе взяты из отчетов об отдельных случаях или небольших серий случаев, поскольку болезнь обычно возникает спорадически (Castella et al., 2008). Более крупные ретроспективные исследования доступны только в Канаде, Австралии и Калифорнии (Craig et al., 2002; O’Brien et al., 2004; Duncan et al., 2005, 2006; McGill et al., 2009; Sykes et al., 2010).

Заболевание обычно бывает редким или спорадическим. Однако в 1999 г. крупномасштабная вспышка криптококкоза, вызванная C. gattii , впервые затронула людей, наземных (собаки, кошки, хорьки, ламы, лошади, птицы) и морских (морские свиньи Phocoenoides dalli ). ) животные; это произошло на юге острова Ванкувер, Британская Колумбия, Канада, в регионе, характеризующемся влажной мягкой зимой и сухим теплым летом.В настоящее время хорошо известно, что C. g attii широко распространен во всем мире на тихоокеанском побережье Северной Америки. В Европе о нем сообщили из Австрии, Дании, Франции, Германии, Греции, Италии, Нидерландов, Португалии, Испании, Швеции и Великобритании (Lester et al., 2011). Также C. n. вар. grubii распространен по всему миру и обычно выделяется от пораженных особей у различных видов животных. C. neoformans считается космополитическим условно-патогенным микроорганизмом в городских популяциях человека, тогда как C.gattii — настоящий патоген, более распространенный в сельской местности (Sykes and Malik, 2012).

Воздействие окружающей среды и бессимптомная колонизация дыхательных путей более распространены, чем клиническое заболевание (Malik et al., 1997b; Connolly et al., 1999). Бессимптомное носительство C. gattii было обнаружено у 4,3% кошек, 1,1% собак и 2% диких животных (белок), пойманных в ловушку в Британской Колумбии (Bartlett et al., 2003; Duncan et al., 2005). .

1. neoformans экология обычно связана с присутствием птичьих гуано, особенно голубиного помета, который создает благоприятные условия для митотической амплификации и размножения гриба, но оба вида Cryptococcus связаны с гниющей растительностью, такой как листья эвкалипта. (Fortes et al., 2001). Голуби служат переносчиками C. neoformans , которые, вероятно, способствуют распространению во всем мире, поскольку они несут Cryptococcus на своих клювах, перьях и ногах (Pal, 1989). Животные, растения, почвы и водные пути являются источниками, откуда может заразиться потенциальный патоген.

Кошки в пять-шесть раз чаще подвержены этой болезни, чем собаки, и в три раза больше, чем лошади (McGill et al., 2009). Ретроспективные исследования кошачьих имели тенденцию показывать преобладание у мужчин, хотя этот результат не был подтвержден в других исследованиях (Malik et al., 1992; Flatland et al., 1996; Jacobs et al., 1997; Гердс-Гроган и Дэйрелл-Харт, 1997; Лестер и др., 2004; МакГилл и др., 2009; Сайкс и др., 2010). Породные породы, такие как рэгдолл, бирманская, сиамская и гималайская, считались более подверженными заболеванию, чем домашние кошки, но, опять же, это открытие не было подтверждено в более поздних исследованиях (Malik et al., 1992; O’Brien et al., 2004; McGill. и др., 2009; Сайкс и др., 2010; Триведи и др., 2011). В отличие от других видов животных, у которых инфекцией заражаются обычно молодые люди, могут поражаться кошки любого возраста (Malik et al., 1992; McGill et al., 2009). Сезонные тенденции в диагностике инфекции не наблюдаются (McGill et al., 2009). Кроме того, образ жизни не является фактором риска — заболевание было зарегистрировано и у домашних кошек.

Патогенез

Cryptococcus — это прежде всего патоген, передающийся воздушно-капельным путем, а носовая полость обычно является первичным очагом инфекции у кошек и собак. В большинстве случаев наблюдается только субклиническая колонизация без инвазии эпителия (Duncan et al., 2005). Когда происходит инвазия слизистых оболочек, заболевание развивается локально и / или системно. Как у людей, так и у кошек инфекция может возникнуть в результате проглатывания высушенных дрожжевых клеток или, реже, кожной инокуляции грибковых форм. Инкубационный период варьируется от месяцев до лет, и источник инфекции часто остается неизвестным. Вирулентность (генотип) и нагрузка вдыхаемых организмов влияют на исход инфекции.

Из верхних дыхательных путей инфекция может распространяться локально в ЦНС через решетчатую кость, а в редких случаях — в нижние дыхательные пути или системно (Martins et al., 2011).

Существуют чувствительные к температуре штаммы, которые не могут расти при температурах > 37,0 ° C и могут вызывать инфекции только на участках тела, где температура ниже (кожа, нос, мошонка) (Bemis et al., 2000; Lin, 2009 г.).

Иммунитет

Антитела, вырабатываемые против капсульных антигенов, не обладают защитным действием. Стойкие инфекции могут возникать из-за того, что капсула дрожжевых форм Cryptococcus подавляет фагоцитоз, а другие факторы вирулентности, такие как выработка меланина, защищают дрожжевые клетки от окислительного повреждения.Следовательно, он способен выживать внутри фагоцитарных клеток, таких как макрофаги и нейтрофилы, и может распространяться вместе с этими клетками (Urban et al., 2006; Lester et al., 2011; Tvedi et al., 2011).

Некоторые исследования показали, что криптококкоз имеет более высокую распространенность или менее благоприятный исход у кошек, инфицированных FeLV или FIV (Gerds-Grogan and Dayrell-Hart, 1997; Jacobs et al., 1997), но этот вывод не разделяется другие (Малик и др., 1992; О’Брайен и др., 2004, 2006; Норрис и др., 2007; Сайкс и др., 2010). Заболевание было зарегистрировано у кошек, получающих химиотерапию или с сопутствующей оппортунистической инфекцией, поэтому нельзя исключить роль иммунокомпетентности в патогенезе ФК (Tvedi et al., 2011; Graham et al., 2011).

Клинические признаки

Криптококкоз, вызываемый C. neoformans или C. gattii , клинически неотличим.

Это заболевание может проявляться в нескольких различных клинических формах, включая назальную форму, форму ЦНС (которая может происходить из носовой формы или возникать независимо), кожную форму и системную форму.Постулируются географические различия в распространенности некоторых клинических проявлений как следствие распределения генотипов с разной вирулентностью. Отклонения от нормы в анализах крови неспецифические, если они присутствуют, что свидетельствует о воспалительном процессе.

Рис.1 Носовой криптококкоз — хронические монолатеральные выделения из носа и легкая деформация носа. Предоставлено Марией Грации Пенниси

Носовая форма

Носовая форма является наиболее часто встречающейся у кошек хронической сино-носовой болезнью, проявляющейся либо отдельно, либо вместе с местным распространением на кожу, подкожную клетчатку, кости и региональные (поднижнечелюстные) лимфатические узлы (Malik et al., 1992; О’Брайен и др., 2004 г .; McGill et al., 2009). Он вызывает отек носа и лица, за которым следует глубокая незаживающая язва с оттоком студенистого экссудата, хронические выделения из носа (монолатеральные или двусторонние) с серозным, слизисто-гнойным или кровянистым проявлением, стерильная и инспираторная одышка, чихание и сопение, а также подчелюстная лимфаденопатия (рис. 1-3). Анорексия и последующая потеря веса также могут быть результатом аносмии у кошек с хроническим заболеванием носа. Криптококк является важным дифференциалом у кошек с хроническими выделениями из носа, независимо от наличия отека лица и / или изъязвления кожи.

.

Рис. 2. Криптококковая инфекция — тяжелая форма носо-лицевого отека и деформации. Предоставлено Марией Грации Пенниси

В некоторых случаях может появиться выступающая мясистая масса из одной или обеих ноздрей. Также были описаны гранулемы носоглотки (напоминающие полипы или рак), проявляющиеся стерторной, инспираторной одышкой и открытым ртом (Malik et al., 1997a). Также могут развиваться пролиферативные или язвенные поражения в полости рта или глотке.Может возникнуть средний / внутренний отит с вестибулярными признаками (Beatty et al., 2000, Paulin et al., 2013). За этим может последовать заболевание нижних дыхательных путей, и его проявление может быть очевидным рентгенологически только в виде узелков в легких или средостении.

Рис. 3. Криптококковая болезнь — изъязвленные узелки на коже лица. Предоставлено Марией Грации Пенниси

Форма CNS

Поражение ЦНС наиболее вероятно возникает после локального распространения через решетчатую пластину; в таких случаях внезапная слепота из-за оптического неврита появляется вместе с судорогами или изменениями поведения.В других случаях он следует за диссеминацией и вызывает гранулематозный энцефаломиелит с одиночными или множественными поражениями (Belluco et al., 2008; Sykes et al., 2010). У многих кошек наблюдается боль в голове или позвоночнике, но другие признаки поражения менингеальных нервов (гиперестезия, ригидность затылочной кости) встречаются нечасто (Sykes et al., 2010).

Кожная форма

Кожные формы характеризуются одиночными или множественными дермато-подкожными узелками на коже: первые указывают на прямую инокуляцию, вторые — на гематогенное распространение из первичного очага инфекции (Sykes and Malik, 2012).Узелки обычно не вызывают зуда и боли и обычно сопровождаются регионарной лимфаденопатией.

Рис. 4. Криптококковая болезнь — кератоувеит и криптококкома передней камеры. Предоставлено Марией Грации Пенниси

Системная форма

Системные формы могут возникать через гематогенное распространение и проявляться признаками менингоэнцефаломиелита (см. Форму ЦНС), увеита, хориоретинита, остеомиелита и полиартрита, системного лимфаденита или поражения многих органов, включая почки (рис.4 и 5). Синдром полости черепа с тяжелым отеком головы и шеи был недавно зарегистрирован у кошки, пораженной развитием криптококковой массы средостения, сдавливающей вену, а также пищевод и трахею (Letendre and Boysen, 2015).

Апатия и кахексия появляются у кошек с тяжелой диссеминацией при длительном хроническом течении болезни. Системная форма, возникающая в результате диссеминации, может следовать или не следовать за классическим заболеванием носа (Tisdall et al., 2007; Martins et al., 2011).

Рис. 5. Рентгенография грудной клетки, вентро-дорсальный вид: диффузные, множественные, плохо очерченные узелки с размытыми краями в легком кошки с системным криптококкозом. Предоставлено Марией Грации Пенниси

Диагноз

Простым и надежным тестом для диагностики криптококкоза является обнаружение антигена в биологических жидкостях. В качестве альтернативы образцы могут быть взяты из поражений и отправлены на цитологию, культуру, гистопатологию и ПЦР.К ним относятся (i) плевральный или перитонеальный выпот, (ii) спинномозговая жидкость (CSF), (iii) образцы, взятые из бронхоальвеолярного лаважа, (iv) тонкоигольные аспираты из узелков или увеличенных лимфатических узлов, (v) биопсии, взятые из любых пораженные ткани. Подозревается повышенный риск грыжи мозжечка после сбора CSF, и эту инвазивную процедуру следует рассматривать только в том случае, если заболевание ЦНС, совместимое с FC, не было подтверждено с помощью других подходящих биологических образцов (Sykes et al., 2010).

Изоляция и ПЦР дают возможность идентифицировать участвующие виды и генотип (только ПЦР).

Обнаружение антигена

Обнаружение антигена в крови — это тест выбора, если он доступен, потому что он быстрый, надежный и минимально инвазивный. Криптококковый капсульный антиген может быть обнаружен с помощью латексного теста на агглютинацию криптококкового антигена (ЛХАТ) в сыворотке, спинномозговой жидкости или моче. Чувствительность и специфичность теста улучшаются путем предварительной обработки образцов теплом и протеиназой (проназа, часто включаемая в коммерческие диагностические наборы), и это считается хорошим для кошек (Sykes and Malik, 2012).В некоторых случаях могут быть ложноотрицательные результаты (Belluco et al., 2008). Если тест на антиген отрицательный, а криптококкоз все еще возможен, образцы ткани должны быть отправлены на цитологию, гистологию и культуру. С другой стороны, в случае титров <200 рекомендуется подтверждающая цитология, посев или ПЦР.

Титр

ЛХАТ также является эффективным способом мониторинга эффективности терапии. Лечение обычно продолжают до тех пор, пока не будет получен отрицательный ЛХАТ, но сообщалось, что титр продолжает снижаться после прекращения терапии у кошек с клиническим разрешением и все еще положительным ЛХАТ (O’Brien et al., 2006).

Цитология

Цитология может быть простым инструментом для диагностики криптококкоза, потому что внешний вид микроорганизмов является характерным, а количество дрожжевых грибов в поражениях обычно велико, но отрицательный результат не исключает диагноза. Соответствующие цитологические образцы могут быть получены с помощью мазков-слепков с изъязвленных поражений кожи, аспиратов тонкой иглой узелков, мазков-слепков биоптатов, бронхоальвеолярного лаважа или спинномозговой жидкости.В случае поражения почек в осадке мочи можно увидеть дрожжи (Brandt and Blauvelt, 2010).

Рис. 6. Окрашенный Diff Quick мазок назального экссудата от кошки с инфекцией C. neoformans. Обратите внимание на видную капсулу (четкий ореол) и узкую почку (стрелка). Микрофотография любезно предоставлена ​​Ричардом Маликом.

Мазки, окрашенные красителем типа Романовского (Wright, Diff-Quick, Giemsa), могут показывать розовые или фиолетовые, круглые или распускающиеся внеклеточные дрожжи, которые различаются по размеру (4-15 мкм) и форме и обычно окружены более или менее прозрачным толстый ореол, соответствующий неокрашенной капсуле (рис.6, 7). Если используется окраска по Граму, микроорганизм выглядит как Gram + с капсулой Gram- (розовой). Обычно наблюдается пиогранулематозный воспалительный процесс. Хотя нитчатые формы обычно не наблюдаются в тканях, эти атипичные морфологические формы C. neoformans могут присутствовать у кошек (Bemis et al., 2000; Lin, 2009).

Рис. 7. Окрашенный по Diff Quick мазок аспирата тонкой иглы из криптококкового поражения. Обратите внимание на огромную капсулу, окружающую дрожжевые клетки.Микрофотография любезно предоставлена ​​Марком Крокенбергером

Гистология

Образцы биопсии слизистой оболочки носа, лимфатических узлов или узелков кожи могут быть получены для гистологии, но они также могут предоставить мазки-слепки для цитологии и материал для посева и ПЦР. Срезы, окрашенные гематоксилин-эозином, показывают эозинофильные тельца, окруженные четким ореолом, и пиогранулематозную реакцию (рис. 8). Муцикармин Майера специфически окрашивает капсулу Cryptococcus .Иммуногистохимия на тканевых срезах используется для дифференциации видов с использованием моноклональных антител (рис. 9) (Krockenberger et al., 2001).

Рис. 8. Ранняя инвазия Cryptococcus gattii в респираторный эпителий коалы. Обратите внимание на эозинофильное тело, окруженное четким ореолом. Микрофотография любезно предоставлена ​​Марком Крокенбергером.

Рис. 9 Иммуногистология для демонстрации Cryptococcus gattii в ткани. Агент может быть окончательно идентифицирован в залитых парафином фиксированных формалином срезах с использованием моноклональных антител, направленных против различных эпитопов капсулы.Коричневые осадки выделяют как тело дрожжевой клетки, так и ее капсулу. Обратите внимание также на узкую бутонию шеи. Микрофотография любезно предоставлена ​​Марком Крокенбергером.

Культура

Посев следует проводить, если тест на антиген отрицательный, титры низкие или отсутствуют.На посев следует направлять только образцы биопсии носа, поскольку наличие криптококка в посевах выделений из носа не считается признаком заболевания. Положительный посев образцов биопсии и гистологические изменения, соответствующие инфекции, считаются диагностическими и могут использоваться для проверки чувствительности к противогрибковым препаратам.

Посев образцов биопсии более чувствителен, чем цитология при подтверждении инфекции. Cryptococcus легко выделяется в декстрозном агаре Сабуро после инкубации при 25 ° C и 37 ° C в течение 10 дней, а также на стандартной бактериальной среде.Теперь возможно дифференцировать C. neoformans от C. gattii с помощью специфического теста на агар (Lester et al., 2011).

Когда образцы загрязнены бактериями, как это происходит в выделениях из носа, полезны среды, содержащие антибиотики (Sykes and Malik, 2012).

Полимеразная цепная реакция

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) была разработана для генетической идентификации в спинномозговой жидкости, моче, сыворотке и образцах биопсии, но на практике не используется в повседневной практике (Kano et al., 2001; Мейер и др., 2003; Okabayashi et al., 2006).

Обнаружение антител

Обнаружение антител не является диагностическим инструментом, поскольку с его помощью нельзя отличить субклиническую инфекцию от болезни.

Диагностическая визуализация

Современные методы диагностической визуализации (КТ и МРТ) часто используются в процессе диагностики хронических симптомов носа и ЦНС. Патологические изменения при криптококкозе кошек включают наличие хронического ринита, фронтального синусита и / или интраназальных или внутричерепных очаговых единичных или мультифокальных образований или поражений, заполненных жидкостью (Sykes et al., 2010). Подтвердить диагноз невозможно только с помощью визуализации, но разрешение массового поражения можно проследить с помощью МРТ у кошек, получающих медикаментозную терапию (Karnik et al., 2009; Hammond et al., 2011). Результаты МРТ могут также включать усиление менингеальной оболочки, поражение зрительного нерва и решетчатой ​​пластинки (Sykes et al., 2010).

Прогноз

Прогноз в большинстве случаев благоприятный при условии, что диагноз поставлен достаточно рано (до распространения или до развития необратимых поражений), а пациенты и владельцы сотрудничают, чтобы обеспечить длительный курс лечения (месяцы) и последующее наблюдение (годы).

Хотя информация о результатах весьма ограничена, похоже, что у кошек прогноз более благоприятный, чем у собак или лошадей, у которых чаще развиваются заболевания нижних дыхательных путей, диссеминированные и неврологические заболевания, связанные с более высокой смертностью (Duncan et al., 2006; O’Brien et al. ., 2006; McGill et al., 2009; Sykes et al., 2010).

В одном ретроспективном исследовании тяжесть заболевания не повлияла на исход, хотя наличие поражения ЦНС оказало значительное неблагоприятное влияние на исход терапии (O’Brien et al., 2006). С другой стороны, изменение психического статуса было единственным негативным прогностическим фактором в ретроспективном исследовании кошек с формой ФК ЦНС, и полное выздоровление было зарегистрировано также у кошек с формой ФК (Sykes et al., 2010; Hammond et al. ., 2011).

Ведение болезней

Терапия

Нет проспективных контролируемых исследований по лечению криптококкоза кошек, и все данные основаны на ретроспективных исследованиях и отчетах о случаях.Рекомендации по лечению не установлены, и выбор подходящего противогрибкового препарата зависит от многих факторов. Соблюдение требований владельца имеет решающее значение из-за высоких затрат как с точки зрения денег, так и с точки зрения длительного времени, необходимого для лечения.

Сообщалось о некоторых ретроспективных исследованиях результатов лечения криптококкоза кошек с неоднородными критериями оценки успеха терапии (Medleau et al., 1995; Davies and Troy, 1996; Jacobs et al., 1997). В крупнейшем ретроспективном исследовании, проведенном на 59 кошках, 68% имели успешный результат (O’Brien et al., 2006). Большинству из них потребовался один разовый курс терапии продолжительностью несколько месяцев (от 1 до 24), и несколько кошек получили второй курс терапии из-за клинического рецидива или повышения титра ЛХАТ. Согласно более позднему ретроспективному исследованию, клинический результат может быть благоприятным примерно у 2/3 пролеченных кошек (McGill et al., 2009). У большинства выздоровевших кошек были выявлены сино-носовые или единичные поражения кожи, подкожной клетчатки или кишечника, а у тех, у которых не выздоровели, были поражения ЦНС или диссеминированное заболевание.

Амфотерицин B, кетоконазол, флуконазол и итраконазол применялись для лечения кошек. Что касается эффекта различных терапевтических протоколов, не было существенной разницы в результатах между кошками, получавшими протоколы, содержащие амфотерицин B, и кошками, получавшими монотерапию азолом с использованием флуконазола или итраконазола (O’Brien et al., 2006).

Средняя кумулятивная доза АТ-В для кошек, излеченных с первой попытки, составила 16 мг / кг (от 7 до 23 мг / кг).Это было выше, чем ранее рекомендованная кумулятивная доза от 4 до 8 мг / кг. Средняя продолжительность лечения кошек, получавших флуконазол, была значительно короче (4 месяца; диапазон от 1 до 8 месяцев), чем медиана для группы итраконазола (9 месяцев; диапазон от 3 до 24 месяцев). Липосомальные формы AMB могут лучше переноситься, но они очень дороги и труднодоступны. Рекомендации по лечению, основанные на тематических исследованиях, заключаются в том, что флуконазол или итраконазол являются хорошим выбором.

При заболеваниях ЦНС или системных случаях амфотерицин B сам по себе или в комбинации с флуцитозином может быть первым выбором с последующим длительным лечением флуконазолом или итраконазолом (O’Brien et al., 2006). Кошек с уже существующим заболеванием почек следует лечить только итраконазолом или флуконазолом. Флуконазол, по-видимому, более эффективен, чем итраконазол, при инфекциях ЦНС, глаз и мочевыводящих путей, а также лучше переносится (Триведи и др., 2011; Хаммонд и др., 2011; Сайкс и Малик, 2012). Об устойчивости к флуконазолу сообщали некоторые изоляты, которые, однако, были чувствительны к другим азолам (Lester et al., 2011; Kano et al., 2015).

Клиническое состояние кошек с церебральным криптококкозом может ухудшиться вскоре после начала терапии амфотерицином B, предположительно из-за воспалительной реакции и повышения внутричерепного давления.Сообщается, что терапия кортикостероидами короткого действия (дексаметазон или преднизолона натрия сукцинат) дает немедленный эффект в таких случаях и связана с большими шансами на выживание в краткосрочной перспективе (O’Brien et al., 2006; Sykes et al., 2010).

Хирургическое удаление любых узелков, расположенных на коже, слизистой оболочке носа или полости рта, следует рассматривать как ценную помощь кошкам, получающим медикаментозное лечение (Hunt et al., 2002).

Как правило, лечение рекомендуется до получения отрицательного результата теста на антиген.Если на момент постановки диагноза тест на антигены отрицательный и заболевание было подтверждено другими методами или если тест на антиген недоступен, лечение следует продолжать как минимум в течение 2–4 месяцев после исчезновения клинических признаков.

В таблице 1 перечислены варианты лечения этой инфекции.

Лечение криптококкоза

Препарат / терапия	Доза и продолжительность	Комментарии
IV = внутривенно, PO = перорально, CNS = центральная нервная система
Итраконазол	50–100 мг на кошку каждые 24 часа	Хорошая абсорбция без еды.Пероральный раствор лучше, чем капсулы. Возможна гепатотоксичность; контролировать ферменты печени периодически / ежемесячно
Амфотерицин B	0,25 мг / кг каждые 48 ч внутривенно до общей дозы 4–16 мг / кг	Лечение выбора при инфекции ЦНС и / или системном заболевании. Значительная нефротоксичность; контролировать функцию почек часто / еженедельно
Флуцитозин	25-50 мг / кг перорально каждые 6 часов	Синергетическое средство с амфотерицином B; не использовать в качестве однократного лечения
Флуконазол	50 мг / кошку каждые 12 часов	Предлагаемое лечение выбора, особенно при инфекции ЦНС.Хорошая абсорбция без еды. Монитор ферментов печени
Тербинафин	10 мг / кг каждые 24 часа	Применяется при устойчивости к азолам
Хирургическое удаление		Гранулемы кожи, ротоглотки и ноздри

Профилактика

Свободно бродячие кошки в сельской местности потенциально более подвержены заражению Cryptococcus, , хотя городские кошки могут быть заражены голубиным гуано . Согласно экологии, присутствие птичьих гуано, особенно голубиного помета и некоторых гниющих растительных субстратов, таких как листья эвкалипта, можно рассматривать как фактор риска (Fortes et al., 2001). Знание местных местообитаний грибов, которые несут наибольший риск заражения, и сезонных колебаний в производстве инфекционных пропагул было бы полезно для разработки профилактических мер как для заражения людей, так и для животных.

Список литературы

Alspaugh JA, Davidson RC, Heitman J (2000): Морфогенез Cryptococcus neoformans .Contrib Microbiol 5, 217-238.

Bartlett KH, Fyfe MW, MacDougall LA (2003): Environment Cryptococcus neoformans var gattii в Британской Колумбии, Канада. Am J Respir Crit Care Med 167, A499.

Битти Дж. А., Баррс В. Р., Суинни Г. Р., Мартин П. А., Малик Р. (2000): Периферическое вестибулярное заболевание, связанное с криптококкозом у трех кошек. J Feline Med Surg 2, 29-34.

Belluco S, Thibaud JL, Guillot J, Krockenberger MB, Wyers M, Blot S, Colle MA (2008): Спинальная криптококкома у иммунокомпетентной кошки.J. Comp Pathol 139, 246-251.

Bemis DA, Krahwinkel DJ, Bowman LA, Mondon P, Kwon-Chung KJ (2000): термочувствительный штамм Cryptococcus neoformans , продуцирующий элементы гиф в гранулеме носа у кошек. J Clin Microbiol 38, 926-928.

Brandt LE, Blauvelt MM (2010): Каков ваш диагноз? Осадок мочи от похудевшей кошки из южной Калифорнии. Ветеринарный врач Clin Pathol 39, 517-518.

Castella G, Abarca L, Cabanes FJ (2008): Criptococosis y animales de Compañía.Ред. Iberoam Micol 25, S19-S24.

Connolly JH, Krockenberger MB, Malik R, Canfield PJ, Wigney DI, Muir DB (1999): бессимптомное носительство Cryptococcus neoformans в носовой полости коалы (Phascolarctos cinereus). Med Mycol 37, 331-338.

Крейг С., Лестер С., Блэк В., Файф М., Раверти С. (2002): Многовидовая вспышка криптококкоза на юге острова Ванкувер, Британская Колумбия. Может Ветеринар J 43, 792-794.

Дэвис К., Трой Г.К. (1996): Глубокие грибковые инфекции у кошек.J Am Anim Hosp Assoc. 32, 380–391.

Дункан С., Стивен С., Кэмпбелл Дж. (2006): Клинические характеристики и предикторы смертности от инфекции Cryptococcus gattii у собак и кошек на юго-западе Британской Колумбии. Can Vet J 47, 993–998.

Duncan C, Stephen C, Lester S, Bartlett KH (2005): Последующее исследование собак и кошек с бессимптомной инфекцией Cryptococcus gattii или носовой колонией. Med Mycol 43, 663-666.

Flatland B, Greene RT, Lappin MR (1996): Клиническая и серологическая оценка кошек с криптококкозом.J Am Vet Med Assoc 209, 1110-1113.

Fortes ST, Lazéra MS, Nishikawa MM, Macedo RC, Wanke B (2001): первая изоляция Cryptococcus neoformans var. gattii из местного дерева джунглей в тропических лесах бразильской Амазонки. Микозы 44, 137-140.

Gerds-Grogan S, Dayrell-Hart B (1997): Кошачий криптококкоз: ретроспективное исследование. J Am Anim Hosp Assoc. 33, 118–122.

Graham KJ, Brain PH, Spielman D, Martin PA, Allan GS, Malik R (2011): одновременное инфицирование комплексом видов Cryptococcus neoformans / gattii и Mycobactcerium avium , поражающим подкожный слой и кость тазовой конечности у кошки .J Feline Med Surg 13, 776-780.

Hammond JJ, Glass EN, Bishop TM, Kent M, De Lahunta A (2011): Диагностика визуализации — внутричерепная криптококковая масса у кошки. Vet Radiol Ultrasound 52, 306-308.

Hunt GB, Perkins M, Foster SF, Barrs VR, Swinney GR, Malik R (2002): Назофарингеальные расстройства у собак и кошек: обзор и ретроспективное исследование. Сборник Cont Educ Practices Vet 24, 184–199.

Jacobs GJ, Medleau L, Calvert C, Brown J (1997): Криптококковая инфекция у кошек: факторы, влияющие на результат лечения, и результаты последовательных титров сывороточных антигенов у 35 кошек.J Vet Intern Med 11, 1–4.

Kano R, Fujino Y, Takamoto N, Tsujimoto H, Hasegawa A (2001): ПЦР-обнаружение гена Cryptococcus neoformans CAP59 из образца биопсии из случая криптококкоза кошек. J Vet Diagn Invest 13, 439–442.

Kano R, Hosaka S, Hasegawa A (2004): Первое выделение криптококка magnus от кошки. Mycopathologia 157, 263-264.

Кано Р., Китагават М., Оота С., Оосумит Т., Мураками Ю., Токурики М. и др. (2008): первый случай системной инфекции Cryptococcus albidus у кошек.Med Mycol 46, 75-77.

Кано Р., Окубо М., Янаи Т., Хасегава А., Камата Х (2015): Первая изоляция азол-устойчивого Cryptococcus neoformans от кошачьего криптококкоза. Mycopathologia 180, 427-433.

Karnik K, Reichle JK, Fischetti AJ, Goggin JM (2009): Результаты компьютерной томографии грибкового ринита и синусита у кошек. Vet Radiol Ultrasound 50, 65-68.

Крокенбергер МБ, Кэнфилд П.Дж., Козель Т.Р., Шинода Т., Икеда Р., Вигни Д.И. и др. (2001): иммуногистохимический метод, позволяющий дифференцировать разновидности и серотипы Cryptococcus neoformans в фиксированных формалином тканях, залитых парафином.Med Mycol 39, 523-533.

Lester SJ, Kowalewich NJ, Bartlett KH, Krockenberger MB, Fairfax TM, Malik R (2004): Клинико-патологические особенности необычной вспышки криптококкоза у собак, кошек, хорьков и птиц: 38 случаев (с января по июль 2003 г.). J Am Vet Med Assoc 225, 1716-1722.

Lester SJ, Malik R, Bartlett KH, Duncan CG (2011): Криптококкоз: обновление и появление Cryptococcus gattii . Ветеринар Clin Pathol 40, 4-17.

Letendre J-A, Boysen S (2015): Синдром краниальной полой вены, вторичный по отношению к криптококковой гранулеме средостения у кошки.Может Ветеринар J 56, 365-369.

Lin X (2009): Cryptococcus neoformans : морфогенез, инфекция и эволюция. Infect Genet Evol 9, 401-416.

Lin X, Heitman J (2006): Биология комплекса видов Cryptococcus neoformans . Анну Рев Микробиол 60, 69-105.

Малик Р., Мартин П., Винни Д. И., Черч Д. Б., Брэдли В., Белленджер С. Р. и др. (1997a): Носоглоточный криптококкоз. Aust Vet J 75, 483-488.

Малик Р., Вигни Д.И., Мьюир Д.Б., Грегори Д.Н., Лав Д.Н. (1992): Криптококкоз у кошек: клиническая и микологическая оценка 29 случаев и оценка лечения с использованием перорального флуконазола.J Med Vet Mycol 30, 133–144.

Малик Р., Вигни Д.И., Мюир Д.Б., Лав Д.Н. (1997b): Бессимптомное носительство Cryptococcus neoformans в носовой полости собак и кошек. J Med Vet Mycol 35, 27-31.

Martins DB, Zanette RA, França RT, Howes F, Azevedo MI, Botton SA et al (2011): Массивная криптококковая диссеминированная инфекция у иммунокомпетентной кошки. Ветеринарный дерматол 22, 232-234.

McGill S, Malik R, Saul N, Beetson S, Secombe C, Robertson I et al (2009): Криптококкоз у домашних животных в Западной Австралии: ретроспективное исследование 1995-2006 годов.Медицинская микология 47, 625-639.

Medleau L, Jacobs GJ, Marks MA (1995): Итраконазол для лечения криптококкоза у кошек. J Vet Intern Med 9, 39–42.

Meyer W, Castañeda A, Jackson S, Huynh M, Castañeda E (2003): Молекулярное типирование изолятов IberoAmerican Cryptococcus neoformans . Emerg Infect Dis 9, 189–195.

Норрис Дж. М., Белл Е. Т., Хейлс Л., Торибио Дж. А., Уайт Дж. Д., Вигни Д. И. и др. (2007): Распространенность инфекции вируса иммунодефицита кошек среди домашних и диких кошек в восточной Австралии.J Feline Med Surg 9, 300-308.

O’Brien CR, Krockenberger MB, Martin P, Wigney D.I, Malik R (2006): долгосрочные результаты терапии для 59 кошек и 11 собак с криптококкозом. Aust Vet J 84, 384-392.

O’Brien CR, Krockenberger MB, Wigney D.I., Martin P, Malik R (2004): ретроспективное исследование кошачьего и собачьего криптококкоза в Австралии с 1981 по 2001 год: 195 случаев. Med Mycol 42, 449-460.

Окабаяси К., Кано Р., Ватанабе Т., Хасегава А. (2006): Серотипы и типы скрещивания клинических изолятов криптококкоза кошек в Японии.J Vet Med Sci 68, 91-94.

Pal M (1989): Cryptococcus neoformans var. neoformans и munia birds Cryptococcus neoformans var. neoformans bei Prachtfinken. Микозы 32, 250–252.

Paulin J, Morshed M, Armién AG (2013): Внутренний отит, вызванный Cryptococcus neoformans var. грубия в кот. Ветеринарный Патол 50, 260-263.

Сайкс Дж. Э., Малик Р. Криптококкоз (2012): В: Грин CE (изд.): Инфекционные болезни собак и кошек. 4-е изд. Сент-Луис, Сондерс, Эльзевир, стр. 621-634.

Сайкс Дж. Э., Стерджес Б. К., Кэннон М. С., Герикота Б., Хиггинс Р. Дж., Триведи С. Р. и др. (2010): Клинические признаки, особенности визуализации, невропатология и исходы у кошек и собак с криптококкозом центральной нервной системы из Калифорнии. J Vet Int Med 24, 1427-1438.

Тисдалл П.Л., Мартин П., Малик Р. (2007): Скрытая болезнь у кошки с болезненными и опухшими скакательными суставами: упражнение в диагностическом обосновании и принятии клинических решений.J Feline Med Surg 9, 418-423.

Триведи С.Р., Сайкс Дж.Э., Кэннон М.С., Виснер Э.Р., Мейер В., Стерджесс Б.К. и др. (2011): Клинические особенности и эпидемиология криптококкоза у кошек и собак в Калифорнии: 93 случая (1988-2010). J Am Vet Med Assoc 239, 357-369.

Urban CF, Lourido S, Zychlinsky A (2006): Как микробы избегают уничтожения нейтрофилов? Cell Microbiol 8,1687-1696.

Для дальнейшего чтения:
Cardoso PH, Baroni FdeA, Silva EG, Nascimento DC, Martins Mdos A, Szezs W, et al (2013): Гранулема носа у кошек, вызванная Cryptococcus gattii, тип GII. Mycopathologia 176, 303-307.

Castrodale LJ, Gerlach RF, Preziosi DE, Frederickson P и Lockhart SR (2014): Длительный инкубационный период инфекции Cyptococcus gattii у кошек, Аляска, США. Emerg Infect Dis 19, 1034-1035.

Espino L, Barreiro JD, Gonzalez A, Santamarina G, Mino N и Vazquez S (2014): Внутричерепная эпидуральная эмпиема, вызванная Cryptococcus neoformans у 5-летнего кастрированного европейского короткошерстного кота. Ветеринарный врач 28, 1-16.

Pennisi MG, Hartmann K, Lloret A, Ferrer L, Addie D, Bélak S и др. (2013): Криптококкоз у кошек. Руководящие принципы ABCD по профилактике и ведению. J Feline Med Surg 15, 611-618.

Прецессия v Резонанс — Вопросы и ответы в МРТ

№ . Ядерная прецессия — долговременное самопроизвольное явление, не сопровождающееся обменом энергией. Ядерный резонанс — это кратковременное индуцированное явление, включающее обмен энергией между прецессирующими спинами и их окружением.

Прецессия испытывает все частицы с ненулевым спином, когда они помещены в статическое внешнее магнитное поле. Поскольку магнитное поле Земли «всегда включено», почти каждое магниточувствительное ядро ​​на Земле, включая водород в каждой капле воды в океане, в этот момент тихо прецессирует! Я лично считаю эту концепцию ошеломляющей.

Резонанс . Хотя ядра водорода всегда прецессируют, они не подвергаются постоянно ядерному магнитному резонансу (ЯМР).Резонанс — это естественное явление, характеризующееся колебательной реакцией в узком диапазоне частот на внешнее поступление энергии. Независимо от того, являются ли они механическими или электромагнитными, все резонансные системы способны передавать энергию между двумя или более различными режимами хранения. Однако от цикла к циклу всегда происходят небольшие потери энергии, поэтому в конечном итоге резонанс затухает.

Магнитный резонанс возникает, когда внешняя энергия вводится в систему ядерных спинов вблизи ларморовской (резонансной) частоты.Как в ЯМР, так и в МРТ, основным источником энергии является вращающееся магнитное поле (называемое B1 ), создаваемое пропусканием переменного тока через расположенную поблизости радиочастотную (RF) катушку. Ядерная система поглощает эту ВЧ-энергию, увеличивая относительную долю спинов в состояниях с более высокой энергией. Часть поглощенной энергии когерентно (без потерь энергии) передается другим спинам в образце, поддерживая колебания. Некоторая часть поглощенной энергии, а в конечном итоге и вся, рассеивается посредством некогерентных электромагнитных взаимодействий с другими спинами или посредством молекулярных колебаний и столкновений.

Потенциальная путаница состоит в том, что, хотя прецессия отдельных ядер не то же самое, что ядерный резонанс, прецессия суммарной намагниченности ( M ) является проявлением резонанса .