Именно поток пациентов из разных уголков нашей страны позволяет нам делать капсульную эндоскопию финансово доступной.

На сегодняшний день, мы можем Вам предложить разные типы капсул от разных производителей. Вы сами выбираете ту капсулу, которой хотите быть обследованы.

Стоимость капсулы для эндоскопии кишечника

На сегодняшний день, мы можем Вам предложить разные типы капсул от разных производителей. Вы сами выбираете ту капсулу, которой хотите быть обследованы.

Стоимость исследования, включающую капсулу, уточняйте в клинике. Средняя стоимость указана на странице «Часто задаваемые вопросы».

После исследования формируется развернутое заключение, включающее ряд основных снимков, выполненных капсулой. Если Вам необходима полная видео запись, принесите в день исследования USB носитель, я обязательно сформирую видео фильм, в формате доступном для просмотра на любом компьютере.

Немного о роли микрофлоры кишечника в жизни человека

Кудин А.П., к.м.н., доцент, зав. инфекционным отделением № 5 УЗ «Городская детская инфекционная больница г. Минска»

Организм человека населяет большое количество микроорганизмов (по приблизительным подсчетам — около 1000 видов), основную массу которых составляют бактерии. В значительно меньшем количестве представлены другие микроорганизмы (вирусы, археи, простейшие). В норме все они находятся в состоянии равновесия между собой и с организмом человека.

Микроорганизмы попадают к человеку из внешней среды и заселяют (с рождения и пожизненно) те области, которые непосредственно контактируют с внешней средой: кожа, дыхательные пути, мочевыводящие пути, желудочно-кишечный тракт (ЖКТ). Внутренняя среда макроорганизма, а также альвеолы, внутреннее и среднее ухо, матка, почки и мочеточники в норме стерильны. Очевидно, самые благоприятные условия для пребывания микробов в организме человека создаются в ЖКТ.

Заселение кишечника ребенка начинается примерно с середины периода внутриутробного развития (единичные микробы), но основное заселение происходит с момента рождения. При прохождении через родовые пути начинается интенсивная колонизация кожных покровов и слизистых оболочек, соприкасающихся с внешней средой. Эпидермальные стафилококки заселяют кожу α-стрептококки – носоглотку. Массивная колонизация кишечника здорового новорожденного происходит гетерогенной флорой (аэробной и анаэробной) в первые сутки. Однако с 3-5 дня основной (резидентной) флорой становятся бифидобактерии, которые вытесняют другие микроорганизмы из местного биотопа. Это связано с тем, что лактоза грудного молока активно метаболизируется в первую очередь бифидо- и лактобактериями. Кроме того, содержащийся в женском (но не коровьем) молоке N-ацетилглюкозамин стимулирует рост бифидобактерий.

При родоразрешении путем кесарева сечения состав микробов, колонизирующих организм новорожденного, отличается в сторону дефицита лактобацилл, энтеробактерий и дифтероидов.

Некоторые факторы (течение беременности, способ родоразрешения, особенности выхаживания ребенка после рождения и др.) могут нарушать этапность заселения и видовой состав микрофлоры кишечника.

Состав микробного пейзажа во многом определяется характером питания. У грудных детей, находящихся на естественном вскамливании, доминируют бифидо- и лактобактерии. У грудных детей на искусственном вскармливании микрофлора кишечника более гетерогенна, и преобладание молочно-кислых микробов над другими выражено в значительно меньшей степени. У более старших детей по мере уменьшения в питании доли молочных продуктов и включения мяса и мясных продуктов увеличивается удельный вес протеолитических микробов.

Нормальная микрофлора человека представлена облигатными микроорганизмами (которые присутствуют, практически, постоянно) и транзиторными (факультативными), на долю которых приходится не более 1-2%.

В зависимости от особенностей метаболизма все микробы кишечника можно условно разделить на протеолитические (кишечная палочка и другие грамм-отрицательные энтеробактерии, бакероиды, клостридии) и сахаролитические (бифидо- и лактобактерии, энтерококки).

По отношению к кислороду бактерии делят на облигатные аэробы, растущие только в присутствии кислорода, облигатные анаэробы рост которых подавляется кислородом (бактероиды, бифидобактерии, клостридии) и факультативные анаэробы, способные к росту как в присутствии кислорода, так и без него (лактобактерии, кишечная палочка и др. грамм-отрицательные энтеробактерии, стафилококки, стрептококки, энтерококки). На долю облигатных анаэробов (бактероиды и бифидобактерии) приходится 95-99% всех микробов кишечника (причем, бактероидов больше).

По локализации в кишечнике выделяют пристеночную и полостную микрофлору. В тонкой кишке содержание пристеночной флоры на несколько порядков превышает численность полостной. В толстой кишке это соотношение меняется на противоположное.

Общее колическтво микробных клеток в организме человека по расчетам составляет около 10¹⁴, что превышает число собственных клеток человека.

Распределение нормальной микрофлоры вдоль желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) неоднородно по качественному и количественному составу.

В ротовой полости анаэробов примерно на порядок больше, чем аэробов, т.к. первые, находясь в труднодоступных местах (десневые карманы, щели между зубами и т.д.), лучше защищены от действия лизоцима и других протективных факторов слюны. Среди бактерий здесь преобладают стрептококки (до 60% всех микробов ротовой полости). Из других частых представителей микрофлоры следует упомянуть фузобактерии, вейонеллы, бактероиды, спирохеты, актиномицеты. Здесь же обитают микоплазмы (M.salivarium), грибы рода Candida, простейшие (Entamoeba buccalis, Entamoeba dentalis, Trichomonas buccalis). Данная микробиота представляет собой первый барьер, препятствующий проникновению болезнетворных микроорганизмов, попадающих в полость рта из внешней среды, дальше в ЖКТ.

В желудке здорового человека микробов, практически, нет из-за действия желудочного сока, имеющего низкое значение рН. В небольшом количестве здесь могут существовать некоторые лактобактерии и грамотрицательные энтеробактерии. Содержание Helicobacter pylori обычно не превышает 10³ бактерий в 1 мл содержимого желудка.

Верхние отделы тонкой кишки относительно мало заселены микроорганизмами. В физиологических условиях в тощей кишке содержится 10^4-5/мл микробов (в основном, лакто- и бифидобактерии), и по мере приближения к илеоцекальному клапану количество микробов в подвздошной кишке увеличивается до 10⁷/мл (в основном за счет бактероидов, энтерококков, кишечной палочки).

Толстая кишка отличается самой высокой плотностью заселения микроорганизмами, количество которых достигает 10⁹-10¹²/мл, из которых анаэробы составляют 95-99%. К ним относятся грамположительные палочки (бифидо-, лакто- и эубактерии), грамотрицательные палочки (бактероиды), грамположительные спорообразующие палочки (клостридии). Из других частых представителей нормальной микрофлоры следует назвать энтерококки, грамотрицательные факультативно-анаэробные палочки (кишечная палочка, клебсиелла, энтеробактер и др.). в меньших количествах обнаруживаются стафилококки, дрожжевые грибы, простейшие и вирусы.

Сохранению относительного постоянства нормальной микрофлоры способствуют различные факторы, к которым относятся нормальная перистальтика кишечника (прежде всего, тонкой кишки), герметичность эпителиального слоя, компоненты пищеварительных соков (соляная кислота, желчные кислоты, протеолитические ферменты и т.д.), сохранная функция илеоцекального клапана, факторы местного иммунитета (секреторные IgA, лизоцим, лимфоидные образования кишечника, состояние перманентного физиологического воспаления в стенке кишки).

Значение кишечной микробиоты для организма человека трудно переоценить. К основным функциям нормальной микрофлоры относятся:

1. Защитная функция, суть которой заключается в обеспечении колонизационной резистентности, т.е. предотвращении колонизации ЖКТ патогенными микроорганизмами. Это осуществляется за счет конкуренции за питательные вещества, за места адгезии (рецепторы), за счет выработки бактериоцинов, короткоцепочечных жирных кислот, а также за счет стимуляции местных защитных факторов (в виде состояния легкого воспаления).
2. Пищеварительная функция. Микрофлора обеспечивает конечный гидролиз белков, омыление жиров, сбраживание высокомолекулрных углеводов, которые не метаболизировались в тонкой кишке. Кроме того, некоторые вещества, поступающие с пищей, могут расщепляться только кишечной микрофлорой (например, целлюлоза). Под действием нормальной микрофлоры в подвздошной кишке происходит деконъюгация 90% желчный кислот с последующим обратным всасыванием и повторным участием в пищеварении. Оставшиеся в кале желчные кислоты обеспечивают нормальную гидратацию каловых масс.
3. Двигательная функция. На перистальтику кишечника микрофлора может влиять по-разному. С одной стороны, за счет стимуляции синтеза окиси азота и активации L-клеток кишечника может замедлять моторику в тонкой кишке и проксимальных отделах толстой кишки. С другой стороны, короткоцепочечные жирные кислоты, синтезирующиеся микрофлорой, в дистальных отделах толстой кишки стимулируют усиление моторики.
4. Способствует всасыванию воды (с помощью некоторых продуктов микробного метаболизма).
5. Нормальная микрофлора способна обезвреживать многие токсические вещества как путем их химической обработки, так и за счет сорбции на своей поверхности и выведения с каловыми массами. По антитоксической функции некоторые авторы приравнивают кишечных микробов к печени.
6. Участвуют в синтезе некоторых необходимых веществ: витаминов группы В (В₁,В₂,В₆,В₁₂), фолиевой кислоты, витамина К и др. и хотя большинство из этих синтезирующихся веществ не всасываются, они могут оказаться важными и полезными для собственно слизистой кишечника. Например, было показано, что недостаточное поступление к эпителию слизистой толстой кишки витаминов В₆, В₁₂ и фолиевой кислоты связано с повышенным риском развития рака толстой кишки.

Стоит отметить, что геном человека содержит около 23 тыс генов, а количество генов микробов и вирусов, содержащихся только в ЖКТ, составляет более 3 млн, и, возможно, часть из них участвует в синтезе необходимых человеку веществ. В эксперименте показано, например, что у стерильных («гнотобиологических») животных отмечается недоразвитие лимфоидной и гемопоэтической ткани, отмечаются нарушения со стороны головного мозга, истончается стенка кишечника, ослабляется реактивность фагоцитов, развивается гипогаммаглобулинемия.

7. Иммуномодулирующая функция связана с воздействием на факторы врожденного и адаптивного иммунитета как на местном, так и на системном уровне. И это влияние, возможно, является главным во взаимодействии микрофлоры и макроорганизма. Влияние нормальной микрофлоры на систему иммунитета складывается из нескольких моментов. Во-первых, слизистая кишечника, особенно толстой кишки (вследствие наиболее массивного заселения бактериями), обильно инфильтрирована макрофагами, лимфоцитами, плазматическими клетками, т.е., фактически, находится в состоянии постоянного хронического воспаления. Это перманентное воспаление обеспечивает пребывание иммунокомпетентных клеток в состоянии субактивации и, как следствие, — более быстрый и эффективный ответ на попадание агрессивной (патогенной) флоры. Во-вторых, под действием нормальной микрофлоры синтезируются «естественные» («нормальные») антитела, реагирующие на наиболее распространенные в природе антигенные детерминанты (паттерны). Это обеспечивает протективную функцию в отношении многих патогенов. И наконец, в-третьих, не вдаваясь в подробности, следует напомнить, что в кишечнике постоянно находится около 60-70% всех лимфоцитов человека, которые рециркулируют по всему организму. Контакт с микробами кишечника может приводить к активации различных клонов лимфоцитов. Это влияние сохраняется при попадании этих лимфоцитов в кровеносное русло. И в зависимости от того, какие свойства приобрели иммунные клетки, будет определяться их влияние на весь организм. Кроме того, системное действие могут оказывать и вырабатывающиеся в кишечнике под действием микрофлоры различные биологически активные вещества, прежде всего, цитокины. Итогом такого влияния может оказаться как иммуностимуляция, так и иммуносупрессия. Эти процессы могут лежать в основе развития различных заболеваний, в т.ч. и аутоиммунных.

Различные виды и штаммы представителей нормальной микрофлоры слизистых могут оказывать разнонаправленное влияние на активность иммунной системы. Поэтому существует потенциальная возможность целенаправленно влиять на функционирование иммунной системы человека посредством воздействия с помощью микроорганизмов на факторы врожденного и адаптивного иммунитета. Здесь будет уместно процитировать статью Андреевой И.В. и Стецюк О.У., в которой суммированы данные литературы о влиянии различных пробиотиков на организм человека (табл.).

Влияние пробиотиков на макроорганизм (И.В. Андреева и О.У. Стецюк, 2010),

Взаимодействие макроорганизма с кишечной микрофлорой может осуществляться несколькими путями: в виде комменсализма, паразитизма, симбиоза.

По современным представлениям, провести четкую границу между комменсалами и условно-патогенной микрофлорой невозможно. В определенных случаях заболевание могут вызвать различные микробы, входящие в состав нормальной микрофлоры.

В настоящее время в печати (в том числе, и медицинской) нередко говорится о дисбактериозе, как о несуществующей проблеме. Аргументируется это разными доводами.

1. Под «дисбактериозом» обычно обозначают изменения соотношений и состава нормальной микрофлоры организма, а также места их обитания. Однако до настоящего времени во всем мире нет понятия нормы кишечного биоценоза. И нет «золотого стандарта» диагностики дисбактериоза.
2. Наиболее часто для диагностики дисбактериоза используют посев кала. Однако результаты этого анализа непоказательны. Во-первых, анализ показывает состояние микробов, обитающих только в просвете толстой кишки, причем в ее дистальном (конечном) отделе. Состав микробиоты тонкой кишки остается неизвестным. Во-вторых, при таком исследовании выделяют 8-12 видов микробов, в то время как их количество в кишечнике более 1000 (причем не учитывается содержание даже бактериодов, которые составляют более 50% массы всех кишечных микробов). В-третьих, для достоверной диагностики требуется собрать содержимое кишечника в стерильных условиях, транспортировать материал при определенной температуре и доставить его в лабораторию в течение 2 часов. Иначе результаты будут искажены.

Существует другая методика: посев аспирата тонкокишечного содержимого или биоптата стенки тонкой кишки. В этом случае мы получаем данные о состоянии флоры в тонком кишечнике. Но такая диагностика применяется крайне редко.

Есть также косвенные методы, которые позволяют судить о состоянии микрофлоры кишечника. К ним относятся химические методы: газожидкостная хроматография и масс-спектрометрия.

Для анализа используется содержимое кишечника, в котором определяется концентрация веществ — продуктов жизнедеятельности микрофлоры, а затем делается вывод о ее качественном и количественном составе.

Используются также дыхательные тесты, когда продукты жизнедеятельности бактерий определяют в выдыхаемом воздухе. Однако эти методы можно использовать только в качестве предварительной диагностики, так как велика доля ложных результатов.

3. Даже современные молекулярные методики не дают исчерпывающего результата: до 75% разновидностей микробов остаются не классифицируемыми. Содержание микробов в кале не отражает реальной ситуации в просвете тонкой и толстой кишок, а тем более в пристеночных биотопах, где состав микробов может заметно отличаться от состава просветной флоры.
4. И, кроме того, диагноз «дисбактериоз кишечника» не имеет четкой клинической составляющей — иными словами, такой болезни просто не существует.

Все перечисленное верно. Однако говорить об отсутствии проблемы нарушенного, аномального, избыточного и т.д. роста кишечных микробов, очевидно, неверно. Небольшие возможности современной диагностики этого состояния не исключают существование самой проблемы. В зарубежной литературе вместо термина «дисбактериоз кишечника» для обозначения нарушений качественного и количественного состава кишечной микрофлоры применяют термин «синдром избыточного роста бактерий» в тонкой кишке (bacterial overgrowth syndrome). Под этим синдромом понимают клинически и/или лабораторно подтвержденный синдром мальдигестии/мальабсорбции, связанный с качественными или количественными изменениями микробиоты тонкой кишки.

В этой статье, говоря о проблеме влияния измененноймикробиоты на организм человека, мы будем пользоваться привычным нам термином «дисбактериоз».

При дисбактериозе происходит перераспределение флоры на протяжении кишечника: малонаселенная в норме тонкая кишка оказывается заполненной огромным количеством бактерий, а в толстой кишке меняется их видовой состав. Вместо полезных и привычных видов появляются патогенные (чаще это условно-патогенные микробы, которые при определенных условиях начинают проявлять свойства патогенных).

Причин нарушения видового состава и количества микроорганизмов в кишечнике очень много, и обычно действуют они в комплексе.

«Полезные» бактерии гибнут:

• если им нечего есть. Такое случается, когда рацион несбалансирован, беден растительной клетчаткой и кисломолочными продуктами.
• если им некомфортно. При различных заболеваниях (колит, панкреатит, холецистит, гастрит, гепатит и др.) в кишечнике меняется pH. В изменившихся условиях нарушается обмен веществ и целостность клеток кишечных микробов.
• если их место занимают агрессивные «собратья» — патогенные бактерии, микроорганизмы, гельминты, грибы.

Не секрет, что облигатнопатогенные микробы (сальмонеллы, шигеллы, иерсинии, кампилобактерии и др.) вызывают соответствующие заболевания. При дисбактериозе же часто обнаруживаются, так называемые, условно-патогенные микробы, но в большом количестве. И здесь будет уместно напомнить о таком феномене, как «чувство кворума» (quorum sensing) – способность ощущать плотность собствнной популяции микробов. Оказалось, что микроорганизмы обладают способностью к самостимуляции собственного размножения. При благоприятных условиях они начинают продуцировать специальные автоиндукторы, стимулирующие соседние и недалеко расположенные микробные клетки данного вида. При превышении определенной пороговой концентрации биологические свойства этих микробов изменяются: у них экспрессируются заторможенные до этого гены, в которых закодированы биологически активные вещества, повышающие патогенность микробов (различные токсины, ферменты и т.д.). Таким образом, вроде бы безобидные микроорганизмы приобретают свойства патогенных. И в этом случае они уже способны оказывать повреждающее действие на организм человека и вызывать заболевание. (Если немного отвлечься от микробов, то можно сказать, что этот феномен, наверное, имеет универсальное действие. Например, люди в офисе, на стройке или производстве обычно ведут себя адекватно, но собираясь большой группой, например, на стадионе могут становиться агрессивными). Следует отметить, что предпринимаются попытки использовать «чувство кворума» в лечебных целях для увеличения метаболической и антагонистической активности представителей нормальной микрофлоры с целью защиты макроорганизма от действия патогенных агентов.

Поэтому лечение дисбактериоза может потребовать применения антимикробных препаратов, включая антибиотики. Однако следует помнить, что принципиально важным является то, что нужно лечить не плохой анализ на дисбактериоз, а клинически выраженное патологическое состояние, в основе которого лежит дисбактериоз. В немногочисленных данных содержимого тонкой кишки было показано, что до 20% здоровых людей могут иметь отклонения в микробном пейзаже (при патологии этот показатель составляет до 64%).

И, конечно же, говоря о лечении дисбактериоза, нельзя не сказать о применении биопрепаратов. Все они делятся на:

• Пребиотики (лаклулоза, инулин, фруктозо- и галактозоолигосахариды и др.) — это препараты, которые подготавливают кишечник к заселению нормальной микрофлорой, создают для нее комфортные условия. К пребиотикам относятся также продукты питания, такие как: кукурузные, овсяные каши, ржаной хлеб, бобовые, соки с мякотью, отруби, молочные продукты и др.
• Пробиотики (эубиотики) — это препараты, содержащие нормальную микрофлору кишечника и способные благоприятно воздействовать на кишечную микробиоту и общее состояние огранизма. Свойствами пробиотиков также обладают кисломолочные продукты, обогащенные лакто- и бифидобактериями.
• Синбиотики— комбинированные препараты про- и пребиотиков.

Практика показывает, что хорошо работающие «в пробирке» препараты не всегда оказывают должный эффект в организме. Введенная с пробиотиками флора часто пропадает после окончания курса терапии. Дело в том, что дисбактериоз — это скорее следствие, нежели причина болезней. В больном организме «полезные» бактерии просто не приживаются, сколько их не «сажай». Дисбактериоз развивается под влиянием множества факторов. И вылечить его только лишь приемом лекарств невозможно.

Отдельно необходимо сказать о применении биопреаратов после приема антибиотиков. Многие считают, что это является обязательным. На самом деле, при отсутствии каких-либо клинических проявлений антибиотик-ассоциированной диареи в применении биопрепаратов нет необходимости. (Так же, как и при наличии изменений в анализе на дисбактериоз при отсутствии соответствующей симптоматики).

Прежде чем заниматься микрофлорой, необходимо лечение хронических заболеваний, особенно желудочно-кишечного тракта. Важно избавиться от очагов инфекции во рту, ЛОР-органах. Огромное значение имеет сбалансированный рацион питания. То есть, нужно создать самые благоприятные условия для колонизации кишечника, и только после этого рассчитывать на благоприятный эффект от лечения.

И наконец, следует сказать о еще одном заблуждении, которое довольно широко распространено. Многие считают что живые пробиотики колонизируют кишечник и, тем самым, излечивают дисбактериоз. Однако оказалось, что профилактические и лечебные эффекты пробиотиков могут быть воспроизведены с убитыми бактериями и продуктами их разрушения. Это служит подтверждением мысли о том, что основной механизм действия биопрепаратов связан с их влиянием на систему местной защиты организма ребенка (местного врожденного и адаптивного иммунитета кишечника).

Использование пробиотиков в медицине теоретически имеет большие перспективы. К настоящему времени доказана их эффективность при различных заболеваниях ЖКТ как инфекционных (ротавирусная инфекция, диарея путешественников, хеликобактерных хронических гастритах), так и – неинфекционных (некротизирующий энтероколит, неспецифический язвенный колит). Кроме того, показана терапевтическая эффективность пробиотиков при атопических заболеваниях, снижение частоты и тяжести эпизодов ОРИ у детей на фоне применения пробиотиков, и даже – усиление иммунного ответа на вакцинацию. Существуют работы, в которых показана возможная эффективность определенных пробиотиков в лечении воспалительных заболеваний кишечника (болезни Крона, неспецифического язвенного колита).

Если пофантазировать, то при определенном уровне знаний можно с помощью пробиотиков вызывать вполне определенные, необходимые данному конкретному пациенту иммунные реакции, способные помочь человеку справиться с различными по патогенезу заболеваниями (инфекционными, иммунными, неоплазменными). Но, как легко понять, это дело не близкого будущего.

И, в заключение, несколько ключевых моментов этой статьи:

1. При отсутствии клинических признаков поражения ЖКТ (неустойчивый стул, боли в животе, беспокойство, плохая прибавка массы тела и т.д.) обнаруженные в анализе кала признаки дисбактериоза не требуют лечения (!),
2. Проведение АБ-терапии не означает, что детям обязательно необходимо назначать биопрепараты. В подавляющем большинстве случаев достаточно правильного полноценного питания, с включением продуктов, содержащих растительную клетчатку, и, если нет противопоказаний в виде лактазной недостаточности или непереносимости белка коровьего молока, — кисломолочных продуктов.
3. Развитие АБ-ассоциированной диареи обычно купируется после отмены причинно-значимого препарата. Хотя в этом случае может возникнуть потребность в медикаментозном лечении, что в каждом случае решается индивидуально. Однако роль правильного питания и в этом случае также является решающей. (Исключением является псевдомембранозный колит клостридиозной этиологии, лечение которого довольно сложное и может быть не всегда эффективным).
4. У детей первых 4-6 месяцев жизни расстройство стула часто трудно поддаются лечению, но в большинстве случаев быстро исчезают после введения прикорма (в первую очередь, фруктов и овощей).
5. Необходимо понимать, что проблема дисбактериоза – это проблема местной защиты. Поэтому, даже если путем героических усилий добиться нормализации состава микрофлоры кишечника (по анализу кала на дисбактериоз, что само по себе ни о чемне говорит, как уже упоминалось ранее), то при сохранении плохой местной защиты попадание в кишечник достаточно агрессивных возбудителей вновь приведет развитию дисбактериоза.
6. Микробы, содержащиеся в биопрепаратах, хоть и могут участвовать в заселении кишечника, но их роль в этом процессе невелика. Основная их функции – стимуляция местного иммунитета. (Косвенным подтверждением этого тезиса является убедительно доказанный факт защитного действия L.rhamnosus GG при ротавирусном энтерите).

Можно ли пить кофе при гастрите, язвах желудка и двенадцатиперстной кишки?

Для начала нужно выяснить разницу между гастритом и язвой. Гастрит — это воспаление слизистой оболочки желудка. Этот термин в современной медицинской практике используется уже значительно реже. На замену ему пришло новое определение «эритематозная гастропатия». Это собирательное понятие, включающее в себя изменения в слизистой оболочке желудка и его функции, в частности, нарушение процессов пищеварения и тд. Чаще всего функциональные изменения этого органа приводят к нарушению его функции и двенадцатиперстной кишки (ДПК). Так называемый гастродуоденит.

Большинство людей считает, что процесс пищеварения происходит непосредственно в желудке. Однако, это не совсем верно. Пищеварительный процесс начинается уже на этапе попадания пищи в ротовую полость, где она обрабатывается ферментами слюнных желез. В желудке происходит ее химическая обработка соляной кислотой (HCl), и ее механическое перемешивание до однородной массы благодаря моторике желудка. Так как он является мышечно-полым органом.

Воспалительный процесс ДПК может развиваться как самостоятельная болезнь, но чаще всего как следствие изменения рН желудочного сока и некорректной химической обработке пищи.

Что такое язва? Язва — это дефект слизистой оболочки того или иного органа. Язвы образуются в результате хронического воспалительного процесса или действия агрессивных веществ, также они могут быть вызваны результатом деятельности микроорганизма Helicobacter pylori.

Быстрый темп жизни, нехватка времени для реализации своих планов и проектов, все это характеризирует современного человека. Именно потому наше общество уже невозможно представить без такого напитка как кофе. Которое позволяет нам немного выиграть в борьбе со временем. Однако, что же такое кофе, и каково его влияние на наши органы и организм в целом.

Кофе — это напиток, который готовится из бобов кофейного дерева. Данный напиток обладает рядом положительных воздействий на организм человека. Таких как: улучшение настроения, снятия сонливости, повышение концентрации внимания и работоспособности, профилактика некоторых заболеваний. Но несмотря на все положительные эффекты кофе, он также имеет ряд негативных последствий.

Итак, как влияет данный напиток на пораженный желудок и ДПК?

• Выпитый натощак напиток, раздражает слизистую оболочку желудка, чем стимулирует выделение пищеварительного сока (повышение кислотности). Что в свою очередь негативно влияет на и так поврежденную оболочку.
• Выпитая чашка кофе не должна быть горячей. В основе лечения заболеваний желудка и ДПК лежит принцип бережного действия пищи на них, то есть должна быть адекватна термическая, химическая и механическая обработка пищи и соблюдение оптимальной температуры потребляемых блюд.
• Если Вы вообще не в состоянии ограничить или отказаться от данного напитка. Можно разбавлять кофе молоком. Молоко имеет щелочную рН, что в свою очередь снижает кислотность.
• Следует отказаться от растворимого кофе! Доказано, что закваска кофе за счет добавок только ухудшает состояние заболевания.
• При систематическом употреблении кофе натощак увеличивается риск онкологических заболеваний желудка.

Помимо влияния кофе на организм, есть еще и ряд противопоказаний для употребления данного напитка.

Категорически нельзя употреблять кофе:

• при наличии эрозивной формы заболевания;
• при язвенной болезни;
• в период обострения болезни;
• если после употребления кофе ухудшается самочувствие.

Итак, пить или не пить кофе, это вопрос открытый и его решение ложится целиком и полностью на Ваши ответственные плечи. Но прислушайтесь к предостережениям и будьте здоровы!

Последние Новости

Резекции кишечника | Медицинский Центр Рамбам

О методе лечения

Резекцию кишечника проводят с помощью лапаротомии или лапароскопии. Лапаротомия – это когда хирург делает продольный разрез живота. В этом случае у врача есть возможность видеть операционное поле, и нет нужды использовать высокотехнологичное оборудование и специально обученный персонал.

Преимущества метода лечения

Лапароскопия предполагает использование оборудования, с помощью которого делают пару отверстий, чтобы ввести лапароскопический инструмент. У такого метода множество достоинств, но не всегда она возможна. Главный плюс в том, что не нужно делать широкий разрез, пациент быстрее выздоравливает после того, как была сделана операция.

После того, как хирург делает продольный разрез передней брюшной стенки, он проводит осмотр полости живота, и найдя пораженный участок кишечника, иссекает его. Как только кишечная стенка рассечена, удаляется и часть брыжейки. Сосуды брыжейки перевязывают, а ее иссекают.

Кишечник удаляют очень аккуратно, чтобы не вызвать поражение тканей. Если удаляют всю тонкую или толстую кишку, это тотальная резекция. Если иссекают только часть отдела, это субтотальная резекция.

Чтобы снизить риск возникновения инфекции, ткани изолирую специальными хирургическими салфетками, инструменты периодически меняют по мере оперативного вмешательства.

Когда удален пораженный участок кишечника, врач должен еще и осуществить наложение соединения между концами кишечника. Очень трудно растянуть кишку, и хирургу приходится использовать все свое мастерство, чтобы все сделать. Иногда это не удается сделать, и больному накладывают выводное отверстие на стенку брюшной полости.

Типы соединений кишечника после резекции:

• Конец в конец – его считают самым анатомически подходящим. Просветы соединяются так же, как они были до операции. Но могут образовываться рубцы;
• Бок в бок – противоположные концы кишки соединяют боковыми поверхностями;
• Бок в конец – используется, когда соединяют разные по анатомии отделы кишечника.

Если у хирурга нет возможности обеспечить продвижение содержимого кишечника максимально анатомически верно или дистальный конец должен восстанавливаться долгое время, тогда врач накладывает выводное отверстие на переднюю стенку брюшной полости. Такое отверстие может остаться навсегда, если удалены большие участки кишечника, или непостоянным, чтобы облегчить процесс заживления оставшихся частей кишки.

Колостома – это проксимальный отрезок кишечника, который выведен и зафиксирован к стенке брюшной полости, и через него уже и выходит кал. Дистальный фрагмент ушивают наглухо. Если колостома временная, тогда спустя пару месяцев делают еще одну операцию, чтобы восстановить нормальную целостность кишечника.

Резекция толстой кишки отличается рядом особенностей. Как правило, ее проводят, когда у человека диагностируют новообразования. В этом случае удаляется вся толстая кишка, часть ободочной или ее половина. На операцию уходит много времени, проводится она под общим наркозом.

Хирург производит разрез не менее двадцати пяти сантиметров, проводит осмотр толстой кишки, и после нахождения пораженной области, иссекает его, предварительно перевязав сосуды брыжейки. Когда толстый кишечник удален, накладывают один из видов соединения концов или выводят колостому.

После оперативного вмешательства брюшную полость промывают, ушивают ткани живота, устанавливают в него дренажные трубки, чтобы обеспечить отток отделяемого.

Лапароскопическая резекция также может быть проведена, но не всегда возможно это сделать, так как часто толстая кишка сильно поражена. Поэтому ее проводят не так часто, как хотелось бы и хирургу, и пациентам.

Операции на прямой кишке отличаются от таковых на других отделах, что связано не только с особенностями строения и расположения органа (прочная фиксация в малом тазу, близость органов мочеполовой системы), но и с характером выполняемой функции (накопление каловых масс), которую вряд ли способна на себя взять другая часть толстой кишки.

Если заболевание располагается в верхних двух третях органа, тогда существует вероятность сохранения анального сфинктера. Во время операции хирурги удаляют часть кишки, далее перевязываются сосуды брыжейки и ее отсекают. После этого формируется соединение, которое наиболее приближено к анатомическому ходу терминального отдела кишечника –передняя резекция прямой кишки.

Опухоли нижнего отрезка ректума предполагают иссечение элементов анального канала, в том числе и сфинктер. Подобные операции всегда делают с пластикой, чтобы в той или иной степени обеспечить опорожнение кишечника каловыми массами. Сейчас очень редко проводят брюшно-промежностную экстирпацию, и то лишь в том случае, если у человека поражен сфинктер, кишка, ткани таза. Когда их удаляют, единственная возможность отвести кал – постоянная колостома.  

Сфинктеросохраняющая резекция делается, если нет раковых клеток в анальном жоме, и есть возможность сохранить естественное опорожнение кишечника. Операция проводится под общим наркозом, в конце устанавливают дренажи в малый таз.

Несмотря на высокую квалификацию врачей и использование высокотехнологического оборудования, крайне редко операция обходится без осложнений. К сожалению, кишечник содержит в себе огромное количество бактерий, и они являются источником инфекции.

Чаще всего среди осложнений после проведенной резекции кишечника бывают такие, как:

1. Нагноение в месте послеоперационных швов;
2. Кровотечение;
3. Перитонит из-за несостоятельности швов;
4. Стеноз (сужение) участка кишки в зоне анастомоза;
5. Диспепсические расстройства.

Период после оперативного вмешательства

Процесс восстановления организма больного после того, как была проведена операция во многом зависит от того, в каком объеме проводилось оперативное вмешательство, физического состояния больного, образа жизни и выполнения пациентом предписаний лечащего специалиста. Кроме мер, направленных на предотвращение заражения раны, огромное значение имеет питание больного, так как с пищей столкнется оперированный ранее кишечник. 

Что касается характера питания, то у него есть отличия после того, как провели операцию, и потом он меняется в сторону более привычных для пациента продуктов питания. Человеку, перенесшему операцию нельзя использовать копчености, маринады, острые и жирные блюда, напитки, содержащие газ. Желательно не пить кофе и напитки, содержащие алкоголь.  

В ранний послеоперационный период питание осуществляют до 8 раз в день. Объемы должны быть небольшими. Пища должна быть теплой, жидкой в первые 2 дня. С третьего дня можно включать в рацион смеси, в которых есть белок, витамины. Через одну неделю пациенту можно перейти на протертую пищу.

 Если больному проводят тотальную или субтотальную резекцию тонкого кишечника, когда большая часть системы пищеварения удаляется, тогда период реабилитации затягивается на несколько месяцев. В течение первой недели больному назначают парентеральное питание, затем 2 недели питание предполагает применения особых смесей. Их объем не должен превышать два литра.

Через один месяц в питание можно включать бульон на основе мяса, кисель, кашу, компот, блюда из рыбы. Если больной хорошо переносит питание, тогда можно добавить котлеты из мяса и рыбы на пару. В рацион питания также можно добавить еще блюда из картофеля, кабачки. Свежие овощи и капусту нельзя употреблять.

Через некоторое время, исходя из состояния больного, можно перейти на мелко нарезанную пищу. Срок реабилитации после таких резекций составляет не менее одного года, хотя четкого срока нет. Все индивидуально. Естественно, больному навсегда приходится отказываться от ранее привычной еды. Его рацион станет совсем иным. Но это необходимо делать, чтобы хорошо себя чувствовать и не допускать развития осложнений.

Причина большинства заболеваний

ПРИЧИНА БОЛЬШИНСТВА ЗАБОЛЕВАНИЙ

 От чего зависит состояние нашей иммунной системы?

Наличие или отсутствие дефицитных состояний — витаминов, белков, минералов и даже гормонов?

Наличие или отсутствие аутоиммуных заболеваний (НЯК, болезнь Крона, астма, псориаз, ревматоидный артрит, сахарный диабет 1 типа),

аллергий, дерматитов, нейродермитов, высыпаний на коже, акне?

Бактериальные инфекции (хеликтобактер, кандидоз, стафилококк и тд.)?

Заболевания ЖКТ, сердечно-сосудистой, дыхательной и мочевыделительных систем?

 К сожалению, людей без проблем в какой-либо области практически не встречается. В лучшем случае проблема носит скрытый характер. И основа здоровья — состояние ЖКТ. И первое с чего стоит начать — это нормализация его работы.

 Большинство людей гастрит не считают чем-то серьезным и опасным.

А между тем:

— От качества обработки пищи в желудке зависит как она будет усвоена

— Отсюда берут начало различные формы желудочно-кишечных расстройств

— От концентрации соляной кислоты зависит уровень антибактериальной и противопаразитарной защиты

— Соляная кислота способствует переходу пищи из желудка в двенадцатиперстную кишку

— Участвует в регуляции секреции двенадцатиперстной кишки и поджелудочной железы⠀⠀

Делится гастрит на 2 основные категории — гиперацидные и гипоацидные.

Людей, у которых присутствует тот или иной тип отклонений очень много.

ГИПЕРАЦИДНЫЕ ГАСТРИТЫ — характерна повышенная кислотность.

• Слишком кислое содержимое желудка переходит из желудка в двенадцатиперстную кишку

• Спазм привратниковой части желудка, боль

• Спаз верхнего отдела тонкого кишечника

• Отток секретов печени и поджелудочной железы

• Пища не получает полноценной обработки желчью и соком поджелудочной железы,

• Кислота раздражает слизистую толстого кишечника

• Частые и обильные поносы

• Стенки толстого кишечника испытывают химический ожог

• Поносы сменяются запорами.

 Симптомы гиперацидного гастрита:

— боли/дискомфорт в эпигастрии

— изжоги

— ощущение дискомфорта при длительных перерывах между приемами пищи

— неприязнь к кислому

— отрыжка кислым

— быстрый процесс пищеварения

ГИПОАЦИДНЫЕ ГАСТРИТЫ — характерна пониженная кислотность.

• Из-за отсутствия соляной кислоты нет антибактериального действия желудочного сока

• Не уничтожаются бактерии и микробы, попадая в кишечник

• Там они получают благоприятные условия для размножения

• Ослабляется перистальтика толстого кишечника

• Запор

• Процессы гниения и брожения

• Колиты, энтероколиты, геморрой

• Размножение гнилостной микрофлоры (кандида, стафилококк, хеликобактер и тд.)

• Возможно появление в дальнейшем различного рода опухолей, вплоть до злокачественных!!!

Симптомы гипоацидных гастритов:

— Отрыжка тухлым

— Запоры, геморрой

— Анемия, гиповитаминозы

— Вздутие, газообразование

— Сложно набрать вес

— Зависимость от соли

— Большое количество паразитов, патогенной микрофлоры, хеликобактер и тд.

Как бы это парадоксально не звучало, но какое бы у вас заболевание не было, они возникло неслучайно, под воздействием нескольких факторов: питания, стресса, воды. И начинать нужно прежде всего с питания и смены образа жизни и мышления. Диагностики и лечения ЖКТ.

________

Нужна помощь ведущих специалистов?

Запишитесь на прием по номеру 76-00-00 , 47-00-00

 Имеются противопоказания. Необходимо проконсультироваться со специалистом.

двенадцатиперстная кишка — обзор | ScienceDirect Topics

3.5.1 Двенадцатиперстная кишка

Двенадцатиперстная кишка включает первые 20–30 см тонкой кишки. Это место значительной секреторной и пищеварительной активности, при этом слизь бокаловидных клеток защищает эпителий кишечника от кислого химуса желудка, бикарбонат поджелудочной железы возвращает pH в нейтральную зону, а желчные и панкреатические ферменты поступают внутрь, чтобы помочь в расщепление и усвоение углеводов, жиров и белков.Анатомически эпителий двенадцатиперстной кишки состоит из крипт и длинных ворсинок с «щеточной каймой» микроворсинок, заполненных пищеварительными ферментами для секреции и переносчиками питательных веществ для поглощения. Иммунологически двенадцатиперстная кишка имеет подслизистый GALT, хотя пейеровских бляшек меньше, чем в тощей и подвздошной кишках. ⁵⁶

Эти особенности влияют на микробиом двенадцатиперстной кишки определенным образом. Во-первых, достаточно высокий уровень проглоченного кислорода, а также кислорода, диффундирующего через ткани двенадцатиперстной кишки, предотвращает формирование более анаэробных микробов.Во-вторых, быстрая перистальтика двенадцатиперстной кишки может помешать многим микробам, которые распространяются из верхних сегментов желудочно-кишечного тракта, успеть прижиться или закрепиться. Таким образом, бактериальная нагрузка довольно низкая, в диапазоне 10 ¹ –10 ³ КОЕ / мл, и, как правило, в ней преобладают бактерии типа Firmicutes , Actinobacteria и Proteobacteria , которые содержат много факультативных анаэробов. ^59,60

Первичные желчные кислоты (ЖК), которые синтезируются из холестерина в печени, депонируются через желчный проток непосредственно в двенадцатиперстную кишку.Эти амфипатические молекулы действуют как детергент, который способствует абсорбции липидов путем эмульгирования жировых шариков. Однако было показано, что БА проявляют сильную бактерицидную активность и, следовательно, действуют как селективное давление на более толерантные к желчи микробы по всему тонкому кишечнику. ^15,61 Гидролазы солей желчных кислот (BSH) — это ферменты, которые деконъюгируют первичные ЖК, и они широко распространены среди микробных обитателей кишечника. ⁶² Предполагается, что эти ферменты BSH придают повышенную толерантность к первичным БА, что может быть особенно важно в проксимальном отделе тонкой кишки, где первичные БА наиболее распространены. ^63–65

Новая захватывающая работа по внеклеточному переносу электронов (EET) также предполагает, что железо, которого особенно много в двенадцатиперстной и тощей кишках, может быть важным метаболическим ресурсом для кишечных бактерий, которые могут использовать EET для выработки энергии. ⁶⁶ По аналогии с внутриклеточным окислительным фосфорилированием млекопитающих, эти бактерии могут использовать внеклеточные минералы, такие как железо, в качестве акцептора электронов, вырабатывая электричество и АТФ и поддерживая рост бактерий на неферментируемых источниках углерода.Ортологи пути EET были недавно идентифицированы в геномах широкого спектра патогенных и комменсальных видов Firmicutes , что позволяет предположить, что EET может быть значительной конкурентной адаптацией в ограниченных ресурсами среде проксимального отдела тонкой кишки.

Пищевод человека составляет около 10 дюймов из

Двенадцатиперстная кишка

• Двенадцатиперстная кишка — это первая часть малого кишечник
• Нет брыжейки.
• Длина около 25 см.
• Двенадцатиперстная кишка образует С-образную петлю вокруг головки поджелудочной железы.
• Разделен на четыре части.
  • Первая часть
    • От привратника до шейки желчного пузыря
    • это заключена в печеночно-двенадцатиперстную связку
    • Размер 5 см
  • Вторая часть
    • От шейки желчного пузыря до L3
    • Нисходящая часть
    • длина 8-10 см
    • Забрюшинное образование.
    • Содержит ампулу, в которую впадает проток поджелудочной железы и общая желчь. дренажный канал.
  • Третья часть
    • Поперечная часть
    • Продолжается от L3 влево и вверх
    • О нас 10 см в длину.
  • Часть четвертая
    • Продолжается как тощая кишка на L2
    • Удерживается связкой Трейца.
    • Эта связка соединяет двенадцатиперстная кишка до правой ножки диафрагмы.

1-я часть двенадцатиперстной кишки

• Взаимоотношения
  • Выше и спереди
    • Квадратная доля печени
    • Желчный пузырь
  • Сзади
    • Артерия желудочно-кишечного тракта
    • Желчный проток и воротная вена
    • Головка и шейка поджелудочной железы

2-я часть двенадцатиперстной кишки

• Передняя
  • Печень
  • Поперечная ободочная кишка
  • Jejunum
• Задний
  • Правая почка
  • Вена правая
  • IVC
  • Поясничная мышца
• Медиально
  • Головка поджелудочной железы
  • Желчный проток
  • протока поджелудочной железы
• Боковой

3-я часть двенадцатиперстной кишки

• Передняя
• Задний
  • Правый мочеточник
  • Поясничная мышца
  • IVC
  • Брюшная аорта
• Верхний
• Нижний

4-я часть двенадцатиперстной кишки

• Правый
• слева
• вверху
• Передняя
  • Поперечная ободочная кишка
  • Мезоколон

Прикладная анатомия

Лизат цельной ткани двенадцатиперстной кишки человека (цельная нормальная для взрослых) (NB820-59212): Novus Biologicals

Лизат цельной ткани двенадцатиперстной кишки человека (цельная нормальная для взрослых) Резюме

Применения / разбавления

Примечания по реакционной способности

Упаковка, хранение и составы

Детали лизата для массива

Банкноты

Мы рекомендуем добавить 1 x буфер для образцов с 5% BME (или другим восстановителем) перед использованием.

Фон

Общий белок ткани получают из гомогенатов цельной ткани, и он дает согласованную картину при анализе SDS-PAGE.

Ограничения

Публикации по лизату двенадцатиперстной кишки (NB820-59212) (0)

Нет публикаций по лизату двенадцатиперстной кишки (NB820-59212).

Отправляя информацию о публикации, зарабатывайте подарочные карты и скидки для будущих покупок.

Отзывы для лизата двенадцатиперстной кишки (NB820-59212) (0)

• Обзор без изображения — 10 долларов / 7 евро / 6 фунтов стерлингов / 10 канадских долларов / 70 юаней / 1110 йен
• Обзор с изображением — 25 долларов / 18 евро / 15 фунтов стерлингов / 25 канадских долларов / 150 юаней / 2500 йен

Общие протоколы продукта

Видео протоколы

Часто задаваемые вопросы по лизату двенадцатиперстной кишки (NB820-59212) (0)

Другие доступные форматы

Дополнительные продукты двенадцатиперстной кишки

Блоги о двенадцатиперстной кишке

Duodenum Intestine-Chip для доклинической оценки лекарственных средств на соответствующей модели человека

Ряд моделей in vitro, и животных были разработаны и рутинно применяются для характеристики и прогнозирования абсорбции, метаболизма и выведения ксенобиотиков у людей.Среди них одной из наиболее широко используемых моделей является обычная монослойная культура Caco-2, которая в настоящее время считается «золотым стандартом» при изучении распределения лекарств в кишечнике in vitro . Однако присущие ему ограничения, такие как отсутствие у соответствующей трехмерной цитоархитектуры in vivo , отсутствие соответствующего соотношения популяций клеток, измененные профили экспрессии переносчиков лекарств и ферментов, метаболизирующих лекарственные средства, особенно CYP450, и аберрантный индукционный ответ CYP450, затрудняют их использование. модель для прогнозирования ADME в клинике.С другой стороны, модели на животных, сохраняя надлежащие физиологические условия, демонстрируют видовые различия как в метаболизме лекарств, так и в транспорте лекарств, а также в субстратной специфичности ядерных рецепторов, регулирующих CYP450 и переносчики. По этим причинам необходимы новые модели для прогнозирования ADME человека и определения риска DDI, опосредованного кишечными CYP450 и переносчиками лекарств.

Текущие доклинические модели не могут полностью воспроизвести сложную природу и функцию ткани кишечника человека, что приводит к ограниченной точности и плохой предсказуемости при разработке лекарств.В этом исследовании мы использовали технологию Organs-on-Chips и первичные органоиды двенадцатиперстной кишки взрослых для имитации многоклеточной сложности, физиологической среды, архитектуры и функций естественной кишечной ткани и создания альтернативной подходящей для человека модели для оценки ADME перорально вводимых лекарств. Поскольку клинические фармакологические исследования обычно проводятся на взрослых людях, и хорошо известно, что фармакокинетика у детей сильно отличается от фармакокинетики у взрослых в отношении абсорбции, распределения, метаболизма и выведения (Grimsrud et al., 2015), мы использовали органоиды, выделенные от взрослых здоровых доноров, для разработки Duodenum Intestine-Chip. Наши новые результаты, представленные здесь, дополняют методологию и характеристику модели кишечного чипа, установленную в нашем предыдущем отчете (Kasendra et al., 2018) с использованием органоидов, полученных из биопсии детей. Мы демонстрируем, что физиологическая имитация чипа двенадцатиперстной кишки превосходна и превосходит органоиды в их первоначальной форме (статическая, а не на чипе). Синергетическое использование клеток, полученных из органоидов, и органов-на-чипах позволяет создать неповрежденную поверхность раздела ткань-ткань, образованную эпителием кишечника взрослого и эндотелиальными клетками микрососудов тонкого кишечника.Применение механической стимуляции в виде непрерывного просветного и сосудистого кровотока оказало благотворное влияние на архитектуру ткани кишечника. Увеличение высоты эпителиальных клеток, приобретение клеточной морфологии, напоминающей булыжник, образование четко определенных межклеточных соединений и плотных микроворсинок кишечника объяснялись наличием кровотока. Мы подтвердили развитие сопоставимых уровней барьерной функции кишечника для гидрофильных растворенных веществ (декстрана) в культурах Chip-чипов двенадцатиперстной кишки, полученных из органоидных клеток трех независимых доноров.Эта функциональная характеристика кишечной ткани становится критической при изучении поглощения, оттока и распределения лекарств в поляризованных системах органов. Хотя многие исследования продемонстрировали, что трансвелл Caco-2 позволяет хорошо прогнозировать трансцеллюлярную абсорбцию лекарств, они оказались ненадежными при оценке пассивной диффузии полярных молекул, таких как гидрофильные лекарственные средства и пептиды. Это связано с гораздо меньшей по сравнению с ворсинками тонкой кишки эффективной площадью монослоя и его более высоким сопротивлением плотного соединения (Press and Di Grandi, 2008; Kumar et al., 2010). Органоиды быстро стали моделью интереса при открытии и разработке лекарств, однако использование органоидов для изучения кишечной проницаемости было связано с серьезными техническими трудностями, связанными с их трехмерной структурой, ограниченным доступом к просвету и необходимостью использования. сложных методов микроинъекции для нанесения соединения на апикальную клеточную поверхность. С другой стороны, Duodenum Intestine-Chip имитирует сложную архитектуру кишечной ткани, о чем свидетельствует наличие трехмерных ворсиноподобных структур на сканирующих электронных микрофотографиях, полученных на 8-й день культивирования в жидкости, позволяя при этом напрямую подвергать апикальную клеточную поверхность тестируемым соединениям. .Это представляет собой серьезное технологическое преимущество перед трансвеллером Caco-2 и органоидами и может обеспечить действенную альтернативу доклиническим исследованиям всасывания лекарств в кишечнике.

Иммунофлуоресцентная визуализация и анализ экспрессии генов продемонстрировали, что Chip кишечника двенадцатиперстной кишки обладает специализированными субпопуляциями кишечных клеток, которые отсутствуют в линиях опухолевых клеток, включая Caco-2. Важно отметить, что они присутствуют в кишечной микросхеме двенадцатиперстной кишки в физиологически значимых соотношениях, подобных тем, которые наблюдаются в нативной двенадцатиперстной кишке человека.Экспрессия маркеров, специфичных для типов кишечника, которые естественным образом находятся в компартменте ворсинок — щелочная фосфатаза для абсорбирующих энтероцитов, муцин 2 для бокаловидных клеток, хромогранин А для энтероэндокринных клеток — увеличивалась до 8-го дня культивирования Duodenum Intestine-Chip. Это сопровождалось снижением экспрессии генов, специфичных для клеток, проживающих в криптах, — лизоцима для клеток Панета и Lgr5 для стволовых клеток (данные не показаны), что свидетельствует о приобретении фенотипа терминально дифференцированных клеток всеми клетками, присутствующими в чипе. .Это согласуется с хорошо известным эффектом удаления Wnt3a на происходящий из органоидов первичный кишечный эпителий (Sato et al., 2009; Sato et al., 2011). Поскольку клетки кишечника человека не производят значительных количеств Wnt3a, EGF или некоторых других факторов роста, необходимых для деления стволовых клеток и пролиферации клеток, удаление добавки Wnt3a приводит к потере Lgr5-положительных клеток, снижению пролиферации клеток, появлению секреторных клеток. клонов, включая бокаловидные и энтероэндокринные клетки, и трансформацию незрелых криптоподобных энтероцитов в дифференцированные клетки, поглощающие питательные вещества.Присутствие дифференцированных клеточных субпопуляций имеет решающее значение для моделирования различных аспектов биологии и функций кишечника, включая выработку слизи, антимикробный ответ, взаимодействие хозяина и микробиома, секрецию кишечных гормонов, переваривание и всасывание питательных веществ. Учитывая, что мы показали, что чип кишечника двенадцатиперстной кишки точно воспроизводит физиологически релевантные соотношения этих клеток, его можно легко применять помимо приложений ADME при разработке новых подходов и терапевтических средств, нацеленных на конкретные популяции клеток.Например, он может служить для оценки специфического воздействия на клетки Панета, которые с помощью ряда генетических исследований были причастны к воспалительному заболеванию кишечника (Xavier and Podolsky, 2007; Khor et al., 2011; Adolph et al., 2013; Liu et al., 2016b).

Мы сравнили глобальные профили экспрессии РНК, полученные с помощью RNA-seq, чипа двенадцатиперстной кишки, органоидов двенадцатиперстной кишки и нативной ткани двенадцатиперстной кишки человека, чтобы определить, какая из двух моделей лучше отражает их естественный аналог.Удивительно, хотя чипы и органоиды были установлены с клетками одного и того же происхождения (доноры, источник ткани), их транскриптомные профили значительно отличались друг от друга — общее количество 472 генов с повышенной и пониженной регуляцией было обнаружено в это сравнение. Более того, несколько различных анализов продемонстрировали, что транскриптом Duodenum Intestine-Chip больше напоминает глобальную экспрессию генов в двенадцатиперстной кишке взрослого человека, чем органоиды, что убедительно свидетельствует о том, что Chip Duodenum Intestine-Chip представляет собой более близкое приближение к ткани человека in vivo.Важно отметить, что подмножество 305 генов, как было обнаружено, является общим для чипа кишечника двенадцатиперстной кишки и тканей человека, но отличается от органоидов, что подчеркивает полезные изменения в профиле транскрипции органоидов двенадцатиперстной кишки, достигаемые путем комбинирования их с органами на чипе. Было показано, что эти гены связаны с важными биологическими функциями, включая пищеварение, транспорт питательных веществ и ионов, организацию внеклеточного матрикса, заживление ран, метаболизм, детоксикацию и развитие тканей.Кроме того, было обнаружено, что несколько генов, участвующих в метаболизме лекарств, включая, помимо прочего, ферменты метаболизма лекарств: CYP3A4, UGT1A4, UGT2A3, UGT2B7, UGT2B15, UGT2B17 , демонстрируют сходный паттерн экспрессии в двенадцатиперстной кишке и ткани двенадцатиперстной кишки у взрослых. в то время как они отличаются от органоидов, что свидетельствует об улучшенном потенциале этой системы для изучения биотрансформации ксенобиотиков и DDI.

Кишечный отток и переносчики поглощения являются ключевыми детерминантами абсорбции и последующей биодоступности большого количества перорально вводимых лекарств. In vivo -подобная экспрессия основных кишечных транспортеров лекарственных средств, включая клинически значимые MDR1, BCRP и PEPT1 , была продемонстрирована в системе Duodenum Intestine-Chip. Кроме того, мы подтвердили их апикальную локализацию, которая, как известно, имеет решающее значение для уникальной сторожевой функции этих белков в контроле доступа лекарств к метаболизирующим ферментам и выделительным путям (Shugarts and Benet, 2009; Estudante et al., 2013) в плазме. мембрана кишечных эпителиальных клеток, выращенных на чипе.Функциональная оценка оттока MDR1 выявила аналогичный уровень активности, наблюдаемый в Caco-2 Intestine-Chip, и его успешное ингибирование винбластином. Примечательно, что по сравнению с Caco-2 Intestine-Chip система чипов, созданная с использованием клеток, полученных из органоидов двенадцатиперстной кишки, показала улучшенные относительные уровни экспрессии мРНК органических транспортеров анионов и катионов: OATP2B1 и OCT1 . Эти переносчики ответственны за поглощение множества ксенобиотиков, включая статины, противовирусные препараты, антибиотики и противоопухолевые препараты (Roth et al., 2012). Хотя в модели Caco-2 наблюдалась значительно более высокая экспрессия этих белков по сравнению с тканью двенадцатиперстной кишки человека, их уровни оказались ближе к in vivo в Chip Duodenum Intestine-Chip. Наши результаты показывают, что система Duodenum Intestine-Chip может быть применена для оценки конкретного вклада переносчиков оттока в распределение лекарств, для оценки активного транспорта ксенобиотиков через кишечный барьер, а также для моделирования повышенной абсорбции путем нацеливания на конкретные переносчики поглощения, такие как PEPT1 или OATP2B1.

Оценка экспрессии, активности и лекарственной индукции CYP3A4, основного фермента, участвующего в метаболизме ксенобиотиков у человека, выявила ключевое преимущество чипа кишечника двенадцатиперстной кишки над моделями Caco-2. Значительно более высокая и намного ближе к in vivo экспрессия CYP3A4 вместе с повышенным метаболизмом тестостерона (6β-гидроксилирование) наблюдались в Chip-Chip двенадцатиперстной кишки по сравнению с системой на основе клеток Caco-2. В соответствии с результатами других авторов (Negoro et al., 2016) CYP3A4 не обнаруживался на уровне белка в клетках Caco-2 и оставался неизменным при стимуляции RIF (агонист PXR). Кроме того, хотя стимуляция витамином D3 приводила к значительному увеличению экспрессии мРНК цитохрома P450 в Caco-2 Intestine-Chip, она не оказывала влияния на метаболическую активность этого фермента. Напротив, успешная и воспроизводимая модуляция экспрессии и ферментативной активности CYP3A4 с использованием агонистов, специфичных для PXR и VDR, рифампицина и витамина D3, соответственно, была достигнута в Duodenum Intestine-Chip, созданном индивидуально из клеток, полученных из органоидов трех независимых доноров.Наблюдаемые уровни индукции CYP3A4 были аналогичны показанным для срезов кишечника (van de Kerkhof et al., 2008), что свидетельствует о пригодности этой модели для исследований метаболизма лекарств, что не может быть подтверждено предыдущими моделями Caco-2.

В заключение, Duodenum Intestine-Chip обеспечивает более близкую к in vivo модель двенадцатиперстной кишки человека по сравнению с органоидами или клетками Caco-2 и представляет собой потенциальный инструмент для доклинической оценки лекарств на более подходящей для человека модели.Более того, поскольку он состоит из клеток, выделенных от отдельных пациентов, его можно персонализировать по мере необходимости, чтобы оценивать индивидуальные различия в распределении лекарств и ответах, изучать влияние генетических полиморфизмов на фармакокинетику и фармакодинамику, а также разделять влияние лекарств. различные факторы, такие как возраст, пол, состояние болезни и диета, на метаболизм, клиренс и биодоступность ксенобиотиков. Эта система также может помочь нам лучше понять базовую биологию кишечной ткани человека в здоровом и болезненном состояниях и потенциально способствовать новым терапевтическим разработкам по мере того, как мы углубляем наше понимание механизмов, управляющих ключевыми фенотипами заболеваний.

Ассоциация белка HFE с рецептором трансферрина в энтероцитах крипт двенадцатиперстной кишки человека

Abstract

При наследственном гемохроматозе (HH) кишечная абсорбция пищевое железо увеличивается, что приводит к чрезмерному накоплению железа в ткани и связанное с этим повреждение органов. Белок HFE, который является дефектным в HH обычно экспрессируется в энтероцитах крипт двенадцатиперстной кишки, где он имеет уникальную, преимущественно внутриклеточную локализацию. В плаценте, белок HFE колокализуется и образует стабильную ассоциацию с рецептор трансферрина (TfR), обеспечивающий связь между HFE транспорт белков и железа.В настоящем исследовании мы изучили связь белка HFE с TfR в энтероцитах человека двенадцатиперстной кишки и измерили поглощение связанного с трансферрином железа и ионных железо изолированными энтероцитами крипт и ворсинок. Иммуноцитохимия показали, что белок HFE и TfR экспрессируются в крипте энтероциты. Вестерн-блоттинг показал, что, как и в случае с человеческими плацента, белок HFE в энтероцитах крипт физически связан с TfR и с β ₂ -микроглобулин.Клетка склепа фракция демонстрирует значительно более высокое поглощение железа, связанного с трансферрином чем клетки ворсинок. С другой стороны, клетки ворсинок показали 2–3 в разы выше поглощение ионного железа, чем клетки крипт. Мы предлагаем Белок HFE модулирует захват железа, связанного с трансферрином, из плазмы. энтероцитами крипт и участвует в механизме, с помощью которого энтероциты крипт определяют уровень запасов железа в организме. Обесценение эта функция, вызванная мутациями гена HFE в HH, может дают парадоксальный сигнал в энтероцитах крипт, который программирует дифференцируются энтероциты для поглощения большего количества железа, поступающего с пищей, когда они созревают в энтероциты ворсинок.

Наследственный гемохроматоз (ГГ) — распространенный аутосомно-рецессивный расстройство, характеризующееся повышенным всасыванием железа, которое приводит к образованию железа перегрузка паренхиматозных клеток многих органов (1–4). Клинический последствия накопления железа включают цирроз печени, гепатоцеллюлярная карцинома, диабет, сердечная недостаточность, артрит и гипогонадизм. Feder et al. (5) клонированный ген-кандидат (HFE) для HH. В их исследовании 83% из 178 пациентов с клинически диагностированный HH оказался гомозиготным по тем же миссенс-мутация (C282Y) в гене HFE .Высота частота мутации C282Y у пациентов с HH подтверждена другими исследователями (6–13). Подтверждающее доказательство того, что неисправен HFE Ген вызывает HH был обеспечен недавними наблюдениями в мышей с целевым разрушением гена HFE (14). По возрасту Через 10 недель у мышей с нокаутом гена HFE было повышено насыщение трансферрина и увеличение запасов железа в гепатоцитах, подтверждая предсказание, что дефект мыши HFE ген приведет к чрезмерному усвоению пищевого железа.

Белок HFE человека, предсказанный на основе последовательности кДНК, является основным комплексный мембранный белок класса I комплекса гистосовместимости (5). Было предсказано, что мутация C282Y разрушит критическую дисульфидную связь. в α3-домене белка HFE и отменяет связывание мутантный белок HFE к β ₂ -микроглобулин (β ₂ M) (5). Feder et al. (15) и Waheed et al. (16) показали, что мутантный белок HFE C282Y не связывается с β ₂ M в эмбриональном организме человека клетки почек (293 клетки) и клетки COS-7, трансфицированные мутантом кДНК.Waheed et al. (16) также продемонстрировал, что большая часть Мутантный белок C282Y остается в агрегатах с высокой молекулярной массой, не работает пройти позднюю обработку Гольджи и пройти ускоренную деградация. Хотя эти исследования подтвердили предсказания влияние мутации C282Y на ассоциацию HFE с β ₂ M и его перенос на поверхность клетки, они не прояснил связь между белком HFE и железом абсорбция.

Наши предыдущие иммуногистохимические исследования продемонстрировали иммунолокализация белка HFE в тканях желудочно-кишечного тракта (17) и также показали, что белок HFE экспрессируется в плаценте (18).Здесь белок HFE локализован на апикальной поверхности клетки синцитиотрофобласта и физически связаны с β ₂ M и рецептор трансферрина (TfR), который опосредует транспортировку железа, связанного с трансферрином, к плоду через TfR-опосредованный эндоцитоз. Независимо, Feder et al. (19), Lebrón et al. (20) и Gross et al. (21) сообщили, что ассоциация экспрессированного рекомбинантного белка HFE с TfR в культивируемых клетках (19, 21) и in vitro (20) снижает его сродство к его лиганду, диферрическому трансферрину, и предположил, что нормальный белок HFE может играть роль в подавлении TfR-опосредованного поглощение железа.Хотя такая интерпретация роли нормального HFE может объяснить, как потеря функционального гена HFE может привести к для увеличения поглощения железа, связанного с трансферрином, паренхиматозными тканями в HH, это не может объяснить, как такие мутации приводят к нарушению регуляции абсорбция железа с пищей энтероцитами ворсинок кишечника при ДГ пациенты.

Наши предыдущие исследования с использованием иммуногистохимии показали, что крипта энтероциты двенадцатиперстной кишки экспрессируют белок HFE (17). В настоящее время исследования, мы демонстрируем, что белок HFE в энтероцитах крипт физически связан с TfR.Клеточная колокализация и ассоциация этих белков в энтероцитах крипт приводит нас к предполагают, что белок HFE модулирует транспорт Связанное с трансферрином железо из кровотока в энтероциты крипт. Это взаимодействие позволит нормальному белку HFE участвовать в механизм, с помощью которого клетки крипт определяют уровень запасов железа в организме и влияют на уровень железа в клетках крипт, который, в свою очередь, регулирует программа развития, определяющая количество пищевого железа они впитаются, когда созреют в энтероциты ворсинок.

МЕТОДИКА ЭКСПЕРИМЕНТА

Реагенты.

Производство и характеристика HFE-CT16 антитело против полипептида из 16 C-концевых аминокислот на основе кДНК белка HFE (17). Используя соответствующий пептид-смола Affigel 10, пептид-специфический IgG Аффинно очищают и хранят в 50% глицерине при -20 ° C. Кролик антитело против человеческого β ₂ M было приобретено у Сигма. Моноклональное антитело против человеческого TfR было продуктом Zymed.Человек апотрансферрин и нитрилотриуксусная кислота (NTA) были приобретены в Sigma, и ⁵⁹ FeSO ₄ было приобретено в Amersham Pharmacia. Апотрансферрин был помечен ⁵⁹ Fe в присутствии NTA, как описано (22).

Подготовка образцов двенадцатиперстной кишки и изоляция кишечника Ячейки.

Препараты двенадцатиперстной кишки получены во время хирургических операций. для карциномы поджелудочной железы. Они были собраны после информированного согласия, и исследование проводилось в соответствии с положениями Хельсинкская декларация.Некоторые образцы были зафиксированы в жидкости Карнуа. и залили парафином, как описано (17). Один образец был очищен с физиологическим раствором, замороженным в жидком азоте и хранящимся при температуре −80 ° C перед использовать для вестерн-блотов, иммунопреципитации и функциональных исследований. Различные клеточные фракции слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки были получены с помощью дифференциальная техника соскабливания, как описано (23). Используя короткий край предметного стекла микроскопа слизистая оболочка оттаявшего образца двенадцатиперстной кишки была осторожно соскабливают для удаления клеток во фракции 1, содержащей преимущественно клетки ворсинок.Процесс соскабливания повторялся с возрастающей степенью давления для фракций 2 и 3. Окончательная зачистка с наибольшим Давление давало фракцию 4, содержащую большую часть ячеек крипт. Соскобы быстро переносили в ледяной PBS. Клетки были восстановлено после центрифугирования при 15000 × г за 10 мин при 4 ° C. Осадки клеток ресуспендировали в PBS для дальнейшего эксперименты.

Ассоциация белка HFE с TfR и β