Дгэа инструкция по применению: DHEA Dehydroepiandrosterone гормон ДГЭА дегидроэпиандростерон Puritans Pride 50 мг. 100 штук – инструкция по применению

Содержание

Natrol, ДГЭА, DHEA, 25 мг, 180 таблеток.

Описание
  • Обеспечивает сбалансированный гормональный уровень
  • Способствует сохранению здорового состояния
  • Биологически активная добавка
  • На 100% растительный продукт

Что такое ДГЭА?

ДГЭА (дегидроэпиандростерон) — это гормон, который вырабатывается надпочечниками в организме человека.

ДГЭА является предшественником мужских и женских половых гормонов.

Рекомендации по Применению

Принимать 1 таблетку один раз в день во время еды. Важно! Перед применением прочитайте инструкцию и ознакомьтесь с противопоказаниями.

Другие Ингредиенты

Целлюлоза, стеарат магния, диоксид кремния, стеариновая кислота, камедь целлюлозы, мальтодекстрин, гуммиарабик.

Нет дрожжей, пшеницы, молока, яиц, сои, искусственных красителей или ароматизаторов, добавленного сахара консервантов.

Предупреждения

Хранить в сухом и прохладном месте.

Хранить в недоступном для детей месте.

Не для использования лицами в возрасте до 18 лет. Не принимать во время беременности и кормления грудью.

Принимать по 1 таблетке в день.

Предупреждения

Хранить в сухом и прохладном месте.

Хранить в недоступном для детей месте.

Не для использования лицами в возрасте до 18 лет. Не принимать во время беременности и кормления грудью.

Проконсультируйтесь со своим врачом или лицензированным и квалифицированным медицинским специалистом перед использованием продукта, если у вас есть сейчас рак простаты, увеличение простаты, заболевание сердца или низкий уровень «хорошего» холестерина (ЛПВП) или семейная история данных заболеваний или вы принимаете любую другую пищевую добавку, рецептурное или безрецептурное лекарство. Не превышать рекомендуемую дозировку. Превышение рекоммендованой дозы может стать причиной серьезных побочных эффектов. Возможные побочные эффекты вклчают потерю волос, слабость, рост волос на лице (у женщин), агресивность, раздражительность и повышенные уровни эстрогена.

Прекраттите прием и позвоните квалифицированному специалисту или врачу немедленно, если у вас участится сердцебиение, появится головокружение, размытое видение или подобные симптомы.

Информация о Добавках

 
Serving Size: 1 Tablet
Serving Per Container: 300
  Amount Per Serving %DV
Calcium (as Calcium Carbonate) 50 mg 5%
DHEA (Dehydroepiandrosterone) 25 mg *
*Daily Value not established

 

7 keto dhea отзывы

7 keto dhea отзывы

7 keto dhea отзывы

>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>

Что такое 7 keto dhea отзывы?

Инструкция по применению предельно проста. Капсулы Кето Genetic нужно принимать 2 раза в день (1-2 капсулы) за 20-30 минут до еды. Длительность курса зависит от поставленной цели (тяжести ожирения, физических характеристик реального больного). Судя по отзывам врачей, обычно для стойкого похудения достаточно 4-6 недель. За это время при правильном подходе можно потерять 10-12 килограммов.

Эффект от применения 7 keto dhea отзывы

Я очень сильно поправилась после второй беременности, буквально превратилась в замученного бегемота. Дети отнимали все мое время, я не могла найти способ отрегулировать свое питание или заняться спортом. Так что пришлось действовать радикально и искать вспомогательное средство. Эти капсулы выбрала из-за того, что у них натуральный состав и, в принципе, вполне доступная цена. Пропила курс, не пропуская приемы, и действительно похудела, не зря о средстве такие отзывы хорошие пишут. Сбросила 11 килограмм, но лишний вес еще остался, хочу повторить прием после незначительно перерыва.

Мнение специалиста

Принимая капсулы Кето Genetic главное – помнить, что прием натурального комплекса не отменят диеты. Если поглощать быстрые углеводы и запивать их сладкой газировкой, то ни одно лекарство не будет эффективным.

Как заказать

Для того чтобы оформить заказ 7 keto dhea отзывы необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

Отзывы покупателей:

Даша

Я знаю разные препараты для похудения, но Keto Genetic наиболее эффективный. Он содержит только природные компоненты, которые бережным образом влияют на организм. Лишний вес начинает постепенно уходить, потому как сжигаются жировые отложения. Побочных эффектов не наступает, что можно назвать преимуществом. Средство быстро начинает действовать, и уже через несколько дней можно заметить первый результат.

Я всем своим клиентам советую данные капсулы, так как уверена в их качестве.

Вика

Ведущие диетологи мира уже назвали Keto Genetic спасением человечества от лишнего веса. Сейчас на него возлагаются самые большие надежды, и комплекс уже вошел в Государственные программы по похудению в таких странах, как США, Канада, Франция, Дания. Это не обычный БАД, а настоящее лекарство от лишнего веса!

Некоторые покупатели интересуются тем, были ли проведены клинические исследования средства Кето Genetic. Безусловно, производитель ответственно подходит к делу, поэтому он тщательно проверил препарат перед продажей. Люди, которые согласились принять участие в эксперименте, отметили положительные результаты. В 98% случаях удалось сбросить от 5 до 12 кг. Все испытуемые отлично себя чувствовали во время приема капсул и не наблюдали побочных эффектов. Где купить 7 keto dhea отзывы? Принимая капсулы Кето Genetic главное – помнить, что прием натурального комплекса не отменят диеты.

Если поглощать быстрые углеводы и запивать их сладкой газировкой, то ни одно лекарство не будет эффективным.
7 кето — это метаболит ДГЭА, который обеспечивает те же преимущества, что и ДГЭА, но без связанных с ним нежелательных эффектов. ДГЭА — это дегидроэпиандростерон, основа женских и мужских гормонов. Now 7-KETO: 5 отзывов покупателей и фармацевтов. Общий рейтинг на основе 5 отзывов наших покупателей. . С 7-кето улучшилась концентрация и память. На сушке хорошо поддерживает ЦНС. Есть сравнения с ним и без приема препарата. 7-Кето ДГЭА – это метаболит ДГЭА, негормональный, ускоряющий процессы жиросжигания и увеличивающий скорость метаболизма в организме. Очень часто я встречал на практике мнение, что это прекурсор ДГЕА, но однако это не так. 7-кето-ДГЭА — это естественный метаболит дегидроандростерона (ДГЭА). 7-кето-ДГЭА участвует во многих биологических функциях, включая клеточное производство тепла (термогенез). Известно, что производство ДГЭА и 7-кето-ДГЭА, а также скорость метаболизма снижаются с возрастом.
NOW 7-Keto. Жиросжигатель Puritan’s Pride 7-Keto DHEA — отзывы. Рекомендуют 100%. . В каталогах сайтов, посвященных спортивному питанию и добавкам, 7-Keto DHEA описывается как препарат, открытый в 1999 г. в США и способствующий общему омолаживанию организма, повышению иммунитета и активному. Отзывы про продукцию Now Foods, 7-KETO. Отрицательные и положительные стороны. . Выбрала 7-КЕТО как самый безопасный и действенный. Пропила две баночки, скажу честно — я больше чем довольна полученным результатом. Конечно, не одними БАДАми едиными, я ещё и диет-режим соблюдала, и. Отзывы понравились. Хочу купить. . Может ли 7-KETO способствовать выпадениию волос и облысению у мужчин? . Уважаемые напишите что препарат DHEA Metabolik c 2010 входит в список допинга по данным Русада,а вообще препарат работает по всем заявленным пунктам! <Лилия> 26.05.2016 14:15. Так его. 7- КЕТО – метаболит ДГЭА и поэтому не имеет побочных эффектов. Итак что такое ДГЭА? ДГЭА- мать гормонов. Если существует противоядие от старения, то это может быть ДГЭА.
Повышение полового влечения, обновление энергии и выносливости, прояснение ума, улучшение памяти- все эти эффекты. 7 КЕТО (7 Keto) — отзывы, описание, фото, инструкция по применению. . Главным его отличием от ДГЭА является способность в безопасной манере способствовать снижению жировой массы тела и поддерживать стройность. ДГЭА 7 Кето. Привет, девочки! Давно не писала сама, хотя сижу в Сообществе каждый день, читаю — радуюсь и плачу . Мой Г скромно порекомендовала ДГЭА 7-Кето, говорит, что при моем низком АМГ и высоких показателей ЛГ, ФСГ можно попробывать так называемый «Элексир молодости». Короче, я. 7-Keto от Now Foods надо принимать по одной капсуле во время еды два раза в день, тогда эффект будет максимальным. . Добавка 7-Keto от компании Now Foods для улучшения метаболизма и похудения. Как состав действует на организм? Эффективность. Где купить дешевле? С возрастом обменные процессы. 7-КЕТО помогает бороться с лишним весом, замедляет процесс старения на клеточном уровне, нормализует гормональный баланс, увеличивает энергетический потенциал; состав: 7-Кето, экстракт зеленого чая, КЛК, экстракт корня Родиолы.
7-Кето (англ. 7-Keto) – это метаболит, который способствует сжиганию жиров, активизирует метаболизм и заряжает организм энергией. Он участвует в синтезе множества гормонов, число которых неизменно снижается с возрастом, то есть он поддерживает молодо. Специальные добавки DHEA (7-Keto). . Отзывы могут оставлять только зарегистрированные пользователи. Кето диета: плюсы и минусы, меню, рецепты. Кето диета получила название от слова кетоз. Это состояние характеризуется повышением уровня кетоновых тел в организме, которые в дальнейшем он использует для поддержания собственной жизнедеятельности. Если человек получает недостаточное.
http://edilizia.comune.forli.fc.it/public/upload/keto_genetics_dlia_pokhudeniia_realnye_otzyvy_vrachei5412.xml
http://www.zaek.com.br/uploads/ketogenetik_kapsuly_otzyvy_i_tsena3051.xml
http://tortugafilms.com/adminfiles/kupit_ketogenetik_otzyvy9123.xml
http://www.spbi.cz/resketo_genetics_kupit5135.xml
http://e-ceramika. pl/userfiles/preparat_keto_genetik5552.xml
Я очень сильно поправилась после второй беременности, буквально превратилась в замученного бегемота. Дети отнимали все мое время, я не могла найти способ отрегулировать свое питание или заняться спортом. Так что пришлось действовать радикально и искать вспомогательное средство. Эти капсулы выбрала из-за того, что у них натуральный состав и, в принципе, вполне доступная цена. Пропила курс, не пропуская приемы, и действительно похудела, не зря о средстве такие отзывы хорошие пишут. Сбросила 11 килограмм, но лишний вес еще остался, хочу повторить прием после незначительно перерыва.
7 keto dhea отзывы
Инструкция по применению предельно проста. Капсулы Кето Genetic нужно принимать 2 раза в день (1-2 капсулы) за 20-30 минут до еды. Длительность курса зависит от поставленной цели (тяжести ожирения, физических характеристик реального больного). Судя по отзывам врачей, обычно для стойкого похудения достаточно 4-6 недель. За это время при правильном подходе можно потерять 10-12 килограммов.
Кето генетик – препарат, при помощи худеют до 12 кг за месяц без изменения образа жизни. Единственное условие – соблюдать инструкцию по применению Keto genetic. Как правильно принимать препарат? Как принимать Кетогенетик. Оригинальный ketogenetic содержит детальную инструкцию, в которой описана схема приема капсул. При регулярном употреблении, через 2-3 дня уйдут первые кило, а к концу курса потеря составит 10-12 килограмм. Средство принимаю. КЕТО ГЕНЕТИК инструкция по применению, отзывы, аналоги, цены и наличие в аптеках. КЕТО ГЕНЕТИК: Фармакологические свойства, Показания к применению, Способ применения, Противопоказания, Условия хранения, Форма выпуска. Универсальность препарата. Даже если пациент относится к группе аллергиков или людей с органическими особенностями применение капсул Keto Genetic не . Товар доставлен через 14 дней. В общем, начала по инструкции пить капсулы. Скинула 10 кг за 30 дней. Keto Slim препарат для похудения. Инструкция по применению. Фармакологическое действие. Таблетки по похудению Кетогенетик основаны на принципе кетоза — самый эффективный на данный момент способ похудения. Рассмотрим подробно инструкцию по применению Кетогенетик, состав препарата, как правильно принимать капсулы для похудения. Благодаря натуральному составу Keto Genetic – капсул с жиросжигающим эффектом. Кетогенетик — инструкция по применению капсул для похудения, подробный состав таблеток и существующие аналоги. . Когда начинает действовать кетогенетик? Сначала применения keto genetic происходит сокращение объемов в проблемных местах – животе, бедрах, талии. За первую неделю показатели. Кето Генетик — капсулы на основе комплекса витаминов, минералов и аминокислот, применяемый для похудения. . Препарат работает по принципу кетогенной диеты. Ограничивает попадание углеводов в организм пациента, тем самым запускает процесс мягкого похудения. Принцип строится на возможности. Основой Кето Генетик являются кетоновые тела, добываемые из натуральных компонентов, которые отличаются . Инструкция по применению. Чтобы добиться желаемого результата, необходимо грамотно подойти к процессу похудения. Несмотря на то, что производитель гарантирует эффект без.

7 keto dhea отзывы

7 keto dhea отзывы

7 keto dhea отзывы

>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>

Что такое 7 keto dhea отзывы?

Инструкция по применению предельно проста. Капсулы Кето Genetic нужно принимать 2 раза в день (1-2 капсулы) за 20-30 минут до еды. Длительность курса зависит от поставленной цели (тяжести ожирения, физических характеристик реального больного). Судя по отзывам врачей, обычно для стойкого похудения достаточно 4-6 недель. За это время при правильном подходе можно потерять 10-12 килограммов.

Эффект от применения 7 keto dhea отзывы

Keto Genetic не просто является равноценной заменой диетам, а считается лучшим их аналогом. Препарат полностью состоит из натуральных ингредиентов, поэтому не имеет строгих ограничений к применению. Все пациенты по итогам пройденного лечения остаются довольны полученным результатом. В среднем за один месяц происходит снижение веса на 5-15 кг. Итог всегда зависит от начального ИМТ и возраста человека. При использовании уникального средства главное соблюдать инструкцию. Уменьшение дозировки приведёт к снижению эффективности терапии, а увеличение никогда не ускорит процесс похудения. Прохождение курса допускается в домашних условиях, без одобрения врача. Безопасность капсул достигает 100%. Данный факт был доказан в ходе многочисленных клинических испытаний на добровольцах.

Мнение специалиста

Натуральная основа препарата Кето Genetic воздействует аккуратно, не вызывая побочных действий и не вводя организм в состояние стресса, поэтому абсолютно безвреден и может использоваться в любом возрасте.

Как заказать

Для того чтобы оформить заказ 7 keto dhea отзывы необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

Отзывы покупателей:

Валентина

Кето Диета – это эффективные капсулы, которые помогают быстро и без диет похудеть. В их составе только натуральные компоненты, положительно влияющие на организм. Рекомендуется принимать препарат по инструкции, и тогда удастся добиться удивительных результатов. Проведенные исследования подтвердили, что Keto Genetic помогает многим людям сбросить лишний вес.

Kira

Сколько себя помню, всегда мечтала быть стройной. В подростковом возрасте я уже весила больше 100 кг, а после родов стала 130 кг. И вместо того, чтобы всерьёз собой заняться, я только ела и ела. На диетах сидеть не могла, а супер-пупер интернет-методики не срабатывали. Всё изменилось, когда я узнала на женском форуме о Keto Genetic. Принцип действия капсул меня заинтересовал, такого я ещё не пробовала… Препарат купила на официальном сайте, потом поняла, что это очень важно! Подруга решила худеть тем же способом, но умудрилась связаться с мошенниками… Так вот, благодаря этому натуральному средству, я сбросила 15 кг в первый месяц! Для меня это конечно капля в море, но лёд ведь тронулся… Ещё через месяц вес стал на 12 кг меньше, и я на этом не останавливаюсь. Никогда ещё не было таких результатов, я очень довольна препаратом и буду всем его рекомендовать!

Таблетки натуральные, этим они отличаются от аналогов. В аптеке не нашла, пришлось заказать в интернете. Доставили быстро, уже начала прием. Первые впечатления нормальные. Посмотрим, что дальше будет. Где купить 7 keto dhea отзывы? Натуральная основа препарата Кето Genetic воздействует аккуратно, не вызывая побочных действий и не вводя организм в состояние стресса, поэтому абсолютно безвреден и может использоваться в любом возрасте.
7 кето — это метаболит ДГЭА, который обеспечивает те же преимущества, что и ДГЭА, но без связанных с ним нежелательных эффектов. ДГЭА — это дегидроэпиандростерон, основа женских и мужских гормонов. Now 7-KETO: 5 отзывов покупателей и фармацевтов. Общий рейтинг на основе 5 отзывов наших покупателей. . С 7-кето улучшилась концентрация и память. На сушке хорошо поддерживает ЦНС. Есть сравнения с ним и без приема препарата. 7-Кето ДГЭА – это метаболит ДГЭА, негормональный, ускоряющий процессы жиросжигания и увеличивающий скорость метаболизма в организме. Очень часто я встречал на практике мнение, что это прекурсор ДГЕА, но однако это не так. 7-кето-ДГЭА — это естественный метаболит дегидроандростерона (ДГЭА). 7-кето-ДГЭА участвует во многих биологических функциях, включая клеточное производство тепла (термогенез). Известно, что производство ДГЭА и 7-кето-ДГЭА, а также скорость метаболизма снижаются с возрастом. NOW 7-Keto. Жиросжигатель Puritan’s Pride 7-Keto DHEA — отзывы. Рекомендуют 100%. . В каталогах сайтов, посвященных спортивному питанию и добавкам, 7-Keto DHEA описывается как препарат, открытый в 1999 г. в США и способствующий общему омолаживанию организма, повышению иммунитета и активному. Отзывы про продукцию Now Foods, 7-KETO. Отрицательные и положительные стороны. . Выбрала 7-КЕТО как самый безопасный и действенный. Пропила две баночки, скажу честно — я больше чем довольна полученным результатом. Конечно, не одними БАДАми едиными, я ещё и диет-режим соблюдала, и. Отзывы понравились. Хочу купить. . Может ли 7-KETO способствовать выпадениию волос и облысению у мужчин? . Уважаемые напишите что препарат DHEA Metabolik c 2010 входит в список допинга по данным Русада,а вообще препарат работает по всем заявленным пунктам! <Лилия> 26.05.2016 14:15. Так его. 7- КЕТО – метаболит ДГЭА и поэтому не имеет побочных эффектов. Итак что такое ДГЭА? ДГЭА- мать гормонов. Если существует противоядие от старения, то это может быть ДГЭА. Повышение полового влечения, обновление энергии и выносливости, прояснение ума, улучшение памяти- все эти эффекты. 7 КЕТО (7 Keto) — отзывы, описание, фото, инструкция по применению. . Главным его отличием от ДГЭА является способность в безопасной манере способствовать снижению жировой массы тела и поддерживать стройность. ДГЭА 7 Кето. Привет, девочки! Давно не писала сама, хотя сижу в Сообществе каждый день, читаю — радуюсь и плачу . Мой Г скромно порекомендовала ДГЭА 7-Кето, говорит, что при моем низком АМГ и высоких показателей ЛГ, ФСГ можно попробывать так называемый «Элексир молодости». Короче, я. 7-Keto от Now Foods надо принимать по одной капсуле во время еды два раза в день, тогда эффект будет максимальным. . Добавка 7-Keto от компании Now Foods для улучшения метаболизма и похудения. Как состав действует на организм? Эффективность. Где купить дешевле? С возрастом обменные процессы. 7-КЕТО помогает бороться с лишним весом, замедляет процесс старения на клеточном уровне, нормализует гормональный баланс, увеличивает энергетический потенциал; состав: 7-Кето, экстракт зеленого чая, КЛК, экстракт корня Родиолы. 7-Кето (англ. 7-Keto) – это метаболит, который способствует сжиганию жиров, активизирует метаболизм и заряжает организм энергией. Он участвует в синтезе множества гормонов, число которых неизменно снижается с возрастом, то есть он поддерживает молодо. Специальные добавки DHEA (7-Keto). . Отзывы могут оставлять только зарегистрированные пользователи. Кето диета: плюсы и минусы, меню, рецепты. Кето диета получила название от слова кетоз. Это состояние характеризуется повышением уровня кетоновых тел в организме, которые в дальнейшем он использует для поддержания собственной жизнедеятельности. Если человек получает недостаточное.
http://tbm-mova.by/images_from_html_editor/keto_fit_kupit1543.xml
http://www.sanitärprofi.ch/fckeditor/editor/images/ketodieta_tabletki_instruktsiia_po_primeneniiu_tsena1097.xml
http://pokerdeal.ru/upload/keto_fit_kupit9195.xml
http://kino-shevchenko.ru/userfiles/keto_fit_realnye_otzyvy8648.xml
http://mixtorg.com.ua/upload/keto_eat_fit_tsena_v_aptekakh2346.xml
Keto Genetic не просто является равноценной заменой диетам, а считается лучшим их аналогом. Препарат полностью состоит из натуральных ингредиентов, поэтому не имеет строгих ограничений к применению. Все пациенты по итогам пройденного лечения остаются довольны полученным результатом. В среднем за один месяц происходит снижение веса на 5-15 кг. Итог всегда зависит от начального ИМТ и возраста человека. При использовании уникального средства главное соблюдать инструкцию. Уменьшение дозировки приведёт к снижению эффективности терапии, а увеличение никогда не ускорит процесс похудения. Прохождение курса допускается в домашних условиях, без одобрения врача. Безопасность капсул достигает 100%. Данный факт был доказан в ходе многочисленных клинических испытаний на добровольцах.
7 keto dhea отзывы
Инструкция по применению предельно проста. Капсулы Кето Genetic нужно принимать 2 раза в день (1-2 капсулы) за 20-30 минут до еды. Длительность курса зависит от поставленной цели (тяжести ожирения, физических характеристик реального больного). Судя по отзывам врачей, обычно для стойкого похудения достаточно 4-6 недель. За это время при правильном подходе можно потерять 10-12 килограммов.
Меню кето-диеты на неделю с рецептами и точными макросами (КБЖУ). . Некоторые продукты могут испортиться, если вы купите их за неделю вперед. В таком случае поместите их в морозильник или купите всего за несколько дней до того, как вы будете готовить. Если вам нужно взять с собой еду, чтобы. Кетоконазол, синтетическое производное имидазол-диоксалана, обладает противогрибковым действием в отношении дерматофитов, таких как Trichophyton… Читайте дальше, и я расскажу, как кето диета (меню на неделю) для женщин поможет сбросить вес и отобьет желание уплетать конфеты и печенья.  . Мой блог — это место, где я постоянно рассказываю вам секреты для похудения. Что такое кето диета для похудения? . Кето-диета основана на поступлении ограниченного количества углеводов, обилии жиров и . Каждую неделю устраивайте длительную прогулку в быстром темпе, чтобы поддерживать минимальный уровень физической активности, не отступая от плана питания. А по. Готовые продукты для кето-диеты. Меню на неделю – рецепты кето-блюд. Понедельник. . Впервые кето-диета была применена в 20-е годы XX века. Причем целью было совсем не похудение (тогда эта проблема не была так актуальна в обществе, как сейчас). Ее применили для лечения детей, больных. Меню на неделю и рекомендации помогут правильно соблюдать диету. . Меню на неделю для кето диеты. Углеводы исключаются из пищи полностью. . Не все эффективные диеты для похудения могут быть одновременно безопасными. Рассмотрим, на каких из них можно остановиться без дополнительного вреда. Меню для кетогенной диеты для похудения с уже рассчитанным БЖУ на неделю для женщин и мужчин.  . В конце этой статьи вы найдете наше предложение по кето-меню с множествами рецептов — завтрак, обед, ужин на каждый день в течение недели. Если же вы захотите меньше готовить, есть две вещи. Наиболее известна кето-диета для похудения – в виде диеты Аткинса для лечения ожирения . Серьезное отношение к избавлению от лишних жировых запасов в собственном теле, несомненно, требует составления меню на неделю кето-диеты. И поможет в этом информации предыдущего раздела. В чем суть кето-диеты для женщин, каковы основные ее правила для похудения, как правильно составить меню на неделю? Разрешенные и запрещенные продукты кето-диеты. Что такое кето и кетодиета — способы устранения воспаления жировой ткани и отзывы . Меню на неделю. Разрабатывая план меню, помните . Итак, теперь вы знаете все, на чем строится кетогенная диета: меню на неделю для похудения с рецептами, полное руководство для желающих похудеть и врачей.

7 keto dhea

7 keto dhea

7 keto dhea

>>>ПЕРЕЙТИ НА ОФИЦИАЛЬНЫЙ САЙТ >>>

Что такое 7 keto dhea?

Исследования подтвердили, что Keto Genetic не только эффективный, но и безопасный. Он уже многим людям помог сбросить лишний вес и улучшить физическую форму. Более того, с его помощью удается укрепить волосы, привести в норму состояние кожи, нормализовать показатель сахара в крови. Компоненты, которые находятся в составе, полезны для сердца и сосудов. По этой причине препарат стоит использовать и тем людям, которые желают укрепить здоровье.

Эффект от применения 7 keto dhea

Мои впечатления от комплекса Кето Genetic только отличные. Пить даже приятно было за счет того, что в нем лечебные растения. Использование самое простое. Когда смотрю на себя в зеркало, ощущаю некоторую гордость. Что тут добавить, я к лету и отпуску готова, спасибо производителю. Такому способу похудения я довольна, а еще и цена доступная.

Мнение специалиста

Инструкция по применению предельно проста. Капсулы Кето Genetic нужно принимать 2 раза в день (1-2 капсулы) за 20-30 минут до еды. Длительность курса зависит от поставленной цели (тяжести ожирения, физических характеристик реального больного). Судя по отзывам врачей, обычно для стойкого похудения достаточно 4-6 недель. За это время при правильном подходе можно потерять 10-12 килограммов.

Как заказать

Для того чтобы оформить заказ 7 keto dhea необходимо оставить свои контактные данные на сайте. В течение 15 минут оператор свяжется с вами. Уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 3-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении.

Отзывы покупателей:

Nika

Клинические испытания действия средства Keto Genetic на организм, обнаружили такие результаты после проведения целого курса: Заметное уменьшение объемов тела; Разрушение жира, который не устранялся диетами и тренировками; Улучшение обменных процессов; Активный детокс организма; Уменьшение отеков; Сокращение целлюлита на проблемных местах; Улучшение внешнего вида кожи, волос, ногтей; Укрепление иммунитета; Поднятие настроение.

Варя

Растительные кетоновые тела – основа капсул Keto Genetic, поэтому с помощью этого комплекса худеют все! Эти вещества добываются из натуральных растительных компонентов, поэтому не вредят организму и к тому же обладают чрезвычайно высокой эффективностью (по которой превосходят собственные кетоновые тела человека более чем в 15 раз!). Клинические исследования показали, что при их приеме вес начинает уходить стремительно и со 100% эффективностью.

Я прекрасно знаю, что собой представляет кето-диета, которая предусматривает минимальное потребление углеводов. Несколько лет назад мне её рекомендовал врач по состоянию здоровья. Тогда я действительно хорошо постройнела и стала лучше себя чувствовать. Но всю жизнь отказываться от круп, хлеба и сладостей я не могла. Когда узнала о Keto Dieta, подумала, это мой шанс… К слову, отрицательных отзывов о нём в Сети я не нашла, считаю это огромным плюсом. Сразу хочу отметить, что действует средство ещё быстрее, чем оригинальная диета. При этом я вообще не озадачивалась, что и когда мне есть. Хотя по окончании курса аппетит уменьшился, и меня перестало тянуть на шоколад и мучное. Благодаря Keto Genetic я уже похудела на 9 кг, хочу ещё 5 кг и буду идеальной. Даже подумать не могла, что теперь производят действительно эффективные жиросжигающие препараты… Где купить 7 keto dhea? Инструкция по применению предельно проста. Капсулы Кето Genetic нужно принимать 2 раза в день (1-2 капсулы) за 20-30 минут до еды. Длительность курса зависит от поставленной цели (тяжести ожирения, физических характеристик реального больного). Судя по отзывам врачей, обычно для стойкого похудения достаточно 4-6 недель. За это время при правильном подходе можно потерять 10-12 килограммов.
Способ применения 7-Кето ДГЭА (рекомендуемая дозировка, активная доза, другие детали). . 7-Кето ДГЭА и сердечно-сосудистые заболевания. Кровяное давление. Воздействие 7-Кето ДГЭА на жировую массу и ожирение. 7-Keto от Now Foods надо принимать по одной капсуле во время еды два раза в . Это естественный метаболит ДГЭА, выработка которого снижается с возрастом. Компонент принимает участие в большинстве функций организма. Категории Пищевые добавки Снижение веса 7-кето. 7-Кето (англ. 7-Keto) – это метаболит, который способствует сжиганию жиров, активизирует метаболизм и заряжает организм энергией. Естественная выработка дегидроэпиандростерона с возрастом резко сокращается, что приводит к . «7-Кето» значительно повышает метаболизм, а у большинства людей после 25 лет, как известно, он понижается. Именно поэтому. 7 кето — это метаболит ДГЭА, который обеспечивает те же преимущества, что и ДГЭА, но без связанных с ним нежелательных эффектов. 7-КЕТО помогает бороться с лишним весом, замедляет процесс старения на клеточном уровне, нормализует гормональный баланс, увеличивает энергетический. 7-кето дегидроэпиандростерон (синонимы: 7-Keto, 7-Keto-DHEA, 7-Keto-degidroepiandrosterone) — метаболит DHEA, активно рекламируется как более эффективная форма дегидроэпиандростерона.
http://www.thailande.ru/upload/kupit_keto_dieta_dlia_pokhudeniia_otzyvy8052.xml
http://living168.com.tw/images/tsena_na_ketogenetik_v_aptekakh_selo_aleksandrovskoe6987.xml
http://arim-dz.com/data/ketogenetik_tseny_v_kopeiske5295.xml
http://caini-de-vanzare.ro/userfiles/sposob_pokhudeniia_keto5983.xml
http://justbuymeds.net/userfiles/ketogenetik_preparat_dlia_pokhudeniia_instruktsiia6471. xml
Мои впечатления от комплекса Кето Genetic только отличные. Пить даже приятно было за счет того, что в нем лечебные растения. Использование самое простое. Когда смотрю на себя в зеркало, ощущаю некоторую гордость. Что тут добавить, я к лету и отпуску готова, спасибо производителю. Такому способу похудения я довольна, а еще и цена доступная.
7 keto dhea
Исследования подтвердили, что Keto Genetic не только эффективный, но и безопасный. Он уже многим людям помог сбросить лишний вес и улучшить физическую форму. Более того, с его помощью удается укрепить волосы, привести в норму состояние кожи, нормализовать показатель сахара в крови. Компоненты, которые находятся в составе, полезны для сердца и сосудов. По этой причине препарат стоит использовать и тем людям, которые желают укрепить здоровье.
Препарат Кето Диета – цена капсул для похудения, реальные отзывы покупателей. Инструкция по применению, противопоказания. Где купить, официальный сайт Keto Dieta. Кетоконазол, синтетическое производное имидазол-диоксалана, обладает противогрибковым действием в отношении дерматофитов, таких как Trichophyton… Инструкция по применению, рекомендации и состав Keto Genetic. Кето генетик – препарат, при помощи худеют до 12 кг за месяц без . Показания и противопоказания. Как применять препарат для похудения. Keto genetic — инструкция к применению. Официальный сайт средства для похудения КетоДиета. Что такое кетодиета, цена и где купить, реальные отзывы о препарате. . Если принимать Кетодиету в таблетках по инструкции по применению, побочные реакции не развиваются. КЕТО-ДИЕТА — это капсулы для похудения, действие которых основано на специальной методике, разрушающей стереотипы. Пользовательское внимание приковано к новому продукту, поскольку состав обладает неоспоримыми. Как правильно принимать капсулы Кето Диета? Подробная инструкция по применению. . Все компоненты признали эффективными и рекомендованными в сфере похудения. Медицинская статья говорит, что таблетки Кето Диета разработаны на основе натуральных действующих компонентов. Препарат Кето Диета – отзывы реальных покупателей о капсулах для похудения. . Препарат Кето Диета – инструкция по применению капсул для похудения. Важно понимать, что ожирение нередко становится главной причиной многих тяжелых патологических изменений в общем здоровье человека. Вот основные виды кето-диет: Стандартная. Это наиболее распространенный способ похудения, подразумевающий практически полный отказ от углеводов.Стоит учитывать, что совсем исключать углеводы из рациона нельзя! Что такое кето диета для похудения? Кетогенная, кетоновая или кето диета — это низкоуглеводный рацион питания с высоким содержание количества жиров в меню и небольшим добавлением белка для поддержания обменных процессов. Способ применения и дозы. Как принимать капсулы Кето Диета, чтобы достичь . График приема по инструкции: Препарат КетоДиета нужно принимать один раза в . Средство для похудения КетоДиета выпускается как в форме таблеток, так и в. Стандартная схема похудения. Стандартная кето диета – это самый простой вариант, позволяющий сбросить лишний вес. Данная схема не предполагает проведение рефидов, так называются определенные временные периоды, в которые необходимо повышать количество углеводистой пищи. Баланс жиров.

Покрытый коллагеном поли(лактид-со-гликолид)/гидроксиапатитовый каркас, содержащий пептид DGEA, для синергетического восстановления дефекта черепа[v1]

Препринт Статья Версия 1 Сохранено в портике. Эта версия не рецензируется.

Версия 1 : Получено: 16 января 2018 г. / Утверждено: 17 января 2018 г. / В сети: 17 января 2018 г. (06:48:17 CET)

Также существует рецензируемая статья этого препринта.

Би, М.; Хан, Х .; Донг, С .; Чжан, Ю .; Сюй, В.; Чжу, Б.; Ван, Дж.; Чжоу, Ю .; Динг, Дж. Покрытый коллагеном поли(лактид--со--гликолид)/гидроксиапатитовый каркас, содержащий пептид DGEA, для синергетического восстановления дефекта черепа. Полимеры 2018 , 10 , 109. Би, М.; Хан, Х .; Донг, С .; Чжан, Ю .; Сюй, В .; Чжу, Б.; Ван, Дж. ; Чжоу, Ю .; Дин, Дж. Покрытый коллагеном каркас из поли(лактид-со-гликолида)/гидроксиапатита, включающий пептид DGEA, для синергетического восстановления дефекта черепа. Полимеры 2018, 10, 109.Копировать

Ссылка на журнал: Полимеры 2018, 10, 109
DOI: 10.3390/polym10020109

Цитировать как:

Би, М.; Хан, Х .; Донг, С .; Чжан, Ю .; Сюй, В .; Чжу, Б.; Ван, Дж.; Чжоу, Ю .; Динг, Дж. Покрытый коллагеном поли(лактид--со--гликолид)/гидроксиапатитовый каркас, содержащий пептид DGEA, для синергетического восстановления дефекта черепа. Полимеры 2018 , 10 , 109. Би, М.; Хан, Х .; Донг, С .; Чжан, Ю .; Сюй, В .; Чжу, Б.; Ван, Дж.; Чжоу, Ю .; Дин, Дж. Покрытый коллагеном каркас из поли(лактид-со-гликолида)/гидроксиапатита, включающий пептид DGEA, для синергетического восстановления дефекта черепа. Полимеры 2018, 10, 109. Копировать

ОТМЕНИТЬ КОПИРОВАТЬ ДЕТАЛИ ЦИТАТА

Абстрактный

Лечение обширных костных дефектов остается сложной задачей; однако были разработаны различные стратегии для улучшения характеристик каркасов в инженерии костной ткани. В этом исследовании поли(лактид--со--гликолид)/гидроксиапатит (PLGA/HA) каркас был покрыт коллагеном, содержащим Asp-Gly-Glu-Ala (DGEA), для восстановления дефекта черепа крысы.Наши результаты показали, что механическая прочность и гидрофильность каркаса PLGA/HA явно улучшились и способствовали адгезии и пролиферации клеток. Коллагеновый каркас с ДГЭА значительно способствовал заживлению дефекта черепа. Эти результаты показали, что комбинация коллагенового покрытия и ДГЭА улучшила свойства каркаса для регенерации кости, тем самым предоставив новую потенциальную стратегию для дизайна каркаса.

Ключевые слова

пористый каркас; коллагеновое покрытие; биоактивный пептид; устранение дефектов черепа; тканевая инженерия

Предмет

МАТЕРИАЛОВЕДЕНИЕ, Биоматериалы

Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии надлежащего цитирования оригинальной работы.

Комментарии (0)

Мы приветствуем комментарии и отзывы широкого круга читателей. См. критерии для комментариев и наше заявление о разнообразии.


что это?

Добавьте запись об этом обзоре в Publons, чтобы отслеживать и демонстрировать свой опыт рецензирования в журналах со всего мира.

×

Симвастатин ингибирует гистологические изменения, связанные с гастродуоденальным рефлюксом в мышиной модели

  • 1.

    Ogunwobi OO, Beales IL. Статины ингибируют пролиферацию и вызывают апоптоз в клетках аденокарциномы пищевода Барретта. Am J Gastroenterol 2008;103:825–837.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 2.

    Антонопулос А.С., Маргаритис М., Ли Р., Чаннон К., Антониадес С. Статины как противовоспалительные средства при атерогенезе: молекулярные механизмы и уроки недавних клинических испытаний. Curr Pharm Des 2012; 18:1519–1530.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 3.

    Diamantis E, Kyriakos G, Quiles-Sanchez LV, Farmaki P, Troupis T. Противовоспалительное действие статинов на ишемическую болезнь сердца: обновленный обзор литературы. Curr Cardiol Rev 2017; 13:209–216.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 4.

    Graaf MR, Richel DJ, van Noorden CJF, Guchelaar H-J. Влияние статинов и ингибиторов фарнезилтрансферазы на развитие и прогрессирование рака. Cancer Treat Rev 2004; 30:609–641.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 5.

    Boudreau DM, Yu O, Johnson J. Использование статинов и риск развития рака: всесторонний обзор. Экспертное заключение по лекарственным препаратам 2010; 9:603–621.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 6.

    Фатехи HA. Текущие взгляды на статины как на потенциальную противораковую терапию: клинические результаты и лежащие в их основе молекулярные механизмы. Transl Lung Cancer Res 2019; 8: 692–699.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 7.

    Контурек П.С., Бурнат Г., Хан Э.Г. Ингибирование роста клеток аденокарциномы Баррета симвастатином: участие ЦОГ-2 и белков, связанных с апоптозом. J Physiol Pharmacol 2007; 58:141–148.

    ПабМед Google Scholar

  • 8.

    Sadaria MR, Reppert AE, Yu JA, Meng X, Fullerton DA, Reece TB et al.Терапия статинами ослабляет рост и злокачественный потенциал клеток аденокарциномы пищевода человека. J Thorac Cardiovasc Surg 2011;142:1152–1160.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 9.

    Чен И, Ли Л-Б, Чжан Дж, Тан Д-П, Вэй Дж-Дж, Чжуан З-Х. Симвастатин, но не правастатин, ингибирует пролиферацию клеток аденокарциномы пищевода и плоскоклеточного рака: клеточно-молекулярное исследование. Lipids Health Dis 2018;17:290.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 10.

    Yu JA, Li H, Meng X, Fullerton DA, Nemenoff RA, Mitchell JD et al. Экспрессия секреторной фосфолипазы группы IIa коррелирует с опосредованной ингибированием секреторной фосфолипазы группы IIa гибелью клеток в мутантных клетках рака легкого K-ras. J Thorac Cardiovasc Surg 2012;144:1479–1485.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 11.

    Бабу А., Менг Х., Банерджи А.М., Гамбони-Робертсон Ф., Кливленд Дж.С., Дамле С. и др. Секреторная фосфолипаза А2 необходима для получения гистологических изменений, связанных с гастродуоденальным рефлюксом в мышиной модели. J Thorac Cardiovasc Surg 2008;135:1220–1227.

    Артикул Google Scholar

  • 12.

    Маккей А., Леунг Б.П., Макиннес И.Б., Томсон Н.К., Лью Ф.Ю. Новая противовоспалительная роль симвастатина в мышиной модели аллергической астмы. J Immunol 2004;172:2903–2908.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 13.

    Брунер-Тран К.Л., Остин К.Г., Дулеба А.Дж. Симвастатин защищает от развития эндометриоза в модели голых мышей. J Clin Endocrinol Metab 2009; 94:2489–2494.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 14.

    Zhang X, Mao S, Luo G, Wei J, Berggren-Söderlund M, Nilsson-Ehle P et al.Влияние симвастатина на аполипопротеин М in vivo и in vitro. Lipids Health Dis 2011;10:112.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 15.

    Основные сведения о назначении лекарств. Зокор (симвастатин) Таблетки. Мерк Шарп и Доме ЛТД. 2015.

  • 16.

    Gergen AK, Kohtz PD, Halpern AL, et al. Статины ингибируют опосредованный толл-подобным рецептором 4 рост клеток аденокарциномы пищевода человека. J Surg Res.2021; 260: 436–447. https://doi. org/10.1016/j.jss.2020.11.016

    Статья пабмед КАС Google Scholar

  • 17.

    Томас Т., Локе Ю., Билз, ILP. Систематический обзор и метаанализ: использование статинов связано со снижением частоты аденокарциномы пищевода. J Gastrointest Cancer 2018; 49:442–454.

    Артикул Google Scholar

  • 18.

    Сингх С., Сингх А.Г., Сингх П.П., Мурад М.Х., Айер П.Г.Статины связаны со снижением риска рака пищевода, особенно у пациентов с пищеводом Барретта: систематический обзор и метаанализ. Clin Gastroenterol Hepatol 2013; 11:620–629.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 19.

    Deng H-Y, Lan X, Zheng X, Zha P, Zhou J, Wang R-L et al. Связь между использованием статинов и выживаемостью больных раком пищевода: систематический обзор и метаанализ. Медицина 2019;98:e16480.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 20.

    Чжан Х.И., Шпехлер С.Дж., Соуза РФ. Аденокарцинома пищевода, возникающая в пищеводе Барретта . Cancer Lett 2009; 275:170–177.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 21.

    Goldstein SR, Yang GY, Curtis SK, Reuhl KR, Liu BC, Mirvish SS et al. Развитие метаплазии пищевода и аденокарциномы в хирургической модели крысы без использования канцерогена. Канцерогенез 1997;18:2265–2270.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 22.

    Chen X, Yang G, Ding WY, Bondoc F, Curtis SK, Yang CS. Модель эзофагогастродуоденального анастомоза для аденокарциногенеза пищевода у крыс и усиления перегрузки железом. Канцерогенез 1999;20:1801–1808.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 23.

    Garman KS, Orlando RC, Chen X. Обзор: экспериментальные модели пищевода Барретта и аденокарциномы пищевода. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol 2012;302:G1231–G1243.

    Артикул КАС Google Scholar

  • 24.

    He J, Fang Y, Chen X. Хирургические модели гастроэзофагеального рефлюкса на мышах. J Vis Exp 2015; 102:e53012–e53112.

    Google Scholar

  • 25.

    Мейсон РП. Молекулярная основа различий между статинами и сравнение с витаминами-антиоксидантами. Am J Cardiol 2006; 98:S34–S41.

    Артикул КАС Google Scholar

  • Модульная запрограммированная двухфазная система двойной доставки на трехмерных керамических каркасах для остеогенеза in vitro и in vivo

    Однофакторная доставка является наиболее распространенной характеристикой методов инженерии костной ткани.Однако регенерация кости представляет собой сложный процесс, требующий множества факторов и специализированных механизмов высвобождения. Таким образом, разработка системы двойной доставки, обеспечивающей запрограммированную кинетику высвобождения, была бы весьма желательной. Улучшение молярности и универсальности системы доставки редко изучалось. Здесь мы сообщаем о разработке новой модульной запрограммированной двухфазной системы двойного высвобождения (SCB), несущей BMP2 и сконструированный мотив распознавания, полученный из коллагена I (Sth-DGEA), с функцией саморемодификации на гидроксиапатите (HA). материалы на основе.Систему SCB загружали на каркас, изготовленный при помощи добавок (AM), чтобы оценить ее двухфакторный остеогенный потенциал и ее двухфазное поведение при высвобождении. Далее биомеханические свойства скаффолда были изучены с использованием метода взаимодействия жидкости и конструкции (FSI). Секция флуоресцентной маркировки показала, что каркас HA имеет относительно более высокую плотность и эффективность. Кроме того, результаты эксперимента по высвобождению и ингибированию показали, что система SCB может способствовать устойчивому высвобождению терапевтических уровней двух факторов на начальном этапе имплантации, тем самым демонстрируя схему быстрого высвобождения высоких доз в определенный момент времени в течение второго периода. сцена.Модель прогнозирования FSI показала, что каркас обеспечивает превосходную биомиметическую механическую и гидродинамическую микросреду для стимулирования остеогенеза. Наши результаты показали, что включение BMP2 с Stath-DGEA в двухфазную систему SCB может иметь синергетический эффект в стимулировании адгезии, пролиферации и дифференцировки мезенхимальных стволовых клеток костного мозга (BMSCs) in vitro при поэтапной стимуляции. Кроме того, исследований in vivo на эктопических и ортотопических моделях крыс показали, что система SCB, загруженная на каркас AM, может усиливать остеоинтеграцию и остеоиндукцию на протяжении остеогенного процесса.Таким образом, новая синтетическая система SCB, описанная в настоящем документе, используемая на каркасе AM, обеспечивает биомиметическую внеклеточную среду, которая усиливает регенерацию кости, и является перспективной многофункциональной платформой двойного высвобождения.

    У вас есть доступ к этой статье

    Подождите, пока мы загрузим ваш контент. .. Что-то пошло не так. Попробуй снова?

    MSF: поиск модулированных подграфов | F1000Research

    Введение

    Методы высокопроизводительного секвенирования широко используются для получения дифференциально экспрессируемых генов (DEG) 1 .Измеряют изменения количества транскриптов, т.е. с помощью методов секвенирования следующего поколения и интерпретируется как индикатор дифференциальной экспрессии генов. DEG можно использовать для понимания механизмов, лежащих в основе различий между состояниями образцов, таких как здоровые и инфицированные. Дифференциальный анализ экспрессии генов (DGEA) сообщает о величине изменений экспрессии, которые часто выражаются в виде логарифмических изменений. Знак логарифмического изменения и уровень достоверности наблюдения подлинного изменения, часто выражаемый как p -значение.Информация от DEG дополнительно интерпретируется для извлечения значимых биологических идей. Например, гены, которые могут быть вовлечены в реакцию на конкретный раздражитель. С этой целью анализ на основе путей стал важным инструментом для дальнейшей интерпретации результатов DGEA и понимания возмущений в биологической системе. В этих методах, основанных на путях, используются предопределенные пути или сети, которые представляют собой наборы генов, взаимодействие которых образует функциональную единицу. DEG помогают идентифицировать пути или сети, которые могут быть изменены во время инфекции, предоставляя важную информацию о заболеваниях и процессе их лечения 2 .Измерения экспрессии генов, полученные из DGEA, в сочетании со статистическими методами и предопределенными путями используются для идентификации специфически модулируемых путей и процессов 3 .

    Хорошо зарекомендовавшие себя ресурсы для аннотаций путей: KEGG (Киотская энциклопедия генов и геномов) 4 и Reactome 5 . Пути KEGG — это ветвь базы данных KEGG, в которой размещена коллекция нарисованных вручную карт путей, представляющих сети молекулярного взаимодействия, реакции и связи клеточных функций.Точно так же Reactome представляет собой рецензируемую базу данных с открытым исходным кодом для сигнальных и метаболических молекул с открытым исходным кодом, сформированную в различных биологических путях 5 . Оба обеспечивают предопределенные пути, которые представляют собой наборы генов и их взаимодействия, разделенные на функциональные единицы.

    Существующие подходы к анализу на основе путей используют разные схемы исследования, которые можно разделить на ORA (анализ чрезмерной репрезентативности), FCS (оценка функционального класса) и методы, основанные на топологии путей.Все они направлены на поиск подмножества генов, например, генов со значительной дифференциальной экспрессией, генов, связанных с определенным путем чаще, чем ожидалось, с учетом общего набора исследованных генов, например. весь фон генома. ORA — это первый и самый простой метод анализа путей 3 . Он использует список DEG с определяемым пользователем отсечкой для логарифмического изменения и p -значения (чаще всего используется абсолютное логарифмическое изменение 2 и p -значение 0.05). Впоследствии наборы генов, связанных с аннотированными путями, проверяют на предмет чрезмерного представительства в наборе DEG. С этой целью используются гипергеометрическое распределение, критерий хи-квадрат, биномиальная вероятность или точный критерий Фишера, тогда как информация о топологии генов в путях игнорируется 6 . Кроме того, ORA предполагает, что биологические пути независимы друг от друга и игнорирует тот факт, что они взаимодействуют и перекрываются 2,3 .

    В отличие от ORA, FCS не имеет искусственного ограничения для определения списка DEG.FCS работает в три этапа. Сначала он рассчитывает статистику на уровне генов, включая корреляцию молекулярных измерений с использованием дифференциальной экспрессии отдельных генов, ANOVA, t-теста и Z-теста. На втором этапе статистика отдельных генов в пути преобразуется в статистику на уровне отдельного пути, обычно с использованием статистики Колмогорова-Смирнова, среднего или медианы. Наконец, оценивается статистическая значимость статистики на уровне путей. Хотя FCS преодолевает некоторые ограничения ORA, она все же игнорирует топологию генов в пути, перекрестные помехи и перекрывание путей 2,3 .Методы, основанные на топологии путей, сходны с FCS, за исключением того, что они учитывают топологию каждого гена во время статистики на уровне генов, но все еще не могут связать различные функциональные пути 2 .

    С другой точки зрения, сетевые подходы не классифицируют наборы генов по функциональным путям, но считают все взаимодействия равными. Таким образом, они избегают произвольного разграничения взаимодействия внутри пути и взаимодействия между путями (т.д., перекрестные помехи). При этом они стремятся идентифицировать подсети, которые показывают модуляцию между двумя состояниями или при стимулах 7 . Чтобы найти эти активные модули, используются эвристические решения, такие как имитация отжига (SA), жадные методы, генетические алгоритмы (GA), распространение сети и методы совместной кластеризации 7 . jActiveModules был первым в своем роде, использующим имитацию отжига для поиска модулированных подсетей 8 . Преимущество исключения путей связано с меньшей интерпретируемостью результатов из-за отсутствия функциональных меток в сетях.

    Исходя из этого, мы предлагаем новый подход к использованию богатых доступных ресурсов аннотаций взаимодействий генов и белков и объединению их с аннотациями функциональных путей для получения дополнительной информации из базового DGEA. Для этого мы начнем с предположения, что экспрессия соседних генов в пределах функционального пути не является независимой друг от друга. Скорее, они часто регулируют экспрессию друг друга или являются частью одного и того же регулона 9 . Мы понимаем, что классификация связей между генами по помеченным путям часто является произвольной, учитывая обширные перекрестные помехи между различными путями. Хотя эти категории оказались полезными во многих ситуациях, они навязывают определенную точку зрения на интерпретацию новых данных. Основываясь на этих двух принципах, мы стремимся найти подграфы связанных генов в клеточной сигнальной сети, которые в целом демонстрируют значительные изменения дифференциальной экспрессии. Этот подход отличается от обычных инструментов анализа пути двумя основными аспектами. Во-первых, он не направлен на идентификацию функциональных путей, обогащенных дифференциально экспрессируемыми генами, но обнаруживает подграфы или ветви в сетевом графе (потенциально охватывающем более одного функционально сгруппированного пути), который когерентно модулируется.Во-вторых, он направлен на улучшение DGEA на уровне генов путем сбора информации о соседних генах, которые в целом могут демонстрировать достаточно заметный сигнал, чтобы его можно было назвать значительно модулированным. Все это может быть полезно для понимания причины и следствия стимула и может дать информацию о потенциальных точках вмешательства.

    В качестве входных данных информация о функциональных связях между генами, предоставленная, например, Требуются KEGG или Reactome и информация о статусе дифференциальной экспрессии отдельных генов, полученных в результате DGEA.В результате анализ возвращает подграфы и их совместные оценки достоверности, отражающие, как возмущение мигрирует по сети. Кроме того, возвращаются точки входа возмущения в сети и перекрытия с обычными категориями путей. Чтобы облегчить определение приоритетов точек входа возмущения, каждой присваивается оценка воздействия и мера ее надежности. Оценка воздействия выражает долю подмодуля, находящегося ниже точки входа. Надежность измеряется с использованием t-критерия для логарифмически преобразованных p значений непосредственно вышестоящих и нижестоящих генов.Выход готовится в файле ориентированной матрицы смежности, удобном для визуализации, например, с помощью StringApp 10 , доступного в виде плагина Cytoscape 11 .

    Предлагаемый алгоритм называется Modulated Sub-graph Finder (сокращенно MSF). MSF может помочь преобразовать информацию, полученную от DGEA, в понятные знания о передаче сигналов генов, таким образом, являясь ценным дополнением к существующим методам, основанным на путях. MSF находится в свободном доступе на GitHub в соответствии с условиями Creative Commons Attribution 4.0 Международная лицензия.

    Методы

    MSF был реализован как программа Java. Он разработан как новый эвристический подход к поиску согласованно модулированных подграфов в сетях биологических взаимодействий. MSF не использует предопределенные наборы генов, сгруппированные в функциональные единицы, а скорее полагается исключительно на сеть взаимодействующих генов. Входная сеть состоит из узлов, соответствующих генам, и ребер, представляющих взаимодействия. Кроме того, он использует всесторонние результаты дифференциального анализа экспрессии генов для обнаружения подграфов или модулей, которые в целом модулируются.

    MSF использует значения p отдельного гена, полученные из DGEA. Значение p выражает вероятность того, что нулевая гипотеза немодифицированной экспрессии гена не может быть отвергнута для данной статистической модели. Для нахождения значимо модулированных подграфов отдельные p -значения вицинальных генов в глобальной сети объединяют в одно комбинированное p -значение, используя статистический метод объединения зависимых p -значений, описанный Hartung 12 .Метод Хартунга использует обратную стандартную функцию нормального распределения. Используя обратную нормальную кумулятивную функцию распределения Φ −1 , отдельные гены p -значения T i преобразуются в соответствующие им нормальные оценки t i = Φ −1 ( i ), который равномерно распределен на (0,1). Затем, используя эти нормальные показатели, вычисляется корреляция между генами: Cov ( t i , t j ) = ρ .Нормальные баллы и корреляция применяются к взвешенной обратной нормальной функции для расчета объединенного p -значения t ( ρ ) для всех исследованных генов, а именно исследованного подграфа

    t(ρ)=∑i =1nλiti(1−ρ)∑i=1nλi2+ρ(∑i=1nλi)2

    Лямбда λ — веса для каждого гена, в настоящее время все гены имеют одинаковый вес, т. е. 1. Суммарное p -значение t ( ρ ) подграфа будет выражать значение всех генов в подграфе, модулируемых вместе.Информация от разных генов используется в качестве, хотя и не независимого, повторяющегося измерения поведения всего подграфа. Это потенциально увеличивает способность обнаруживать также значимые подграфы, состоящие из генов, которые сами по себе не являются значимыми.

    Обзор нашего метода

    Чтобы упростить оценку всех возможных связанных подграфов, MSF применяет четырехступенчатую эвристику, как описано ниже. Идентификация модулированных подграфов из сети с помощью MSF представлена ​​в виде блок-схемы (рис. 1).

    Рисунок 1. Графическое представление эвристического подхода MSF к обнаружению модулированных подграфов в глобальной сети регуляции генов.

    Инициализация модулированных подграфов. MSF строит первый подграф, начиная с генов, связанных с наименьшим (наиболее значимым) значением p , полученным из DGEA. Из этого начального числа он пытается расширить подграф, добавляя непосредственно соседние гены, начиная со следующего по значимости.Одно комбинированное значение p вычисляется для расширенного подграфа. Если объединенное значение p меньше значения p исходного подграфа, расширенный подграф принимается. Этот шаг многократно повторяется до тех пор, пока дальнейшее расширение не будет принято. В этом случае процесс начинается заново со всеми оставшимися генами, еще не входящими в значительно модулированный подграф. Этот шаг идентифицирует все простые подграфы, которые модулируются во всей сети.

    Расширение модулированных подграфов. На следующем шаге мы проверяем, может ли какой-либо из исходных модулированных подграфов быть расширен за пределы непосредственно соседних генов. Вместо того, чтобы тестировать отдельные гены и добавлять их на совместимость, рассматриваются группы генов. Если объединенное значение p исходного модулированного подграфа и генов расширения меньше, чем значение p исходного подграфа, расширение принимается. Проверяются все возможные пути расширения до 3 (по умолчанию 2) генов во всех узлах подграфа.Опять же, этот шаг многократно повторяется до тех пор, пока к значимым дифференциально экспрессируемым подграфам не будут добавлены дополнительные гены. Этот шаг устраняет небольшие пробелы в генах без четкого дифференциального сигнала в DGEA.

    Слияние модулированных подграфов. После обнаружения и расширения модулированных подграфов каждая пара уже идентифицированных подграфов проверяется, если их комбинация оценивается лучше, чем каждая по отдельности. Слияние подграфов осуществляется путем поиска в глубину от одного подграфа к другому подграфу.Если два подграфа сливаются с соединителем не более 3 генов (по умолчанию 2 гена) и объединенное p значение объединенного подграфа, включая промежуточные гены, меньше, чем отдельные p -значения двух подграфов, два подграфа объединяются в один больший модулированный подграф. Этот шаг повторяется итеративно до тех пор, пока ни один из подграфов больше не сможет быть объединен.

    Поиск источников и поглотителей. На последнем этапе постобработки MSF идентифицирует триггерные точки модулированных подграфов.Эти триггерные гены являются источниками подграфов только с исходящими ребрами. Эти гены можно интерпретировать как возможные точки входа возмущения, откуда стимул вызывает последующие эффекты. Каждому отдельному источнику присваивается оценка воздействия, выражающая относительное количество нижестоящих генов в соответствующем подграфе, непосредственно связанных направленными связями. Этот показатель можно интерпретировать как верхний предел того, какая часть возмущения подграфов могла быть вызвана соответствующим источником, и, таким образом, может быть полезной для определения приоритетов различных идентифицированных источников для более крупных подграфов.В том же духе, что и источники, наиболее нисходящие гены модулируемых подграфов идентифицируются и определяются как стоки. Из-за циклов не все подграфы обязательно имеют источники или приемники. Надежность каждого источника проверяется с использованием t-критерия для логарифмически преобразованных p значений. Определена существенная разница между двумя группами, генами ниже источника и генами выше источника. Это помогло бы оценить, является ли выявленный источник надежным и действительно ли он отмечает границу между двумя различными режимами регулирования.

    Выход MSF. MSF создает направленный сетевой файл в качестве выходных данных, содержащий полные направленные взаимодействия всех идентифицированных модулированных подграфов. Этот файл можно было импортировать в Cytoscape 11 для визуализации. Кроме того, сообщается файл, содержащий сведения обо всех источниках и приемниках для всех модулированных подграфов. Кроме того, для облегчения визуализации в Cytoscape предоставляется файл атрибутов узлов, содержащий исходный вес и логарифмические изменения всех рассматриваемых генов.

    Эксплуатация. Единственными системными требованиями для запуска MSF являются Java версии 8 и JDK 1. 8 или выше. Несколько зависимостей пакетов уже добавлены в релиз. Время выполнения MSF составляет менее 10 минут. Чтобы запустить MSF, пользователь должен предоставить два текстовых файла, один из которых содержит DGEA, а второй — направленные взаимодействия в формате файла матрицы смежности. Файлы примеров и подробное руководство по использованию MSF размещены на GitHub https://github.com/Modulated-Subgraph-Finder/MSF.

    Результаты

    Практический пример

    Чтобы продемонстрировать свою полезность, MSF применяли к набору данных секвенирования РНК первичных макрофагов, полученных из моноцитов человека (MDM), инфицированных вирусом Эбола (GSE84188) 13 . Вирус Эбола (EBOV) принадлежит к семейству Filoviridea: нитчатые, оболочечные и одноцепочечные РНК-вирусы. EBOV вызывает геморрагическую лихорадку у людей, индуцируя врожденный и адаптивный иммунный ответ хозяина, который становится неспособным контролировать вирусную инфекцию 14 . В настоящее время нет одобренных противовирусных препаратов для лечения инфекции, вызванной вирусом Эбола 15,16 . Начальными мишенями EBOV являются макрофаги и дендритные иммунные клетки 16,17 . EBOV ингибирует критический врожденный иммунный ответ хозяина, который включает ингибирование активации альфа/бета-интерферона (IFN- α / β ) 14,15,18 . Было предложено, чтобы IFN- α / β был протестирован против лихорадки Эбола на предмет его противовирусной активности посредством клинических испытаний 15 . Данные об инфекции Эбола были выбраны для проверки этого подхода, потому что он хорошо известен в течение последних нескольких десятилетий, и имеется обширная литература по патогенезу Эболы, что облегчает проверку результатов MSF с обширной литературой по инфекции Эбола.В частности, обнаружение IFN- α / β в качестве точки действия вируса можно рассматривать как основной показатель правильности и полезности подхода.

    Данные подсчета секвенированных чтений инфекции EBOV были загружены из GEO (GSE84188), они описывают течение инфекции в трех временных точках через 6, 24 и 48 часов после заражения (hpi). Дифференциальный анализ экспрессии генов был выполнен на данных подсчета с помощью пакета edgeR (версия 3.4.2) 19 с использованием нормализации верхнего квартиля.Результаты анализа DEG, сгенерированные edgeR, использовались в качестве входных данных для MSF. Взаимодействия клеточной сигнализации были отфильтрованы из Reactome Functional Interactions (FIs) Version 2016 20 только для прямых взаимодействий, которые использовались в качестве второго входа для MSF.

    Для самой ранней точки времени при 6 HPI были идентифицированы три больших модулированных подграфа с 42, 139 и 69 генами. Модулированные подграфы состоят преимущественно из цитокинов и хемокинов (CXCL10, CCL8, CXCL9, CXCL11, CXCR4, CCR7, CCL4L1, CCL3L1, CCL4, CCL8, CCL20, CCL3, CCL19, IL6, IL27, IL23).IFNB1 и IFNA1 были идентифицированы как два возможных источника в наиболее значительно модулируемом подграфе, идентифицированном с 42 генами. IFNB1 имеет самый высокий балл воздействия 14,5. IFNA1 имеет оценку влияния 8,7, что входит в пятерку самых высоких оценок воздействия в подграфе, к которому он принадлежит. Большинство источников, идентифицированных MSF, представляли собой гены, индуцированные интерфероном I типа (дополнительный материал). При 24 hpi были идентифицированы семь модулированных подграфов с четырьмя основными подграфами, состоящими из 61, 222, 130 и 242 генов, а другие имели менее 6 генов.Опять же, IFNB1 и IFNA1 были определены как два источника из общего числа источников с оценкой воздействия 3,9 и 1,6. IFNB1 был одним из 5 лучших источников оценки воздействия для соответствующего подграфа. Для последней временной точки 48 HPI было идентифицировано шесть модулированных подграфиков. В трех подграфах было менее десяти генов, а в основных подграфах было 217, 224 и 276 генов. IFNB1 и IFNA1 были идентифицированы как источники в наиболее значительно модулированном подграфе с оценкой воздействия 2,8 и 3,7, но не среди источников с наивысшим рейтингом (дополнительный материал).

    Как указывалось ранее, IFN- α / β считается одним из генов-мишеней инфекции Эбола. Нам удалось успешно идентифицировать IFNA1 и IFNB1 как источники во всех трех временных точках заражения лихорадкой Эбола. Хотя IFNA1 и IFNB1 уже были одними из наиболее значимых генов в DGEA в более поздние временные точки, MSF также смогла обнаружить их как источник в очень ранней временной точке, когда гены не были значимыми на основании одного только DGEA. Выявление возможных источников уменьшит пространство для поиска потенциальных генов-мишеней и может помочь биологу в качестве отправной точки клинических испытаний лекарств и вакцин против инфекции.

    В таблице 1 сравниваются результаты MSF, а именно количество обнаруженных субмодулей и их общее количество генов, с простым анализом картирования значительно модулированных генов из DGEA в сеть и присоединения соседей к модулям. Цифры показывают, что MSF обнаруживает меньше, но более крупные и легко интерпретируемые субмодули, применяя свой статистический тест. Кроме того, зависимость результатов от выбора порогового значения p показана для DGEA, чего полностью избегают для MSF. Он демонстрирует, как применение различных отсечений к значению p генов от edgeR к подграфам, идентифицированным MSF, разбивает большие подграфы на множество меньших несвязанных подграфов, многие из которых являются отдельными генами.

    Таблица 1. Сравнение связанных подграфов модулированных генов в глобальной сети, идентифицированных после анализа с помощью MSF и применения различных значений

    p отсечения от edgeR к генам в MSF, идентифицированным модулированным подграфам.

    9052 Общее количество
    генов в сети

    6HPI
    Количество подключенных
    9005
    Edger + MSF 250 250 3
    p-значение ≤ 0. 1 166 87
    значение р ≤ 0,05 152 89
    значение р ≤ 0,01 125 76
    24hpi
    Edger + MSF 656 7
    P-значение ≤ 0,1 457 183
    P-значение ≤ 0,05 418 418
    P-значение ≤ 0 . 01 332 216
    48hpi
    Кромкообрезная + MSF 744 6
    значение р ≤ 0,1 514 189
    p-значение ≤ 0,05 468 206 206 206 206 206 206
    p-значение ≤ 0,01 363 363 241 241
    6

    Модульные подмассы на 6 HPI

    Три основных модулированных подмага, идентифицированных MSF в 6 л. с. показаны на рисунке 2.Графики представляют непосредственный результат анализа MSF, визуализированный с помощью StringApp 10 в Cytoscape 11 . Каждый узел представляет часть гена модулированного подграфа, при этом связанные цвета кодируют функциональную аннотацию, полученную из путей KEGG. Перекрёстные связи между путями, а также множественное использование многих генов очевидны. Поток информации между датчиками и эффекторами может быть воспринят с учетом направления каждого взаимодействия, указанного стрелками.Более подробно на подграфике 1 (внизу) показано, как активация Toll-подобного рецептора, цитокинов, хемокинов, активирующих гены Jak-STAT и MAPK, вместе с TNF приводит к апоптозу. Следующий важный подграфик (подграфик 2: вверху справа) показывает, как информация от рецептора внеклеточного матрикса (ECM), который, как сообщается, взаимодействует с гликопротеином Эбола (GP) 21 , хемокинами, цитокинами и цитозольными Сенсоры ДНК прямо или косвенно контролируют рост, дифференцировку, пролиферацию и апоптоз клеток. Это предполагает, что нарушение регуляции этих путей отвечает за модуляцию апоптоза. Наконец, подграфик 3 (вверху слева) демонстрирует, как IFNA1 и IFNB1 еще раз модулируют, всего лишь за несколько промежуточных стадий, апоптотический ответ клетки. С другой стороны, сигнальные гены цАМФ активируют гены тромбоцитов.

    Рисунок 2. Визуализация трех модулированных направленных подграфов, идентифицированных MSF при 6 л.с./дюйм.

    Цвет узла связан с путями KEGG, относящимися к цветам в легенде.Ребра графа взяты из Reactome.

    Эта витрина может показать, как мало усилий могут быть обработаны сложные данные и подготовлены для интерпретации экспертом в предметной области, чтобы понять динамику лежащих в основе процессов и предложить проверяемую гипотезу и потенциальные точки вмешательства.

    Надежность

    Потенциальная проблема заключается в том, как шум в измерениях экспрессии генов влияет на наш анализ. Поэтому, чтобы оценить надежность и стабильность нашего метода, мы добавили шум, распределенный по Пуассону, к подсчетам чтения набора данных с тремя временными точками, использованными выше. Затем для возмущенных данных был проведен DGEA с теми же параметрами, что и для нативных данных, с использованием edgeR, с последующим анализом с помощью MSF. Эту процедуру проводили 100 раз. Каждый раз гены из модулированных подграфов, идентифицированных по зашумленным данным, сравнивались с генами подграфов, идентифицированных из нативных данных. Надежность анализа MSF для моментов времени 6, 24 и 48 hpi показана на рисунке 3. Процедуру моделирования шума данных можно считать довольно строгой, поскольку MSF чувствительна к изменениям p значений по всему диапазон возможных значений.Наблюдаемые средние показатели отзыва находились между 71 % (6 л.с.) и 84 % (48 л.с./дюйм).

    Рис. 3. Показатели отзыва для генов в подграфике, идентифицированном MSF, для трех разных моментов времени данных об инфекции EBOV для 100 симуляций, где к экспериментально полученным считываниям для каждого гена был добавлен шум распределения Пуассона.

    Сравнительный анализ

    Целью сравнения с существующими инструментами является демонстрация общих возможностей MSF. MSF сравнивали с jActiveModules 8 , поскольку в нем используются аналогичные подходы для поиска и оценки модулей.Для сравнения с анализом обогащения классического пути был выбран Reactome 5 и анализ обогащения набора генов (GSEA) 22 , поскольку оба они широко используются, а последний не зависит от порогового значения p .

    jActiveModules. jActiveModules 8 — это плагин в Cytoscape, который ищет сеть молекулярного взаимодействия, чтобы найти подсети, активированные экспрессией. Метод, используемый для оценки подсетей, активированных экспрессией, близок к методу, используемому в MSF.Разница заключается в том, как идентифицируются эти подсети. MSF начинает строить подграфы из одного гена, включая и комбинируя значение p следующего гена, с проверкой того, что объединенное значение p нового подграфа должно быть лучше исходного. С другой стороны, jActiveModules сначала преобразует все значения p гена p i в z-показатели, используя z i = Φ −1 (1 − p 9035), где Φ -1 представляет собой обратный нормальный CDF и пытается найти связанные наборы генов с неожиданно высокими уровнями дифференциальной экспрессии, в данном случае с высокими z-показателями. Общий балл подсети рассчитывается путем объединения z-баллов генов. Затем, используя их расширенный метод имитации отжига, jActiveModules переключает несколько узлов для объединения дополнительных компонентов.

    Первые данные о заражении лихорадкой Эбола были проанализированы с использованием jActiveModules (версия 3.2.1) для сравнения модулированных подграфов, идентифицированных MSF и jActiveModules. Входные файлы были одинаковыми для обоих инструментов. Из модулей, идентифицированных с помощью jActiveModules, для сравнения с модулированными подграфами, идентифицированными MSF, был выбран модуль с наивысшим значением pathScore.Модуль состоит из одного графа с 314 генами. При этом MSF идентифицировал три направленно-модулированных субграфа с 42, 69 и 139 генами. Перекрытие общих генов, идентифицированных между MSF и jActiveModules, показано на рисунке 4. Подграфы, идентифицированные MSF, более фрагментированы, чем jActiveModules. К сожалению, нет примеров данных золотого стандарта, которые могли бы помочь протестировать метод. MSF обеспечивает направленность с идентификацией возможных источников возмущений подграфов.Предопределенные метки пути также можно увидеть в подграфе, идентифицированном MSF, без особых усилий с помощью StringApp 10 .

    Рисунок 4. На диаграмме Венна показаны общие гены, идентифицированные как модулированные из подграфов, идентифицированных MSF, и идентифицированный модуль jActiveModules.

    Анализ реактомного пути. Анализ обогащения генов был выполнен с использованием инструмента анализа данных Reactome 5 (версия 67) в различные моменты времени данных об инфекции Эбола.Инструмент анализа чрезмерного представительства Reactome проверяет, обогащены ли определенные пути Reactome для представленных ему списков генов. Гены из подграфов, идентифицированных MSF для каждой временной точки, были проанализированы на предмет обогащения генами с использованием этого инструмента. Для сравнения результаты DEG от edgeR для трех моментов времени были отфильтрованы с использованием отсечки скорректированного значения p <0,05. Эти списки DEG использовали для анализа обогащения генов. Сжатие списков генов подграфов, идентифицированных MSF, и анализ списков DEG показаны на рисунке 5.

    Рисунок 5. На графике Upset показано количество общих путей между списком генов подграфа, идентифицированным MSF, и списком отсечения DEG для трех временных точек.

    Все 10 различных каскадов Toll-подобных рецепторов находятся в наборе из 164 общих путей только между MSF в разные моменты времени.

    Были выбраны все обогащенные пути с отсечкой p -значение <0,05 для списков MSF и DEG для трех временных точек. Сравнение показывает, что большинство путей, которые, как известно из литературы, не регулируются инфекцией Эбола, обогащены как в анализе обогащения.Гликопротеин (GP) EBOV взаимодействует с сигнальным путем Toll-подобных рецепторов, он запускает активацию цитокинов 13 . Ожидается, что путь толл-подобного рецептора будет разрегулирован на ранней стадии инфекции, этот путь не был идентифицирован как значительно разрегулированный, когда p -значения отсечения списков DEG были проанализированы для обогащения. Девять каскадов Toll-подобных рецепторов TLR10, TLR2, TLR3, TLR4, TLR5, TLR7/8, TLR9, TLR1:TLR2 и TLR6:TLR2 были идентифицированы как нерегулируемые в результате анализа обогащения генов генов подграфа, идентифицированных MSF, ни один было показано, что один из этих каскадов не регулируется в анализе обогащения путей из списков отсечения DEG.Поскольку MSF учитывает полные результаты DEG, был обнаружен даже слабый сигнал в самый ранний момент времени; например, передача сигналов Toll-подобного рецептора. Хотя MSF способен улавливать слабые сигналы, он не предоставляет информацию о функциональных взаимоотношениях между генами, как инструмент Reactome.

    Анализ обогащения набора генов. Анализ обогащения набора генов (GSEA) 22 — это метод идентификации классов генов или белков, которые чрезмерно представлены в большом наборе генов или белков.GSEA использует статистические подходы для выявления значительно обогащенных или обедненных групп генов. Полный список DEG из DGEA для первой временной точки 6 л. с. был проанализирован с использованием пакета биопроводников GSEABase (версия 1.44.0). GSEA смог идентифицировать Toll-подобный рецептор, сигнальный путь хемокинов, цитозольный ДНК-воспринимающий путь, сигнальный путь Jak-STAT, сигнальный путь RIG-I-подобного рецептора и апоптоз как пути с наивысшим рейтингом. Хотя GSEA выявила важные пути заражения лихорадкой Эбола, она не показала топологию генов в различных выявленных путях и то, как они взаимодействуют друг с другом.MSF и GSEA используют полный список DEG без каких-либо ограничений, поэтому пути, важные для инфекции Эбола, обнаруживаются даже при наличии в нем слабых сигнальных генов.

    Обсуждение

    Классические инструменты анализа путей предназначены для обнаружения в списках значительно дерегулированных генов обогащенных ассоциаций с генами путей, классифицированных по их биологической функции и их взаимодействиям. В зависимости от инструмента топология внутреннего пути рассматривается или игнорируется целиком. Представленный здесь инструмент, MSF, использует другой подход, стремясь обнаружить подграфы в целых сетях регуляции генов, которые значительно нарушены согласованным образом. С этой целью соседние гены в предоставленной пользователем сети проверяются на совместное общее регулирование. Используя тот факт, что распространенность каждого гена, хотя и не независимого от его соседей, измеряется сама по себе, чувствительность может быть повышена с помощью нашего примененного мета-анализа p , а именно метода Хартунга. Это потенциально позволяет называть не только значимые модулированные гены на основе DGEA убедительно относящимися к группе дерегулируемых генов. Кроме того, он позволяет идентифицировать связанные подграфы, представляющие распространение возмущения регуляции генов во входной сети.Лучшее понимание этого распространения, особенно критических точек, таких как сенсоры, эффекторы и концентраторы, облегчает проекцию потенциальных точек вмешательства, например, для разработки лекарств. Поскольку MSF использует только информацию о взаимодействии в сети регуляции генов, а не функциональную группировку генов в функциональные пути, он особенно приспособлен для обнаружения так называемых перекрестных помех между такими путями.

    Выводы

    MSF — это быстрый и простой в использовании инструмент для поиска согласованно модулированных подграфов в заданной сети.Его реализация на Java позволяет использовать его во многих операционных системах, например. линукс и винда. На данный момент поддерживается необработанный вывод из edgeR 19 и DESeq2 23 .

    Доступность данных

    Набор данных секвенирования РНК инфекции Эбола, проанализированный в ходе текущего исследования, доступен в репозитории GEO (GSE84188) 13 . Используемый сетевой файл сотовой сигнализации взят из Reactome Functional Interactions (FIs) Version 2016 20 .

    Доступность программного обеспечения

    Исходный код доступен на GitHub: https://github.com/Modulated-Subgraph-Finder/ MSF

    Заархивированный исходный код на момент публикации: https://doi.org/10.5281/zenodo.2632973 24

    Лицензия на программное обеспечение: лицензия MIT.

    Как печатать из Linux на принтер в кампусе — Вычислительные услуги — Офис директора по информационным технологиям

    Эти инструкции относятся к Ubuntu Linux 20. 04 LTS в среде рабочего стола GNOME. Другие дистрибутивы и настройки могут отличаться.

    При печати из Ubuntu в Campus Printing вам потребуется указать свой идентификатор пользователя и пароль Andrew.В зависимости от программы, из которой вы печатаете, вы можете получить уведомление GNOME. Если вы получили уведомление, щелкните всплывающее окно, которое откроет окно «Активные задания».

    Если окно, запрашивающее ваш идентификатор пользователя и пароль Andrew, исчезло, выполните аутентификацию, выполнив следующие действия:

    1. Перейдите в окно Настройки > Принтеры и щелкните ожидающее задание.
    2. Щелкните Аутентификация (вверху) и укажите свой идентификатор пользователя и пароль Andrew.

    Некоторые приложения (например, Firefox) могут иметь собственный внутренний запрос аутентификации. Если вы получили это приглашение, введите свой идентификатор пользователя и пароль Эндрю. Если вы введете здесь неправильный идентификатор пользователя или пароль, GNOME может повторно предложить вам ввести свой идентификатор пользователя или пароль.

    При печати с таймшеров

    При печати с таймшера используйте: ssh -XY [email protected] . Позвоните в одно из следующих приложений:

    • evince — файлы pdf и postscript
    • eog  – файлы изображений
    • loffice (LibreOffice) — документы Word и т. д.
    • Firefox — веб-страницы

    Примечание : Некоторые программы при аутентификации предлагают установить флажок запомнить пароль .Для лабораторных компьютеров и таймшеров не устанавливайте этот флажок. Кроме того, печать из командной строки (например, lpr) не поддерживается.

    Примечание: Через веб-портал можно распечатать только файлы следующих типов: pdf, bmp, dib, gif, jfif, jif, jpe, jpeg, jpg, png, tif, tiff.


    1. Выберите Web Print (слева).

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *