После выявления алкалоидов ученые провели не один десяток исследований о влиянии берберина на человеческий организм. Установлено, что он попадает в систему кровообращения, а оттуда проникает внутрь клеток. Компонент связывает «молекулярные мишени» и меняет их основные функции в лучшую сторону. Тот же принцип действия у медикаментозных препаратов.

БАД активизирует фермент, который отвечает за энергетический клеточный баланс. Именно он обеспечивает правильный обмен веществ, функционирование большинства внутренних органов. Берберин влияет на организм на молекулярном уровне.

Полезные свойства: это средство оказывает положительное воздействие на многие системы организма человека.

Сердце

Улучшает деятельность печени, а также способствует активному выделению желчи. Благодаря этому средство положительно влияет на работу желчного пузыря, помогает избавиться от застойных процессов в путях, выводящих желчь. Это, в свою очередь, способствует быстрому выведению из организма продуктов распада и токсинов, которые могут накопиться в печени. Чаще всего застой желчи происходит из-за неправильного питания, малоактивного образа жизни. В результате печень медленнее избавляется от вредных веществ, что негативно сказывается на ее функции. Берберин усиливает отток желчи, помогая улучшить работу внутреннего органа.

Инфекции

Биодобавка оказывает противогрибковое, антибактериальное действие. Она уничтожает возбудителей заболевания, предотвращает развитие инфекционных процессов. Если микроорганизмы спровоцировали воспаление, препарат поможет локализовать его очаг. Противовоспалительные и противомикробные свойства продукта применяют при лечении таких болезней, как цистит, инфекционные поражения половой сферы и пищеварительного тракта. Часто БАД назначают для лечения простудных заболеваний, облегчения состояния при насморке, поражениях дыхательных путей. Средство используют при кандидозе.

Пищеварение

Средство оказывает положительное действие на гладкую мускулатуру кишечника, за счет чего улучшается перистальтика. Кроме того, препарат устраняет боли в абдоминальной зоне. Поскольку у него отмечена высокая противомикробная активность, то он обеспечивает положительный эффект в комплексном лечении расстройств желудка и кишечника. Проводились исследования, которые доказали достижение быстрого результата при использовании добавки. Она устраняет расстройства пищеварения быстрее, чем антибактериальные препараты, но при этом не наносит вреда организму.

Диабет

Ученые проводили опыты, которые продемонстрировали достижение ощутимого результата в лечении пациентов с диабетом второго типа (инсулиннезависимым). БАД действует в нескольких направлениях. Средство увеличивает восприимчивость клеток к инсулину, улучшает процесс окисления глюкозы внутри них, а также уменьшает производство глюкозы в печени. Исследования свидетельствуют о том, что употребление 1 грамма вещества в день на 20% снижает уровень сахара.

Берберин как алкалоид

Алкалоиды – это растительные или животные компоненты, в состав которых входит азот. Еще в древности лекари использовали растения, в состав которых входят эти вещества, для борьбы с многочисленными недугами. Но только в современном мире удалось доказать эффективность подобных соединений.

Все алкалоиды по-разному действуют на человека. Например, берберин прежде всего стабилизирует уровень сахара, холестерина, за счет чего снижает риск развития заболеваний сердечно-сосудистой системы, а также способствует более эффективному сжиганию жировых отложений. Но, поскольку это алкалоид, то может оказывать и негативное воздействие на человека. Однако это происходит только в том случае, если не соблюдать правила использования, или превышать рекомендованную дозировку.

В последние годы увеличилось число пациентов, которым ставят диагноз «сахарный диабет второго типа». Проблема при лечении этой разновидности заболевания состоит в неэффективности медикаментозного использования инсулина. Он не помогает уменьшить уровень сахара. Чувствительность клеток к инсулину снижается, что затрудняет дальнейшее лечение.

Доказано, что применение берберина помогает снизить показатели сахара именно при инсулиннезависимом диабете 2-го типа. Проводилось исследование, в котором участвовали 116 человек с этим диагнозом. Одной группе пациентов давали плацебо, другой – биологически активную добавку.

Оказалось, что у тех, кто принимал БАД в объеме 1 г в сутки, примерно на 20% снизился уровень сахара. Положительный эффект от использования состоит и в том, что уменьшились показатели холестерина, а также жиров в крови. Ученые считают, что натуральное средство со временем может заменить стандартные медикаменты, которые используют в лечении диабета 2-го типа (чаще всего метформин).

Применение для похудения

Другое исследование, которое проводили специалисты, касалось влияния препарата на снижение веса. Первый эксперимент продлился около 3 месяцев. В ходе опыта испытуемые, которые хотели похудеть, получали добавку в объеме 0.5 г трижды в сутки. После завершения исследования оказалось, что они похудели в среднем на 2 килограмма, но при этом существенно уменьшились именно жировые отложения.

Аналогичный эксперимент провели в дальнейшем. Только на этот раз участники опыта получали добавку в объеме 0.3 г трижды в день. Индекс их массы снизился в среднем на несколько единиц.

В первую очередь берберин помогает избавиться от жировых отложений в труднодоступных местах (например, на животе). Специалисты связывают похудение со стабилизацией гормонального фона. Улучшается производство гормонов, нормализуется их уровень (прежде всего инсулина), что положительно сказывается на обмене веществ. Одновременно со снижением веса происходит повышение прочих маркеров здоровья.

Влияние на холестерин

Препараты на основе вещества оказывают положительный эффект не только на уровень сахара, но и на показатели холестерина. Его уровень при регулярном употреблении средства снижается до 25%. Поэтому добавку часто назначают в комплексе с медикаментозными препаратами. Одновременно повышаются показатели «правильного» холестерина, уменьшается уровень триглицеридов (жира).

Аналоги

Сегодня не существует структурных аналогов действующего вещества, поскольку алкалоиды имеют собственную уникальную структуру и принцип действия. Подобрать средство с аналогичными свойствами может только квалифицированный специалист.

Сочетание берберина и куркумина

В сочетании эти два активных компонента усиливают действие друг друга. Берберин уменьшает показатели сахара, а куркумин помогает сократить выработку глюкозы и гликогена в печени.

Применение во время беременности

Все производители указывают, что не следует использовать продукт во время вынашивания ребенка. Он может спровоцировать тонус матки, что негативно сказывается на ходе беременности. Поэтому не применяйте добавку, если только вам ее не назначил лечащий врач.

Инструкция по применению

Рекомендованная суточная норма берберина составляет 1.5 г. Средство разделяют на несколько приемов. Производители чаще всего выпускают капсулы в дозировке 0.5 г, поэтому их нужно выпивать 2 – 3 штуки в день. Обычно рекомендуют принимать препарат за полчаса до еды или во время приема пищи.

Дозировку и продолжительность приема определяет лечащий врач.

Противопоказания

1. Период вынашивания ребенка и кормления грудью;
2. Несовершеннолетний возраст;
3. Проблемы со свертываемостью крови. Продукция может спровоцировать ухудшение ситуации;
4. По той же причине нельзя употреблять добавку людям, которым предстоит хирургическое вмешательство;
5. Пониженное давление является относительным противопоказанием к применению.

Кроме того, специалисты предупреждают, что нельзя самостоятельно повышать дозировку. Если вы пьете берберин для лечения сахарного диабета, следуйте графику приема, назначенному лечащим врачом. В некоторых случаях (чаще всего при превышении дозы) наблюдаются проблемы с пищеварительным трактом. Отмечают диарею, вздутие живота, запоры.

Берберин показан для лечения и профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, для снижения уровня сахара и холестерина. Основное противопоказание к применению продукта – это беременность и период лактации.

THORNE БЕРБЕРИН-500: инструкция, отзывы, аналоги, цена в аптеках

Thorne Берберин-500 — растительный екстракт для поддержки метаболизма, сердечно-сосудистой системы и пищеварения .

Фармакологические свойства

Берберин (в составе Berbercap или Берберин-500) помогает поддерживать здоровый уровень холестерина и сахара в крови. 

Берберин – это алкалоид, который содержится во многих растениях, включая Hydrastis anadensis (желтокорень канадский), Coptis chinensis (Коптис или Золотая нить), Berberis aquifolium (Орегонский виноград), Berberis vulgaris (Барбарис) и Berberis aristata (Барбарис Индийский). Берберин в составе Berbercap и Берберин-500 – это экстракт (корня) индийского барбариса (Berberis aristata).

Высококачественные продукты Thorne с берберином обеспечивают широкую поддержку иммунитета и желудочно-кишечного тракта. Берберин также способствует поддержанию здорового баланса полезных бактерий в кишечнике и улучшает состояние слизистой органов дыхания.

Рекомендации по применению

Принимать 1-2 капсулы два раза в день или в соответствии с рекомендациями вашего лечащего врача.

Если вы беременны, кормите грудью или пытаетесь зачать, не используйте этот продукт.

Противопоказания

Этот продукт противопоказан человеку с повышенной чувствительностью к любому из его компонентов. 

Взаимодействие

Было показано, что снижение активности ферментов цитохрома p450 (CYP) CYP2D6, CYP2C9 и CYP3A4.

Условия хранения

Хранить плотно закрытым в прохладном, сухом месте.

Форма выпуска

60 капсул

Состав

2 капсулы содержат:

Берберин HCl (из экстракта индийского барбариса) (корень) ( Berberis aristata ) — 1 г

Другие ингредиенты: капсула гипромеллозы (полученная из целлюлозы), микрокристаллическая целлюлоза, лейцин, диоксид кремния.

Что такое берберин и для чего он нужен организму? Свойства, польза, действие берберина, показания к применению

Органические соединения активно изучаются и используются в современной медицине. Те из них, которые содержат азотистые компоненты, обладают эффективным противовоспалительным и антимикробным действием. К группе таких веществ относится берберин, который активно используется в профилактике различных заболеваний. При этом данная пищевая добавка может применяться как для монотерапии, так и в комплексном лечении.

Берберин – что это такое?

Берберин – вещество, которое добывается опытным путем из ароматической альфа-аминокислоты (тирозина). Экстракт, получаемый из растений, имеет горьковатый привкус и желтый оттенок. Проходя через ряд химических реакций, он преобразуется в порошок, который потом и добавляется в препараты. Механизм действия берберина заключается в том, что он связывается с некоторыми молекулами и преобразует их функции. При этом многие негативные процессы в организме человека оборачиваются вспять, что способствует выздоровлению, то есть берберин влияет на организм на биохимическом уровне. Это подтверждается рядом исследований, в результате которых было выявлено, что вещество способно затормаживать процесс разрастания патологических тканей и убивать раковые клетки (1).

Для чего берберин нужен организму?

Свойства берберина и его действие на организм доказаны опытным путем. В результате исследований было выявлено, что применение пищевых добавок с этим компонентом в составе положительно сказывается на работе мозга, а также позволяет контролировать психоэмоциональное состояние пациентов.

Препараты с берберином способны:

• снизить окислительный стресс, препятствуя накоплению высокоактивных видов кислорода;
• затормозить дегенеративные процессы, сопутствующие старению организма;
• предотвратить заражение инфекциями различного типа;
• улучшить состав крови, снизив уровень глюкозы и липидов;
• остановить процесс накопления жировых отложений в печени;
• восстановить микрофлору кишечника;
• повысить устойчивость к стрессовым ситуациям.

Говоря о том, для чего нужен организму берберин, стоит отметить, что он снимает воспалительную реакцию и способствует снижению веса во время диеты. Вещество поддерживает работу систем и органов во время болезней и при повышенных психологических, умственных, эмоциональных нагрузках.

Свойства и польза берберина

Свойства берберина таковы, что он легко всасывается в кровоток через стенки желудка и, связываясь с другими молекулами, быстро транспортируется к органам. Попадая в клетки мозга вещество постепенно улучшает когнитивные функции, ускоряя развитие нейронов и регулируя процессы взаимодействия между ними.

Польза берберина состоит также в следующем:

• улучшение выработки желчи и облегчение ее выведения;
• обеспечение полноценного обмена веществ;
• снижение скорости расщепления углеводов;
• восстановление защитных барьеров организма;
• укрепление сердца и сосудов;
• предотвращение развития новообразований;
• поддержание полноценной работы пищеварительного тракта.

Опытным путем были доказаны спазмолитические, антидепрессивные и противоболевые свойства берберина (2). Микроэлемент способен снижать скорость деградации гормонов счастья, что способствует повышению устойчивости к стрессовым ситуациям. При этом он снимает такую симптоматику, как импульсивность, негативный настрой, невнимательность.

Показания к применению

Берберин участвует в обменных процессах и способствует восстановлению энергетического баланса. Учеными активно изучается возможность использования вещества для лечения ожирения и диабета. На данный момент применение берберина практикуется при заболеваниях печени и желчного пузыря, среди которых холецистит, холангит, гепатит В и другие патологии. Его назначают при наличии язвенных процессов и дисбактериальных нарушений. Также берберин помогает очистить организм от токсинов, скапливающихся из-за неправильных питания и образа жизни.

Согласно инструкции по применению берберин пьют перед едой 3 раза в день. При этом суточная норма не должна превышать 1500 мг. Чаще всего курс лечения длится 2 недели. Оценив состояние пациента, врач может продлить использование препарата еще на 14 дней. Стоит четко соблюдать дозирование, поскольку при его превышении могут наблюдаться такие побочные действия, как понижение давления, появление головной боли, нарушение ритма сердцебиения. Перед тем, как принимать берберин, нужно ознакомиться с противопоказаниями. Среди них наличие хронических заболеваний в стадии обострения, возраст до 12 лет, беременность, индивидуальная непереносимость компонентов.

Отзывы о берберине

Отзывы врачей и пациентов о берберине имеют положительный характер. Отмечается, что использование препарата приносит результаты в короткие сроки. Период похудения проходит легче, а проявление симптоматики нарушений работы печени уменьшается. Согласно отзывам, берберин помогает снизить уровень сахара в крови, а также укрепить сердце и сосуды.

Рейтинг: ТОП-13 лучших добавок с берберином

Отзыв на берберин и инструкция по применению — польза и вред: iherbnow — LiveJournal

Берберин часто рекомендуется к приему при диабете, но его функции намного шире. Он помогает при гипертонии и болезнях сердца, избыточном весе, для профилактики рака. Это отличный заменитель метформина, лекарства, назначаемого при диабете. В нашем обзоре рассмотрим полезные свойства берберина и другие вопросы:

1. Что такое берберин и как он помогает при диабете, можно ли пить для профилактики онкологических заболеваний.
2. Почему берберин это неплохая замена метформина.
3. Инструкция по приему берберина и дозировка.

Что такое берберин и для чего принимать

Берберин это растительный изохинолиновый алкалоид, содержащийся в различных растениях, включая барбарис, орегонский виноград, желтокорень и коптис Китайский. Он имеет 3000-летнюю историю использования в традиционной китайской и индийской медицине, ранее использовали для уменьшения диареи из-за антимикробного действия. Приведем основные полезные свойства береберина, на базе последних исследований:

По многочисленным исследованиям, берберин может быть полезен людям с диабетом 2-го типа. Однако авторы этой научной работы подчеркнули, что доказательства в целом являются слабыми, поскольку включенные исследования были немногочисленными, имели низкое методологическое качество, небольшой размер выборки участников и неопознанные риски предвзятости. В одном исследовании берберин (0,5 г, прием 3 раза в день в течение 3-х месяцев) действовал аналогично метформину (лекарство от диабета). Он снижал уровень гликированного гемоглобина А1С (HbA1c), уровень глюкозы в крови натощак, глюкозу в крови после еды и уровень триглицеридов у 36 пациентов с сахарным диабетом 2-го типа. В другом исследовании с участием 48 пациентов с сахарным диабетом 2-го типа, получавших берберин, были получены аналогичные результаты и также снижение инсулина в плазме крови. Показатели общего холестерина и ЛПНП (плохого холестерина) также уменьшились. В третьем значимом исследовании берберин в дозе 1 грамма в сутки снижал уровень глюкозы в крови натощак и после еды, значения гликированного гемоглобина HbA1c, триглицеридов, общего холестерина и ЛПНП-холестерина (участвовало 116 пациентов с сахарным диабетом 2-го типа).  

В экспериментах на крысах уже стал более понятен принцип действия берберина при диабете. Оказывается он влияет регенерацию бета-клеток поджелудочной железы (клеток, вырабатывающих инсулин), увеличивает активность антиоксидантов и уменьшает перекисное окисление липидов, что уменьшало окислительный стресс. В настоящее время ученые выдвинули множество гипотез о том, как берберин может помочь при диабете на клеточном уровне, включая следующие:

• Увеличение AMPK (5 АМФ-активируемая протеинкиназа), которая стимулирует поглощение глюкозы мышечными клетками и помогает сбалансировать высокий уровень сахара в крови (исследования на крысах и клетках). Исследования тут, тут, тут. Метформин при диабете тоже активирует АМПК
• Задержка распада углеводов на простые сахара.
• Усиление секреции глюкагона.
• Имитирует действие инсулина, увеличивая способность организма поглощать глюкозу.
• Снижение объема перемещения глюкозы через слизистую оболочку кишечника.
• Увеличение адипонектина, белка, который помогает регулировать уровень сахара в крови (через AMPK).
• Активация транспортной активности сахара в крови транспортером глюкозы 1 (GLUT1).
• Активация рецептора жирных кислот GPR40.
• Уже упомянутая защита бета-клеток поджелудочной железы от клеточной гибели.
• Подавление продукции глюкозы в печени.
• Улучшение состава микрофлоры кишечника.
• Ингибирование воспалительного пути NF-kB.
• Повышение количества рецепторов к инсулину.

Как видно, исследований было довольно много, и в настоящее время проводятся новые.

Прием берберина приводит к повышенному превращению холестерина в желчные кислоты, что способствует снижению уровня холестерина в крови, поскольку повышенный синтез желчных кислот является основным путем выведения холестерина из организма. Понижающие уровень холестерина эффекты были подтверждены в сводке из 27 клинических исследований, что сделало берберин привлекательной альтернативой для пациентов с дислипидемией, неспособных принимать статины из-за побочных эффектов. Стоит иметь ввиду, что берберин не относится к лекарствам и не регулируется с такой же строгостью, как рецептурные препараты. Кроме того, повышенная секреция желчных кислот в желудочно-кишечный тракт может быть связан с риск развития колоректального рака. Какие есть исследования на эту тему?

Берберин, принимаемый ежедневно в течение 4-х недель, снижал показатели общего холестерина, ЛПНП-холестерина и триглицеридов, а также увеличивал хороший холестерин ЛПВП. В другом исследовании с 32 пациентами с высоким уровнем холестерина добавление берберина в течение 3-х месяцев значительно снижало показатели холестерина, триглицеридов и ЛПНП. И еще ряд исследований, где комплексная добавка, содержащая берберин (500 мг берберина, 10 мг поликосанола, 200 мг красного дрожжевого риса, 0,2 мг фолиевой кислоты, 2,0 мг коэнзима Q10 и 0,5 мг астаксантина), снижала уровень общего холестерина, ЛПНП и резистентности к инсулину, но там она не влияла на показатели ЛПВП. См тут, тут и тут. Основываясь на лабораторных экспериментах, ученые полагают, что берберин может снижать уровень ЛПНП-холестерина через:

Согласно большому метаанализу клинических исследований, добавки берберина в сочетании с традиционной терапией снижают систолическое артериальное давление через 2 месяца приема. Правда берберин вносит немного, снижает систолическое артериальное давление на 5 мм рт.ст. и диастолическое артериальное давление на 2 мм рт. ст., по сравнению с только медикаментозным лечением. Берберин (в дозировке 1,2-2,0 г/сут) в сочетании с несколькими традиционными методами лечения повышал качество жизни (физическая нагрузка и снижение утомляемости) и снижал смертность у 156 пациентов с хронической застойной сердечной недостаточностью. Берберин показал потенциал для улучшения аспектов сердечно-сосудистого здоровья в исследованиях на крысах. Было изучено возможное защитное воздействие на клетки сердечной мышцы, поврежденные возвращением кровотока после ограничения кровотока (например, после инсульта). Исследования тут, тут и тут.

Берберин чтобы похудеть

Берберин считается популярной добавкой для похудения, эффект есть, но в большинстве случаев незначительный. В одном исследовании берберин (прием 500 мг 3 раза в день в течение 12 недель) приводил к средней потере веса на 2,25 кг, но зато приводил к улучшению показателей триглицеридов и холестерина у пациентов с ожирением.  

Зато он хорошо помогает для защиты от дальнейшего набора веса:

• Берберин (прием 0,3 г/сут в течение 12 недель) снижал значения ИМТ и уровень гормона лептина у пациентов с метаболическим синдромом. В исследовании приняли участие 37 пациентов.
• Берберин ингибировал (подавлял) выработку жировых клеток организма посредством стимуляции ингибиторов C/EBP, CHOP и DEC2, с одновременным подавлением C/EBPa, PPARy и других маркеров адипоцитов.
• В другом исследовании было замечено, что берберин может активировать коричневую жировую ткань. Эти жировые клетки помогают организму превращать пищу в тепло тела, а повышенная активация способна помочь в лечении ожирения и метаболического синдрома.
• Еще одно исследование предположило, что берберин действует аналогично препарату метформину. Эффект действительно есть, но делает он это иначе. Берберин изменяет состав бактерий в кишечнике, что может помогать в лечении как ожирения, так и диабета.

В исследовании 2015 года было показано, что берберин эффективен при лечении синдрома раздраженного кишечника (СРК). Пациенты с преобладающим СРК были разделены на две группы, одна из которых принимала берберин 2 раза в день в течение 8 недель. Группа пациентов с берберином сообщила о значительном улучшении диареи и уменьшении срочности и частоты дефекации. У этих пациентов также наблюдалось снижение боли в животе на 64,6% в конце исследования по сравнению с начальными показателями. Берберин улучшал пациентами общую оценку своих симптомов, оценку тревожности и депрессии.

Берберин и профилактика рака

На людях исследования не проводили, но в пробирках результаты хорошие, берберин показал способность подавлять некоторые типы раковых клеток:

1. Рака головного мозга, см тут и тут.
2. Рака молочной железы, см тут и тут.
3. Рака шейки матки, см тут и тут.
4. Рака толстой кишки, см тут и тут.
5. Рака печени, см тут и тут.
6. Лимфомы, см тут.
7. Рака полости рта, см тут и тут.
8. Рака щитовидной железы, см тут и тут.

Давайте разбираться, с чем могут быть связаны противораковые свойства, пускай даже полученные в пробирке. Очевидно на это влияют следующие довольно важные свойства берберина:

• Берберин способствует фосфорилированию p53. Это белок, который останавливает деление клеток при наличии у них поврежденной ДНК, важный противоопухоливый белок, фосфорилирование не позволяет опухоли его деактивировать.
• Снижает количество про-воспалительных белков: циктокинов IL-1beta, IL-6, TNFα, простагландинов (COX-2).
• Берберин может быть полезен в аутоиммунных заболеваниях, опосредованных чрезмерной функцией Th2 и/или Th27 подтипов CD4+ клеток. То есть при всех аутоиммунных заболеваниях. От сахарного диабета 1-го типа и ревматоидного артрита до аутоиммунного энцефаломиелита. В очень интересном исследовании берберин при экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите снижал уровни IFNy, IL-6 и IL-17 (первый и последний – основные про-воспалительные цитокины Th2 и Th27 соответственно).
• За счет увеличения количества инкретинов (ГПП-1) может потенциально быть полезен при сахарном диабете 1-го типа.
• Подавляет окислительный метаболизм митохондрий, связанный с NAD и комплексом I. Это можно назвать метформино-подобным эффектом, аналогичная кето-диете. Исследования тут, тут и тут.
• Берберин помогал формировать новые митохондрии, увеличивая активность гена SIRT1 и соотношение NAD+/NADH у крыс.

Известный профессор Дэвин Синклер принимает метформин для профилактики рака и увеличения длительности жизни. Но учитывая, что большинству людей метформин недоступен, то имеет смысл проговорить с врачом прием берберина.

Что лучше берберин или метформин

Берберин часто сравнивается с метформином, так как у них схожие свойства. При этом метформин считается рецептурным лекарством, а берберин БАД. Как видите по формуле – это разные молекулы, поэтому сходство действия возникает по другими причинам. 

В одном небольшом исследовании 36 пациентов с сахарным диабетом, которым диагноз был поставлен недавно, 3 раза в день получали или 500 мг берберина, или метформина. Через 3 месяца оба метода лечения подействовали почти одинаково хорошо: у больных существенно снизился уровень сахара в крови натощак, а также уровень сахара после еды и гемоглобин. Однако берберин обладал одним плюсом — в отличие от метформина, он повлиял и на количество холестерина и триглицеридов.

В другом, более объемлющем, исследовании обнаружено, что берберин понижает уровень сахара в крови не только аналогично метформину, но и как еще одно лекарство против диабета розиглитазон. Вот тут есть подробное сравнение действия берберина с  метформином, можно почитать в деталях.

К преимуществам берберина можно отнести двойной механизм действия: 

• Берберин апрегулирует АМПК, чем стимулирует аутофагию и забор глюкозы в клетки.
•  Берберин и повышает количество инкретинов. 

Что в целом отражено в исследованиях – берберин где-то не менее эффективней метформина, где-то более эффективен. Смотрите рисунок ниже, где берберин был эффективнее метформина в снижении (слева направо): гликизированного гемоглобина, глюкозы натощак, глюкозы после еды, инсулина натощак.

Что важно, у берберина пока не нашли минусы метформина: 

• Метформин вызывает дефицит B12
• Метформин связывается с потенциально опасным для жизни состоянием. Оно называется лактатацидозом — это скопление молочной кислоты в крови. 
• Метформин влияет на фолатный цикл. 

Но берберин это БАД, а не лекарственное средство, то есть он не так хорошо изучен. И ряд недостатков, вроде снижения андрогенов, могут быть и у берберина. Тем не менее, показатели безопасности берберина достаточно высокие, он может стать многообещающей альтернативой имеющимся на данный момент лекарствам от сахарного диабета, особенно метформину. Если вы подумываете включить в свое лечение против сахарного диабета берберин,  обязательно проконсультируйтесь с грамотным врачом.

Противопоказания приема берберина

Берберин в целом безопасная добавка, если принимать не более 1.5 грамма в сутки. Тем не менее, любой приема БАДов лучше согласовывать с врачом. Незначительные неблагоприятные пищеварительные эффекты наблюдались у нескольких пациентов в исследованиях с приемом берберина, такие как дискомфорт в животе (тошнота, вздутие живота, диарея). Какие есть противопоказания приема берберина и другие особенности:

• Снижает кишечную абсорбцию глюкозы и как следствие количество поступающих калорий. В условиях голода не самая хорошая идея принимать берберин.
• Известные побочные эффекты высоких токсичных доз: гипотензия, диспения, одышка, дискомфорт ЖКТ, диарея, запоры, урон сердечно-сосудистой системе.
• Потенциальная нейротоксичность за счет аккумуляции в митохондриях нервных клеток и повышению чувствительности.
• Нельзя применять с антибиотиками-макролидами, усиливает риск осложнений сердечно-сосудистных осложнений (макролиды известны тем, что сильнее других антибиотиков вредят митохондриям).
• Возможное негативное влияние на мужские половые функции. Берберин и метформин подавляли ЛГ/ФСГ/тестостерон сильнее, чем метфорин по одиночке при поликистозе яичников.
• Взаимодействие с лекарствами за счет подавления CYP2D6 и CYP3A4. Берберин может препятствовать абсорбции тетрациклина и связанных с ним антибиотиков. Поскольку эти ферменты метаболизируют большинство лекарств, берберин может замедлить выведение многих лекарств из организма, тем самым усиливая их эффект.
• Благодаря множеству антидиабетических эффектов берберинсодержащие растения могут усиливать действие пероральных гипогликемических препаратов. Те, кто принимает пероральные гипогликемические препараты, должны контролировать уровень глюкозы в крови при приеме берберина.

Беременная или кормящая женщина не должна принимать берберин без одобрения своего врача. Хотя исследования не показали, что берберин является вредным для развивающегося плода или грудного ребенка, окончательные доказательства, что он безопасен, могут продемонстрировать только дальнейшие исследования. Детям берберин только по назначению педиатра, исследований не было.

У берберина низкая биодоступность, меньше 5%. Это означает, что большая часть принимаемой добавки действует в основном в области кишечника, и лишь небольшая часть имеет свое действие путем всасывания в кровь. Берберин выпускается в виде таблеток или капсул. Хотя установленной дозы не существует, в большинстве исследований доза была 1000-1500 мг (1-1,5 г) /сут. Прием берберина часто рекомендуют разбить на несколько доз, например, принимая по 500 мг 3 раза в день, чтобы поддерживать устойчивый уровень этого вещества в своем организме.

Какой берберин на Айхерб лучше

Если вы решили приобрести берберин, то мы приведем ссылки на лучше варианты. Зачем переплачивать в несколько раз, когда есть оптимальные варианты.

1) Paradise Herbs, берберин, 180 вегетарианских капсул. Цена качество, бестселлер. Дозировка стандартная, 500 мг.

2) Natural Factors, Ultimate Heart Health, 90 Vegetarian Capsules. Это комплексная добавка, направленная на здоровье сердца, снижение холестерина и нормализация давления. Берберин 250 мг.

3) Dr. Mercola, MicroPQQ и берберин с улучшенной рецептурой, 30 капсул. Премиальная добавка, добавлен кофактор PQQ для лучшего усвоения. 500 мг

4) Terry Naturally, Berberine MetX, ультра абсорбция, 60 капсул. Производитель пишет об уникальной технологии, повышающую стандартную биодоступность в 5%. Но что за технология, и насколько он повышает усвоение — не понятно. 250 мг.

5) Доктор Уитакер, Берберин + GlucoGOLD, 90 таблеток. Комплексная добавка, которая лучше других подойдет при диабете. 500 мг.

1. Если Вам пока сложно разобраться, что выбрать из 25 тысяч позиций на Айхерб, то тут каталог лучших вариантов. Специальными фильтрами мы убрали плохие варианты добавок и оставили все самое лучшее.
2. Многоразовый промокод Айхерб на скидку BEF2848, пожалуйста, запишите его и используйте при всех покупках. Нашей семье с этого будет небольшая благодарность, которая уходит на лечение тяжелого ребенка, а вам скидка 5-10% в зависимости от бренда. Большое спасибо за использование кода!
3. Удобный алфавитный список всех наших обзоров тут. Не забудьте подписаться, чтобы первыми узнавать о закрытых акциях и новых обзорах, ссылки ниже. Всем здоровья и будем на связи!

Дисклеймер. Все публикации размещены исключительно в информационных целях, мы несем ответственности за их использование. Прием любых добавок должен согласовываться с вашим лечащим врачом.

Берберин | Berberin — описание препарата, ⚕️ инструкция по применению, противопоказания, отзывы | 🧾 Аналоги для Берберин

i Аналоги:

Берберин – описание

iПоказания к применению:

Берберин в комплексном лечении применяется при:

• холецистите;
• дискинезиях по гипокинетическому типу;
• хроническом гепатите;
• язвенной болезни.

[ads-mob-1]

iСпособ применения и дозировки:

Препарат Берберин принимают внутрь, по 1-2 таблетки трижды в день, до еды, курсом 3-4 недели.

iПротивопоказания:

• повышенная чувствительность;
• беременность.

С осторожностью назначается при желчнокаменной болезни.

[ads-mob-2]

iФармакологическое действие:

Спазмолитическое, желчегонное.

Фармакодинамика

Препарат Берберин содержит действующее вещество берберина бисульфат, являющийся производным алкалоида берберина, получаемого из листьев и корней барбариса.

Оказывает желчегонное действие. Относится к холекинетикам растительного происхождения. Раздражает рецепторы слизистой двенадцатиперстной кишки и вызывает выработку холецистокинина, который стимулирует желчеотделение, снижение тонуса желчных путей и сокращение ЖП. При его приеме отмечается увеличение секреции желчи, уменьшается ее вязкость. Оказывает также гипотензивное действие и стимулирует родовую деятельность.

Фармакокинетика

Данные не представлены.

iПобочные действия:

• аллергические реакции;
• снижение артериального давления;
• урежение пульса.

iФорма выпуска препарата:

Таблетки.

Данная страница носит информационный характер! Описание препарата Берберин не должно использоваться пациентами для принятия самостоятельного решения об их применении. Решение о назначении препарата и способе его применения принимается только лечащим врачом в результате очной консультации.

Поделиться ссылкой:

Польза для здоровья, побочные эффекты, применение, дозы и меры предосторожности

Абэ Ф., Нагафудзи С., Ямаути Т., Окабе Х., Маки Дж., Хиго Х., Акахане Х., Агилар А., Хименес-Эстрада М. и Рейес -Чилпа, Р. Трипаноцидные компоненты растений 1. Оценка некоторых мексиканских растений на предмет их трипаноцидной активности и активных компонентов гуако, корней Aristolochia taliscana. Биол Фарм Булл 2002;25(9):1188-1191. Посмотреть реферат.

Абиди П., Чжоу Ю., Jiang, JD, and Liu, J. Регулируемая внеклеточным сигналом киназозависимая стабилизация мРНК печеночного рецептора липопротеинов низкой плотности с помощью фитотерапии берберина. Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol 2005;25(10):2170-2176. Посмотреть реферат.

Аффузо Ф., Руволо А., Мичилло Ф., Сакка Л. и Фацио С. Влияние комбинации нутрицевтиков (берберин, красный дрожжевой рис и поликозанолы) на уровни липидов и функцию эндотелия, рандомизированное, двойное -слепое плацебо-контролируемое исследование. Нутр Метаб Кардиоваск.Дис 2010;20(9):656-661. Посмотреть реферат.

Ахтер М. Х., Сабир М. и Бхид Н. К. Возможный механизм противодиарейного действия берберина. Indian J Med Res 1979;70:233-241. Посмотреть реферат.

Al-masri, I.M., Mohammad, M.K., and Tahaa, M.O. Ингибирование дипептидилпептидазы IV (DPP IV) является одним из механизмов, объясняющих гипогликемический эффект берберина. J Enzyme Inhib.Med Chem 2009;24(5):1061-1066. Посмотреть реферат.

Албал М.В., Джадхав С. и Чандоркар А.G. Клиническая оценка берберина при грибковых инфекциях. Индийский Дж. Офтальмол. 1986; 34:91-92. Посмотреть реферат.

Arana, BA, Navin, TR, Arana, FE, Berman, JD, и Rosenkaimer, F. Эффективность короткого курса (10 дней) высоких доз меглюмина антимоната с интерфероном-гамма или без него при лечении кожного лейшманиоза в Гватемале . Clin Infect Dis 1994;18(3):381-384. Посмотреть реферат.

Баббар О.П., Чхатвал В.К., Рэй И.Б. и Мехра М.К. Влияние глазных капель хлорида берберина на пациентов с клинически положительной трахомой.Индийская J Med Res. 1982;76 Приложение:83-88. Посмотреть реферат.

Берберин. Altern Med Rev 2000;5(2):175-177. Посмотреть реферат.

Карломаньо Г. , Пироцци К., Меркурио В., Руволо А. и Фацио С. Влияние комбинации нутрицевтиков на ремоделирование левого желудочка и вазореактивность у пациентов с метаболическим синдромом. Nutr Metab Cardiovasc.Dis 2012;22(5):e13-e14. Посмотреть реферат.

Чернакова М., Косталова Д., Кеттманн В., Плодова М., Тот Дж., Дримал Дж. Потенциальная антимутагенная активность берберина, входящего в состав Mahonia aquifolium.BMC.Complement Altern.Med 19.02.2002; 2:2. Посмотреть реферат.

Чае, С. Х., Чжон, И. Х., Чой, Д. Х., О, Дж. В. и Ан, Ю. Дж. Ингибирующее рост действие изохинолиновых алкалоидов, полученных из корня коптиса японского, на кишечные бактерии человека. J Agric.Food Chem 1999;47(3):934-938. Посмотреть реферат.

Чан М.Ю. Влияние берберина на экскрецию билирубина у крыс. Comp Med East West 1977;5(2):161-168. Посмотреть реферат.

Chang, K.S., Gao, C., and Wang, LC. Индуцированная берберином морфологическая дифференцировка и подавление экспрессии протоонкогена c-Ki-ras2 в клетках тератокарциномы человека. Рак Летт. 12-3-1990;55(2):103-108. Посмотреть реферат.

Чекалина С. И., Умурзакова Р. З., Салиев К. К., Абдурахманов Т. Р. Влияние берберина бисульфата на гемостаз тромбоцитов у больных тромбоцитопенией. Гематология и трансфузиология 1994;39(5):33-35. Посмотреть реферат.

Cheng, Z., Pang, T., Gu, M., Gao, AH, Xie, CM, Li, JY, Nan, FJ и Li, J. Стимулированное берберином поглощение глюкозы в мышечных трубках L6 включает как AMPK, так и р38 МАПК. Биохим.Биофиз.Акта 2006;1760(11):1682-1689.Посмотреть реферат.

Chi, CW, Chang, YF, Chao, TW, Chiang, SH, P’eng, FK, Lui, WY и Liu, TY Проточный цитометрический анализ влияния берберина на экспрессию глюкокортикоидных рецепторов в клетках гепатомы человека HepG2 . Жизнь наук. 1994;54(26):2099-2107. Посмотреть реферат.

Чоудхри В.П., Сабир М. и Бхид В.Н. Берберин при лямблиозе. Индийский педиатр. 1972;9(3):143-146. Посмотреть реферат.

Чун Ю.Т., Ип Т.Т., Лау К.Л. и др. Биохимическое исследование гипотензивного действия берберина на крысах. Gen Pharmac 1979; 10:177-182. Посмотреть реферат.

Chung JG, Wu LT, Chang SH и др. Ингибирующее действие берберина на рост и активность ариламин-N-ацетилтрансферазы штаммов Helicobacter Pylori у больных язвенной болезнью. Международный журнал токсикологии 1999; 18:35.

Chung, JG, Chen, GW, Hung, CF, Lee, JH, Ho, CC, Ho, HC, Chang, HL, Lin, WC, and Lin, JG Влияние берберина на активность ариламин-N-ацетилтрансферазы и 2- Образование аддукта аминофлуорен-ДНК в клетках лейкемии человека.Am J Chin Med 2000;28(2):227-238. Посмотреть реферат.

Chung, JG, Wu, LT, Chu, CB, Jan, JY, Ho, CC, Tsou, MF, Lu, HF, Chen, GW, Lin, JG и Wang, TF Влияние берберина на ариламин-N-ацетилтрансферазу активности в опухолевых клетках мочевого пузыря человека. Food Chem Toxicol 1999;37(4):319-326. Посмотреть реферат.

Чианчи, А., Цицерон, А.Ф., Колакурчи, Н., Матараццо, М.Г., и Де, Лео, В. Активность изофлавонов и берберина в отношении вазомоторных симптомов и профиля липидов у женщин в менопаузе. Гинекол.Эндокринол. 2012;28(9):699-702. Посмотреть реферат.

Цицерон А.Ф. и Тартаньи Э. Противодиабетические свойства берберина: от клеточной фармакологии до клинических эффектов. Hosp.Pract.(1995.) 2012;40(2):56-63. Посмотреть реферат.

Клелесс К., Шлоттфельдт Дж. Л., Паскуаль М., Мойна П., Энрикес Дж. А. и Вайнер М. Ингибирование трансформации лимфоцитов in vitro изохинолиновым алкалоидом берберином. Дж Фарм Фармакол. 1995;47(12А):1029-1031. Посмотреть реферат.

Кризи, В.А. Биохимические эффекты берберина. Биохим.Фармакол. 4-1-1979; 28(7):1081-1084. Посмотреть реферат.

Дероса Г., Маффиоли П. и Цицерон А. Ф. Берберин о метаболических и сердечно-сосудистых факторах риска: анализ от доклинических данных до клинических испытаний. Expert.Opin.Biol Ther 2012;12(8):1113-1124. Посмотреть реферат.

Десаи А.Б., Шах К.М. и Шах Д.М. Берберин в лечении диареи. Индийский педиатр. 1971;8(9):462-465. Посмотреть реферат.

Доггелл, С.А.Берберин — новый подход к снижению уровня холестерина. Expert.Opin.Investig.Drugs 2005;14(5):683-685. Посмотреть реферат.

Датта Н.К. и Айер С.Н. Антиамебное значение алкалоидов берберина и курчи. Журнал Индийской медицинской ассоциации 1968;50(8):349-354.

Дутта Н.К. и Пансе М.В. Полезность берберина (алкалоид из Berberis aristata) при лечении холеры (экспериментальный). Indian J Med Res 1962;50(5):732-736.

Фрейле М.Л., Джаннини Ф., Пуччи Г., Стурниоло А., Родеро, Л., Пуччи, О., Бальзарети, В., и Энриз, Р. Д. Противомикробная активность водных экстрактов и берберина, выделенных из Berberis heterophylla. Фитотерапия 2003;74(7-8):702-705. Посмотреть реферат.

Фукуда К., Хибия Ю., Мутох М., Кошиджи М., Акао С. и Фудзивара Х. Ингибирование берберином транскрипционной активности циклооксигеназы-2 в клетках рака толстой кишки человека. J Этнофармакол. 1999;66(2):227-233. Посмотреть реферат.

Gao, C.R., Zhang, J.Q., and Huang, Q.L. [Экспериментальное исследование берберина, повышающего чувствительность к инсулину в моделях крыс с резистентностью к инсулину]. Чжунго Чжун.Си.И.Цзе.Хэ.За Чжи. 1997;17(3):162-164. Посмотреть реферат.

Гош А.К., Бхаттачарья Ф.К. и Гош Д.К. Leishmania donovani: ингибирование амастиготы и механизм действия берберина. Экспериментальная паразитология 1985;60:404-413.

Гу, Ю., Чжан, Ю., Ши, X., Ли, X., Хун, Дж., Чен, Дж., Гу, В., Лу, X., Сюй, Г., и Нин, G. Влияние берберина традиционной китайской медицины на диабет 2 типа на основе комплексной метабономики. Таланта 15-5-2010;81(3):766-772. Посмотреть реферат.

Guan, S., Wang, B., Li, W., Guan, J. и Fang, X. Влияние берберина на экспрессию LOX-1 и SR-BI в пенистых клетках, полученных из макрофагов человека, индуцированную быком -ЛПНП. Am J Chin Med 2010;38(6):1161-1169. Посмотреть реферат.

Guo, Y., Chen, Y., Tan, Z.R., Klaassen, C.D., and Zhou, H.H. Многократное введение берберина ингибирует цитохромы P450 у людей. Eur J Clin Pharmacol 2012;68(2):213-217. Посмотреть реферат.

Хагинава Дж. и Харада М. Фармакологические исследования необработанных лекарств. V. Сравнение растений, содержащих алкалоиды берберинового типа, по их компонентам и некоторым фармакологическим действиям. Якугаку Засси 1962; 82: 726.

Haisong J, Xiaojie L, Baolu Z и др. Очищающее действие бербамина на активные радикалы кислорода в полиморфноядерных лейкоцитах человека, стимулированных форболовым эфиром. Биохимическая фармакология 1990;39(11):1673.

Хайницка В., Косталова Д., Свецова Д., Сохорова Р., Фуксбергер Н. и Тот Дж. Влияние активных соединений Mahonia aquifolium на выработку интерлейкина-8 в моноцитарной клетке человека линия ТДП-1.Planta Med 2002;68(3):266-268. Посмотреть реферат.

Хамон, СЗ. Голденсил. CPJ-RPC 1990;508-510.

Хашми К. и Хафиз А. Антибактериальная активность Berberis asiatica in vivo. J Pak Med Assoc 1986;36(1):5-7. Посмотреть реферат.

Хаясака С., Кодама Т. и Охира А. Традиционные японские травяные (кампо) лекарства и лечение глазных заболеваний: обзор. Am J Chin Med 2012;40(5):887-904. Посмотреть реферат.

Hermann, R. и von, Richter O. Клинические данные о растительных препаратах как виновниках фармакокинетических лекарственных взаимодействий.Планта Мед 2012;78(13):1458-1477. Посмотреть реферат.

Хо Н.К. Традиционная китайская медицина и лечение желтухи новорожденных. Singapore Med J 1996;37(6):645-651. Посмотреть реферат.

Холик, М. Ф., Лэмб, Дж. Дж., Лерман, Р. Х., Конда, В. Р., Дарланд, Г., Миних, Д. М., Десаи, А., Чен, Т. С., Остин, М., Корнберг, Дж., Чанг, Дж. Л., Hsi, A., Bland, JS, и Tripp, ML Изо-альфа-кислоты хмеля, берберин, витамин D3 и витамин K1 благоприятно влияют на биомаркеры обмена костной ткани у женщин в постменопаузе в 14-недельном исследовании.J Bone Miner.Metab 2010;28(3):342-350. Посмотреть реферат.

Hong, Y., Hui, S.S., Chan, B.T., and Hou, J. Влияние берберина на уровни катехоламинов у крыс с экспериментальной сердечной гипертрофией. Жизнь наук. 4-18-2003;72(22):2499-2507. Посмотреть реферат.

Hu, F. L. [Сравнение кислоты и Helicobacter pylori в ульцерогенезе язвенной болезни двенадцатиперстной кишки]. Чжунхуа И. Сюэ. За Чжи. 1993;73(4):217-9, 253. Посмотреть реферат.

Hu, J. P., Takahashi, N., and Yamada, T. Корневище Coptidis ингибирует рост и протеазы ротовых бактерий.Оральный Дис. 2000;6(5):297-302. Посмотреть реферат.

Ху, Ю., Эли, Э.А., Киттельсруд, Дж., Ронан, П.Дж., Мангер, К., Дауни, Т., Болен, К., Каллахан, Л., Мансон, В., Янке, М., Маршалл Л.Л., Нельсон К., Хуизенга П., Хансен Р., Саунди Т.Дж. и Дэвис Г.Е. Гиполипидемический эффект берберина у людей и крыс. Фитомедицина. 15.07.2012;19(10):861-867. Посмотреть реферат.

Hu, Y., Kutscher, E., and Davies, G.E. Берберин ингибирует связанный с SREBP-1 клозапин и рисперидон, индуцированный адипогенезом в клетках 3T3-L1.Phytother.Res 2010;24(12):1831-1838. Посмотреть реферат.

Huang W, Zhang Z и Xu Y. Изучение эффектов и механизмов берберина на потенциалы действия с медленным ответом. Журнал электрокардиологии 1990;23(3):231-234.

Huang, W. [Жендочковая тахиаритмия, леченная берберином]. Чжунхуа Синь. Сюэ.Гуань.Бин.За Чжи. 1990;18(3):155-6, 190. Посмотреть реферат.

Huang, WM, Wu, Z.D. и Gan, Y.Q. [Влияние берберина на ишемическую желудочковую аритмию]. Чжунхуа Синь.Сюэ.Гуань.Бин.За Чжи. 1989;17(5):300-1, 319. См. реферат.

Hui, KK, Yu, JL, Chan, WF, and Tse, E. Взаимодействие берберина с адренорецепторами альфа-2 тромбоцитов человека. Жизнь наук. 1991;49(4):315-324. Посмотреть реферат.

Хунг О.Л., Ши Р.Д., Чианг В.К. и др. Применение фитопрепаратов среди пациентов городских отделений скорой помощи. Академическая неотложная медицина 1997;4(3):209-213.

Хван, Дж. Т., Квон, Д. Ю., и Юн, С. Х. АМФ-активируемая протеинкиназа: потенциальная мишень для профилактики заболеваний с помощью встречающихся в природе полифенолов.Н.Биотехнолог. 10-1-2009;26(1-2):17-22. Посмотреть реферат.

Иидзука Н., Миямото К., Окита К., Тангоку А., Хаяси Х., Йосино С., Абэ Т., Мориока Т., Хазама С. и Ока M. Ингибирующее действие Coptidis Rhizoma и берберина на пролиферацию клеточных линий рака пищевода человека. Cancer Lett 1-1-2000;148(1):19-25. Посмотреть реферат.

Иидзука Н., Ока М., Ямамото К., Тангоку А., Миямото К., Миямото Т., Учимура С., Хамамото Ю. и Окита К. Идентификация обыкновенных или отдельные гены, связанные с противоопухолевой активностью лекарственного растения и его основного компонента, с помощью олигонуклеотидного микрочипа.Int J Cancer 11-20-2003;107(4):666-672. Посмотреть реферат.

Инбарай Дж. Дж., Кукельчак Б. М., Билски П., Сандвик С. Л. и Чигнелл С. Ф. Фотохимия и фотоцитотоксичность алкалоидов желтокореня (Hydrastis canadensis L.) 1. Берберин. Chem Res Toxicol 2001;14(11):1529-1534. Посмотреть реферат.

Иноуэ К., Кулсум У., Чоудхури С.А., Фудзисава С., Исихара М., Йокоэ И. и Сакагами Х. Опухолеспецифическая цитотоксичность и индуцирующая апоптоз активность берберинов. Anticancer Res 2005;25(6B):4053-4059.Посмотреть реферат.

Джантова С., Ципак Л., Чернакова М. и Косталова Д. Влияние берберина на пролиферацию, клеточный цикл и апоптоз в клетках HeLa и L1210. J Pharm Pharmacol 2003;55(8):1143-1149. Посмотреть реферат.

Jeong, H.W., Hsu, K.C., Lee, J.W., Ham, M., Huh, J.Y., Shin, H.J., Kim, W.S. и Kim, J.B. Берберин подавляет провоспалительные реакции посредством активации AMPK в макрофагах. Am J Physiol Endocrinol.Metab 2009;296(4):E955-E964. Посмотреть реферат.

Юнг, Х.А., Юн, Н.Ю., Бае, Х.Дж., Мин, Б.С., и Чой, Дж.С. Ингибирующая активность алкалоидов корневищ коптидиса против альдозоредуктазы. Arch Pharm Res 2008;31(11):1405-1412. Посмотреть реферат.

Kalman, DS, Feldman, S., Feldman, R., Schwartz, HI, Krieger, DR, и Garrison, R. Влияние запатентованного экстракта магнолии и феллодендрона на уровень стресса у здоровых женщин: экспериментальный, двойной слепой , плацебо-контролируемое клиническое исследование. Нутр Дж. 2008; 7:11. Посмотреть реферат.

Камат С.А.Клинические испытания гидрохлорида берберина для контроля диареи при остром гастроэнтерите. J Assoc Physicians India 1967; 15:525-529.

Kaneda Y, Tanaka T и Saw T. Влияние берберина, растительного алкалоида, на рост анаэробных простейших в аксенической культуре. Tokai J Exp Clin Med 1990;15(6):417-423.

Канеда Ю., Тории М., Танака Т. и др. Влияние сульфата берберина in vitro на рост и структуру Entamoeba histolytica, Giardia lamblia и Trichomonas vaginalis.Анналы тропической медицины и паразитологии 1991;85(4):417-425.

Кеттманн В., Косфалова Д., Янтова С., Чернакова М. и Дримал Дж. Цитотоксичность берберина in vitro против линий раковых клеток HeLa и L1210. Pharmazie 2004;59(7):548-551. Посмотреть реферат.

Кхин, Маунг У. и Нве, Нве Вай. Влияние берберина на индуцированное энтеротоксином накопление кишечной жидкости у крыс. J Diarrheal Dis Res 1992;10(4):201-204. Посмотреть реферат.

Кхин, Маунг У., Мио, Кхин, Ньюнт, Ньюнт Вай и Тин, У.Клинические испытания высоких доз берберина и тетрациклина при холере. J Diarrheal Dis Res 1987;5(3):184-187. Посмотреть реферат.

Khin, Maung U., Myo, Khin, Nyunt, Nyunt Wai, Aye, Kyaw и Tin, U. Клинические испытания берберина при острой водянистой диарее. Br.Med.J.(Clin.Res.Ed) 12-7-1985;291(6509):1601-1605. Посмотреть реферат.

Ким, Х. Р., Мин, Х. Ю., Чжон, Ю. Х., Ли, С. К., Ли, Н. С., и Сео, Э. К. Цитотоксические компоненты всего растения Corydalis pallida. Arch Pharm Res 2005;28(11):1224-1227.Посмотреть реферат.

Kim, HS, Kim, MJ, Kim, EJ, Yang, Y., Lee, MS, and Lim, JS Индуцированная берберином активация AMPK ингибирует метастатический потенциал клеток меланомы за счет снижения активности ERK и экспрессии белка ЦОГ-2 . Biochem.Pharmacol 2-1-2012;83(3):385-394. Посмотреть реферат.

Kim, WS, Lee, YS, Cha, SH, Jeong, HW, Choe, SS, Lee, MR, Oh, GT, Park, HS, Lee, KU, Lane, MD и Kim, JB Берберин улучшает липидную дисрегуляцию при ожирении путем контроля центральной и периферической активности AMPK.Am J Physiol Endocrinol.Metab 2009;296(4):E812-E819. Посмотреть реферат.

Ko, WH, Yao, XQ, Lau, CW, Law, WI, Chen, ZY, Kwok, W., Ho, K., and Huang, Y. Сосудорасширяющее и антипролиферативное действие берберина. Eur J Pharmacol 7-7-2000;399(2-3):187-196. Посмотреть реферат.

Kong, WJ, Wei, J., Zuo, ZY, Wang, YM, Song, DQ, You, XF, Zhao, LX, Pan, HN и Jiang, JD Комбинация симвастатина с берберином повышает гиполипидемическую эффективность . Метаболизм 2008;57(8):1029-1037.Посмотреть реферат.

Kong, WJ, Zhang, H., Song, DQ, Xue, R., Zhao, W., Wei, J., Wang, YM, Shan, N., Zhou, ZX, Yang, P., You, XF, Li, ZR, Si, SY, Zhao, LX, Pan, HN и Jiang, JD Берберин снижает резистентность к инсулину посредством протеинкиназы C-зависимой повышающей регуляции экспрессии рецептора инсулина. Метаболизм 2009;58(1):109-119. Посмотреть реферат.

Конг, В., Вэй, Дж., Абиди, П., Лин, М., Инаба, С., Ли, К., Ван, Ю., Ван, З., Си, С., Пан, Х. ., Ван, С., Ву, Дж., Wang, Y., Li, Z., Liu, J. и Jiang, J.D. Берберин — новый препарат для снижения уровня холестерина, работающий по уникальному механизму, отличному от статинов. Nat Med 2004;10(12):1344-1351. Посмотреть реферат.

Ковалевски З., Мрозикевич А., Бобкевич Т., Дрост К. и Хладон Б. [Токсичность сульфата берберина]. Acta Pol.Pharm 1975;32(1):113-120. Посмотреть реферат.

Кришнан, П. и Бастоу, К.Ф. Положение 9 в аналогах берберина является важным фактором, определяющим ингибирование ДНК-топоизомеразы II.Anticancer Drug Des 2000;15(4):255-264. Посмотреть реферат.

Крол Р., Залевски А. и Мароко П.Р. Благотворное влияние берберина, нового положительного инотропного агента, на желудочковые аритмии, вызванные наперстянкой. Тираж 1982 г.; 66 (доп. 2): 56.

Ksiezycka E, Cheung W и Maroko PR. Антиаритмические эффекты берберина при аконитин-индуцированных желудочковых и наджелудочковых аритмиях. Клинические исследования 1983;31(2):197A.

Кулкарни С.К., Дандия П.К. и Варандани Н.L. Фармакологические исследования сульфата берберина. Jpn. J Фармакол. 1972;22(1):11-16. Посмотреть реферат.

Кумар, Г. С. Нацеливание на РНК малыми молекулами: связывание протоберберина, бензофенантридина и алкалоидов аристолохии с различными структурами РНК. Дж Биоски. 2012;37(3):539-552. Посмотреть реферат.

Кумазава Ю., Итагаки А., Фукумото М. и др. Активация перитонеальных макрофагов алкалоидами берберинового ряда в плане индукции цитостатической активности. Int J Immunopharmac 1984;6(6):587-592.

Kuo, C.L., Chi, C.W., и Liu, T.Y. Модуляция апоптоза берберином посредством ингибирования экспрессии циклооксигеназы-2 и Mcl-1 в раковых клетках полости рта. In Vivo 2005;19(1):247-252. Посмотреть реферат.

Kuo, C.L., Chi, C.W., и Liu, T.Y. Противовоспалительный потенциал берберина in vitro и in vivo. Cancer Lett 1-20-2004;203(2):127-137. Посмотреть реферат.

Kuo, C.L., Chou, C.C., and Yung, B.Y. Комплексы берберина с ДНК в берберин-индуцированном апоптозе в лейкемических клетках HL-60 человека.Cancer Lett 7-13-1995;93(2):193-200. Посмотреть реферат.

Лахири С. и Датта Н.К. Берберин и хлорамфеникол в лечении холеры и тяжелой диареи. Журнал Индийской медицинской ассоциации 1967;48(1):1-11.

Лэмб, Дж. Дж., Холик, М.Ф., Лерман, Р.Х., Конда, В.Р., Миних, Д.М., Десаи, А., Чен, Т.С., Остин, М., Корнберг, Дж., Чанг, Дж.Л., Си, А., Бланд, Дж. С., и Трипп, М. Л. Пищевые добавки, содержащие изо-альфа-кислоты хмеля, берберин, витамин D (3) и витамин К (1), создают благоприятный профиль костных биомаркеров, поддерживая здоровый костный метаболизм у женщин в постменопаузе с метаболическим синдромом.Нутр Рез 2011;31(5):347-355. Посмотреть реферат.

Lau, C.W., Yao, X.Q., Chen, Z.Y., Ko, WH, and Huang, Y. Действие берберина на сердечно-сосудистую систему. Cardiovasc Drug Rev 2001;19(3):234-244. Посмотреть реферат.

Lee, HS. Ингибирующая активность изохинолиновых алкалоидов, полученных из корня Coptis japonica, в отношении альдозоредуктазы хрусталика хрусталика крысы. J Agric.Food Chem 11-20-2002;50(24):7013-7016. Посмотреть реферат.

Lee, S., Lim, H.J., Park, H.Y., Lee, K.S., Park, J.H., and Jang, Y. Берберин ингибирует пролиферацию и миграцию гладкомышечных клеток сосудов крыс in vitro и улучшает образование неоинтимы после баллонного повреждения in vivo. Берберин улучшает образование неоинтимы в модели крыс. Атеросклероз 2006;186(1):29-37. Посмотреть реферат.

Lee, YS, Kim, WS, Kim, KH, Yoon, MJ, Cho, HJ, Shen, Y., Ye, JM, Lee, CH, Oh, WK, Kim, CT, Hohnen-Behrens, C., Госби, А., Краеген, Э.В., Джеймс, Д.Э., и Ким, Дж.Б. Берберин, натуральный растительный продукт, активирует AMP-активированную протеинкиназу с благотворным метаболическим эффектом при диабетических и инсулинорезистентных состояниях. Диабет 2006;55(8):2256-2264. Посмотреть реферат.

Левин Н.А., Хауленд М.А. и Голдфранк Л.Р. Травяные препараты. Голдфранка «Неотложная токсикологическая помощь». Норуолк, Коннектикут: Appleton & Lange; 1996.

Ли ХВ. [Контролируемое клиническое исследование у младенцев и детей, сравнивающее пакетики Lacteol Fort с двумя эталонными антидиарейными препаратами]. Энн Педиатр 1995;42(6):396-401.

Li, GH, Wang, DL, Hu, YD, Pu, P., Li, DZ, Wang, WD, Zhu, B., Hao, P., Wang, J., Xu, XQ, Wan, JQ, Zhou, YB, и Chen, ZT. Берберин ингибирует острую радиационную интестинальную недостаточность у людей с лучевой терапией брюшной полости. Мед Онкол. 2010;27(3):919-925. Посмотреть реферат.

Ли Х., Мияхара Т., Тэдзука Ю., Намба Т., Судзуки Т., Доваки Р., Ватанабэ М., Немото Н., Тонами С., Сето Х. ., и Кадота, С. Влияние формул кампо на резорбцию кости in vitro и in vivo. II. Подробное изучение берберина. Биол Фарм Булл 1999;22(4):391-396. Посмотреть реферат.

Li, TK, Bathory, E., LaVoie, EJ, Srinivasan, AR, Olson, WK, Sauers, RR, Liu, LF, and Pilch, DS Отравление топоизомеразы I человека протоберберинами: потенциальная роль как лекарственной ДНК, так и лекарственно-ферментные взаимодействия.Биохимия 6-20-2000;39(24):7107-7116. Посмотреть реферат.

Li-Weber, M. Ориентация на пути апоптоза при раке с помощью китайской медицины. Рак Летт. 5-28-2013;332(2):304-312. Посмотреть реферат.

Lin, C.C., Kao, S.T., Chen, G.W., and Chung, J.G. Берберин снижал N-ацетилирование 2-аминофлуорена посредством ингибирования экспрессии гена N-ацетилтрансферазы в клетках лейкемии человека HL-60. Anticancer Res 2005;25(6B):4149-4155. Посмотреть реферат.

Лин, К.С., Као, С.Т., Чен, Г.W., Ho, HC, and Chung, JG. Апоптоз клеток лейкемии человека HL-60 и клеток мышиной лейкемии WEHI-3, индуцированный берберином посредством активации каспазы-3. Anticancer Res 2006;26(1A):227-242. Посмотреть реферат.

Лин, Дж. Г., Чанг, Дж. Г., Ву, Л. Т., Чен, Г. В., Чанг, Х. Л., и Ван, Т. Ф. Влияние берберина на активность ариламин-N-ацетилтрансферазы в опухолевых клетках толстой кишки человека. Am J Chin Med 1999;27(2):265-275. Посмотреть реферат.

Лин, Дж. П., Ян, Дж. С., Ли, Дж. Х., Се, В.Т. и Чанг, Дж. Г. Берберин вызывает остановку клеточного цикла и апоптоз в клеточной линии карциномы желудка человека SNU-5. Мир J Гастроэнтерол. 1-7-2006;12(1):21-28. Посмотреть реферат.

Lin, S., Tsai, S.C., Lee, C.C., Wang, B.W., Liou, J.Y., и Shyu, K.G. Берберин ингибирует экспрессию HIF-1alpha посредством усиленного протеолиза. Мол Фармакол 2004;66(3):612-619. Посмотреть реферат.

Лю CX, Сяо PG и Лю GS. Исследования растительных ресурсов, фармакологии и клинического лечения бербамином. Фитотерапевтические исследования 1991; 5:228-230.

Liu, L.Z., Cheung, S.C., Lan, L.L., Ho, S.K., Xu, H.X., Chan, JC, and Tong, P.C. Берберин модулирует передачу сигналов инсулина в резистентных к инсулину клетках. Мол.Селл Эндокринол. 4-12-2010;317(1-2):148-153. Посмотреть реферат.

Liu, L., Yu, YL, Yang, JS, Li, Y., Liu, YW, Liang, Y., Liu, XD, Xie, L., and Wang, GJ Берберин подавляет кишечные дисахаридазы с благоприятным метаболическим эффектом при диабетических состояниях, данные исследований in vivo и in vitro.Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol 2010;381(4):371-381. Посмотреть реферат.

Лю, В. Х., Хей, ZQ, Не, Х., Тан, FT, Хуан, HQ, Ли, XJ, Дэн, Ю. Х., Чен, С. Р., Го, Ф. Ф., Хуан, В. Г., Чен, Ф. Я. и Лю, Берберин PQ уменьшает повреждение почек у крыс с диабетом, вызванным стрептозотоцином, путем подавления как окислительного стресса, так и альдозоредуктазы. Chin Med J (англ.) 4-20-2008;121(8):706-712. Посмотреть реферат.

Лю В., Лю П., Тао С., Дэн Ю., Ли X. , Лан Т., Zhang, X., Guo, F., Huang, W., Chen, F., Huang, H. и Zhou, S. F. Берберин ингибирует альдозоредуктазу и окислительный стресс в мезангиальных клетках крыс, культивируемых при высоком уровне глюкозы. Arch Biochem.Biophys. 15.07.2008;475(2):128-134. Посмотреть реферат.

Liu, Y., Yu, H., Zhang, C., Cheng, Y., Hu, L., Meng, X. и Zhao, Y. Защитное действие берберина на радиационно-индуцированное повреждение легких посредством межклеточной адгезии молекулярный-1 и трансформирующий фактор роста-бета-1 у больных раком легкого. Eur J Cancer 2008;44(16):2425-2432.Посмотреть реферат.

Lu, SS, Yu, YL, Zhu, HJ, Liu, XD, Liu, L., Liu, YW, Wang, P., Xie, L. и Wang, GJ Берберин способствует глюкагоноподобному пептиду-1 ( 7-36) секреция амида у крыс с диабетом, индуцированным стрептозотоцином. J Эндокринол. 2009;200(2):159-165. Посмотреть реферат.

Махади, Г. Б., Пендланд, С. Л., Стоя, А., и Чедвик, Л. Р. Восприимчивость Helicobacter pylori к изохинолиновым алкалоидам in vitro из Sanguinaria canadensis и Hydrastis canadensis. Phytother Res 2003;17(3):217-221.Посмотреть реферат.

Махаджан В. М., Шарма А. и Раттан А. Противогрибковая активность сульфата берберина: алкалоид из индийского лекарственного растения. Сабураудиа. 1982;20(1):79-81. Посмотреть реферат.

Мантена, С. К., Шарма, С. Д., и Катияр, С. К. Берберин, натуральный продукт, вызывает остановку клеточного цикла в фазе G1 и зависимый от каспазы-3 апоптоз в клетках карциномы предстательной железы человека. Мол Рак Тер 2006;5(2):296-308. Посмотреть реферат.

Марацци Г., Каччиотти Л., Пелличча Ф., Iaia, L., Volterrani, M., Caminiti, G., Sposato, B., Massaro, R., Grieco, F. и Rosano, G. Долгосрочные эффекты нутрицевтиков (берберин, красный дрожжевой рис, поликозанол) ) у пожилых пациентов с гиперхолестеринемией. Adv.Ther 2011;28(12):1105-1113. Посмотреть реферат.

Марин-Нето, Дж. А., Масиэль, Б. К., Секчес, А. Л., и Галло, Джуниор Л. Сердечно-сосудистые эффекты берберина у пациентов с тяжелой застойной сердечной недостаточностью. Клин.Кардиол. 1988;11(4):253-260. Посмотреть реферат.

Мэн, С., Wang, L.S., Huang, Z.Q., Zhou, Q., Sun, Y.G., Cao, J.T., Li, Y.G. и Wang, C.Q. Берберин уменьшает воспаление у пациентов с острым коронарным синдромом после чрескожного коронарного вмешательства. Clin Exp.Pharmacol Physiol 2012;39(5):406-411. Посмотреть реферат.

Мисик В., Безакова Л., Малекова Л., Косталова Д. Ингибирование липоксигеназы и антиоксидантные свойства протобербериновых и апорфиновых алкалоидов, выделенных из Mahonia aquifolium. Planta Med 1995;61(4):372-373.Посмотреть реферат.

Митани Н., Мураками К., Ямаура Т., Икеда Т. и Сайки И. Ингибирующее действие берберина на метастазы в медиастинальные лимфатические узлы, вызванные ортотопической имплантацией карциномы легких Льюис. Рак Летт. 4-10-2001;165(1):35-42. Посмотреть реферат.

Миура Н., Ямамото М., Уэки Т. и др. Ингибирование апоптоза тимоцитов берберином. Биохимическая фармакология 1997; 53:1315-1322.

Миядзаки Х., Шираи Э. , Исибаши М., Хосой К., Шибата С.и Иванага М. Количественное определение хлорида берберина в моче человека с использованием мониторинга отдельных ионов в режиме полевой десорбции. Биомед.Масс-спектр. 1978;5(10):559-565. Посмотреть реферат.

Мохан М., Пант С.Р., Ангра С.К. и Махаджан В.М. Берберин при трахоме. (Клиническое исследование). Индийский Дж. Офтальмол. 1982;30(2):69-75. Посмотреть реферат.

Мохан, М., Секхар, Г. К., и Махаджан, В. М. Берберин: местное лекарство при экспериментальном герпетическом увеите. Индийский Дж. Офтальмол. 1983;31(2):65-68.Посмотреть реферат.

Muller, K., Ziereis, K., and Gawlik, I. Противопсориатическое средство Mahonia aquifolium и его активные компоненты; II. Антипролиферативная активность против роста клеток кератиноцитов человека. Планта Мед 1995;61(1):74-75. Посмотреть реферат.

Ni, Y. X. [Терапевтическое действие берберина на 60 больных сахарным диабетом II типа и экспериментальное исследование]. Zhong.Xi.Yi.Jie.He.Za Zhi. — Китайский журнал современных достижений в традиционной медицине 1988; 8 (12): 711-3, 707. Посмотреть аннотацию.

Ni, Y. X., Yang, J. и Fan, S. [Клиническое исследование цзян тан сан при лечении пациентов с инсулиннезависимым сахарным диабетом]. Чжунго Чжун.Си.И.Цзе.Хэ.За Чжи. 1994;14(11):650-652. Посмотреть реферат.

Нисида С., Кикуичи С., Йошиока С., Цубаки М., Фуджи Ю., Мацуда Х., Кубо М. и Иримаджири К. Индукция апоптоза в клетках HL-60 лечили лекарственными травами. Am J Chin Med 2003;31(4):551-562. Посмотреть реферат.

Нишино Х., Китагава К., Фуджики Х. и др.Сульфат берберина ингибирует опухоль-стимулирующую активность телеоцидина в двухстадийном канцерогенезе на коже мыши. Онкология 1986;43:131-134.

Орфила Л., Родригес М., Колман Т., Хасегава М., Мерентес Э. и Арвело Ф. Структурная модификация алкалоидов берберина в отношении цитотоксической активности in vitro. J Ethnopharmacol 2000;71(3):449-456. Посмотреть реферат.

Одзаки Ю., Судзуки Х. и Сатакэ М. [Сравнительные исследования концентрации берберина в плазме после перорального приема экстракта корневища коптидиса, экстракта его культивированных клеток и комбинированного применения этих экстрактов и экстракта корня солодки при крыс].Якугаку Дзаси 1993;113(1):63-69. Посмотреть реферат.

Palasuntheram C, Iyer KS, de Silva LB, and et al. Антибактериальная активность Coscinium fenestratum Colebr в отношении Clostridium tetani. Ind J Med Res 1982;76(Suppl):71-76.

Палмери М., Леоне М.Г., Пимпинелла Г. и др. Влияние Hydrastis canadensis L. и двух основных алкалоидов берберина и гидрастина на аорту кролика. Фармакологические исследования 1993;27(дополнение 1):73-74.

Пан, Г. Ю., Ван, Г. Дж., Сунь, Дж. Г., Хуанг, З.J., Zhao, XC, Gu, Y. и Liu, XD [Ингибирующее действие берберина на абсорбцию глюкозы]. Яо Сюэ.Сюэ.Бао. 2003;38(12):911-914. Посмотреть реферат.

Pan, JF, Yu, C., Zhu, DY, Zhang, H., Zeng, JF, Jiang, SH, and Ren, JY Идентификация трех сульфат-конъюгированных метаболитов хлорида берберина в моче здоровых добровольцев после перорального приема . Акта Фармакол Син. 2002;23(1):77-82. Посмотреть реферат.

Peng, W.H., Hsieh, M.T., и Wu, C.R. Влияние длительного введения берберина на скополамин-индуцированную амнезию у крыс.Jpn J Pharmacol 1997;74(3):261-266. Посмотреть реферат.

Pisciotta, L., Bellocchio, A., и Bertolini, S. Нутрицевтические таблетки, содержащие берберин, по сравнению с эзетимибом, на структуру липидов плазмы у субъектов с гиперхолестеринемией и их аддитивный эффект у пациентов с семейной гиперхолестеринемией при стабильном снижении уровня холестерина. Здоровье липидов Dis 2012;11:123. Посмотреть реферат.

Пурохит С.К., Кочар Д.К., Лал Б.Б. и др. Выращивание Leishmania tropica из нелеченых и леченных случаев восточной язвы.Индийский журнал общественного здравоохранения, 1982 г.; 26(1):34–37.

Раббани Г. Механизм и лечение диареи, вызванной холерным вибрионом и кишечной палочкой: роль лекарств и простагландинов. Датский медицинский бюллетень 1996; 43:173-185.

Рибейро Л.Г., Боукер Б. Л., Мароко П.Р. и др. Благотворное влияние берберина на раннюю смертность после экспериментальной окклюзии коронарных артерий у крыс. Тираж 1982;66:II-56.

Рыжикова М.А., Фархутдинов Р.Р., Сибиряк С.В., Загидуллин ШЗ.Влияние водных экстрактов гепатотропных лекарственных растений на процессы свободнорадикального окисления. Эксп.Клин.Фармакол. 1999;62(2):36-38. Посмотреть реферат.

Сабир М. и Бхиде Н.К. Изучение некоторых фармакологических действий берберина. Ind J Physiol & Pharmac 1971;15(3):111-132.

Сабир М., Махаджан В.М., Мохапатра Л.Н. и др. Экспериментальное изучение противотрахомного действия берберина. Indian J Med Res 1976;64(8):1160-1167.

Сабир М., Ахтер М. Х. и Бхид Н.К. Дальнейшие исследования по фармакологии берберина. Indian J Physiol Pharmacol 1978;22(1):9-23. Посмотреть реферат.

Сак, Р. Б. и Фрёлих, Дж. Л. Берберин ингибирует кишечную секреторную реакцию энтеротоксинов Vibrio cholerae и Escherichia coli. Заразить иммун. 1982;35(2):471-475. Посмотреть реферат.

Саксена Х.К., Томар В.Н. и Соангра М.Р. Эффективность новой соли берберина Uni-Berberine при восточной язве. Текущая медицинская практика 1970; 14: 247-252.

Солт, И. П. и Палмер, Т.М. Использование противовоспалительных эффектов активации АМФ-активируемой протеинкиназы. Expert.Opin.Investig.Drugs 2012;21(8):1155-1167. Посмотреть реферат.

Saxe, T.G. Токсичность лекарственных растительных препаратов. Am.Fam.Physician 1987;35(5):135-142. Посмотреть реферат.

Seery TM и Bieter RN. Вклад в фармакологию берберина. J Pharmacol Exp Ther 1940;69:64-67.

Сеоу В.К., Ферранте А., Сумморс А. и др. Сравнительные эффекты тетрандрина и бербамина на продукцию воспалительных цитокинов интерлейкина-1 и фактора некроза опухоли.Науки о жизни 1992;50(8):pl-53-pl-58.

Шаффер, Дж. Э. Инотропная и хронотропная активность берберина на изолированных предсердиях морской свинки. J Cardiovasc Pharmacol 1985;7(2):307-315. Посмотреть реферат.

Shanbhag, S. M., Kulkarni, HJ, and Gaitonde, B.B. Фармакологическое действие берберина на центральную нервную систему. Jpn.J Pharmacol 1970;20(4):482-487. Посмотреть реферат.

Шарда, округ Колумбия. Берберин в лечении диареи у младенцев и детей. J Indian MA 1970;54(1):22-24.

Шарма Р., Джоши К.К. и Гоял Р.К. Берберина таннат при острой диарее. Индийская педиатрия 1970;7(9):496-501.

Соффар, С.А., Метвали, Д.М., Абдель-Азиз, С.С., Эль Вакиль, Х.С., и Саад, Г.А. Оценка воздействия растительного алкалоида (берберин, полученный из барбериса аристата) на Trichomonas vaginalis in vitro. J Egypt.Soc Паразитол. 2001;31(3):893-904. Посмотреть реферат.

Сривастава Р. А., Пинкоски С. Л., Филиппов С., Хансельман Дж. К., Крамер С. Т. и Ньютон Р.S. АМФ-активируемая протеинкиназа: новая лекарственная мишень для регулирования дисбаланса липидного и углеводного обмена для лечения сердечно-метаболических заболеваний. J Lipid Res 2012;53(12):2490-2514. Посмотреть реферат.

Sriwilaijareon, N. , Petmitr, S., Mutirangura, A., Ponglikitmongkol, M., и Wilairat, P. Стадийная специфичность теломеразы Plasmodium falciparum и ее ингибирование берберином. Parasitol.Int 2002;51(1):99-103. Посмотреть реферат.

Стермитц Ф. Р., Лоренц П., Тавара Дж. Н., Зеневич Л.А. и Льюис К. Синергия в лекарственном растении: противомикробное действие берберина, усиленное 5′-метоксигидрокарпином, мультилекарственным ингибитором помпы. Proc.Natl.Acad.Sci.USA 2-15-2000;97(4):1433-1437. Посмотреть реферат.

Subbaiah TV и Amin AH. Влияние сульфата берберина на Entamoeba histolytica. Природа 1967;215(100):527-528.

Сан Д., Кортни Х.С. и Бичи Э.Х. Сульфат берберина блокирует прилипание Streptococcus pyogenes к эпителиальным клеткам, фибронектину и гексадекану. Антимикробные агенты и химиотерапия 1988;32(9):1370-1374.

Supek Z and Tomic D. Farmakološko-kemijsko istrazivanje zutike (

Swabb, EA, Tai, YH, and Jordan, L. Reversal of colera токсин-индуцированная секреция в подвздошной кишке крыс с помощью просветного берберина. Am J Physiol 1981; 241( 3):G248-G252.Просмотреть реферат.

Tai, WP и Luo, HS [Ингибирующее действие берберина на циклооксигеназу-2 линии клеток толстой кишки человека]. Zhonghua Nei Ke.Za Zhi. 2003;42(8):558 -560. Посмотреть реферат

Tai, YH, Feser, JF, Marnane, WG, and Desjeux, J.F. Антисекреторные эффекты берберина в подвздошной кишке крысы. Am J Physiol 1981; 241(3):G253-G258. Посмотреть реферат.

Tan, W., Li, Y., Chen, M., and Wang, Y. Гидрохлорид берберина: противораковая активность и система доставки наночастиц. Int J Наномедицина. 2011;6:1773-1777. Посмотреть реферат.

Taylor, C.T. and Baird, A.W. Ингибирование берберином транспорта электрогенных ионов в толстой кишке крысы. Br J Pharmacol 1995;116(6):2667-2672. Посмотреть реферат.

Teh BS, Seow WK, Li SY и др.Ингибирование образования простагландинов и лейкотриенов растительными алкалоидами тетрандрином и бербамином. Int J Immnopharmac 1990;12(3):321-326.

Thumm, H.W. and Tritschler, J. [Действие бербериновых капель на внутриглазное давление (ВГД) (перевод автора)]. Клин.Монбл.Аугенхейлкд. 1977;170(1):119-123. Посмотреть реферат.

Tice R. Goldenseal (Hydrastis canadensis L) и два входящих в его состав алкалоида: берберин [2086-83-1] и гидрастин [118-08-1]. Обзор токсикологической литературы.1997;1-52.

Тримарко, В., Чиммино, К.С., Санторо, М., Паньяно, Г., Манзи, М.В., Пилья, А., Джудиче, К.А., Де, Лука Н., и Иззо, Р. Нутрицевтики для контроля артериального давления у пациентов с гипертензией высокой степени или гипертензией 1 степени. High Blood Press Cardiovasc.Prev. 9-1-2012;19(3):117-122. Посмотреть реферат.

Трипати Ю.Б. и Шукла С.Д. Berberis artistata ингибирует PAF-индуцированную агрегацию тромбоцитов кролика. Фитотерапевтические исследования 1996; 10:628-630.

Варма РЛ. Берберина сульфат при хронической трахоме.Индийский Мед Газ 1933; 68:122.

Вик-Мо Х., Фариа Д.Б., Чунг В.М. и др. Благотворное влияние берберина на функцию левого желудочка у собак с сердечной недостаточностью. Клинические исследования 1983;31(2):224а.

Воллекова А., Косталова Д., Сохорова Р. Изохинолиновые алкалоиды коры стебля Mahonia aquifolium активны в отношении Malassezia spp. Folia Microbiol. (Прага) 2001;46(2):107-111. Посмотреть реферат.

Ви Тхи, Ле Т., Хан, С., Че, Дж., и Парк, Х. Дж. G-квадруплексные связывающие лиганды: от встречающихся в природе до рационально спроектированных молекул.Curr Pharm Des 2012;18(14):1948-1972. Посмотреть реферат.

Wang, C., Li, J., Lv, X., Zhang, M., Song, Y., Chen, L., and Liu, Y. Улучшающее действие берберина на эндотелиальную дисфункцию у крыс с диабетом, вызванное высоким содержанием -жировая диета и стрептозотоцин. Eur J Pharmacol 10-12-2009;620(1-3):131-137. Посмотреть реферат.

Wang, DY, Yeh, CC, Lee, JH, Hung, CF, and Chung, JG Берберин ингибирует активность ариламин-N-ацетилтрансферазы, экспрессию генов и образование аддуктов ДНК при злокачественной астроцитоме человека (G9T/VGH) и мультиформах глиобластомы головного мозга ( клетки GBM 8401). Neurochem.Res 2002;27(9):883-889. Посмотреть реферат.

Wang, J.M., Yang, Z., Xu, M.G., Chen, L., Wang, Y., Su, C. и Tao, J. Вызванное берберином снижение циркулирующих CD31+/. Eur J Pharmacol 7-1-2009;614(1-3):77-83. Посмотреть реферат.

Wang, N., Feng, Y., Cheung, F., Chow, OY, Wang, X., Su, W., and Tong, Y. Сравнительное исследование гепатопротекторного действия медвежьей желчи и водного раствора Coptidis Rhizoma экстракт на экспериментальном фиброзе печени у крыс. BMC.Комплемент Altern.Med 2012;12:239.Посмотреть реферат.

Wang, Q., Zhang, M., Liang, B., Shirwany, N., Zhu, Y., and Zou, MH Активация АМФ-активируемой протеинкиназы необходима для индуцированного берберином снижения атеросклероза у мышей: роль разобщающего белка 2. PLoS.One. 2011;6(9):e25436. Посмотреть реферат.

Wang, T., Wang, N., Song, H., Xi, X., Wang, J., Hao, A. и Li, T. Подготовка системы доставки безводных обратных мицелл для повышения пероральной биодоступности и Антидиабетическая эффективность берберина. Eur J Pharm Sci 9-18-2011;44(1-2):127-135. Посмотреть реферат.

Wang, Y., Campbell, T., Perry, B., Beaurepaire, C., и Qin, L. Гипогликемические и инсулин-сенсибилизирующие эффекты берберина у крыс с диабетом, вызванным диетой с высоким содержанием жиров и стрептозотоцином. Метаболизм 2011;60(2):298-305. Посмотреть реферат.

Wang, Y., Jia, X., Ghanam, K., Beaurepaire, C., Zidichouski, J., and Miller, L. Берберин и растительные станолы синергетически ингибируют всасывание холестерина у хомяков. Атеросклероз 2010;209(1):111-117.Посмотреть реферат.

Вэй В., Чжао Х., Ван А., Суй М., Лян К., Дэн Х., Ма Ю., Чжан Ю., Чжан Х. и Гуань, Y. Клиническое исследование краткосрочного влияния берберина по сравнению с метформином на метаболические характеристики женщин с синдромом поликистозных яичников. Евр Дж Эндокринол. 2012;166(1):99-105. Посмотреть реферат.

Райт, К.В., Маршалл, С.Дж., Рассел, П.Ф., Андерсон, М.М., Филлипсон, Дж.Д., Кирби, Г.К., Уорхерст, Д.К., и Шифф, П. Л. In vitro антиплазмодиальная, антиамебная и цитотоксическая активность некоторых мономерных изохинолиновых алкалоидов.J Nat Prod 2000;63(12):1638-1640. Посмотреть реферат.

Wu, H.L., Hsu, C.Y., Liu, W.H., and Yung, B.Y. Апоптоз клеток лейкемии человека HL-60, индуцированный берберином, связан с подавлением активности нуклеофосмина/B23 и теломеразы. Int J Cancer 6-11-1999;81(6):923-929. Посмотреть реферат.

Ву, Дж. Ф. и Лю, Т. П. [Влияние берберина на агрегацию тромбоцитов и уровни TXB2 и 6-кето-PGF1 альфа в плазме у крыс с обратимой окклюзией средней мозговой артерии]. Яо Сюэ.Сюэ.Бао. 1995;30(2):98-102. Посмотреть реферат.

Ву, С. Н., Ю, Х. С., Ян, К. Р., Ли, Х. Ф. и Ю, К. Л. Ингибирующее действие берберина на токи калия, активируемые напряжением и кальцием, в клетках миеломы человека. Life Sci 1998;62(25):2283-2294. Посмотреть реферат.

Ся, X., Янь, Дж., Шен, Ю., Тан, К., Инь, Дж., Чжан, Ю., Ян, Д., Лян, Х., Е, Дж. и Венг, J. Берберин улучшает метаболизм глюкозы у крыс с диабетом за счет ингибирования печеночного глюконеогенеза. PLoS.One. 2011;6(2):e16556.Посмотреть реферат.

Xin, H.W., Wu, X.C., Li, Q., Yu, A.R., Zhong, M.Y., and Liu, Y.Y. Влияние берберина на фармакокинетику циклоспорина А у здоровых добровольцев. Методы Find.Exp.Clin Pharmacol 2006;28(1):25-29. Посмотреть реферат.

Xu, M.G., Wang, J.M., Chen, L., Wang, Y., Yang, Z. и Tao, J. Вызванная берберином мобилизация циркулирующих эндотелиальных клеток-предшественников улучшает эластичность мелких артерий человека. J Hum.Hypertens 2008;22(6):389-393. Посмотреть реферат.

Ян З., Шао, Ю. К., Ли, С. Дж., Ци, Дж. Л., Чжан, М. Дж., Хао, В., и Джин, Г. З. Лекарства, содержащие l-тетрагидропальматин, значительно уменьшают тягу к опиатам и повышают уровень воздержания у потребителей героина: пилотное исследование. Акта Фармакол Син. 2008;29(7):781-788. Посмотреть реферат.

Yin, J., Gao, Z., Liu, D., Liu, Z. и Ye, J. Берберин улучшает метаболизм глюкозы за счет индукции гликолиза. Am J Physiol Endocrinol.Metab 2008;294(1):E148-E156. Посмотреть реферат.

Инь, Дж., Ху, Р., Чен М., Тан Дж., Ли Ф., Ян Ю. и Чен Дж. Влияние берберина на метаболизм глюкозы in vitro. Метаболизм 2002;51(11):1439-1443. Посмотреть реферат.

Yin, J., Xing, H., и Ye, J. Эффективность берберина у пациентов с сахарным диабетом 2 типа. Метаболизм 2008;57(5):712-717. Посмотреть реферат.

Юнт Г., Цянь Ю., Мур Д., Базила Д., Уэст Дж., Алдапе К., Арволд Н., Шалев Н. и Хаас-Коган Д. Берберин повышает чувствительность клеток глиомы человека, но не нормальных глиальных клеток, к ионизирующему излучению in vitro.J Exp Ther Oncol. 2004;4(2):137-143. Посмотреть реферат.

Юань, Дж., Шен, X. Z., и Чжу, X. S. [Влияние берберина на время прохождения тонкой кишки человека]. Чжунго Чжун.Си.И.Цзе.Хэ.За Чжи. 1994;14(12):718-720. Посмотреть реферат.

Залевски А., Крол Р. и Мароко П.Р. Берберин, новый инотропный агент — различие между его сердечными и периферическими реакциями. Клин Рез 1983;31(2):227А.

Zeng, X. and Zeng, X. Взаимосвязь между клиническими эффектами берберина на тяжелую застойную сердечную недостаточность и его концентрацией в плазме изучена с помощью ВЭЖХ.Биомед Хроматогр 1999;13(7):442-444. Посмотреть реферат.

Чжан, Х., Вэй, Дж., Сюэ, Р., Ву, Дж. Д., Чжао, В., Ван, ZZ, Ван, СК, Чжоу, ZX, Сонг, Д. К., Ван, Ю. М., Пан, Х. Н., Kong, WJ, and Jiang, JD Берберин снижает уровень глюкозы в крови у пациентов с сахарным диабетом 2 типа за счет увеличения экспрессии рецепторов инсулина. Метаболизм 2010;59(2):285-292. Посмотреть реферат.

Zhang, J., Zhou, F., Lu, M., Ji, W., Niu, F., Zha, W., Wu, X., Hao, H. и Wang, G. Фармакокинетика-фармакология разъединение растительных лекарственных средств и их потенциальных растворов с клеточной фармакокинетической-фармакодинамической стратегией.Curr Drug Metab 6-1-2012;13(5):558-576. Посмотреть реферат.

Чжан, М. Ф. и Шен, Ю. К. [Противодиарейные и противовоспалительные эффекты берберина]. Чжунго Яо Ли Сюэ.Бао. 1989;10(2):174-176. Посмотреть реферат.

Чжан Р. X., Догерти Д. В. и Розенблюм М. Л. Лабораторные исследования берберина, используемого отдельно и в сочетании с 1,3-бис(2-хлорэтил)-1-нитрозомочевиной для лечения злокачественных опухолей головного мозга. Chin Med.J (англ.) 1990;103(8):658-665. Посмотреть реферат.

Чжан Ю., Ли, С., Цзоу, Д., Лю, В., Ян, Дж., Чжу, Н., Хо, Л., Ван, М., Хун, Дж., Ву, П., Рен, Г. и Нин Г. Лечение диабета 2 типа и дислипидемии натуральным растительным алкалоидом берберином. J Clin Endocrinol.Metab 2008;93(7):2559-2565. Посмотреть реферат.

Чжао, Л., Ли, В., Хан, Ф., Хоу, Л., Байаржон, Дж. П., Куанг, Х., Ван, Ю. и Ву, X. Берберин снижает резистентность к инсулину, вызванную дексаметазоном в тека клеток в пробирке. Fertil.Стерил. 2011;95(1):461-463. Посмотреть реферат.

Чжао, К., Wan Y., Wang C., Wei Q., ​​Chen H., Meng X. и Yao J. Регуляторный механизм сигнального пути p38MAPK на воспаление почечной ткани при хроническом заболевании почек и интервенционный эффект традиционная китайская медицина]. Чжунго Чжун. Яо За Чжи. 2012;37(12):1700-1704. Посмотреть реферат.

Zhou, JY, Zhou, SW, Zhang, KB, Tang, JL, Guang, LX, Ying, Y., Xu, Y., Zhang, L., and Li, DD Хроническое воздействие берберина на кровь, глюколипиды печени метаболизм и экспрессия PPAR печени у крыс с диабетом и гиперлипидемией.Биол Фарм Бык. 2008;31(6):1169-1176. Посмотреть реферат.

Чжу Б. и Аренс Ф.А. Влияние берберина на кишечную секрецию, опосредованную термостабильным энтеротоксином Escherichia coli, в тощей кишке свиней. Am J Vet Res 1982;43(9):1594-1598.

Zhu, B. и Ahrens, F. Антисекреторные эффекты берберина с морфином, клонидином, L-фенилэфрином, йохимбином или неостигмином в тощей кишке свиньи. Eur J Pharmacol 12-9-1983;96(1-2):11-19. Посмотреть реферат.

Зуо Ф., Накамура Н., Акао Т. и Хаттори М.Фармакокинетика берберина и его основных метаболитов у обычных и псевдомикробных крыс, определенная с помощью жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии с ионной ловушкой. Препарат Метаб Распоряжение. 2006;34(12):2064-2072. Посмотреть реферат.

Амин А.Х., Суббайя ТВ, Аббаси К.М. Сульфат берберина: антимикробная активность, биопроба и механизм действия. Can J Microbiol 1969;15:1067-76. Посмотреть реферат.

Анг Э.С., Ли С.Т., Ган К.С. и др. Оценка роли альтернативной терапии в лечении ожоговых ран: рандомизированное исследование, сравнивающее влажную открытую мазь от ожогов с обычными методами лечения пациентов с ожогами второй степени.МедГенМед 2001; 3:3. Посмотреть реферат.

Анис К.В., Раджешкумар Н.В., Куттан Р. Ингибирование химического канцерогенеза берберином у крыс и мышей. J Pharm Pharmacol 2001; 53:763-8. . Посмотреть реферат.

Бхиде МБ, Чаван СР, Датта Н.К. Всасывание, распределение и выведение берберина. Indian J Med Res 1969; 57:2128-31. Посмотреть реферат.

Будзински Дж.В., Фостер Б.С., Ванденхук С., Арнасон Дж.Т. Оценка in vitro ингибирования цитохрома P450 3A4 человека выбранными коммерческими травяными экстрактами и настойками.Фитомедицина 2000;7:273-82. Посмотреть реферат.

Chan E. Замещение билирубина из альбумина берберином. Биол новорожденных 1993;63:201-8. Посмотреть реферат.

Чаттерджи П., Франклин М.Р. Ингибирование цитохрома p450 человека и образование промежуточных метаболических комплексов экстрактом желтокорня и его метилендиоксифенильными компонентами. Drug Metab Dispos 2003;31:1391-7. Посмотреть реферат.

Cicero, AF, Rovati LC и Setnikar I. Эвлипидемические эффекты берберина, вводимого отдельно или в сочетании с другими природными средствами, снижающими уровень холестерина.Простое слепое клиническое исследование. Арцнаймиттельфоршунг. 2007;57:26-30. Посмотреть реферат.

Фукуда К., Хибия Ю., Мутох М. и др. Ингибирование берберином транскрипционной активности циклооксигеназы-2 в клетках рака толстой кишки человека. J Ethnopharmacol 1999;66:227-33. Посмотреть реферат.

Gupte S. Применение берберина при лечении лямблиоза. Ам Дж. Дис Чайлд 1975; 129:866. Посмотреть реферат.

Сян С. И., Ву С.Л., Ченг С.Е., Хо Т.Ю. Индуцированное ацетальдегидом производство интерлейкина-1бета и фактора некроза опухоли-альфа ингибируется берберином через сигнальный путь ядерного фактора-каппаВ в клетках HepG2.J Biomed Sci 2005; 12:791-801. Посмотреть реферат.

Хуан Х.С., Ян Г.Ф., Пан Ю.К. Влияние гидрохлорида берберина на концентрацию циклоспорина А в крови у пациентов с трансплантацией сердца. Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi 2008; 28: 702-4. Посмотреть реферат.

Ивановская Н., Филиппов С. Изучение противовоспалительного действия экстракта корня барбариса обыкновенного, алкалоидных фракций и чистых алкалоидов. Int J Immunopharmacol 1996;18:553-61. Посмотреть реферат.

Джанбаз К.Х., Гилани А.Х. Исследования профилактического и лечебного воздействия берберина на химически индуцированную гепатотоксичность у грызунов.Фитотерапия 2000;71:25-33.. Посмотреть аннотацию.

Kaneda Y, Torii M, Tanaka T, Aikawa M. Влияние сульфата берберина in vitro на рост и структуру Entamoeba histolytica, Giardia lamblia и Trichomonas vaginalis. Энн Троп Мед Паразитол 1991;85:417-25. Посмотреть реферат.

Хосла П.Г., Нирадж В.И., Гупта С.К. и др. Берберин, потенциальное лекарство от трахомы. Rev Int Trach Pathol Ocul Trop Subtrop Sante Publique 1992; 69: 147-65. Посмотреть реферат.

Ким Дж.С., Танака Х., Шояма Ю.Иммуноколичественный анализ берберина и родственных ему соединений с использованием моноклональных антител в растительных лекарственных средствах. Аналитик 2004;129:87-91. Посмотреть реферат.

Ким С.Х., Шин Д.С., О М.Н. и др. Ингибирование изохинолиновыми алкалоидами транспептидаз-сортазы, закрепляющей поверхностный белок бактерий. Biosci Biotechnol Biochem 2004;68:421-4.. Посмотреть реферат.

Ли Б., Шан Дж. К., Чжоу QX. [Изучение общих алкалоидов корневища коптиса китайского при экспериментальных язвах желудка]. Chin J Integr Med 2005; 11: 217-21.Посмотреть реферат.

Lin CC, Ng LT, Hsu FF и др. Цитотоксические эффекты экстрактов Coptis chinensis и Epimedium sagittatum и их основных компонентов (берберин, коптизин и икариин) на рост клеток гепатомы и лейкемии. Clin Exp Pharmacol Physiol 2004; 31:65-9. Посмотреть реферат.

Мерч С.Дж., Симмонс К.Б., Саксена П.К. Мелатонин в пиретруме и других лекарственных растениях. Ланцет 1997;350:1598-9. Посмотреть реферат.

Пак К.С., Канг К.С., Ким Дж.Х. и др. Дифференциальные ингибирующие эффекты протоберберинов на биосинтез стерола и хитина у Candida albicans.J Antimicrob Chemother 1999;43:667-74. Посмотреть реферат.

Раббани Г.Х., Батлер Т., Найт Дж. и др. Рандомизированное контролируемое исследование терапии берберинсульфатом диареи, вызванной энтеротоксигенными Escherichia coli и Vibrio cholerae. J Infect Dis 1987; 155:979-84. Посмотреть реферат.

Рехман Дж., Диллоу Дж.М., Картер С.М. и др. Повышенная продукция антигенспецифических иммуноглобулинов G и M после лечения in vivo лекарственными растениями Echinacea angustifolia и Hydrastis canadensis.Immunol Lett 1999;68:391-5. Посмотреть реферат.

Scazzocchio F, Corneta MF, Tomassini L, Palmery M. Антибактериальная активность экстракта Hydrastis canadensis и его основных изолированных алкалоидов. Планта Мед 2001;67:561-4. Посмотреть реферат.

Шэн В.Д., Джиддави М.С., Хун К.К., Абдулла С.М. Лечение малярии, устойчивой к хлорохину, с использованием пириметамина в сочетании с берберином, тетрациклином или котримоксазолом. Восточная Африка Мед J 1997; 74: 283-4. Посмотреть реферат.

Сун Д., Абрахам С.Н., Бичи Э.Х.Влияние берберина сульфата на синтез и экспрессию фимбриального адгезина Pap в уропатогенных кишечных палочках. Противомикробные агенты Chemother 1988;32:1274-7. Посмотреть реферат.

Сан Д., Кортни Х.С., Бичи Э.Х. Сульфат берберина блокирует прилипание Streptococcus pyogenes к эпителиальным клеткам, фибронектину и гексадекану. Противомикробные агенты Chemother 1988;32:1370-4. Посмотреть реферат.

Tsai PL, Tsai TH. Гепатобилиарная экскреция берберина. Drug Metab Dispos 2004;32:405-12. . Посмотреть реферат.

Воллекова А., Костальова Д., Кеттманн В., Тот Дж. Противогрибковая активность экстракта магония водорослевого и его основных протобербериновых алкалоидов. Phytother Res 2003;17:834-7. Посмотреть реферат.

Wu X, Li Q, Xin H, Yu A, Zhong M. Влияние берберина на концентрацию циклоспорина A в крови у реципиентов с пересаженной почкой: клиническое и фармакокинетическое исследование. Eur J Clin Pharmacol 2005;61:567-72. Посмотреть реферат.

Се, X., Мэн, X., Чжоу, X., Шу, X., и Конг, Х. [Исследование терапевтического эффекта и гемореологических изменений берберина у впервые диагностированных пациентов с диабетом 2 типа в сочетании с неалкогольной жировой болезнью печени ].Чжунго Чжун Яо За Чжи 2011; 36 (21): 3032-3035. Посмотреть реферат.

Цзэн XH, Цзэн XJ, Ли YY. Эффективность и безопасность берберина при застойной сердечной недостаточности, вторичной по отношению к ишемической или идиопатической дилатационной кардиомиопатии. Am J Cardiol 2003; 92: 173-6. Посмотреть реферат.

Чжан Ю, Ли С, Цзоу Д и др. Лечение диабета 2 типа и дислипидемии натуральным растительным алкалоидом берберином. J Clin Endocrinol Metab 2008;93:2559-65. Посмотреть реферат.

Обзор, применение, побочные эффекты, меры предосторожности, взаимодействие, дозировка и обзоры

Abe, F., Нагафуджи С., Ямаути Т., Окабе Х., Маки Дж., Хиго Х., Акахане Х., Агилар А., Хименес-Эстрада М. и Рейес-Чилпа Р. Трипаноцидные компоненты в растениях 1. Оценка некоторых мексиканских растений на предмет их трипаноцидной активности и активных компонентов в гуако, корнях Aristolochia taliscana. Биол Фарм Булл 2002;25(9):1188-1191. Посмотреть реферат.

Аффузо Ф., Руволо А., Мичилло Ф., Сакка Л. и Фацио С. Влияние комбинации нутрицевтиков (берберин, красный дрожжевой рис и поликозанолы) на уровни липидов и функцию эндотелия, рандомизированное, двойное -слепое плацебо-контролируемое исследование.Nutr Metab Cardiovasc.Dis 2010;20(9):656-661. Посмотреть реферат.

Албал М.В., Джадхав С. и Чандоркар А.Г. Клиническая оценка берберина при грибковых инфекциях. Индийский Дж. Офтальмол. 1986; 34:91-92. Посмотреть реферат.

Arana, BA, Navin, TR, Arana, FE, Berman, JD, и Rosenkaimer, F. Эффективность короткого курса (10 дней) высоких доз меглюмина антимоната с интерфероном-гамма или без него при лечении кожного лейшманиоза в Гватемале . Clin Infect Dis 1994;18(3):381-384.Посмотреть реферат.

Баббар О.П., Чхатвал В.К., Рэй И.Б. и Мехра М.К. Влияние глазных капель хлорида берберина на пациентов с клинически положительной трахомой. Индийская J Med Res. 1982;76 Приложение:83-88. Посмотреть реферат.

Берберин. Altern Med Rev 2000;5(2):175-177. Посмотреть реферат.

Карломаньо Г., Пироцци К., Меркурио В., Руволо А. и Фацио С. Влияние комбинации нутрицевтиков на ремоделирование левого желудочка и вазореактивность у пациентов с метаболическим синдромом.Nutr Metab Cardiovasc.Dis 2012;22(5):e13-e14. Посмотреть реферат.

Чае, С. Х., Чжон, И. Х., Чой, Д. Х., О, Дж. В. и Ан, Ю. Дж. Ингибирующее рост действие изохинолиновых алкалоидов, полученных из корня коптиса японского, на кишечные бактерии человека. J Agric.Food Chem 1999;47(3):934-938. Посмотреть реферат.

Чекалина С. И., Умурзакова Р. З., Салиев К. К., Абдурахманов Т. Р. Влияние берберина бисульфата на гемостаз тромбоцитов у больных тромбоцитопенией. Гематология и трансфузиология 1994;39(5):33-35.Посмотреть реферат.

Чоудхри В.П., Сабир М. и Бхид В.Н. Берберин при лямблиозе. Индийский педиатр. 1972;9(3):143-146. Посмотреть реферат.

Чун Ю.Т., Ип Т.Т., Лау К.Л. и др. Биохимическое исследование гипотензивного действия берберина на крысах. Gen Pharmac 1979; 10:177-182. Посмотреть реферат.

Chung JG, Wu LT, Chang SH и др. Ингибирующее действие берберина на рост и активность ариламин-N-ацетилтрансферазы штаммов Helicobacter Pylori у больных язвенной болезнью.Международный журнал токсикологии 1999; 18:35.

Chung, JG, Chen, GW, Hung, CF, Lee, JH, Ho, CC, Ho, HC, Chang, HL, Lin, WC, and Lin, JG Влияние берберина на активность ариламин-N-ацетилтрансферазы и 2- Образование аддукта аминофлуорен-ДНК в клетках лейкемии человека. Am J Chin Med 2000;28(2):227-238. Посмотреть реферат.

Chung, JG, Wu, LT, Chu, CB, Jan, JY, Ho, CC, Tsou, MF, Lu, HF, Chen, GW, Lin, JG и Wang, TF Влияние берберина на ариламин-N-ацетилтрансферазу активности в опухолевых клетках мочевого пузыря человека.Food Chem Toxicol 1999;37(4):319-326. Посмотреть реферат.

Чианчи, А., Цицерон, А.Ф., Колакурчи, Н., Матараццо, М.Г., и Де, Лео, В. Активность изофлавонов и берберина в отношении вазомоторных симптомов и профиля липидов у женщин в менопаузе. Гинекол.Эндокринол. 2012;28(9):699-702. Посмотреть реферат.

Десаи А.Б., Шах К.М. и Шах Д.М. Берберин в лечении диареи. Индийский педиатр. 1971;8(9):462-465. Посмотреть реферат.

Дутта Н.К. и Пансе М.В. Полезность берберина (алкалоид из Berberis aristata) при лечении холеры (экспериментальный).Indian J Med Res 1962;50(5):732-736.

Фрейле М.Л., Джаннини Ф., Пуччи Г., Стурниоло А., Родеро Л., Пуччи О., Бальзарети В. и Энриз Р.Д. Противомикробная активность водных экстрактов и берберина, выделенного из Барбарис разнолистный. Фитотерапия 2003;74(7-8):702-705. Посмотреть реферат.

Фукуда К., Хибия Ю., Мутох М., Кошиджи М., Акао С. и Фудзивара Х. Ингибирование берберином транскрипционной активности циклооксигеназы-2 в клетках рака толстой кишки человека. J Этнофармакол.1999;66(2):227-233. Посмотреть реферат.

Гош А.К., Бхаттачарья Ф.К. и Гош Д.К. Leishmania donovani: ингибирование амастиготы и механизм действия берберина. Экспериментальная паразитология 1985;60:404-413.

Guo, Y., Chen, Y., Tan, Z.R., Klaassen, C.D., and Zhou, H.H. Многократное введение берберина ингибирует цитохромы P450 у людей. Eur J Clin Pharmacol 2012;68(2):213-217. Посмотреть реферат.

Хайницкая В., Косталова Д., Швецова Д., Сохорова Р., Фуксбергер Н.и Тот, Дж. Влияние активных соединений Mahonia aquifolium на выработку интерлейкина-8 в моноцитарной клеточной линии человека THP-1. Planta Med 2002;68(3):266-268. Посмотреть реферат.

Хаясака С., Кодама Т. и Охира А. Традиционные японские травяные (кампо) лекарства и лечение глазных заболеваний: обзор. Am J Chin Med 2012;40(5):887-904. Посмотреть реферат.

Hermann, R. и von, Richter O. Клинические данные о растительных препаратах как виновниках фармакокинетических лекарственных взаимодействий.Планта Мед 2012;78(13):1458-1477. Посмотреть реферат.

Холик, М. Ф., Лэмб, Дж. Дж., Лерман, Р. Х., Конда, В. Р., Дарланд, Г., Миних, Д. М., Десаи, А., Чен, Т. С., Остин, М., Корнберг, Дж., Чанг, Дж. Л., Hsi, A., Bland, JS, и Tripp, ML Изо-альфа-кислоты хмеля, берберин, витамин D3 и витамин K1 благоприятно влияют на биомаркеры обмена костной ткани у женщин в постменопаузе в 14-недельном исследовании. J Bone Miner.Metab 2010;28(3):342-350. Посмотреть реферат.

Хун Ю., Хуэй С. С., Чан Б.Т. и Хоу Дж. Влияние берберина на уровень катехоламинов у крыс с экспериментальной сердечной гипертрофией. Жизнь наук. 4-18-2003;72(22):2499-2507. Посмотреть реферат.

Hu, F. L. [Сравнение кислоты и Helicobacter pylori в ульцерогенезе язвенной болезни двенадцатиперстной кишки]. Чжунхуа И. Сюэ. За Чжи. 1993;73(4):217-9, 253. Посмотреть реферат.

Hu, J. P., Takahashi, N., and Yamada, T. Корневище Coptidis ингибирует рост и протеазы ротовых бактерий. Оральный Дис. 2000;6(5):297-302. Посмотреть реферат.

Ху, Ю., Эли, Э.А., Киттельсруд, Дж., Ронан, П.Дж., Мангер, К., Дауни, Т., Болен, К., Каллахан, Л., Мансон, В., Янке, М., Маршалл Л.Л., Нельсон К., Хуизенга П., Хансен Р., Саунди Т.Дж. и Дэвис Г.Е. Гиполипидемический эффект берберина у людей и крыс. Фитомедицина. 15.07.2012;19(10):861-867. Посмотреть реферат.

Huang, W. [Жендочковая тахиаритмия, леченная берберином]. Чжунхуа Синь.Сюэ.Гуань.Бин.За Чжи. 1990;18(3):155-6, 190. Посмотреть реферат.

Хуанг, В.М., Ву, З. Д. и Ган, Ю. К. [Влияние берберина на ишемическую желудочковую аритмию]. Чжунхуа Синь.Сюэ.Гуань.Бин.За Чжи. 1989;17(5):300-1, 319. См. реферат.

Hui, KK, Yu, JL, Chan, WF, and Tse, E. Взаимодействие берберина с адренорецепторами альфа-2 тромбоцитов человека. Жизнь наук. 1991;49(4):315-324. Посмотреть реферат.

Иидзука Н., Миямото К., Окита К., Тангоку А., Хаяси Х., Йосино С., Абэ Т., Мориока Т., Хазама С. и Ока M. Ингибирующее действие Coptidis Rhizoma и берберина на пролиферацию клеточных линий рака пищевода человека.Cancer Lett 1-1-2000;148(1):19-25. Посмотреть реферат.

Иидзука Н., Ока М., Ямамото К., Тангоку А., Миямото К., Миямото Т., Учимура С., Хамамото Ю. и Окита К. Идентификация обыкновенных или отдельные гены, связанные с противоопухолевой активностью лекарственного растения и его основного компонента, с помощью олигонуклеотидного микрочипа. Int J Cancer 11-20-2003;107(4):666-672. Посмотреть реферат.

Инбарай Дж. Дж., Кукельчак Б. М., Билски П., Сандвик С. Л. и Чигнелл С. Ф. Фотохимия и фотоцитотоксичность алкалоидов желтокореня (Hydrastis canadensis L.) 1. Берберин. Chem Res Toxicol 2001;14(11):1529-1534. Посмотреть реферат.

Иноуэ К., Кулсум У., Чоудхури С.А., Фудзисава С., Исихара М., Йокоэ И. и Сакагами Х. Опухолеспецифическая цитотоксичность и индуцирующая апоптоз активность берберинов. Anticancer Res 2005;25(6B):4053-4059. Посмотреть реферат.

Джантова С., Чипак Л., Чернакова М. и Костальова Д. Влияние берберина на пролиферацию, клеточный цикл и апоптоз в клетках HeLa и L1210. J Pharm Pharmacol 2003;55(8):1143-1149.Посмотреть реферат.

Jeong, H.W., Hsu, K.C., Lee, J.W., Ham, M., Huh, J.Y., Shin, H.J., Kim, W.S., and Kim, J.B. Берберин подавляет провоспалительные реакции посредством активации AMPK в макрофагах. Am J Physiol Endocrinol.Metab 2009;296(4):E955-E964. Посмотреть реферат.

Камат С.А. Клинические испытания гидрохлорида берберина для контроля диареи при остром гастроэнтерите. J Assoc Physicians India 1967; 15:525-529.

Kaneda Y, Tanaka T и Saw T. Влияние берберина, растительного алкалоида, на рост анаэробных простейших в аксенической культуре.Tokai J Exp Clin Med 1990;15(6):417-423.

Канеда Ю., Тории М., Танака Т. и др. Влияние сульфата берберина in vitro на рост и структуру Entamoeba histolytica, Giardia lamblia и Trichomonas vaginalis. Анналы тропической медицины и паразитологии 1991;85(4):417-425.

Кхин, Маунг У. и Нве, Нве Вай. Влияние берберина на индуцированное энтеротоксином накопление кишечной жидкости у крыс. J Diarrheal Dis Res 1992;10(4):201-204. Посмотреть реферат.

Кхин, Маунг У., Myo, Khin, Nyunt, Nyunt Wai и Tin, U. Клинические испытания высоких доз берберина и тетрациклина при холере. J Diarrheal Dis Res 1987;5(3):184-187. Посмотреть реферат.

Khin, Maung U., Myo, Khin, Nyunt, Nyunt Wai, Aye, Kyaw и Tin, U. Клинические испытания берберина при острой водянистой диарее. Br.Med.J.(Clin.Res.Ed) 12-7-1985;291(6509):1601-1605. Посмотреть реферат.

Kim, HS, Kim, MJ, Kim, EJ, Yang, Y., Lee, MS, and Lim, JS Индуцированная берберином активация AMPK ингибирует метастатический потенциал клеток меланомы за счет снижения активности ERK и экспрессии белка ЦОГ-2 .Biochem.Pharmacol 2-1-2012;83(3):385-394. Посмотреть реферат.

Kim, WS, Lee, YS, Cha, SH, Jeong, HW, Choe, SS, Lee, MR, Oh, GT, Park, HS, Lee, KU, Lane, MD и Kim, JB Берберин улучшает липидную дисрегуляцию при ожирении путем контроля центральной и периферической активности AMPK. Am J Physiol Endocrinol.Metab 2009;296(4):E812-E819. Посмотреть реферат.

Конг, В., Вэй, Дж., Абиди, П., Лин, М., Инаба, С., Ли, К., Ван, Ю., Ван, З., Си, С., Пан, Х. ., Ван, С., Wu, J., Wang, Y., Li, Z., Liu, J. и Jiang, J.D. Берберин — новый препарат для снижения уровня холестерина, работающий по уникальному механизму, отличному от статинов. Nat Med 2004;10(12):1344-1351. Посмотреть реферат.

Крол Р., Залевски А. и Мароко П.Р. Благотворное влияние берберина, нового положительного инотропного агента, на желудочковые аритмии, вызванные наперстянкой. Тираж 1982 г.; 66 (доп. 2): 56.

Ksiezycka E, Cheung W и Maroko PR. Антиаритмические эффекты берберина при аконитин-индуцированных желудочковых и наджелудочковых аритмиях.Клинические исследования 1983;31(2):197A.

Кулкарни С.К., Дандия П.К. и Варандани Н.Л. Фармакологические исследования сульфата берберина. Jpn. J Фармакол. 1972;22(1):11-16. Посмотреть реферат.

Kuo, C.L., Chi, C.W., and Liu, T.Y. Модуляция апоптоза берберином посредством ингибирования экспрессии циклооксигеназы-2 и Mcl-1 в раковых клетках полости рта. In Vivo 2005;19(1):247-252. Посмотреть реферат.

Kuo, C.L., Chou, C.C., and Yung, B.Y. Комплексы берберина с ДНК в берберин-индуцированном апоптозе в лейкемических клетках HL-60 человека.Cancer Lett 7-13-1995;93(2):193-200. Посмотреть реферат.

Лахири С. и Датта Н.К. Берберин и хлорамфеникол в лечении холеры и тяжелой диареи. Журнал Индийской медицинской ассоциации 1967;48(1):1-11.

Лэмб, Дж.Дж., Холик, М.Ф., Лерман, Р.Х., Конда, В.Р., Миних, Д.М., Десаи, А., Чен, Т.С., Остин, М., Корнберг, Дж., Чанг, Дж.Л., Си, А., Бланд, Дж. С., и Трипп, М. Л. Пищевые добавки, содержащие изо-альфа-кислоты хмеля, берберин, витамин D (3) и витамин К (1), создают благоприятный профиль костных биомаркеров, поддерживая здоровый костный метаболизм у женщин в постменопаузе с метаболическим синдромом.Нутр Рез 2011;31(5):347-355. Посмотреть реферат.

Lau, C.W., Yao, X.Q., Chen, Z.Y., Ko, WH, and Huang, Y. Действие берберина на сердечно-сосудистую систему. Cardiovasc Drug Rev 2001;19(3):234-244. Посмотреть реферат.

Lee, S., Lim, H.J., Park, H.Y., Lee, K.S., Park, J.H., and Jang, Y. Берберин ингибирует пролиферацию и миграцию гладкомышечных клеток сосудов крыс in vitro и улучшает образование неоинтимы после баллонного повреждения in vivo. Берберин улучшает образование неоинтимы в модели крыс.Атеросклероз 2006;186(1):29-37. Посмотреть реферат.

Ли ХВ. [Контролируемое клиническое исследование у младенцев и детей, сравнивающее пакетики Lacteol Fort с двумя эталонными антидиарейными препаратами]. Энн Педиатр 1995;42(6):396-401.

Li, GH, Wang, DL, Hu, YD, Pu, P., Li, DZ, Wang, WD, Zhu, B., Hao, P., Wang, J., Xu, XQ, Wan, JQ, Zhou, YB, и Chen, ZT. Берберин ингибирует острую радиационную интестинальную недостаточность у людей с лучевой терапией брюшной полости. Мед Онкол. 2010;27(3):919-925.Посмотреть реферат.

Ли Х., Мияхара Т., Тэдзука Ю., Намба Т., Судзуки Т., Доваки Р., Ватанабэ М., Немото Н., Тонами С., Сето Х. ., и Кадота, С. Влияние формул кампо на резорбцию кости in vitro и in vivo. II. Подробное изучение берберина. Биол Фарм Булл 1999;22(4):391-396. Посмотреть реферат.

Lin, C.C., Kao, S.T., Chen, GW, Ho, HC, and Chung, JG. Апоптоз клеток лейкемии человека HL-60 и клеток лейкемии мыши WEHI-3, индуцированный берберином посредством активации каспазы-3.Anticancer Res 2006;26(1A):227-242. Посмотреть реферат.

Лин, Дж. Г., Чанг, Дж. Г., Ву, Л. Т., Чен, Г. В., Чанг, Х. Л., и Ван, Т. Ф. Влияние берберина на активность ариламин-N-ацетилтрансферазы в опухолевых клетках толстой кишки человека. Am J Chin Med 1999;27(2):265-275. Посмотреть реферат.

Lin, J. P., Yang, J. S., Lee, J. H., Hsieh, W. T., и Chung, J. G. Берберин вызывает остановку клеточного цикла и апоптоз в клеточной линии карциномы желудка человека SNU-5. Мир J Гастроэнтерол. 1-7-2006;12(1):21-28.Посмотреть реферат.

Lin, S., Tsai, S.C., Lee, C.C., Wang, B.W., Liou, J.Y., и Shyu, K.G. Берберин ингибирует экспрессию HIF-1alpha посредством усиленного протеолиза. Мол Фармакол 2004;66(3):612-619. Посмотреть реферат.

Liu, Y., Yu, H., Zhang, C., Cheng, Y., Hu, L., Meng, X. и Zhao, Y. Защитное действие берберина на радиационно-индуцированное повреждение легких посредством межклеточной адгезии молекулярный-1 и трансформирующий фактор роста-бета-1 у больных раком легкого. Eur J Cancer 2008;44(16):2425-2432.Посмотреть реферат.

Lu, SS, Yu, YL, Zhu, HJ, Liu, XD, Liu, L., Liu, YW, Wang, P., Xie, L. и Wang, GJ Берберин способствует глюкагоноподобному пептиду-1 ( 7-36) секреция амида у крыс с диабетом, индуцированным стрептозотоцином. J Эндокринол. 2009;200(2):159-165. Посмотреть реферат.

Махаджан В. М., Шарма А. и Раттан А. Противогрибковая активность сульфата берберина: алкалоид из индийского лекарственного растения. Сабураудиа. 1982;20(1):79-81. Посмотреть реферат.

Мантена, С.К., Шарма С.Д. и Катияр С.К. Берберин, натуральный продукт, вызывает остановку клеточного цикла в фазе G1 и зависимый от каспазы-3 апоптоз в клетках карциномы предстательной железы человека. Мол Рак Тер 2006;5(2):296-308. Посмотреть реферат.

Марацци Г., Каччиотти Л., Пелличча Ф., Айя Л., Вольтеррани М., Каминити Г., Спосато Б., Массаро Р., Гриеко Ф. и Розано, G. Долгосрочные эффекты нутрицевтиков (берберин, красный дрожжевой рис, поликозанол) у пожилых пациентов с гиперхолестеринемией. Adv.Ther 2011;28(12):1105-1113.Посмотреть реферат.

Марин-Нето, Дж. А., Масиэль, Б. К., Секчес, А. Л., и Галло, Джуниор Л. Сердечно-сосудистые эффекты берберина у пациентов с тяжелой застойной сердечной недостаточностью. Клин.Кардиол. 1988;11(4):253-260. Посмотреть реферат.

Meng, S., Wang, L.S., Huang, Z.Q., Zhou, Q., Sun, Y.G., Cao, J.T., Li, Y.G. и Wang, C.Q. Берберин уменьшает воспаление у пациентов с острым коронарным синдромом после чрескожного коронарного вмешательства. Clin Exp.Pharmacol Physiol 2012;39(5):406-411.Посмотреть реферат.

Митани Н., Мураками К., Ямаура Т., Икеда Т. и Сайки И. Ингибирующее действие берберина на метастазы в медиастинальные лимфатические узлы, вызванные ортотопической имплантацией карциномы легких Льюис. Рак Летт. 4-10-2001;165(1):35-42. Посмотреть реферат.

Миядзаки Х., Шираи Э., Исибаши М., Хосой К., Шибата С. и Иванага М. Количественное определение хлорида берберина в моче человека с использованием мониторинга отдельных ионов в режиме полевой десорбции . Биомед.Масс-спектр.1978;5(10):559-565. Посмотреть реферат.

Мохан М., Пант С.Р., Ангра С.К. и Махаджан В.М. Берберин при трахоме. (Клиническое исследование). Индийский Дж. Офтальмол. 1982;30(2):69-75. Посмотреть реферат.

Muller, K., Ziereis, K., and Gawlik, I. Противопсориатическое средство Mahonia aquifolium и его активные компоненты; II. Антипролиферативная активность против роста клеток кератиноцитов человека. Планта Мед 1995;61(1):74-75. Посмотреть реферат.

Ni, Y. X. [Терапевтическое действие берберина на 60 больных сахарным диабетом II типа и экспериментальное исследование].Zhong.Xi.Yi.Jie.He.Za Zhi.- Китайский журнал современных достижений в традиционной медицине 1988; 8 (12): 711-3, 707. Посмотреть аннотацию.

Ni, Y. X., Yang, J. и Fan, S. [Клиническое исследование цзян тан сан при лечении пациентов с инсулиннезависимым сахарным диабетом]. Чжунго Чжун.Си.И.Цзе.Хэ.За Чжи. 1994;14(11):650-652. Посмотреть реферат.

Нисида С., Кикуичи С., Йошиока С., Цубаки М., Фуджи Ю., Мацуда Х., Кубо М. и Иримаджири К. Индукция апоптоза в клетках HL-60 лечили лекарственными травами.Am J Chin Med 2003;31(4):551-562. Посмотреть реферат.

Одзаки Ю., Судзуки Х. и Сатакэ М. [Сравнительные исследования концентрации берберина в плазме после перорального приема экстракта корневища коптидиса, экстракта его культивированных клеток и комбинированного применения этих экстрактов и экстракта корня солодки при крыс]. Якугаку Дзаси 1993;113(1):63-69. Посмотреть реферат.

Palasuntheram C, Iyer KS, de Silva LB, and et al. Антибактериальная активность Coscinium fenestratum Colebr в отношении Clostridium tetani.Ind J Med Res 1982;76(Suppl):71-76.

Pan, JF, Yu, C., Zhu, DY, Zhang, H., Zeng, JF, Jiang, SH, and Ren, JY Идентификация трех сульфат-конъюгированных метаболитов хлорида берберина в моче здоровых добровольцев после перорального приема . Акта Фармакол Син. 2002;23(1):77-82. Посмотреть реферат.

Peng, W.H., Hsieh, M.T., и Wu, C.R. Влияние длительного введения берберина на скополамин-индуцированную амнезию у крыс. Jpn J Pharmacol 1997;74(3):261-266.Посмотреть реферат.

Pisciotta, L., Bellocchio, A., и Bertolini, S. Нутрицевтические таблетки, содержащие берберин, по сравнению с эзетимибом, на структуру липидов плазмы у субъектов с гиперхолестеринемией и их аддитивный эффект у пациентов с семейной гиперхолестеринемией при стабильном снижении уровня холестерина. Здоровье липидов Dis 2012;11:123. Посмотреть реферат.

Пурохит С.К., Кочар Д.К., Лал Б.Б. и др. Выращивание Leishmania tropica из нелеченых и леченных случаев восточной язвы. Индийский журнал общественного здравоохранения, 1982 г.; 26(1):34–37.

Раббани Г. Механизм и лечение диареи, вызванной холерным вибрионом и кишечной палочкой: роль лекарств и простагландинов. Датский медицинский бюллетень 1996; 43:173-185.

Сабир М. и Бхиде Н. К. Изучение некоторых фармакологических действий берберина. Ind J Physiol & Pharmac 1971;15(3):111-132.

Сабир М., Махаджан В.М., Мохапатра Л.Н. и др. Экспериментальное изучение противотрахомного действия берберина. Indian J Med Res 1976;64(8):1160-1167.

Сэк, Р.B. и Froelich, JL. Берберин ингибирует кишечную секреторную реакцию энтеротоксинов Vibrio cholerae и Escherichia coli. Заразить иммун. 1982;35(2):471-475. Посмотреть реферат.

Саксена Х.К., Томар В.Н. и Соангра М.Р. Эффективность новой соли берберина Uni-Berberine при восточной язве. Текущая медицинская практика 1970; 14: 247-252.

Seery TM и Bieter RN. Вклад в фармакологию берберина. J Pharmacol Exp Ther 1940;69:64-67.

Сеоу В.К., Ферранте А., Сумморс А. и др.Сравнительные эффекты тетрандрина и бербамина на продукцию воспалительных цитокинов интерлейкина-1 и фактора некроза опухоли. Науки о жизни 1992;50(8):pl-53-pl-58.

Шаффер, Дж. Э. Инотропная и хронотропная активность берберина на изолированных предсердиях морской свинки. J Cardiovasc Pharmacol 1985;7(2):307-315. Посмотреть реферат.

Shanbhag, S.M., Kulkarni, HJ, and Gaitonde, B.B. Фармакологическое действие берберина на центральную нервную систему. Jpn.J Pharmacol 1970;20(4):482-487.Посмотреть реферат.

Шарда, округ Колумбия. Берберин в лечении диареи у младенцев и детей. J Indian MA 1970;54(1):22-24.

Шарма Р., Джоши К.К. и Гоял Р.К. Берберина таннат при острой диарее. Индийская педиатрия 1970;7(9):496-501.

Соффар, С. А., Метвали, Д. М., Абдель-Азиз, С. С., Эль Вакиль, Х. С., и Саад, Г. А. Оценка воздействия растительного алкалоида (берберина, полученного из барбериса аристата) на Trichomonas vaginalis in vitro. J Egypt.Soc Паразитол.2001;31(3):893-904. Посмотреть реферат.

Sriwilaijareon, N., Petmitr, S., Mutirangura, A., Ponglikitmongkol, M., и Wilairat, P. Стадийная специфичность теломеразы Plasmodium falciparum и ее ингибирование берберином. Parasitol.Int 2002;51(1):99-103. Посмотреть реферат.

Subbaiah TV и Amin AH. Влияние сульфата берберина на Entamoeba histolytica. Природа 1967;215(100):527-528.

Сан Д., Кортни Х.С. и Бичи Э.Х. Сульфат берберина блокирует прилипание Streptococcus pyogenes к эпителиальным клеткам, фибронектину и гексадекану.Антимикробные агенты и химиотерапия 1988;32(9):1370-1374.

Supek Z and Tomic D. Farmakološko-kemijsko istrazivanje zutike (

Swabb, EA, Tai, YH, and Jordan, L. Reversal of colera токсин-индуцированная секреция в подвздошной кишке крыс с помощью просветного берберина. Am J Physiol 1981; 241( 3):G248-G252.Посмотреть реферат.

Tai, YH, Feser, JF, Marnane, WG, и Desjeux, JF Антисекреторные эффекты берберина в подвздошной кишке крысы, Am J Physiol 1981;241(3):G253-G258. Посмотреть реферат.

Thumm, H.W. and Tritschler, J. [Действие бербериновых капель на внутриглазное давление (ВГД) (перевод автора)]. Клин.Монбл.Аугенхейлкд. 1977;170(1):119-123. Посмотреть реферат.

Тримарко, В., Чиммино, К.С., Санторо, М., Паньяно, Г., Манзи, М. В., Пилья, А., Джудиче, К.А., Де, Лука Н., и Иззо, Р. Нутрицевтики для контроля артериального давления у пациентов с гипертензией высокой степени или гипертензией 1 степени. High Blood Press Cardiovasc.Prev. 9-1-2012;19(3):117-122. Посмотреть реферат.

Трипати Ю.Б. и Шукла С.Д.Berberis artistata ингибирует PAF-индуцированную агрегацию тромбоцитов кролика. Фитотерапевтические исследования 1996; 10:628-630.

Вик-Мо Х., Фариа Д.Б., Чунг В.М. и др. Благотворное влияние берберина на функцию левого желудочка у собак с сердечной недостаточностью. Клинические исследования 1983;31(2):224а.

Wang, DY, Yeh, CC, Lee, JH, Hung, CF, and Chung, JG Берберин ингибирует активность ариламин-N-ацетилтрансферазы, экспрессию генов и образование аддуктов ДНК при злокачественной астроцитоме человека (G9T/VGH) и мультиформах глиобластомы головного мозга ( клетки GBM 8401).Neurochem.Res 2002;27(9):883-889. Посмотреть реферат.

Wang, N., Feng, Y., Cheung, F., Chow, OY, Wang, X., Su, W. , and Tong, Y. Сравнительное исследование гепатопротекторного действия медвежьей желчи и водного раствора Coptidis Rhizoma экстракт на экспериментальном фиброзе печени у крыс. BMC.Комплемент Altern.Med 2012;12:239. Посмотреть реферат.

Wang, Q., Zhang, M., Liang, B., Shirwany, N., Zhu, Y., and Zou, MH Активация АМФ-активируемой протеинкиназы необходима для индуцированного берберином снижения атеросклероза у мышей: роль разобщающего белка 2.PLoS.One. 2011;6(9):e25436. Посмотреть реферат.

Wang, Y., Jia, X., Ghanam, K., Beaurepaire, C., Zidichouski, J., and Miller, L. Берберин и растительные станолы синергетически ингибируют всасывание холестерина у хомяков. Атеросклероз 2010;209(1):111-117. Посмотреть реферат.

Вэй В., Чжао Х., Ван А., Суй М., Лян К., Дэн Х., Ма Ю., Чжан Ю., Чжан Х. и Гуань, Y. Клиническое исследование краткосрочного влияния берберина по сравнению с метформином на метаболические характеристики женщин с синдромом поликистозных яичников.Евр Дж Эндокринол. 2012;166(1):99-105. Посмотреть реферат.

Райт, К.В., Маршалл, С.Дж., Рассел, П.Ф., Андерсон, М.М., Филлипсон, Дж.Д., Кирби, Г.К., Уорхерст, Д.К., и Шифф, П.Л. In vitro антиплазмодиальная, антиамебная и цитотоксическая активность некоторых мономерных изохинолиновых алкалоидов. J Nat Prod 2000;63(12):1638-1640. Посмотреть реферат.

Wu, H.L., Hsu, C.Y., Liu, W.H., and Yung, B.Y. Апоптоз клеток лейкемии человека HL-60, индуцированный берберином, связан с подавлением активности нуклеофосмина/B23 и теломеразы.Int J Cancer 6-11-1999;81(6):923-929. Посмотреть реферат.

Ву, Дж. Ф. и Лю, Т. П. [Влияние берберина на агрегацию тромбоцитов и уровни TXB2 и 6-кето-PGF1 альфа в плазме у крыс с обратимой окклюзией средней мозговой артерии]. Яо Сюэ.Сюэ.Бао. 1995;30(2):98-102. Посмотреть реферат.

Ву, С. Н., Ю, Х. С., Ян, К. Р., Ли, Х. Ф. и Ю, К. Л. Ингибирующее действие берберина на токи калия, активируемые напряжением и кальцием, в клетках миеломы человека. Life Sci 1998;62(25):2283-2294. Посмотреть реферат.

Xin, H.W., Wu, X.C., Li, Q., Yu, A.R., Zhong, M.Y., and Liu, Y.Y. Влияние берберина на фармакокинетику циклоспорина А у здоровых добровольцев. Методы Find.Exp.Clin Pharmacol 2006;28(1):25-29. Посмотреть реферат.

Xu, M.G., Wang, J.M., Chen, L., Wang, Y., Yang, Z. и Tao, J. Вызванная берберином мобилизация циркулирующих эндотелиальных клеток-предшественников улучшает эластичность мелких артерий человека. J Hum.Hypertens 2008;22(6):389-393. Посмотреть реферат.

Yang, Z., Shao, YC, Li, SJ, Qi, JL, Zhang, MJ, Hao, W., and Jin, GZ Лекарство l-тетрагидропальматином значительно улучшает тягу к опиатам и повышает уровень воздержания у потребителей героина: пилотное исследование. Акта Фармакол Син. 2008;29(7):781-788. Посмотреть реферат.

Yin, J., Xing, H., и Ye, J. Эффективность берберина у пациентов с сахарным диабетом 2 типа. Метаболизм 2008;57(5):712-717. Посмотреть реферат.

Йонт Г., Цянь Ю., Мур Д., Базила Д., West, J., Aldape, K. , Arvold, N., Shalev, N., and Haas-Kogan, D. Берберин повышает чувствительность клеток глиомы человека, но не нормальных глиальных клеток, к ионизирующему излучению in vitro. J Exp Ther Oncol. 2004;4(2):137-143. Посмотреть реферат.

Юань, Дж., Шен, X. Z., и Чжу, X. S. [Влияние берберина на время прохождения тонкой кишки человека]. Чжунго Чжун.Си.И.Цзе.Хэ.За Чжи. 1994;14(12):718-720. Посмотреть реферат.

Залевски А., Крол Р. и Мароко П.Р. Берберин, новый инотропный агент — различие между его сердечными и периферическими реакциями.Клин Рез 1983;31(2):227А.

Zeng, X. and Zeng, X. Взаимосвязь между клиническим воздействием берберина на тяжелую застойную сердечную недостаточность и его концентрацией в плазме изучена с помощью ВЭЖХ. Биомед Хроматогр 1999;13(7):442-444. Посмотреть реферат.

Чжан, Х., Вэй, Дж., Сюэ, Р., Ву, Дж. Д., Чжао, В., Ван, ZZ, Ван, СК, Чжоу, ZX, Сонг, Д. К., Ван, Ю. М., Пан, Х. Н., Kong, WJ, and Jiang, JD Берберин снижает уровень глюкозы в крови у пациентов с сахарным диабетом 2 типа за счет увеличения экспрессии рецепторов инсулина. Метаболизм 2010;59(2):285-292. Посмотреть реферат.

Чжан, М. Ф. и Шен, Ю. К. [Противодиарейные и противовоспалительные эффекты берберина]. Чжунго Яо Ли Сюэ.Бао. 1989;10(2):174-176. Посмотреть реферат.

Чжан Ю., Ли Х., Цзоу Д., Лю В., Ян Дж., Чжу Н., Хо Л., Ван М., Хун Дж., Ву П. ., Рен Г. и Нин Г. Лечение диабета 2 типа и дислипидемии натуральным растительным алкалоидом берберином. J Clin Endocrinol.Metab 2008;93(7):2559-2565. Посмотреть реферат.

Чжоу, Дж.Y., Zhou, SW, Zhang, KB, Tang, JL, Guang, LX, Ying, Y., Xu, Y., Zhang, L., and Li, DD Хроническое воздействие берберина на кровь, печень, метаболизм глюколипида и печень Экспрессия PPAR у диабетических гиперлипидемических крыс. Биол Фарм Бык. 2008;31(6):1169-1176. Посмотреть реферат.

Чжу Б. и Аренс Ф.А. Влияние берберина на кишечную секрецию, опосредованную термостабильным энтеротоксином Escherichia coli, в тощей кишке свиней. Am J Vet Res 1982;43(9):1594-1598.

Чжу, Б. и Аренс, Ф.Антисекреторные эффекты берберина с морфином, клонидином, L-фенилэфрином, йохимбином или неостигмином в тощей кишке свиньи. Eur J Pharmacol 12-9-1983;96(1-2):11-19. Посмотреть реферат.

Кофлан К.А., Валентайн Р.Дж., Рудерман Н.Б., Саха А.К. Активация AMPK: терапевтическая цель при диабете 2 типа? Diabetes Metab Syndr Obes 2014;7:241-53. Посмотреть реферат.

Абаскал К., Ярнелл Э. Последние клинические достижения берберина. Альтернативное дополнение Ther 2010;16(5):281-7.

Амин А.Х., Суббайя ТВ, Аббаси К.М.Сульфат берберина: антимикробная активность, биопроба и механизм действия. Can J Microbiol 1969;15:1067-76. Посмотреть реферат.

An Y, Sun Z, Zhang Y, Liu B, Guan Y, Lu M. Использование берберина для женщин с синдромом поликистозных яичников, проходящих лечение ЭКО. Clin Endocrinol (Oxf) 2014;80(3):425-31. Посмотреть реферат.

Анг Э.С., Ли С.Т., Ган К.С. и др. Оценка роли альтернативной терапии в лечении ожоговых ран: рандомизированное исследование, сравнивающее влажную открытую мазь от ожогов с обычными методами лечения пациентов с ожогами второй степени.МедГенМед 2001; 3:3. Посмотреть реферат.

Анис К.В., Раджешкумар Н.В., Куттан Р. Ингибирование химического канцерогенеза берберином у крыс и мышей. J Pharm Pharmacol 2001; 53:763-8. . Посмотреть реферат.

Асбаги О., Ганбари Н., Шекари М. и др. Влияние добавок берберина на параметры ожирения, воспаление и ферменты функции печени: систематический обзор и метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Клин Нутр ESPEN 2020;38:43-9. Посмотреть реферат.

Беба М., Джафарян К., Шаб-Бидар С.Влияние берберина на С-реактивный белок: систематический обзор и метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Дополнение Ther Med. 2019;46:81-6. Посмотреть реферат.

Бхиде МБ, Чаван СР, Датта Н.К. Всасывание, распределение и выведение берберина. Indian J Med Res 1969; 57:2128-31. Посмотреть реферат.

Будзински Дж.В., Фостер Б.С., Ванденхук С., Арнасон Дж.Т. Оценка in vitro ингибирования цитохрома P450 3A4 человека выбранными коммерческими травяными экстрактами и настойками. Фитомедицина 2000;7:273-82.Посмотреть реферат.

Мясник Н.Дж., Минчин РФ. Ариламин-N-ацетилтрансфераза 1: новая мишень для лечения рака. Pharmacol Rev 2012;64(1):147-65. Посмотреть реферат.

Chan E. Замещение билирубина из альбумина берберином. Биол новорожденных 1993;63:201-8. Посмотреть реферат.

Чаттерджи П., Франклин М.Р. Ингибирование цитохрома p450 человека и образование промежуточных метаболических комплексов экстрактом желтокорня и его метилендиоксифенильными компонентами. Drug Metab Dispos 2003;31:1391-7.Посмотреть реферат.

Чен С., Тао С., Лю З., Лу М., Пан К., Чжэн Л. и др. Рандомизированное клиническое исследование берберина гидрохлорида у пациентов с синдромом раздраженного кишечника с преобладанием диареи. Фитотер Рез. 2015 ноябрь; 29 (11): 1822-7. doi: 10.1002/ptr.5475. Посмотреть реферат.

Chen YX, Gao QY, Zou TH и др. Берберин против плацебо для предотвращения рецидива колоректальной аденомы: многоцентровое двойное слепое рандомизированное контролируемое исследование. Ланцет Гастроэнтерол Гепатол. 2020;5(3):267-75.Посмотреть реферат.

Cicero, AF, Rovati LC и Setnikar I. Эвлипидемические эффекты берберина, вводимого отдельно или в сочетании с другими природными средствами, снижающими уровень холестерина. Простое слепое клиническое исследование. Арцнаймиттельфоршунг. 2007;57:26-30. Посмотреть реферат.

Dong H, Zhao Y, Zhao L, Lu F. Влияние берберина на липиды крови: системный обзор и метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Планта Мед 2013;79(6):437-46. Посмотреть реферат.

Фукуда К., Хибия Ю., Мутох М. и др.Ингибирование берберином транскрипционной активности циклооксигеназы-2 в клетках рака толстой кишки человека. J Ethnopharmacol 1999;66:227-33. Посмотреть реферат.

Гарбер Эй Джей. Агонисты рецепторов глюкагоноподобного пептида 1 длительного действия: обзор их эффективности и переносимости. Diabetes Care 2011;34 Suppl 2:S279-84. Посмотреть реферат.

Gupte S. Применение берберина при лечении лямблиоза. Ам Дж. Дис Чайлд 1975; 129:866. Посмотреть реферат.

Hou Q, Han W, Fu X. Фармакокинетическое взаимодействие между такролимусом и берберином у ребенка с идиопатическим нефротическим синдромом.Eur J Clin Pharmacol 2013;69(10):1861-2. Посмотреть реферат.

Сян С.И., Ву С.Л., Ченг С.Е., Хо Т.Ю. Индуцированное ацетальдегидом производство интерлейкина-1бета и фактора некроза опухоли-альфа ингибируется берберином через сигнальный путь ядерного фактора-каппаВ в клетках HepG2. J Biomed Sci 2005; 12:791-801. Посмотреть реферат.

Хуан К.Г., Чу З.Л., Вэй С.Дж., Цзян Х., Цзяо Б.Х. Влияние берберина на метаболизм арахидоновой кислоты в тромбоцитах и ​​эндотелиальных клетках кролика. Thromb Res 2002;106(4-5):223-7.Посмотреть реферат.

Хуан Х.С., Ян Г.Ф., Пан Ю.К. Влияние гидрохлорида берберина на концентрацию циклоспорина А в крови у пациентов с трансплантацией сердца. Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi 2008; 28: 702-4. Посмотреть реферат.

Ивановская Н., Филиппов С. Изучение противовоспалительного действия экстракта корня барбариса обыкновенного, алкалоидных фракций и чистых алкалоидов. Int J Immunopharmacol 1996;18:553-61. Посмотреть реферат.

Джанбаз К.Х., Гилани А.Х. Исследования профилактического и лечебного воздействия берберина на химически индуцированную гепатотоксичность у грызунов.Фитотерапия 2000;71:25-33.. Посмотреть аннотацию.

Jiang XW, Zhang Y, Zhu YL и др. Влияние берберинового желатина на рецидивирующий афтозный стоматит: рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое исследование в китайской когорте. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol 2013; 115 (2): 212-7. Посмотреть реферат.

Ju J, Li J, Lin Q, Xu H. Эффективность и безопасность берберина при дислипидемии: систематический обзор и метаанализ рандомизированных клинических испытаний. Фитомедицина. 2018;50:25-34. Посмотреть реферат.

Kaneda Y, Torii M, Tanaka T, Aikawa M. Влияние сульфата берберина in vitro на рост и структуру Entamoeba histolytica, Giardia lamblia и Trichomonas vaginalis. Энн Троп Мед Паразитол 1991;85:417-25. Посмотреть реферат.

Хосла П.Г., Нирадж В.И., Гупта С.К. и др. Берберин, потенциальное лекарство от трахомы. Rev Int Trach Pathol Ocul Trop Subtrop Sante Publique 1992; 69: 147-65. Посмотреть реферат.

Kim JS, Tanaka H, ​​Shoyama Y. Иммуноколичественный анализ берберина и родственных ему соединений с использованием моноклональных антител в растительных лекарственных средствах.Аналитик 2004;129:87-91. Посмотреть реферат.

Ким С.Х., Шин Д.С., О М.Н. и др. Ингибирование изохинолиновыми алкалоидами транспептидаз-сортазы, закрепляющей поверхностный белок бактерий. Biosci Biotechnol Biochem 2004;68:421-4.. Посмотреть реферат.

Lan J, Zhao Y, Dong F и др. Метаанализ действия и безопасности берберина при лечении сахарного диабета 2 типа, гиперлипемии и артериальной гипертензии. J Этнофармакол. 2015;161:69-81. Посмотреть реферат.

Ли Б., Шан Дж. К., Чжоу QX.[Изучение общих алкалоидов корневища коптиса китайского при экспериментальных язвах желудка]. Chin J Integr Med 2005; 11: 217-21. Посмотреть реферат.

Li G, Zhao M, Qiu F, Sun Y, Zhao L. Фармакокинетические взаимодействия и переносимость хлорида берберина с симвастатином и фенофибратом: открытое, рандомизированное, параллельное исследование здоровых китайских субъектов. Препарат Des Devel Ther. 2018;13:129-139. Посмотреть реферат.

Лю Ю., Чжан Ю., Ян М. и др. Фармакокинетические взаимодействия между метформином и берберином у крыс: роль последовательностей перорального введения и микробиоты.Жизнь наук. 2019;235:116818. Посмотреть реферат.

Marazzi G, Campolongo G, Pelliccia F, Quattrino S, Vitale C, Cacciotti L, et al. Сравнение низкой дозы статина с низкой дозой статина + армолипид плюс у пациентов с непереносимостью статинов высокой интенсивности с предшествующим коронарным событием и чрескожным коронарным вмешательством (испытание ADHERENCE). Ам Джей Кардиол. 2017 15 сентября; 120 (6): 893-897. doi: 10.1016/j.amjcard.2017.06.015. Посмотреть реферат.

Marazzi G, Pelliccia F, Campolongo G, Quattrino S, Cacciotti L, Volterrani M, et al. Полезность нутрицевтиков (Армолипид Плюс) по сравнению с эзетимибом и комбинацией у пациентов с непереносимостью статинов, дислипидемией и ишемической болезнью сердца. Ам Джей Кардиол. 2015 15 декабря; 116 (12): 1798-801. doi: 10.1016/j.amjcard.2015.09.023. Посмотреть реферат.

Millán J, Cicero AF, Torres F, Anguera A. Влияние нутрицевтической комбинации, содержащей берберин (BRB), поликозанол и красный дрожжевой рис (RYR), на профиль липидов у пациентов с гиперхолестеринемией: метаанализ рандомизированных контролируемых исследований .Clin Investig Arterioscler. 2016;28(4):178-87. Посмотреть реферат.

Пак К.С., Канг К.С., Ким Дж.Х. и др. Дифференциальные ингибирующие эффекты протоберберинов на биосинтез стерола и хитина у Candida albicans. J Antimicrob Chemother 1999;43:667-74. Посмотреть реферат.

Перес-Рубио К.Г., Гонсалес-Ортис М., Мартинес-Абундис Э., Роблес-Сервантес Х.А., Эшпинель-Бермудес М.С. Влияние введения берберина на метаболический синдром, чувствительность к инсулину и секрецию инсулина. Metab Syndr Relat Disord 2013; 11 (5): 366-9.Посмотреть реферат.

Qing Y, Dong X, Hongli L, Yanhui L. Берберин способствовал защите миокарда послеоперационных пациентов посредством регулирования аутофагии миокарда. Биомед Фармаколог. 2018;105:1050-1053. Посмотреть реферат.

Раббани Г.Х., Батлер Т., Найт Дж. и др. Рандомизированное контролируемое исследование терапии берберинсульфатом диареи, вызванной энтеротоксигенными Escherichia coli и Vibrio cholerae. J Infect Dis 1987; 155:979-84. Посмотреть реферат.

Рехман Дж., Диллоу Дж.М., Картер С.М. и др.Повышенная продукция антигенспецифических иммуноглобулинов G и M после лечения in vivo лекарственными растениями Echinacea angustifolia и Hydrastis canadensis. Immunol Lett 1999;68:391-5. Посмотреть реферат.

Ruscica M, Gomaraschi M, Mombelli G, Macchi C, Bosisio R, Pazzucconi F, Pavanello C, Calabresi L, Arnoldi A, Sirtori CR, Magni P. Нутрицевтический подход к умеренному кардиометаболическому риску: результаты рандомизированного двойного слепого исследования и перекрестное исследование с Армолипидом Плюс. Дж. Клин Липидол.2014;8(1):61-8. Посмотреть реферат.

Scazzocchio F, Corneta MF, Tomassini L, Palmery M. Антибактериальная активность экстракта Hydrastis canadensis и его основных изолированных алкалоидов. Планта Мед 2001;67:561-4. Посмотреть реферат.

Шэн В.Д., Джиддави М.С., Хун К.К., Абдулла С.М. Лечение малярии, устойчивой к хлорохину, с использованием пириметамина в сочетании с берберином, тетрациклином или котримоксазолом. Восточная Африка Мед J 1997; 74: 283-4. Посмотреть реферат.

Сун Д., Абрахам С.Н., Бичи Э.Х.Влияние берберина сульфата на синтез и экспрессию фимбриального адгезина Pap в уропатогенных кишечных палочках. Противомикробные агенты Chemother 1988;32:1274-7. Посмотреть реферат.

Сан Д., Кортни Х.С., Бичи Э.Х. Сульфат берберина блокирует прилипание Streptococcus pyogenes к эпителиальным клеткам, фибронектину и гексадекану. Противомикробные агенты Chemother 1988;32:1370-4. Посмотреть реферат.

Tsai PL, Tsai TH. Гепатобилиарная экскреция берберина. Drug Metab Dispos 2004;32:405-12.. Посмотреть реферат.

Воллекова А., Костальова Д., Кеттманн В., Тот Дж. Противогрибковая активность экстракта магония водорослевого и его основных протобербериновых алкалоидов. Phytother Res 2003;17:834-7. Посмотреть реферат.

Wen C, Wu L, Fu L, Zhang X, Zhou H. Берберин усиливает противоопухолевую активность тамоксифена в клетках MCF 7, чувствительных к лекарствам, и клетках MCF 7/TAM, устойчивых к лекарствам. Mol Med Rep. 2016;14(3):2250-6. Посмотреть реферат.

Wu X, Li Q, Xin H, Yu A, Zhong M. Влияние берберина на концентрацию циклоспорина A в крови у реципиентов с пересаженной почкой: клиническое и фармакокинетическое исследование.Eur J Clin Pharmacol 2005;61:567-72. Посмотреть реферат.

Wu XK, Wang YY, Liu JP, Liang RN, Xue HY, Ma HX и др. Рандомизированное контролируемое исследование летрозола, берберина или их комбинации при бесплодии при синдроме поликистозных яичников. Фертил Стерил. 2016;106(3):757-765.e1. doi: 10. 1016/j.fertnstert.2016.05.022. Посмотреть реферат.

Се, X., Мэн, X., Чжоу, X., Шу, X., и Конг, Х. [Исследование терапевтического эффекта и гемореологических изменений берберина у впервые диагностированных пациентов с диабетом 2 типа в сочетании с неалкогольной жировой болезнью печени ].Чжунго Чжун Яо За Чжи 2011; 36 (21): 3032-3035. Посмотреть реферат.

Сюй Л., Чжан Ю., Сюэ Х. и др. I фаза испытаний берберина у китайцев с язвенным колитом. Рак Prev Res (Фила). 2020;13(1):117-26. Посмотреть реферат.

Yan HM, Xia MF, Wang Y, Chang XX, Yao XZ, Rao SX и др. Эффективность берберина у пациентов с неалкогольной жировой болезнью печени. ПЛОС Один. 7 августа 2015 г .; 10 (8): e0134172. doi: 10.1371/journal.pone.0134172. Посмотреть реферат.

Цзэн XH, Цзэн XJ, Ли YY.Эффективность и безопасность берберина при застойной сердечной недостаточности, вторичной по отношению к ишемической или идиопатической дилатационной кардиомиопатии. Am J Cardiol 2003; 92: 173-6. Посмотреть реферат.

Zhang D, Ke L, Ni Z, Chen Y, Zhang LH, Zhu SH и др. Четырехкомпонентная терапия, содержащая берберин, для начальной эрадикации Helicobacter pylori: открытое рандомизированное исследование фазы IV. Медицина (Балтимор). 2017;96(32):e7697. doi: 10.1097/MD.0000000000007697. Посмотреть реферат.

Чжан Л.С., Чжан Дж.Х., Фэн Р. и др. Эффективность и безопасность берберина отдельно или в сочетании со статинами для лечения гиперлипидемии: систематический обзор и метаанализ рандомизированных контролируемых клинических испытаний.Am J Chin Med 2019;47(4):751-67. Посмотреть реферат.

Чжан Ю, Ли С, Цзоу Д и др. Лечение диабета 2 типа и дислипидемии натуральным растительным алкалоидом берберином. J Clin Endocrinol Metab 2008;93:2559-65. Посмотреть реферат.

Берберин облегчает фиброз печени, индуцируя окислительно-восстановительный потенциал железа для активации ферроптоза звездчатых клеток печени, опосредованного АФК от инфицированных вирусом гепатита В, вызванных алкоголем и пациентов с вторичным билиарным фиброзом печени во время операций перед любым терапевтическим вмешательством.

Разрешение на исследование и лечение мышей

Все эксперименты на животных проводились в Третьей дочерней больнице Университета Сунь Ятсена в соответствии с протоколом, одобренным Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Университета Сунь Ятсена (IACUC-F3- 19-0311).Исследования на животных представлены в соответствии с рекомендациями ARRIVE [57]. Всего для экспериментов на животных использовали слепым методом 120 мышей C57BL/6. Вкратце, 6-недельных самцов мышей (20–25 г) случайным образом распределяли по указанным группам и помещали в клетки со свободным доступом к пище и воде после привыкания к 12-часовому циклу свет/темнота. Экспериментатор не знал о распределении по группам. Группа моделей фиброза печени мышей была создана путем внутрибрюшинной (внутрибрюшинной) инъекции ТАА или четыреххлористого углерода (CCl ₄ ) в течение 6 недель [58, 59].Контрольной группе вводили внутрибрюшинно. только с тем же объемом оливкового масла или физиологического раствора. В группе BBR доза BBR (200 мг/кг/день) вводилась перорально [10]. В дополнение к и.п. инъекция. с TAA или CCl ₄ мыши в группе лечения получали BBR внутрижелудочно. В группе ингибиторов, помимо инъецируемого внутрибрюшинно при пероральном введении TAA и BBR мышам вводили внутрибрюшинно. с дозой Фер-1 (1 мг/кг/день). Мышей умерщвляли под анестезией 3% изофлураном после 6 недель лечения; образцы крови и ткани печени были взяты и обработаны для последующего анализа.В каждой группе использовали не менее пяти срезов печени мыши.

Антитела

Антитела против COL1A1 (ab34710), COL4A1 (ab6586), α-SMA (ab5694/ab7817), виментина (ab), p75 ^NTR (ab52987), десмина (ab32362), x175 (ab18t2) (ab179800), GPx4 (ab125066), FTh2 (ab65080/ab183781), FTL (ab69090), Atg5 (ab108327), Atg7 (ab133528), LC3B (ab48394) и 4-HNE (ab46544) были приобретены у Abcam Technology (Abcam , Кембридж, Великобритания). Антитела против FTh2 (sc-376594), FTL (sc-3

) и убиквитина (sc-8017 AC) были приобретены у Santa Cruz Biotechnology (Санта-Круз, Калифорния, США).Антитела против α-SMA (14395-1-AP), Ptgs2 (66351-1-Ig), BECN1 (11306-1-AP), p97/VCP (10736-1-AP) и SQSTM1/p62 (18420-1 -AP) были приобретены у Proteintech (Proteintech, IL, USA). Конъюгированная с пероксидазой хрена (HRP) легкая цепь AffiniPure козьего антимышиного IgG (AS062), конъюгированная с пероксидазой козьего антимышиного IgG тяжелая цепь (AS064) и анти-NCOA4 (A5695) были приобретены у ABclonal (ABclonal, Ухань, Китай). ). Антитела против S403-pp62 (#39786), LC3B (#83506), PCNA (#13110) и GAPDH (#5174) были приобретены у Cell Signaling Technology (Cell Signaling Technology, Дэнверс, Массачусетс, США).Моноклональные анти-FLAG® M2 (F1804), моноклональные анти-HA (H9658) и анти-ACTB (A5441) были приобретены у Sigma-Aldrich (Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури, США).

Химические вещества

Берберин (PHR1502), трегалоза (T0167), CCl ₄ (SHBF2363V), TAA (BCBW8069) и тригидрат гексацианоферрата (II) калия (P9387) были приобретены у Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури). , США). CQ (S4157), 3-MA (S2767), дефероксамин (S5742), деферипрон (S4067), липрокстатин-1 (S7699), некростатин-1 (S8037), Z-VAD-FMK (S7023), кальпептин (S7396), RSL3 (S8155), сорафениб (S7397) и эрастин (S7242) были получены от Selleck Chemicals (Селлек, Хьюстон, Техас, США).Диацетат флуоресцеина (HY-D0719), ферростатин-1 (HY-100579), SBE-β-CD (HY-17031) и CHX (HY-12320) были приобретены у MCE (MCE, Вашингтон, США). MG-132 (tlrl-mg132) был приобретен у Invitrogen (Invitrogen, Калифорния, США). Цитрат железа и аммония был приобретен у Macklin (C107, Macklin, Шанхай, Китай).

Культура клеток и трансфекция

Линия HSC человека (HSC-LX2), линия клеток гепатоцитов (LO2) и линия HSC крысы (HSC-T6) были получены из Американской коллекции типовых культур (ATCC, США).Клеточная линия крысиных гепатоцитов (BRL-3A) и GFP-LC3B были любезно предоставлены доктором Дунбо Цю (отделение Центра биологической терапии, Третья дочерняя больница Университета Сунь Ятсена, Гуанчжоу, Китай). Все клетки культивировали в модифицированной Дульбекко среде Игла (Thermo Scientific, Рокфорд, Алабама, США) с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки (Gibco-BRL, Гранд-Айленд, Нью-Йорк, США), 2 мМ L-глютамина и 1% пенициллина. стрептомицин (Gibco-BRL). Клетки диссоциировали с помощью 0,05% трипсина и подсчитывали с помощью автоматического счетчика клеток TC20™ (Thermo Scientific).Плазмиды, кодирующие вектор pcDNA3.0-HA-K48/K63-Ub, были любезно предоставлены профессором Юнфей Цинь (отделение Центра биологической терапии, Третья дочерняя больница Университета Сунь Ятсена, Гуанчжоу, Китай). FTh2, FTL, FTh2-Flag и векторные плазмиды были созданы и синтезированы Genecopoeia (Гуанчжоу, Китай). Перед трансфекцией клетки HSC-LX2 трансплантировали в 6-луночные или 96-луночные планшеты и выращивали до слияния 50-60%. Липофектамин ^TM 3000 (Thermo Fisher Scientific, Уолтем, Массачусетс, США) использовали в соответствии с инструкциями производителя.Вектор pcDNA3.0 трансфицировали в качестве отрицательного контроля. Все плазмиды инкубировали со средой для трансфекции в течение 24 часов перед следующими экспериментами.

Экстракция тотальной РНК и ПЦР в реальном времени

Тотальную РНК выделяли из ГСК с использованием реагента TRIzol (Invitrogen, Карлсбад, Калифорния, США) в соответствии с протоколом производителя. Затем 2 мкг тотальной РНК использовали для синтеза кДНК с использованием набора для синтеза кДНК iScript™ (Bio-Rad, Калифорния, США). КолПЦР проводили с использованием iQSYBR Green Master Mix с системой реального времени Bio-Rad CFX96.Уровни экспрессии генов были нормализованы к β-актину. Относительные уровни экспрессии рассчитывали методом 2 ^-ΔΔCt . Последовательности праймеров, использованные для количественной ПЦР, перечислены в дополнительной таблице 1.

Вестерн-блоттинг

Белок экстрагировали из клеток или тканей печени мыши буфером для лизиса (P0013, Институт биотехнологии Beyotime, Цзянсу, Китай) с добавлением смеси ингибиторов протеаз ( 046001; Roche Diagnostics, Индианаполис, Индиана, США) и коктейль ингибиторов фосфатазы (78420; Thermo Scientific, Waltham, MA), после чего образцы центрифугировали. Иммуноблотинг проводили, как описано ранее [3]. Иммунодетекцию проводили с помощью хемилюминесцентного реагента Hyglo (Denville Scientific) и обнаруживали с помощью прибора Bio-Rad ECL (Bio-Rad). После количественной оценки сигнала с помощью денситометрии результаты выражали как отношение к контрольной нагрузке в единицах денситометрии.

Иммунопреципитация (IP)

IP проводили с использованием набора Thermo Scientific Pierce IP Kit (Thermo Scientific). Вкратце, после обработки культивированные клетки трижды промывали холодным фосфатно-солевым буфером (PBS) и затем лизировали буфером для лизиса.Добавляли IP-антитело (5  мкг) или нормальный IgG и инкубировали при 4 °C в течение ночи на ротаторе. В целом, 25 мкл агарозных шариков A/G добавляли к 200 мкл лизатов и инкубировали в течение 3 часов при осторожном встряхивании при комнатной температуре в соответствии с протоколом производителя. Гранулы удаляли центрифугированием, а конечные образцы анализировали вестерн-блоттингом с использованием указанных антител.

Гистологическое исследование печени и окрашивание HSC

Окрашивание трихромом по Массону, Sirius red, H&E, иммуногистохимическое (IHC) и окрашивание IF, а также двойное окрашивание IF выполняли, как описано ранее [3].Окрашивание трихромом по Массону и окрашивание сириусом красным использовали для исследования коллагена, а полуколичественный анализ выполняли с использованием Image-Pro Plus 8.0 (Media Cybernetics, Роквилл, Мэриленд, США). Для IHC после извлечения антигена срезы толщиной 3 мкм, залитые парафином, пермеабилизировали 1% Triton X-100 с последующим промыванием PBS и инкубацией с указанными антителами в течение ночи при 4°C. Затем целевой белок выявляли с помощью вторичного антитела, а затем инкубировали в DAB для интенсификации, а срезы докрашивали гематоксилином.Для окрашивания IF целевые белки инкубировали с указанными первичными антителами в течение ночи при 4 °C, а затем с соответствующим биотин-конъюгированным вторичным антителом и стрептавидином Alexa Fluor 488® или 594® (Thermo Fisher Scientific). Ядра окрашивали 4,6-диамидино-2-фенилиндолом (DAPI). Для двойного окрашивания после завершения окрашивания первого белка срезы повторно инкубировали и выявляли вторичный белок. Стадию фиброза печени оценивали по шкале Ishak [60].

Окраска Perls’-DAB

Срезы ткани печени гистохимически инкубировали в растворе Perls (5% ферроцианид калия/5% соляная кислота) в течение 30 мин. Затем срезы промывали 3 раза PBS, инкубировали в DAB для интенсификации и промывали деионизированной водой для остановки реакции. Далее срезы докрашивали гематоксилином.

Исследование GFP-LC3B и p62

Клетки HSC-LX2 культивировали на конфокальных планшетах и ​​временно трансфицировали GFP-LC3B в соответствии с инструкциями производителя.Клетки инкубировали с указанными химическими веществами, а затем добавляли реакционный раствор Hoechst 33342 (Thermo Fisher Scientific) для обнаружения окрашивания. Для обнаружения p62 клетки HSC-LX2, экспрессирующие GFP-LC3B, обрабатывали указанными химическими веществами, а затем фиксировали 4% формальдегидом в течение 30 мин. К клеткам добавляли антитело против p62 (1:200) и инкубировали в течение ночи при 4 °C. Клетки промывали PBS, добавляли Alexa Fluor 594® (Thermo Fisher Scientific) и инкубировали в течение 2 ч, а ядра окрашивали DAPI.LC3B puncta и p62 наблюдали под конфокальным микроскопом Zeiss LSM 880 (Zeiss, Оберкохен, Германия).

Трансмиссионная электронная микроскопия

ГСК предварительно обрабатывали с помощью или без BBR, а затем фиксировали ледяным 2,5% глутаралем. ТЭМ проводили с использованием просвечивающего электронного микроскопа (JEOL, Токио, Япония) в основной лаборатории электронной микроскопии Университета Сунь Ятсена.

Анализ функции печени

Для исследования функции печени концентрации трансаминазы аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в сыворотке в указанных образцах определяли с помощью наборов для твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) (Cusabio, Wuhan Huamei Biotech, Ухань, Китай) в соответствии с инструкциями производителя.Молочную дегидрогеназу, гиалуроновую кислоту, проколлаген III и коллаген IV в сыворотке мышей определяли с помощью наборов ELISA (Sinopharm Chemical Reagent).

Измерение гибели клеток

Гибель некротических клеток HSC и живые клетки определяли окрашиванием PI (KeyGEN BioTECH, Нанкин, Китай) и окрашиванием FDA (MCE) в соответствии с инструкциями производителя.

Анализ жизнеспособности клеток и анализ 5-этинил-2′-дезоксиуридина (EdU)

Жизнеспособность клеток определяли с помощью набора для подсчета клеток-8 (CCK-8) (Dojindo Laboratories, JAPAN) в соответствии с инструкциями производителя.Вкратце, HSC и гепатоциты высевали в 96-луночные планшеты с плотностью 2500 клеток на лунку. Реагент CCK-8 (10 мкл/100 мкл среды) добавляли в каждую лунку после обработки клеток указанными химическими веществами. После инкубации в течение 2 ч измеряли оптическую плотность (ОП) при 550 нм. Скорость пролиферации клеток определяли с помощью анализа EdU (RiboBio Co., Ltd., Гуанчжоу, Китай) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, клетки высевали в 48-луночные планшеты и инкубировали с концентрацией IC50 BBR в течение указанного времени.Каждую лунку инкубировали с 50 мкМ раствором EdU в течение 2 часов, фиксировали 4% параформальдегидом в течение 30 минут, инкубировали с 2 мг/мл раствором глицина в течение 5 минут для обесцвечивания на шейкере, а затем промывали холодным PBS, содержащим 0,5% тритона X. -100 на 10 мин. Окрашивание ядер проводили с добавлением окрашивающего раствора Apollo® с последующей инкубацией в темноте и микроскопическим исследованием (Zeiss).

Анализ малонового диальдегида (МДА)

Относительную концентрацию МДА в клеточных лизатах измеряли с использованием набора для анализа перекисного окисления липидов (Abcam, ab118970) в соответствии с инструкциями производителя.Вкратце, МДА в HSC реагировала с тиобарбитуровой кислотой (ТБК) с образованием аддукта МДА-ТБК, и оптическая плотность каждой поры измерялась при 532 нм с помощью спектрофотометра (BioTek-Epoch3, США).

Анализ железа

Относительный уровень клеточного двухвалентного железа (Fe ²⁺ ) в клеточных лизатах проверяли с помощью набора для анализа железа (Abcam, ab83366) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, после обработки HSC собирали и трижды промывали холодным PBS. Затем в каждую лунку клеток на льду добавляли 200 мкл буфера для анализа железа.Собирали клеточные лизаты и добавляли восстановитель железа для уменьшения переключения с Fe ³⁺ на Fe ²⁺ , тщательно перемешивали и реагировали в течение 30 мин. Затем добавляли железный зонд и тщательно перемешивали, а затем инкубировали в течение 60 мин. Выход измеряли сразу при 593 нм с помощью спектрофотометра (BioTek-Epoch3).

Определение АФК липидов

Уровень АФК липидов определяли с использованием 5 мкМ красителя C11-BODIPY 488 [35]. Вкратце, клетки высевали в 6-луночные планшеты, обрабатывали указанными концентрациями BBR или без них в течение 24 ч, с указанными ингибиторами или агонистами или без них.Через двадцать четыре часа культуральную среду заменяли 2 мл среды C11-BODIPY 488. После инкубации в течение еще 15 мин клетки собирали в пробирки на 15 мл и дважды промывали PBS. Затем клетки ресуспендировали в 500 мкл PBS. Суспензию клеток фильтровали через клеточный фильтр (нейлоновая сетка 40 мкм) и подвергали проточному цитометрическому анализу для определения количества АФК в клетках. Интенсивность флуоресценции клеток на образец определяли методом проточной цитометрии с использованием проточного цитометра BD FACSAria (BD Biosciences).

Анализ глутатиона (GSH)

Концентрацию GSH в клеточных лизатах определяли с использованием набора для анализа GSH (Sigma, CS0260) в соответствии с инструкциями производителя. Вкратце, после обработки HSC гомогенизировали в 50 мМ буфере MES (Sigma-Aldrich, M8250), содержащем 1 мМ ЭДТА (Sigma-Aldrich, 03620). Образцы центрифугировали при 10 000 ×  g в течение 10 мин при 4 °C, супернатанты подвергали набору для анализа GSH и смешивали с рабочим раствором для обнаружения GSH вместе со стандартами, и образцы инкубировали в течение 25 мин при комнатной температуре.Затем выход измеряли сразу при 412 нм с помощью спектрофотометра (BioTek-Epoch3).

Статистический анализ

Все эксперименты были независимо повторены не менее трех раз. Данные представлены как среднее  ± SD. Статистическую значимость оценивали с помощью одностороннего дисперсионного анализа тестов или тестов Стьюдента t , и все тесты были двусторонними. Все данные были проанализированы с помощью GraphPad Prism 8.0 (GraphPad Software, Inc.). P  < 0,05 считалось статистически значимым.

Эффективность и безопасность бифидобактерий и берберина при гипергликемии человека и их регулирующее влияние на микробиоту кишечника: многоцентровое двойное слепое рандомизированное исследование с параллельным контролем | Genome Medicine

Берберин предотвращает индуцированное гипергликемией повреждение эндотелия и усиливает вазодилатацию с помощью активируемой аденозинмонофосфатом протеинкиназы и эндотелиальной синтазы оксида азота | Сердечно-сосудистые исследования

Аннотация

Цели

Эндотелиальная дисфункция является ключевым событием, которое связывает ожирение, диабет, гипертонию и сердечно-сосудистые заболевания.Целью настоящего исследования было изучить защитный эффект алкалоидного препарата берберина против индуцированного гипергликемией клеточного повреждения и эндотелиальной дисфункции.

Методы и результаты

Как в культивируемых эндотелиальных клетках, так и в кровеносных сосудах, выделенных из аорты крысы, концентрация берберина в зависимости от концентрации усиливала фосфорилирование эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS) по Ser ¹¹⁷⁷ и способствовала ассоциации eNOS с белком теплового шока 90 ( HSP90), что приводит к увеличению образования оксида азота.Кроме того, берберин ослаблял вызванное высоким содержанием глюкозы образование активных форм кислорода, клеточный апоптоз, активацию ядерного фактора-κB и экспрессию молекул адгезии, тем самым подавляя прикрепление моноцитов к эндотелиальным клеткам. В кольцах аорты мышей берберин вызывал эндотелийзависимую вазодилатацию и облегчал эндотелиальную дисфункцию, опосредованную высоким уровнем глюкозы. Все эти положительные эффекты берберина на эндотелий были устранены либо фармакологическим ингибированием аденозинмонофосфат-активируемой протеинкиназы (AMPK), либо аденовирус-опосредованной сверхэкспрессией доминантно-негативной версии AMPK.

Заключение

Берберин защищает от повреждения эндотелия и усиливает эндотелийзависимую вазодилатацию, которая частично опосредована активацией сигнального каскада AMPK. Берберин или его производные могут быть полезны для лечения и/или профилактики эндотелиальной дисфункции, связанной с диабетом и сердечно-сосудистыми заболеваниями.

1. Введение

Эндотелий представляет собой единый слой клеток, покрывающий внутреннюю поверхность всех кровеносных сосудов. ^1,2 Помимо формирования физического барьера для защиты стенки сосуда, эндотелий секретирует большое количество биоактивных веществ, участвующих в модуляции сосудистого тонуса, коагуляции, пролиферации клеток и воспалении. ¹ Эндотелиальная дисфункция, характеризующаяся снижением биодоступности оксида азота (NO) и нарушением эндотелийзависимой вазодилатации, тесно связана с резистентностью к инсулину и диабетом. ^1–3 Хроническая дисфункция эндотелия является достоверно установленным предшественником ряда сердечно-сосудистых заболеваний, включая гипертонию, атеросклероз, диабетическую васкулопатию и инфаркт миокарда.Кроме того, дисфункция эндотелия периферических сосудов на артериолярном и капиллярном уровнях способствует патогенезу инсулинорезистентности и метаболического синдрома, препятствуя рекрутированию капилляров и кровотоку в скелетных мышцах. ⁴ У пациентов с ожирением и диабетом гипергликемия, повышенный уровень свободных жирных кислот и провоспалительные факторы вызывают ряд патофизиологических изменений в эндотелии, включая внутриклеточное накопление активных форм кислорода (АФК), эндотелиальной синтазы оксида азота (eNOS ) разобщение, апоптоз клеток и воспаление, которые, в свою очередь, способствуют ускоренному повреждению и дисфункции эндотелия. ⁵ В настоящее время твердо установлено, что эндотелиальная дисфункция является ключевым медиатором, связывающим ожирение, диабет и его сердечно-сосудистые осложнения. Следовательно, терапевтические вмешательства, направленные на облегчение эндотелиальной дисфункции, должны представлять собой одну из наиболее эффективных стратегий лечения и/или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, связанных с метаболическим синдромом.

Берберин ([C ₂₀ H ₁₈ NO ₄ ] ⁺ ), изохинолиновый алкалоид, первоначально выделенный из китайской травы лечения диареи во многих азиатских странах.Кроме того, все больше данных, полученных как в исследованиях на животных, так и в клинических исследованиях, свидетельствуют о том, что берберин полезен в борьбе с диабетом и сердечно-сосудистыми заболеваниями. Как у людей, так и у грызунов с диабетом берберин снижает гипергликемию и облегчает резистентность к инсулину, возможно, за счет активации аденозинмонофосфат-активируемой протеинкиназы (AMPK). ^6–9 Он использовался для лечения застойной сердечной недостаточности у людей. ^10,11 Кроме того, на различных моделях животных сообщалось об антигипертензивных, антиатеросклеротических и васкулопротекторных свойствах берберина. ^12–14 Однако механизмы, лежащие в основе его сердечно-сосудистых эффектов, остаются плохо изученными.

В настоящем исследовании оценивалось прямое эндотелиальное действие берберина и выяснялись молекулярные пути, участвующие в этом процессе. Это показывает, что берберин сильно стимулирует активацию eNOS и эндотелиальную продукцию NO через механизм, зависящий от AMPK. Кроме того, настоящие результаты демонстрируют, что берберин защищает эндотелиальную дисфункцию, вызванную гипергликемией, подавляя внутриклеточное накопление АФК и апоптоз, а также ингибируя активацию NF-κB.

2. Методы

2.1 Материалы

к фосфо-AMPKα (Thr172) и к общему AMPKα, а также к белку теплового шока 90 (HSP90) были получены от Cell Signaling Technology, Inc. (Беверли, Массачусетс, США). Антифосфо-eNOS (Ser ¹¹⁷⁷ ), антитела против eNOS и добавка для роста эндотелиальных клеток (ECGS) были получены от BD Transduction Laboratories (Хосе, Калифорния, США). Берберин, фенилэфрин, ацетилхолин, метиловый эфир N ^G -нитро-1-аргинина (l-NAME) и соединение С были приобретены у Sigma (Сент-Луис, Миссури, США).

2.2 Культура клеток и аденовирусная инфекция

Эндотелиальные клетки пупочной вены человека (HUVEC, полученные из Американской коллекции типовых культур) в пассажах 4–8 культивировали в покрытых желатином колбах в среде M199 с добавлением 15% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS, Invitrogen), 0,1 мг/мл гепарина и 0,03 мг/мл ЭКГ. Клетки инфицировали рекомбинантными аденовирусами, кодирующими доминантно-негативную версию AMPK или люциферазы (в качестве контроля) в количестве 50 бляшкообразующих единиц на клетку, как описано. ¹⁵

2.3 Ко-иммунопреципитация и вестерн-блоттинг

HUVEC растворяли в лизирующем буфере и подвергали иммунопреципитации антителом против eNOS, как описано ранее. ¹⁵ Клеточные лизаты очищали центрифугированием при 15 300 об/мин при 4°C в течение 15 минут, а затем предварительно инкубировали с 50 мкл гранул белка A/G при 4°C в течение 1 часа для удаления неспецифических связей. Оставшийся супернатант инкубировали с анти-eNOS-антителом при 4°C в течение ночи, и иммунокомплексы осаждали добавлением 50 мкл гранул белка A/G при 4°C в течение 2 часов.Иммунопреципитированные комплексы или клеточные лизаты разделяли с помощью SDS-PAGE, переносили на нейлоновую мембрану и зондировали различными первичными антителами, как указано на рисунках и в подписях. Белки визуализировали детектированием хемилюминесценции.

Для количественной оценки фосфорилирования AMPK, Akt и eNOS мембрану исследовали анти-фосфо-антителами, специфичными к этим трем белкам, соответственно, а затем инкубировали с буфером для удаления (10% SDS, 0,1 М бета-меркаптоэтанол, и 1 М Трис-HCl pH 6.7) в течение 30 мин при 50°С. После промывки мембрану повторно зондировали анти-тотальной AMPK, eNOS или Akt. Относительную плотность полос определяли количественно с использованием программного пакета MultiAnalyst (Bio-Rad). Результаты выражали как количество фосфорилированных белков по отношению к общему количеству белков.

2.4 Измерение содержания оксида азота

HUVEC, выращенные в шестилуночных чашках (~90% слияния), выдерживали в бессывороточной среде в течение 4 часов. Клетки обрабатывали различными концентрациями берберина, растворенного в ДМСО.В каждую контрольную группу добавляли одинаковый объем ДМСО. Высвобождение NO определяли путем измерения уровней нитритов (NO ₂ ⁻ ) и нитратов (NO ₃ ⁻ ) с использованием анализатора оксида азота Sievers (Boulder, США), как описано. ¹⁵

2.5 Анализ адгезии моноцитов

клеток THP1 человека использовали для оценки адгезии моноцитов к эндотелиальным клеткам. HUVEC выращивали до слияния в 24-луночных планшетах, инкубировали с 5 или 30 мМ глюкозы и обрабатывали берберином или другими соединениями, как указано, в течение 48 часов.Клетки THP1 метили 1,5 мкМ кальцеина-АМ (Invitrogen, Калифорния, США) в течение 1 ч при 37°C в RPMI 1640, содержащем 1% FBS. Затем к HUVEC добавляли меченые клетки THP1 (10 ⁵ /100 мкл) и инкубировали в течение 1 ч при 37°C. После инкубации среду, содержащую моноциты, отсасывали, а монослой осторожно трижды промывали PBS для удаления несвязавшихся моноцитов. Адгезии к моноцитам определяли с помощью флуоресцентного микроскопа Olympus IX 81 с объективом 20×. Пять случайно выбранных полей были захвачены для каждого экспериментального условия.Количество прикрепившихся клеток THP1 подсчитывали с использованием программного обеспечения National Institutes of Health Image, и значения выражали в виде прикрепленных клеток на поле.

2.6 Анализ активации NF-

HUVEC выращивали до слияния в культуральных чашках диаметром 100 мм и затем инкубировали в течение 48 часов с 5 или 30 мМ глюкозы в присутствии берберина или различных ингибиторов, как указано. Ядерные и цитоплазматические экстракты готовили с использованием реагента для экстракции ядерного белка млекопитающих в соответствии с инструкциями производителя (Pierce, Rockford, IL, USA).Ядерный белок (30 мкг) разделяли на 12% SDS-PAGE, переносили на нейлоновую мембрану и исследовали моноклональным антителом против человеческого NF-κB (p65) для оценки количества белка. Активацию субъединицы р50 NF-κB определяли на 3 мкг экстрактов ядерных белков с использованием коммерческого набора (EZ-Detect Transcription Factor Kit; Pierce).

2.7 Количественная оценка экспрессии молекулы-1 адгезии сосудистых клеток на клеточной поверхности и молекулы-1 межклеточной адгезии

HUVEC, выращенных в 96-луночных планшетах, обрабатывали 3.7% формальдегид (рН 7,4), содержащий 0,1 М моногидрохлорида 1-лизина и 0,01 М натрия м -периодата. Уровни экспрессии молекулы сосудистой клеточной адгезии-1 (VCAM-1) и межклеточной молекулы адгезии-1 (ICAM-1) на клеточной поверхности количественно определяли с использованием in situ ELISA, как описано. ¹⁶

2.8 Подготовка кольца аорты

Все эксперименты были одобрены институциональными комитетами по этике исследований на животных. Исследование соответствует Руководству по уходу и использованию лабораторных животных, опубликованному Национальным институтом здравоохранения США (публикация NIH №85-23, пересмотрено в 1996 г.). Самцов крыс Sprague-Dawley (250–300 г) умерщвляли путем смещения шейных позвонков и обескровливали. Грудную часть аорты рассекали, удаляли прилипшие соединительные ткани и разрезали на кольцевые сегменты. Каждое кольцо подвешивали между двумя крючками из нержавеющей проволоки в 10-мл камерах для органов, заполненных раствором Кребса, который содержал (мМ): 119 NaCl, 4,7 KCl, 25 NaHCO ₃ , 2,5 CaCl ₂ , 1 MgCl ₂ , 1,2 KH ₂ PO ₄ и 11 d-глюкоза.Верхний провод был соединен с датчиком силы-перемещения (Grass Instruments, Род-Айленд, США), а нижний прикреплен к дну органной ванны. Раствор для купания насыщали кислородом с помощью 95% O ₂ и 5% CO ₂ и поддерживали при 37°C (pH 7,4). Кольца помещали под оптимальное натяжение в состоянии покоя 15 мН и давали им уравновеситься в течение 90 минут. В некоторых кольцах эндотелиальный слой был механически разрушен путем осторожного растирания поверхности просвета артерии, и удаление эндотелия было подтверждено отсутствием релаксации в ответ на 1 мкМ ацетилхолина (данные не показаны).

2.9 Изометрическое измерение силы

Все кольца сначала сокращались с помощью 1 мкМ фенилэфрина (для оценки сократимости), а затем расслаблялись до 1 мкМ АХ (для оценки целостности эндотелия). Устойчивое сокращение индуцировали 1 или 0,3 мкМ фенилэфрина в кольцах с эндотелием или без него, а затем кумулятивно добавляли берберин, чтобы вызвать релаксацию. В экспериментах по изучению роли происходящего из эндотелия NO и роли AMPK кольца сначала подвергались воздействию 100 мкМ l-NAME или 5 мкМ соединения C соответственно в течение 30 минут, а затем сокращались с помощью фенилэфрина.Затем берберин применяли кумулятивно. Влияние транспортного средства также было проверено. Подробный метод функционального исследования аорты мышей можно найти в дополнительных онлайн-материалах.

2.10 Определение содержания циклического гуанозинмонофосфата

кольца аорты инкубировали с берберином и/или соединением С, как описано выше. По окончании инкубации их быстро замораживали в жидком азоте, а затем переносили в 1 мл 80%-ного этанола. Пробы гомогенизировали этанолом и инкубировали 30 мин при 4°С.Образцы, содержащие этанол, высушивали в токе азота при 60°C, а высушенный экстракт растворяли в аналитическом буфере для количественного определения содержания циклического гуанозинмонофосфата (цГМФ) с использованием коммерческого набора Amersham Biosciences (Уппсала, Швеция). . Количество цГМФ в каждом кольце грудной аорты стандартизировали по фмоль цГМФ мг ^-1 белка.

2.11 Анализ данных

Данные представлены как среднее значение ± стандартная ошибка среднего, а n относится к количеству исследованных образцов.Параллельно исследовали несколько колец, изготовленных из одной и той же артерии, и в каждом кольце при разных обработках строили две последовательные кривые кумулятивной зависимости концентрация-реакция для ацетилхолина. Кривые были проанализированы с помощью нелинейной аппроксимации кривых с использованием программного обеспечения Graphpad (версия 3.0), а статистическая разница между кривыми была проанализирована с помощью двустороннего дисперсионного анализа с последующим пост-тестом Бонферрони. Определяли отрицательный логарифм концентрации, вызывающей половину (pIC ₅₀ ) максимальной релаксации. P — значения <0,05 расценивались как указывающие на статистически значимое различие.

3. Результаты

3.1 Берберин индуцирует активацию эндотелиальной синтазы оксида азота и продукцию оксида азота посредством активации протеинкиназы, активируемой аденозинмонофосфатом

Берберин увеличивал фосфорилирование eNOS в месте активации (Ser ¹¹⁷⁷ ) этого фермента в зависимости от времени и концентрации ( Рисунок 1A – D ).Через шестьдесят минут после обработки 25 мкМ берберина фосфорилирование eNOS в Ser ¹¹⁷⁷ увеличилось в 2,8 раза по сравнению с исходным уровнем, тогда как экспрессия общего eNOS осталась неизменной. Ко-иммунопреципитационный анализ показал, что обработка клеток берберином усиливала взаимодействие между eNOS и HSP90 ( Рисунок 1E ), что является важным шагом для максимальной активации активности eNOS. ¹⁷ Продукция NO из HUVEC также была значительно повышена после стимуляции берберином (, рисунок 1F, ).Этот стимулирующий эффект берберина на выработку NO был устранен при предварительной инкубации HUVEC с ингибитором eNOS l-NAME, что указывает на то, что повышенное высвобождение NO берберином зависит от eNOS.

Рисунок 1

Влияние берберина на фосфорилирование eNOS, взаимодействие между HSP90 и eNOS и на продукцию NO в эндотелиальных клетках. HUVEC стимулировали различными концентрациями берберина ( A и B ) в течение 60 минут или 25 мкМ берберина в течение разных периодов, как указано ( C и D ).Методом вестерн-блоттинга анализировали фосфорилирование eNOS по Ser ¹¹⁷⁹ (p-eNOS) и уровень общего белка eNOS (T-eNOS) в лизатах клеток. ( E ) Клетки обрабатывали без берберина или с различными концентрациями в течение 60 минут. Лизаты клеток подвергали иммунопреципитации с использованием антитела против eNOS. Иммунопреципитированные комплексы разделяли с помощью SDS-PAGE и зондировали антителами против HSP90 или eNOS, как указано. ( F ) Продукцию NO в отсутствие (черная полоса) или в присутствии (пустая полоса) l-NAME измеряли и выражали как кратность по сравнению с контрольными клетками, обработанными без берберина.Черная полоса: * P < 0,05; ** P < 0,01 по сравнению с контролем ( n = 4–6).

Рисунок 1

Влияние берберина на фосфорилирование eNOS, взаимодействие между HSP90 и eNOS и на продукцию NO в эндотелиальных клетках. HUVEC стимулировали различными концентрациями берберина ( A и B ) в течение 60 минут или 25 мкМ берберина в течение разных периодов, как указано ( C и D ). Методом вестерн-блоттинга анализировали фосфорилирование eNOS по Ser ¹¹⁷⁹ (p-eNOS) и уровень общего белка eNOS (T-eNOS) в лизатах клеток.( E ) Клетки обрабатывали без берберина или с различными концентрациями в течение 60 минут. Лизаты клеток подвергали иммунопреципитации с использованием антитела против eNOS. Иммунопреципитированные комплексы разделяли с помощью SDS-PAGE и зондировали антителами против HSP90 или eNOS, как указано. ( F ) Продукцию NO в отсутствие (черная полоса) или в присутствии (пустая полоса) l-NAME измеряли и выражали как кратность по сравнению с контрольными клетками, обработанными без берберина. Черная полоса: * P < 0.05; ** P < 0,01 по сравнению с контролем ( n = 4–6).

Обработка HUVEC берберином вызывала фосфорилирование α-каталитической субъединицы AMPK в месте ее активации (Thr ¹⁷² ) в зависимости от времени и концентрации ( Рисунок 2 ). Напротив, это соединение не влияло на фосфорилирование Akt ни в одном из двух его сайтов активации (Ser ⁴⁷³ или Thr ³⁰⁸ ). Кроме того, берберин не изменял внутриклеточные уровни цАМФ в HUVEC (данные не представлены).

Рисунок 2

Влияние берберина на фосфорилирование AMPK и Akt в местах их активации в HUVEC. Клетки инкубировали с различными концентрациями берберина в течение 60 минут ( A и B ) или с 25 мкМ берберина в течение различных периодов, как указано ( C и D ). Клеточные лизаты разделяли с помощью SDS-PAGE и исследовали с помощью антител против фосфорилированной или против тотальной AMPK или Akt, как указано. * Р < 0.05; ** P < 0,01 по сравнению с контролем ( n = 3–5).

Рисунок 2

Влияние берберина на фосфорилирование AMPK и Akt в местах их активации в HUVEC. Клетки инкубировали с различными концентрациями берберина в течение 60 минут ( A и B ) или с 25 мкМ берберина в течение различных периодов, как указано ( C и D ). Клеточные лизаты разделяли с помощью SDS-PAGE и исследовали с помощью антител против фосфорилированной или против тотальной AMPK или Akt, как указано.* Р < 0,05; ** P < 0,01 по сравнению с контролем ( n = 3–5).

Предварительная обработка HUVEC соединением C (селективным ингибитором AMPK) блокировала индуцированное берберином фосфорилирование eNOS по Ser ¹¹⁷⁷ и его взаимодействие с HSP90, что, следовательно, приводило к заметному снижению продукции NO ( Рисунок 3 ). В клетках, инфицированных рекомбинантным аденовирусом, кодирующим люциферазу (в качестве контроля), берберин по-прежнему индуцировал фосфорилирование eNOS по Ser ¹¹⁷⁷ , усиливал взаимодействие eNOS-HSP90 и увеличивал эндотелиальную продукцию NO.Напротив, эти эффекты берберина были устранены после опосредованной аденовирусом экспрессии доминантно-негативной версии Myc-меченой AMPK (DN AMPK) ¹⁵ ( Рисунок 3 ). Ингибитор Akt SH-5 и ингибитор протеинкиназы A (PKA) H89 не влияли на индуцированное берберином фосфорилирование eNOS, взаимодействие eNOS-HSP90 и продукцию NO.

Рисунок 3

Вызванная берберином активация eNOS и высвобождение NO ослаблялись ингибированием AMPK, но не Akt и PKA в HUVEC.Клетки предварительно обрабатывали соединением-ингибитором AMPK C (CC, 1 мкМ), ингибитором Akt SH-5 (5 мкМ), ингибитором PKA H89 (1 мкМ) в течение 30 мин или инфицировали рекомбинантным аденовирусом, экспрессирующим люциферазу (Luc), или доминантно-негативную версию (DN) AMPK в течение 24 часов, а затем обрабатывали 25 мкМ берберина в течение еще одного часа. Фосфорилирование eNOS по Ser ¹¹⁷⁷ ( A ) и взаимодействие между eNOS и HSP90 ( B ) и продукцию NO ( C ) определяли, как в Рисунок 1 .** P < 0,01 ( n = 4–5).

Рисунок 3

Вызванная берберином активация eNOS и высвобождение NO ослаблялись ингибированием AMPK, но не Akt и PKA в HUVEC. Клетки предварительно обрабатывали соединением-ингибитором AMPK C (CC, 1 мкМ), ингибитором Akt SH-5 (5 мкМ), ингибитором PKA H89 (1 мкМ) в течение 30 мин или инфицировали рекомбинантным аденовирусом, экспрессирующим люциферазу (Luc), или доминантно-негативную версию (DN) AMPK в течение 24 часов, а затем обрабатывали 25 мкМ берберина в течение еще одного часа.Фосфорилирование eNOS по Ser ¹¹⁷⁷ ( A ) и взаимодействие между eNOS и HSP90 ( B ) и продукцию NO ( C ) определяли, как в Рисунок 1 . ** P < 0,01 ( n = 4–5).

3.2 Берберин снижает индуцированное гипергликемией внутриклеточное накопление активных форм кислорода и клеточный апоптоз через сигнальный путь активируемой аденозинмонофосфатом протеинкиназы/эндотелиальной синтазы оксида азота

Внутриклеточная концентрация DCF-чувствительных АФК в HUVECs была увеличена примерно в 2 раза.5-кратное увеличение после инкубации с высоким содержанием глюкозы (30 мМ) по сравнению с 5 мМ глюкозой (, фигура 4A, ). Обработка клеток берберином приводила к заметному снижению индуцированного высоким содержанием глюкозы внутриклеточного образования АФК. Ингибирующее действие берберина на образование АФК было ослаблено в клетках, предварительно обработанных ингибитором AMPK соединением C или аденовирус-опосредованной экспрессией DN AMPK, но не ингибитором Akt SH-5 и/или ингибитором PKA H89. ПЦР-анализ в реальном времени и анализ активности ферментов показали, что берберин не влияет ни на экспрессию, ни на активность нескольких ключевых ферментов, участвующих в антиоксидантной защите, включая глутатионпероксидазу, каталазу и супероксиддисмутазу (данные не представлены).Кроме того, берберин не оказывал явного влияния на экспрессию двух мембранных субъединиц (p22 ^phox и gp91 ^phox ) или трех цитозольных субъединиц (p47 ^phox , p67 ^phox и Rac-1) НАД(Ф)Н-оксидазы и не изменяет внутриклеточную локализацию этого фермента (данные не представлены).

Рисунок 4

Ингибирующее действие берберина на накопление АФК и апоптоз, вызванное высоким содержанием глюкозы, зависит от AMPK.HUVEC, выращенные в среде с низким содержанием глюкозы (5 мМ, пустой столбец), с низким содержанием глюкозы + 25 мМ манитола (серый столбец), с высоким содержанием глюкозы (30 мМ, черный столбец), предварительно обрабатывали 1 мкМ соединения C (CC) в течение 30 минут или инфицировали рекомбинантный аденовирус, экспрессирующий люциферазу (Luc) или доминантно-негативную (DN) AMPK в течение 24 часов, а затем обработанный берберином еще в течение 36 часов. ( A ) Генерация внутриклеточных DCF-чувствительных АФК в HUVEC; ( B ) уровни апоптоза, определяемые фрагментацией ДНК. * Р < 0,05; ** Р < 0.01 ( n = 5–6).

Рисунок 4

Ингибирующее действие берберина на накопление АФК и апоптоз, вызванное высоким содержанием глюкозы, зависит от AMPK. HUVEC, выращенные в среде с низким содержанием глюкозы (5 мМ, пустой столбец), с низким содержанием глюкозы + 25 мМ манитола (серый столбец), с высоким содержанием глюкозы (30 мМ, черный столбец), предварительно обрабатывали 1 мкМ соединения C (CC) в течение 30 минут или инфицировали рекомбинантный аденовирус, экспрессирующий люциферазу (Luc) или доминантно-негативную (DN) AMPK в течение 24 часов, а затем обработанный берберином еще в течение 36 часов.( A ) Генерация внутриклеточных DCF-чувствительных АФК в HUVEC; ( B ) уровни апоптоза, определяемые фрагментацией ДНК. * Р < 0,05; ** P < 0,01 ( n = 5–6).

После воздействия на HUVEC высокой концентрации глюкозы (30 мМ) в течение 72 часов процент апоптоза, оцененный по фрагментации ДНК, увеличился на 62% по сравнению с клетками, обработанными 5 мМ глюкозой и 25 мМ маннитом (в качестве осмотического контроля) ( Рисунок 4B ).Величина увеличения индуцированного высоким содержанием глюкозы повышения уровня апоптоза была значительно ослаблена после лечения берберином. Этот защитный эффект берберина на клеточный апоптоз ослаблялся соединением С, доминантно-негативной версией AMPK, и частично ингибировался l-NAME.

3.3 Вызванная берберином активация аденозинмонофосфат-активируемой протеинкиназы и продукция оксида азота участвуют в ингибировании адгезии моноцитов к эндотелиальным клеткам

Высокий уровень глюкозы вызвал ∼4.5-кратное увеличение числа клеток моноцитов THP1, связывающихся с HUVEC (, фигура 5A, и , B, ), что было связано со значительным повышением активации NF-kB (, фигура, 5C, и , фигура 5C, ) и экспрессии молекул адгезии, включая VCAM-1 и ICAM-1 (, рисунок 5E, и , F, ). Лечение берберином снижало индуцированную глюкозой высокую активацию NF-κB и экспрессию двух молекул адгезии, что приводило к значительному уменьшению количества прикрепленных моноцитов THP1 на HUVEC.Ингибирующее действие берберина на индуцированную высоким содержанием глюкозы активацию NF-κB, экспрессию молекул адгезии и адгезию моноцитов к эндотелиальным клеткам устранялось соединением С, но лишь частично обращалось вспять под действием l-NAME.

Рисунок 5

Влияние берберина на адгезию моноцитов, индуцированную высоким уровнем глюкозы, активацию NF-κB и экспрессию молекул адгезии в HUVEC. Клетки инкубировали только с 5 мМ глюкозой (а), 5 мМ глюкозой + 25 мМ манитола (b), 30 мМ глюкозой (с), 30 мМ глюкозой + 25 мкМ берберина (d), 30 мМ глюкозой + 25 мкМ берберином и 1 мкМ соединения C (e), 30 мМ глюкозы + 25 мкМ берберина и 100 мкМ l-NAME (f) в течение 48 часов.( A ) Репрезентативные микрофотографии моноцитов, прикрепленных к эндотелиальным клеткам. Анализ адгезии проводили, как описано в разделе «Методы». ( B ) Данные количественного определения моноцитов, прикрепленных к HUVEC. (C) Репрезентативный блот для экспрессии NF-κB (p65) в ядерных экстрактах. ( D ) Активность связывания NF-kB p50, измеренная с помощью ELISA. ( E и F ) Экспрессия VCAM-1 и ICAM-1 на клеточной поверхности. * Р < 0,05; ** Р < 0.01 ( n = 4–6).

Рисунок 5

Влияние берберина на адгезию моноцитов, индуцированную высоким уровнем глюкозы, активацию NF-κB и экспрессию молекул адгезии в HUVEC. Клетки инкубировали только с 5 мМ глюкозой (а), 5 мМ глюкозой + 25 мМ манитола (b), 30 мМ глюкозой (с), 30 мМ глюкозой + 25 мкМ берберина (d), 30 мМ глюкозой + 25 мкМ берберином и 1 мкМ соединения C (e), 30 мМ глюкозы + 25 мкМ берберина и 100 мкМ l-NAME (f) в течение 48 часов. ( A ) Репрезентативные микрофотографии моноцитов, прикрепленных к эндотелиальным клеткам.Анализ адгезии проводили, как описано в разделе «Методы». ( B ) Данные количественного определения моноцитов, прикрепленных к HUVEC. (C) Репрезентативный блот для экспрессии NF-κB (p65) в ядерных экстрактах. ( D ) Активность связывания NF-kB p50, измеренная с помощью ELISA. ( E и F ) Экспрессия VCAM-1 и ICAM-1 на клеточной поверхности. * Р < 0,05; ** P < 0,01 ( n = 4–6).

ПЦР-анализ в реальном времени показал, что берберин также подавлял высокий уровень глюкозы, индуцированный повышением уровня нескольких провоспалительных цитокинов и хемокинов, включая TNFα, IL1β, IL8 и MCP1, все из которых являются хорошо известными мишенями NF-κB ( Дополнительный материал онлайн, рисунок S1).

3.4 Берберин стимулирует расширение сосудов и предотвращает повреждение сосудов аорты крыс, вызванное высоким содержанием глюкозы

Чтобы продемонстрировать физиологическую значимость вышеуказанных результатов, было исследовано влияние берберина на активацию AMPK/eNOS и NO-зависимую вазодилатацию в изолированных кольцах аорты крыс. В соответствии с выводами, полученными в HUVEC, берберин индуцировал фосфорилирование AMPK по Thr ¹⁷² и eNOS по Ser ¹¹⁷⁷ и повышал уровни цГМФ в изолированной аорте крысы (, рисунок 6A, и , B ).Эти эффекты уменьшались при предварительной инкубации с соединением C.

Рисунок 6

Влияние берберина на фосфорилирование AMPK и eNOS, уровни цГМФ и вазорелаксацию в изолированной аорте крысы. Кольца аорты крыс инкубировали с берберином (BBR) в диапазоне концентраций 0,1–10 мкМ в присутствии или в отсутствие соединения C (CC) в течение 1 часа. Экстракты тканей подвергали вестерн-блот-анализу на фосфо и общую AMPK или eNOS, как указано ( А ).Концентрации цГМФ в экстрактах тканей определяли иммуноанализом ( В ). * Р < 0,05; ** P <0,01 по сравнению с контрольной группой или группой, получавшей берберин + соединение С ( n = 5–6). ( C и D ) Расслабляющий эффект берберина ослаблялся путем обработки I-NAME, ODQ или соединения C в аорте с эндотелием или путем удаления функционального эндотелия. Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для семи отдельных экспериментов в каждой группе.

Рисунок 6

Влияние берберина на фосфорилирование AMPK и eNOS, уровни цГМФ и вазорелаксацию в изолированной аорте крысы.Кольца аорты крыс инкубировали с берберином (BBR) в диапазоне концентраций 0,1–10 мкМ в присутствии или в отсутствие соединения C (CC) в течение 1 часа. Экстракты тканей подвергали вестерн-блот-анализу на фосфо и общую AMPK или eNOS, как указано ( А ). Концентрации цГМФ в экстрактах тканей определяли иммуноанализом ( В ). * Р < 0,05; ** P <0,01 по сравнению с контрольной группой или группой, получавшей берберин + соединение С ( n = 5–6). ( C и D ) Расслабляющий эффект берберина ослаблялся путем обработки I-NAME, ODQ или соединения C в аорте с эндотелием или путем удаления функционального эндотелия.Данные представляют собой среднее значение ± стандартная ошибка среднего для семи отдельных экспериментов в каждой группе.

В фенилэфрин-сокращенных кольцах с эндотелием берберин вызывал зависимое от концентрации расслабление с pIC ₅₀ 5,66 ± 0,04. В соответствии с нашим предыдущим исследованием, ¹⁸ удаление эндотелия привело к частичному уменьшению вызываемой берберином вазорелаксации ( рис. 6C и D , см. независимые механизмы связаны с сосудорасширяющим эффектом этого соединения.Лечение 100 мкМ l-NAME или 3 мкМ ¹ H-[1,2,4]оксадизоло[4,3-а]хиноксалин-1-она (ODQ, ингибитор гуанилатциклазы) ослабляло индуцированное берберином расслабление до сопоставимого степени, как при удалении эндотелия. Соединение С в концентрации 5 мкМ оказывает такое же ингибирующее действие на расслабление, вызванное берберином, как l-NAME или ODQ.

Как и в аортах крыс, индуцированное берберином расслабление аорты мышей значительно ингибировалось 100 мкМ l-NAME или эндотелиальной денудацией ( Рисунок 7A ), а расслабление ингибировалось 5 мкМ соединения C ( Рисунок 7B , см. Дополнительный материал онлайн, таблица S2).Воздействие (36 ч) на аорты мышей высокой концентрации глюкозы, но не маннита, нарушало индуцированную ацетилхолином эндотелийзависимую релаксацию, которая могла быть в значительной степени ингибирована 0,5 мкМ берберина (, рисунок 7C, и , D , см. дополнительный онлайн-материал, таблица S3). . Соединение C в концентрации 5 мкМ предотвращало действие берберина на облегчение индуцированного высоким содержанием глюкозы нарушения эндотелийзависимой вазодилатации (, рисунок 7D , см. дополнительный онлайн-материал, таблица S3). Инкубация с 0.5 мкМ берберина не влияли на сокращение, вызванное фенилэфрином (см. Дополнительный онлайн-материал, рисунок S2).

Рисунок 7

Влияние берберина на вазорелаксацию колец аорты мыши в условиях нормального и высокого уровня глюкозы. ( A и B ) Расслабляющее действие берберина на аорты мышей ослаблялось обработкой 100 мкМ l-NAME или удалением эндотелия или 5 мкМ соединения С соответственно. ( C ) Индуцированное ацетилхолином расслабление аорты мышей было нарушено хроническим воздействием (36 часов) высоким содержанием глюкозы (HG), но не маннитолом.( D ) Расслабление, вызванное ацетилхолином, в условиях высокого уровня глюкозы улучшалось при 0,5 мкМ берберина (BBR), тогда как этот эффект берберина устранялся 5 мкМ соединения C (CC). НГ, нормальная глюкоза. Данные являются средними значениями ± SEM для 6–10 экспериментов.

Рисунок 7

Влияние берберина на вазорелаксацию колец аорты мыши при нормальном и высоком уровне глюкозы. ( A и B ) Расслабляющее действие берберина на аорты мышей ослаблялось обработкой 100 мкМ l-NAME или удалением эндотелия или 5 мкМ соединения С соответственно.( C ) Индуцированное ацетилхолином расслабление аорты мышей было нарушено хроническим воздействием (36 часов) высоким содержанием глюкозы (HG), но не маннитолом. ( D ) Расслабление, вызванное ацетилхолином, в условиях высокого уровня глюкозы улучшалось при 0,5 мкМ берберина (BBR), тогда как этот эффект берберина устранялся 5 мкМ соединения C (CC). НГ, нормальная глюкоза. Данные являются средними значениями ± SEM для 6–10 экспериментов.

4. Обсуждение

Хотя как клинические исследования, так и исследования на животных демонстрируют терапевтический потенциал берберина для лечения гипертонии, атеросклероза и сердечных заболеваний, ^10–12,14 основной механизм остается неясным.Настоящее исследование предоставляет как in vitro , так и ex vivo доказательства, показывающие, что сердечно-сосудистая защита берберином опосредована, по крайней мере частично, его активацией AMPK. Берберин противодействует нескольким неблагоприятным эффектам гипергликемии на эндотелий, включая ингибирование накопления АФК, вызванного высоким содержанием глюкозы, и клеточного апоптоза, что является признаком повреждения сосудов. Кроме того, это алкалоидное соединение подавляет высокую активацию NF-κB, опосредованную глюкозой, экспрессию молекул адгезии и адгезию моноцитов к эндотелиальным клеткам, что является ключевым событием на ранних стадиях атеросклероза. ⁵ Эти результаты in vitro дополнительно подтверждаются нашим наблюдением ex vivo , согласно которому берберин защищает индуцированное высоким уровнем глюкозы нарушение эндотелийзависимой вазодилатации в аорте мыши. Эти данные свидетельствуют о том, что берберин может быть полезен для предотвращения сосудистых дисфункций, связанных с ожирением и диабетом.

Несколько протеинкиназ, включая AMPK, Akt и PKA, были идентифицированы как киназы выше eNOS путем фосфорилирования eNOS в месте ее активации (Ser ¹¹⁷⁷ ). ¹⁷ Настоящее исследование демонстрирует, что опосредованное берберином фосфорилирование eNOS, продукция NO и цГМФ и эндотелий-зависимая вазодилатация устраняются фармакологическим или генетическим ингибированием AMPK. Напротив, фармакологические ингибиторы Akt или PKA мало влияют на действие этого алкалоидного соединения на эндотелий. Эти результаты подчеркивают центральную роль AMPK в опосредовании эндотелиальной продукции NO и вазодилатации, вызванной берберином.

AMPK — это датчик клеточной энергии, который играет центральную роль в регулировании гомеостаза глюкозы и чувствительности к инсулину. Несколько исследований на животных демонстрируют, что антидиабетические эффекты метформина ^19,20 опосредованы, по крайней мере частично, активацией AMPK. В дополнение к его полезным метаболическим эффектам, все больше данных свидетельствует о том, что AMPK является важным регулятором сосудистого гомеостаза. ²¹ ряд агентов и факторов с сердечно-сосудистыми преимуществами, включая статус, ²² resveratrol, ²³ Metformin, ²³ Metformin, ²⁴ PPARγ-агонисты тиазолидин, ²⁵ Агонист PPARα фенофибрат, ²⁶ Estradiol, ²⁷ Было показано, что α-липоевая кислота, ²⁸ липопротеин высокой плотности, ²⁹ адипонектин, ^15,30,31 и VEGF, ^32,33 индуцируют активацию AMPK в эндотелиальных клетках.Помимо своей роли прямой восходящей киназы, опосредующей фосфорилирование eNOS в ее сайте активации, AMPK также усиливает активность eNOS, способствуя образованию комплекса между eNOS и HSP90, что является важным шагом, необходимым для максимальной активации eNOS. ^15,27

В дополнение к увеличению активности eNOS и продукции NO активация AMPK оказывает несколько других дополнительных полезных эффектов на эндотелий, таких как подавление продукции АФК, индуцированной гипергликемией, путем стимуляции митохондриального биогенеза ³⁴ и ингибирования НАД( P)H-оксидазная активность, ³⁵ снижение липотоксичности, вызванной свободными жирными кислотами, ³⁶ ингибирование TNFα-индуцированной активации NF-kB, ³⁷ и защита эндотелиальных клеток от апоптоза. ^31,38 В соответствии с этими наблюдениями настоящее исследование показывает, что подавляющее действие берберина на индуцированное гипергликемией накопление АФК, апоптоз и воспаление эндотелия также зависит от активации AMPK. Взятые в совокупности, эти результаты предполагают обязательную роль AMPK в обеспечении действия берберина на эндотелий и дополнительно подтверждают мнение о том, что активация AMPK с помощью фармакологических вмешательств может представлять собой новую терапевтическую стратегию для лечения эндотелиальной дисфункции.Примечательно, что l-NAME не влияет на способность берберина уменьшать индуцированное гипергликемией накопление АФК и вызывает лишь частичное снижение опосредованного берберином подавления индуцированного гипергликемией NF-κB и адгезии моноцитов, что свидетельствует о том, что активация AMPK берберином ингибирует гипергликемию. индуцировал выработку АФК и воспаление в эндотелии посредством механизма, независимого от его влияния на продукцию NO. Действительно, наш анализ профиля генов показывает, что берберин увеличивает экспрессию митохондриального разобщающего белка 2 (UCP2) (W.Y. и X.A., неопубликованные результаты), хорошо зарекомендовавший себя антиоксидант за счет ингибирования продукции АФК в митохондриях. ³⁹ Примечательно, что недавний отчет показывает, что как антидиабетический препарат метформин, так и AICAR ослабляют индуцированный гипергликемией окислительный стресс в эндотелии посредством AMPK-зависимой активации UCP2 in vitro и in vivo . ⁴⁰ Таким образом, возможно, что подавляющее действие берберина на накопление АФК, вызванное гипергликемией, опосредовано, по крайней мере частично, за счет индукции экспрессии этого антиоксидантного белка.

Две восходящие киназы, включая LKB1 и кальций/кальмодулин-зависимую киназу β, вовлечены в фосфорилирование субъединицы AMPK α в Thr ¹⁷² . ²¹ Однако недавнее исследование показывает, что активация AMPK берберином не зависит ни от одной из этих двух вышестоящих киназ. ⁷ Примечательно, что берберин ингибирует дыхание митохондрий, ингибируя активность дыхательного комплекса I в мышечной трубке L6, что, в свою очередь, активирует AMPK, повышая соотношение AMP/ATP. ^7,8 Ингибирование дыхания митохондрий берберином напоминает наблюдаемое при метформине ⁴¹ и розиглитазоне. ⁴² Однако, в отличие от метформина, ⁴² фармакологические ингибиторы PI-3-киназы не влияют на активацию AMPK берберином (W.Y. и X.A., неопубликованные результаты), что позволяет предположить, что эти два препарата активируют AMPK посредством различных механизмов. Точные механизмы, посредством которых берберин активирует AMPK, еще предстоит выяснить.

В дополнение к своему эндотелийзависимому действию берберин также усиливает эндотелийнезависимую дилатацию гладкой мускулатуры сосудов и ингибирует эндотелийнезависимое сокращение, индуцированное фенилэфрином. ¹⁸ Наше предыдущее исследование показало, что независимая от эндотелия вазодилатация берберином может быть связана с его действием на ингибирование высвобождения кальция и активацию калиевых каналов. ¹⁸ Лечение предполагаемыми блокаторами калиевых каналов, такими как ионы тетрапентиламмония и 4-аминопиридин, приводит к значительному ослаблению вызванной берберином вазодилатации в артериях с обнаженным эндотелием. Интересно, что недавнее исследование показывает, что AMPK активирует каналы KATP, ⁴³ , которые также являются важным модулятором вазодилатации.Необходимы дальнейшие исследования, чтобы выяснить, играет ли AMPK-зависимая активация калиевых каналов роль в вызванной берберином вазодилатации.

Помимо благотворного воздействия на эндотелий, некоторые другие фармакологические свойства берберина могут способствовать защите сердечно-сосудистой системы, обеспечиваемой этим соединением. Как у грызунов, так и у пациентов с диабетом II типа берберин эффективно снижает гипергликемию и гиперлипидемию, а также снижает резистентность к инсулину. ^6–8 У пациентов с гиперхолестеринемией берберин снижает уровень холестерина в сыворотке за счет увеличения экспрессии печеночного рецептора липопротеинов низкой плотности, ⁴⁴ , и, следовательно, снижает традиционный метаболический риск сердечно-сосудистых заболеваний.Кроме того, берберин ослабляет образование неоинтимы, ингибируя пролиферацию гладкой мускулатуры сосудов. ¹⁴ Эти результаты вместе с наблюдениями настоящего исследования повышают вероятность того, что берберин или его более биологически доступные производные ⁷ могут быть полезны для лечения и профилактики эндотелиальной дисфункции, связанной с ожирением и диабетом.

Дополнительный материал

доступен в Интернете на веб-сайте исследования сердечно-сосудистых заболеваний.

Конфликт интересов: Не объявлено.

Финансирование

Эта работа была поддержана Гонконгским советом по исследовательским грантам (HKU 7645/06M для AX и CUHK 4653/08 для YH) и Фондом совместных исследований (HKU 2/07C), премией для выдающихся молодых исследователей Университета Гонконга (для AX ).

Каталожные номера

Эндотелиальная дисфункция: многогранное заболевание

291

H985

h2002

Эндотелиальная синтаза оксида азота при сосудистых заболеваниях: от чудес к угрозе

Циркуляция

2006

113

1708

1714

Эндотелиальная синтаза оксида азота и эндотелиальная дисфункция

Curr Hypertens Rep

2003

5

473

480

Реципрокные отношения между резистентностью к инсулину и дисфункцией эндотелия: молекулярные и патофизиологические механизмы

113

1888

1904

Механизмы заболевания: эндотелиальная дисфункция при инсулинорезистентности и диабете

3

46

56

Лечение диабета 2 типа и дислипидемии натуральным растительным алкалоидом берберином

J Clin Endocrinol Metab

2008

93

2559

2565

Берберин и его более биологически доступное производное, дигидроберберин, ингибируют митохондриальный дыхательный комплекс I: механизм действия берберина по активации АМФ-активируемой протеинкиназы и улучшению действия инсулина

57

1414

1418

Берберин улучшает метаболизм глюкозы за счет индукции гликолиза.

294

E148

E156

Берберин, натуральный растительный продукт, активирует АМФ-активированную протеинкиназу с благоприятными метаболическими эффектами при диабете и резистентности к инсулину

55

2256

2264

Эффективность и безопасность берберина при застойной сердечной недостаточности, вторичной по отношению к ишемической или идиопатической дилатационной кардиомиопатии

92

173

176

Влияние берберина на сердечно-сосудистую систему у пациентов с тяжелой застойной сердечной недостаточностью

11

253

260

Вызванная берберином мобилизация циркулирующих эндотелиальных клеток-предшественников улучшает эластичность мелких артерий человека

22

389

393

Антигипертензивный эффект производного берберина 6-протоберберина у крыс со спонтанной гипертензией

59

283

289

Берберин ингибирует пролиферацию и миграцию гладкомышечных клеток сосудов крыс in vitro и улучшает образование неоинтимы после повреждения баллоном in vivo . Берберин улучшает образование неоинтимы у крыс модели

Атеросклероз

2006

186

29

37

Индуцированная адипонектином активация эндотелиальной синтазы оксида азота и продукция оксида азота опосредуются APPL1 в эндотелиальных клетках

56

1387

1394

Лактозилцерамид опосредует экспрессию индуцированной фактором некроза опухоли-альфа молекулы межклеточной адгезии-1 (ICAM-1) и адгезию нейтрофилов в эндотелиальных клетках пупочной вены человека

273

34349

34357

Регуляция эндотелиального и миокардиального синтеза NO путем многосайтового фосфорилирования eNOS

42

271

279

Вазорелаксантное и антипролиферативное действие берберина

Eur J Pharmacol

2000

399

187

196

Киназа LKB1 опосредует гомеостаз глюкозы в печени и терапевтические эффекты метформина

Science

2005

310

1642

1646

Роль AMP-активируемой протеинкиназы в механизме действия метформина

J Clin Invest

2001

108

1167

1174

Активация АМФ-активируемой протеинкиназы как стратегия защиты эндотелиальной функции сосудов

35

535

545

Статины активируют AMP-активированную протеинкиназу in vitro и in vivo

Циркуляция

2006

114

2655

2662

Полифенолы стимулируют АМФ-активируемую протеинкиназу, снижают уровень липидов и ингибируют ускоренный атеросклероз у мышей с диабетом и дефицитом рецепторов ЛПНП

55

2180

2191

Активация АМФ-активируемой киназы противодиабетическим препаратом метформином стимулирует синтез оксида азота in vivo путем содействия ассоциации белка теплового шока 90 и эндотелиальной синтазы оксида азота

Диабет

2006

55

496

505

Тиазолидиндионы могут быстро активировать AMP-активированную протеинкиназу в тканях млекопитающих

291

E175

E181

Фенофибрат активирует AMPK и увеличивает фосфорилирование eNOS в HUVEC.

341

973

978

Эстрадиол-опосредованная ассоциация эндотелиальной синтазы оксида азота с белком теплового шока 90 требует аденозинмонофосфат-зависимой протеинкиназы

111

3473

3480

Альфа-липоевая кислота предотвращает дисфункцию эндотелия у крыс с ожирением посредством активации АМФ-активируемой протеинкиназы

25

2488

2494

Липопротеин высокой плотности и аполипопротеин AI повышают активность эндотелиальной NO-синтазы за счет белковой ассоциации и многосайтового фосфорилирования.

101

6999

7004

Адипонектин стимулирует выработку оксида азота эндотелиальными клетками сосудов

J Biol Chem

2003

278

45021

45026

Селективное подавление апоптоза эндотелиальных клеток высокомолекулярной формой адипонектина

Circ Res

2004

94

e27

e31

Модулируемая агонистом регуляция AMP-активируемой протеинкиназы (AMPK) в эндотелиальных клетках. Доказательства пути AMPK -> Rac1 -> Akt -> эндотелиальная синтаза оксида азота

J Biol Chem

2007

282

20351

20364

АМФ-активируемая протеинкиназа опосредует VEGF-стимулируемую эндотелиальную продукцию NO

354

1084

1088

Активация АМФ-активируемой протеинкиназы снижает индуцированную гипергликемией выработку митохондриальными активными формами кислорода и способствует митохондриальному биогенезу в эндотелиальных клетках пупочной вены человека

55

120

127

Розиглитазон снижает индуцированный глюкозой окислительный стресс, опосредованный NAD(P)H-оксидазой, посредством AMPK-зависимого механизма

27

2627

2633

Активация AMPK как стратегия обращения эндотелиальной липотоксичности, лежащей в основе повышенного сосудистого риска, связанного с синдромом резистентности к инсулину

64

1211

1215

Метформин ингибирует индуцированную цитокинами активацию ядерного фактора kappaB посредством активации АМФ-активируемой протеинкиназы в эндотелиальных клетках сосудов

47

1183

1188

Индуцированный гипергликемией апоптоз в эндотелиальных клетках пупочной вены человека: ингибирование активацией АМФ-активируемой протеинкиназы

51

159

167

Новые функции UCP2 в области здоровья, болезней и терапии

8

1

38

Повышающая регуляция митохондриального разобщающего белка-2 с помощью АМФ-активируемой протеинкиназы в эндотелиальных клетках ослабляет окислительный стресс при диабете

57

3222

3330

Активация АМФ-активируемой протеинкиназы антидиабетическим препаратом метформином in vivo. Роль митохондриальных активных форм азота

J Biol Chem

2004

279

43940

43951

Розиглитазон стимулирует синтез оксида азота в эндотелиальных клетках аорты человека посредством АМФ-активируемой протеинкиназы

283

11210

11217

АМФ-активируемая протеинкиназа опосредует предварительное кондиционирование в кардиомиоцитах путем регуляции активности и транспорта сарколеммальных АТФ-чувствительных К(+) каналов

210

224

236

Берберин — новый препарат для снижения уровня холестерина, работающий по уникальному механизму, отличному от статинов.

10

1344

1351

Примечания автора

Опубликовано от имени Европейского общества кардиологов. Все права защищены. © The Author 2009. Для разрешения обращайтесь по электронной почте: журналы.разрешения@oxfordjournals.org.

Испытание фазы I берберина у китайцев с язвенным колитом | Исследования по профилактике рака

Колоректальный рак занимает первое место по заболеваемости и смертности от рака во всем мире, в том числе в США и Китае (1). Это третий по распространенности тип рака как в США, так и в Китае, и ежегодно на него приходится примерно 11% и 14% всех смертей от рака соответственно (2–5).Таким образом, определение стратегий для снижения его заболеваемости имеет важное значение. Язвенный колит представляет собой хронический кишечный воспалительный процесс, подвергающий людей высокому риску развития колоректального рака, поэтому лица с язвенным колитом представляют собой хорошую когорту для оценки эффективности потенциальных средств профилактики рака (6–10). В глобальном масштабе заболеваемость колоректальным раком у пациентов с язвенным колитом оценивается в 2-5 раз выше, чем в общей популяции той же возрастной группы (11).Заболеваемость колоректальным раком у пациентов с язвенным колитом в США с 1998 по 2010 гг. Подавляющее большинство пациентов с язвенным колитом как в Китае, так и в США получают терапию, основанную на 5-аминосалициловой кислоте (5-АСК), обычно в форме месаламина, 5-АСК второго поколения (14, 15). . Хотя месаламин эффективно сокращает периоды активного заболевания и продлевает время ремиссии (16, 17), язвенный колит часто становится рефрактерным, а при длительном течении язвенного колита повышается риск колоректального рака (2% в 10 лет, 8% в 20 лет). и 18% к 30 годам; исх.18). Более того, после развития колоректального рака лечение остается субоптимальным, а прогноз у пациентов с язвенным колитом хуже, чем у пациентов без него (19). Таким образом, разработка новых методов лечения, которые сочетают в себе высокую эффективность лечения, удобное дозирование, низкие побочные эффекты и, что более важно, способность предотвращать колоректальный рак, является важной целью для лечения язвенного колита и снижения связанной с ним заболеваемости колоректальным раком.

Средство для профилактики рака должно соответствовать строгому набору критериев.Он должен модулировать прогрессирование раннего канцерогенеза в течение длительного периода времени. Для профилактики приемлемый профиль токсичности предполагает нечастые, легкие побочные эффекты. Таким образом, натуральные продукты с низкой токсичностью представляют собой привлекательные новые средства для профилактики рака (20). Они представляют собой соединения с разнообразной биологической активностью, и люди потребляли их большое количество в течение продолжительных периодов времени с незначительной очевидной токсичностью. Еще одной особенностью натуральных продуктов является тенденция оказывать фармакологически слабое воздействие на несколько мишеней.Агенты, которые в перспективе синтезируются и предназначены для действия на одну мишень, но оказывают действие на несколько разных мишеней, считаются фармакологически нечистыми и нежелательными. Когда эта точка зрения применяется к натуральным продуктам, они не очень хорошо принимаются. Однако агент, который обладает способностью слабо модулировать более чем одну фармакологическую мишень, но комбинированные эффекты которого оказывают селективное терапевтическое воздействие на данный биологический процесс, представляет собой стратегию, которая может обеспечить избирательную биологическую эффективность и низкую долгосрочную токсичность.Благодаря взаимодействию со сложными биологическими системами в течение очень длительного периода времени натуральные продукты открывают доступ к такому потенциалу.

И наоборот, натуральные продукты имеют ряд ограничений. Прежде всего, во многих механистических исследованиях, особенно с использованием клеточных линий, используются концентрации, намного превышающие концентрации, достигаемые у людей, что, вероятно, объясняет высокую степень неспецифичности, наблюдаемую в этих исследованиях.Таким образом, предсказание модуляции мишени у людей по данным in vitro затруднительно. Хорошо спланированные исследования на животных могут обеспечить важную меру эффективности в контексте всей системы и дать предварительные оценки безопасности или токсичности. Проспективные исследования использования натуральных продуктов у людей обычно отсутствуют, а сообщаемый опыт обычно носит исторический и анекдотический характер. Несмотря на эти предостережения, натуральные продукты, как правило, хорошо переносятся, и данные о лечебных эффектах, даже если они носят эпизодический характер, заслуживают внимания.

Соединения, используемые в традиционной китайской медицине, представляют собой богатый источник биологически активных соединений, которые использовались людьми в течение длительного времени. Берберин, основной компонент корневища Coptidis , является одним из таких соединений и обладает многими полезными свойствами, связанными с потенциальной профилактикой колоректального рака. Большое количество доказательств указывает на то, что он может ингибировать колоректальный канцерогенез у людей, в основном за счет его противовоспалительного действия.Берберин широко используется для лечения гастроэнтерита и диареи в Китае (21–24). В четырех различных клинических испытаниях с участием взрослых пациентов с острой диареей берберин уменьшал объем стула и был нетоксичен (25–28). В отдельном исследовании было показано, что берберин уменьшает острый лучевой кишечный синдром у людей, получающих абдоминальную лучевую терапию (29). Берберин эффективен на различных животных моделях воспаления кишечника (30–32). Особое значение имеет то, что он ингибирует канцерогенез толстой кишки в доклинических моделях.Он обладает высокой активностью в предотвращении колита, вызванного декстрансульфатом натрия и тринитробензолсульфоновой кислотой у мышей и крыс (33–36). Кроме того, он предотвращает индуцированный азоксиметаном канцерогенез толстой кишки у крыс (37), при этом такие эффекты в значительной степени объясняются его противовоспалительными свойствами.

Несколько линий доказательств поддерживают представление о том, что первичный эффект берберина на кишечник связан с противовоспалительной активностью.В Китае берберин широко используется в клинической практике для лечения ряда воспалительных заболеваний, при этом специфическая противовоспалительная активность была продемонстрирована на различных моделях. В частности, берберин эффективен в адъювантно-индуцированных мышиных моделях артрита и в экспериментальных моделях остеоартрита у крыс (38–42). Он подавляет аутоиммунный нефрит у мышей BALB/c (43) и ослабляет вызванное липополисахаридами накопление внеклеточного матрикса и воспаление в мезангиальных клетках крыс (44).В дополнение к этим тщательно проведенным и физиологически значимым исследованиям основное противовоспалительное действие берберина было слабо связано с рядом последующих процессов, включая антиоксидантную, антиапоптотическую и противоопухолевую активность в большом количестве отчетов (обзор в ссылках 45, 46). ). Однако дизайн таких исследований (как правило, с использованием очень высоких концентраций агента in vitro ) накладывает ограничения на то, работают ли такие механизмы в системных моделях.

Другая привлекательная и очень важная особенность берберина связана с его способностью обеспечивать низкую системную доставку агента, но высокую доставку к органу-мишени, в данном случае к кишечнику.Системная доставка любого агента дает возможность для системной токсичности, и она увеличивается с продолжительностью воздействия агента. Тем не менее, основная цель агентов для профилактики рака — практически полное отсутствие токсичности в условиях длительного времени введения. Рассмотрение этих факторов, а также тот факт, что данный орган риска может быть нацелен на местную доставку лекарств, служит стимулом для изучения стратегий местной доставки в области профилактики рака (47). Что касается берберина, исследования на грызунах показывают, что пероральный берберин всасывается через слизистую оболочку кишечника, подвергается быстрому метаболизму при первом прохождении в печени и имеет системную доставку ниже 0.001% (48–50). То есть пероральное введение обеспечивает доставку в эпителий толстой кишки и поддерживающий орган с очень небольшой системной доставкой. Исследования на людях подтверждают это, демонстрируя максимальные концентрации в плазме 1,1 нмоль/л после доз 400 мг, при этом чаще используются дозы 300 мг (51).

В совокупности исследования подтверждают мнение о том, что берберин обладает благоприятным терапевтическим эффектом при воспалительных состояниях в толстой кишке, проявляет активность в моделях профилактики колоректального рака, имеет фармакологический профиль, обеспечивающий селективное воздействие на кишечник, и широко используется среди населения Китая. показывает, что он хорошо переносится.Мы предполагаем, что берберин обладает высоким потенциалом для предотвращения колоректального рака у людей с язвенным колитом. Лица с язвенным колитом подвержены высокому риску развития колоректального рака и составляют важную целевую группу для изучения стратегий профилактики рака, включая терапевтические. Важно тестировать новые терапевтические средства на стабильной с медицинской точки зрения когорте, особенно для тех, кто занимается профилактикой. Однако язвенный колит вызывает симптомы и вызывает нестабильность функции желудочно-кишечного тракта.Так как лечение мезаламинами быстро устраняет симптомы и нормализует функцию, когорта с язвенным колитом, стабилизированным с медицинской точки зрения с помощью месаламина, представляет собой когорту, хорошо подходящую для тестирования новых профилактических средств. Берберин тестировали в дозе 300 мг три раза в день, что соответствует его широкому использованию без рецепта в этой дозе и схеме в Китае. При более высоких дозах побочные эффекты со стороны желудочно-кишечного тракта описываются примерно в трети случаев, при этом в большинстве случаев требуется снижение дозы (52). Наконец, признано, что при окончательном применении в качестве терапевтического средства для профилактики рака весьма вероятно, что берберин потребуется вводить в течение длительного времени, либо непрерывно, либо с перерывами.Тем не менее, комбинация берберина и месаламина никогда ранее официально не оценивалась. Таким образом, основной конечной точкой текущего исследования является токсичность, и с учетом необходимости оптимизации безопасности пациентов продолжительность тестирования этой первой комбинации была установлена ​​на уровне трех месяцев. Кроме того, с акцентом на безопасность и учитывая, что он широко используется в Китае и что метаболизм лекарств неодинаков для разных рас, исследование было проведено в Китае в когорте китайцев с язвенным колитом.

Мы провели рандомизированное двойное слепое исследование фазы I по изучению берберина в сравнении с плацебо в Китае у людей с клинически стабильным язвенным колитом, принимающих месаламин для поддерживающей терапии. Это исследование было разработано для проверки гипотезы о том, что берберин будет хорошо переноситься пациентами с язвенным колитом при приеме с месаламин. Мы демонстрируем, что берберин хорошо переносился китайскими пациентами с язвенным колитом в клинической ремиссии, принимавших месаламин.Пероральное дозирование было связано с очень низкими наномолярными средними концентрациями берберина в плазме. В ткани толстой кишки берберин значительно снижал степень Гебоеса, которая является составной мерой воспаления ткани, используемой при язвенном колите. Измерения других биомаркеров пролиферации и воспаления, проведенные в крови и ткани толстой кишки, предоставляют проспективные данные для оценки размера выборки, которые можно использовать для разработки более крупных исследований в будущем. Результаты этого исследования поддерживают будущие исследования берберина как потенциального средства профилактики колоректального рака.

Исследование представляет собой двойное слепое плацебо-контролируемое исследование фазы I берберина у участников с язвенным колитом, получающих месаламин. Все участники были набраны и пролечены в больнице Сицзин (Сиань, Китай), и все они были коренными китайцами. Исследование было рассмотрено и одобрено Институциональным наблюдательным советом Северо-Западного университета (Чикаго, Иллинойс) и Комитетом по этике человека больницы Сицзин.Все участники дали устное и письменное информированное согласие. Исследование проводилось в соответствии со всей надлежащей клинической практикой в ​​соответствии с Международной конференцией по гармонизации и Хельсинкской декларацией этических принципов (53). NCI США (Bethesda, MD), Отдел профилактики рака, спонсировал и контролировал испытание, выполнял статистические и научные обзоры протокола и хранил данные. Вслепую все данные исследования были проверены на качество путем мониторинга на месте специальным персоналом из Северо-Западного университета и Орегонского университета здравоохранения и науки (Портленд, штат Орегон), а также NCI, а затем заблокированы.Затем он был разоблачен и передан в исследование биостатистику для анализа. Исследование было зарегистрировано на сайте ClinicalTrials.gov (NCT02365480).

Участники имели право на участие, если им было 18–70 лет, у них был патологический диагноз язвенного колита, они находились в клинической ремиссии, определяемой индексом активности язвенного колита (UCDAI) ≤1 в течение как минимум 3 месяцев, на поддерживающей терапии месаламин в течение не менее 3 месяцев, имели статус эффективности Восточной кооперативной онкологической группы (ECOG) ≤1, имели сохранную функцию конечного органа и были в состоянии читать, понимать и были готовы дать письменное информированное согласие.Из исследования были исключены участники, получавшие иммуномодулирующее лечение в течение 3 месяцев или имеющие опухоль или поражение, связанные с дисплазией.

Участники прошли базовую колоноскопию перед лечением с биопсией и забором крови для анализа биомаркеров и были рандомизированы в соотношении 3:1 для перорального приема 300 мг берберина три раза в день или соответствующего плацебо. Через 3 месяца повторили постлечебную колоноскопию с биопсией и забором крови. Они также собирали анамнез и физикальное обследование на исходном уровне, ежемесячно во время лечения и через 1 месяц после него, и с ними связывались по телефону на 7-й день.Все исходные симптомы и нежелательные явления регистрировались и классифицировались. Берберин, выделенный из корневища Coptidis , поставлялся в виде гидрохлорида берберина чистотой >98% в таблетках по 100 мг компанией Shanghai SINE TianPing Pharmaceutical Co., которая также предоставила соответствующее плацебо.

Основная цель состояла в том, чтобы определить безопасность берберина у китайских участников с язвенным колитом в клинической ремиссии на поддерживающей терапии месаламин.Вторичные цели включали показатели воспаления на основе плазмы, включая уровень белка С-реакции, скорость оседания эритроцитов и цитокины, такие как TNFα, IL4, IL6, IL8 и IL10, показатели воспаления на основе тканей, включая TNFα, циклооксигеназу (ЦОГ). -2 и NF-κB, а также противоракового действия, включая Ki-67, активированную каспазу-3 и метилирование ДНК на SFRP1, TCERGIL FBN2 и TFP12. Другие вторичные показатели включали симптомы, связанные с язвенным колитом, оцениваемые по шкале UCDAI (54), и гистологическое воспаление, оцениваемое по шкале Geboes (55).

Анализы ИГХ проводились партиями после завершения накопления; образцы до и после вмешательства обрабатывались вместе в одной партии. Для всех антигенов были включены соответствующие положительные и отрицательные контроли. Фиксированную формалином и залитую парафином ткань разрезали и подвергли оценке ИГХ, как сообщалось ранее (56). Срезы толщиной 5 микрон помещали на предметные стекла Superfrost, покрытые Vectabond, депарафинизировали путем нагревания при 60°C в течение 30 минут, регидратировали серией последовательных промывок этанолом и промывали в PBS.Демаскирование антигенного эпитопа для Ki-67 осуществляли путем нагревания срезов в буфере EDTA (pH 9) в микроволновой печи под давлением (NordicWare) в течение всего 9 минут при высокой температуре. Для COX-2 и NF-κB антигены демаскировали с помощью раствора для демаскирования антигенов (Vector Laboratories) и помещали предметные стекла под давлением в микроволновую печь в течение 9 минут при высокой температуре в соответствии с инструкциями производителя. Активность эндогенной пероксидазы блокировали в 1% H ₂ O ₂ (в метаноле) в течение 10 минут, а сайты неспецифического связывания блокировали 5% лошадиной сывороткой в ​​PBS.Первичные антитела COX-2 и NF-κB (Santa Cruz Biotechnology) использовали в соотношении 1:100, а Ki-67 (Dako) использовали в соотношении 1:200. После промывки в PBS образцы инкубировали с биотинилированными вторичными антителами (1:2000) с последующей разработкой комплекса авидин-биотин-пероксидаза в соответствии с рекомендациями производителя (с использованием набора Vectatain Elite ABC Kit от Vector Laboratories).

Для оценки иммунореактивности эпителиальных клеток использовали полуколичественную шкалу.Для ЦОГ-2 и NF-kB степень окрашивания оценивали по шкале 0 (отрицательное окрашивание), 1+ (10% окрашенных клеток), 2+ (10–50% окрашенных клеток) и 3+ (50% окрашенных клеток). % окрашенных клеток). Для Ki-67 окрашивание оценивали как 0 (отрицательное окрашивание), 1+ (окрашивание 1/3 клеток), 2+ (окрашивание 1/2 клеток) и 3+ (окрашивание ≥2/3 клеток). ). Гистологический анализ воспаления ткани был выполнен на ткани, окрашенной гематоксилином и эозином (H&E), и количественно оценен с использованием системы оценки Geboes, как описано ранее (55).Все разделы IHC и H&E были оценены патологом-исследователем (Z.-S. Li), который не знал об исследуемой группе. Второй патологоанатом (Г.-Ю. Ян) участвовал в согласованном чтении всех разделов.

Пациенты были проинструктированы принимать исследуемые препараты через час после еды вместе с 8 унциями воды. Заборы крови проводились утром, через 1-2 часа после первой дозы, с регистрацией времени дозирования и забора крови.Фармакология берберина у человека плохо изучена. Всесторонний фармакокинетический анализ берберина у грызунов был проведен несколькими разными исследователями, при этом пиковые концентрации в крови колебались от 1,3 до 2 часов после перорального приема, а период полувыведения составлял от 5 до 14 часов (49, 50). На основе этой информации текущее исследование было разработано для измерения концентрации берберина в крови во время, соответствующее расчетным пиковым концентрациям.

Концентрации берберина в плазме измерялись дважды, как сообщалось ранее (57).Вкратце, использовали ВЭЖХ [с использованием колонки Agilent eclipse plus C18 (2,1 × 150 мм, 3,5 мкм)] в сочетании с трехквадрупольной МС Agilent 6410, оснащенной источником ионизации электрораспылением (Agilent Technologies). Мы использовали 500 мкл плазмы для экстракции, аликвоту 10 мкл вводили в систему ЖХ/МС-МС 6410. Калибровочную кривую строили по высоте пиков в зависимости от концентрации с использованием невзвешенной линейной регрессии. Концентрации берберина в образцах определяли с использованием параметров регрессии, полученных из калибровочной кривой.Калибровочные стандарты были включены в каждую аналитическую партию образцов. Все данные были получены с использованием программного обеспечения для обработки данных Agilent 6410 Quantitative Analysis version. Предел обнаружения (LOD) определялся как наименьшая концентрация, которую можно было обнаружить с приемлемой точностью и прецизионностью, которая достигается по графику, в три раза превышающему уровень шума. Предел количественного определения (LOQ) в образцах определяли как наименьшую концентрацию на калибровочной кривой, для которой погрешность анализа (коэффициент вариации) ниже 10% и не менее чем в 10 раз превышает LOD.Значения LOQ для берберина в плазме были следующими: верхний LOQ, 40 нг/мл; нижний LOQ, 0,1 нг/мл.

В период с августа 2016 г. по октябрь 2017 г. 20 участников дали согласие, 2 были признаны непригодными, 2 отказались от участия после начала вмешательства и 16 продолжили исследование, как показано на рис. 1. Из двух участников, отказавшихся от участия после начала вмешательства , оба получали берберин, и ни один из них не сообщал о побочных эффектах: один принимал агент вместо двоих.5 месяцев и не хотел приезжать на следующий ознакомительный визит, а другой был агентом в течение 1 месяца и отказался от него из-за изменений, происходящих дома.

Рисунок 1.

Рисунок 1.

Характеристики участников показаны в Таблице 1. Никаких существенных различий между группами плацебо и берберина не наблюдалось ни по каким характеристикам.Средний возраст составил 49 и 45 лет для группы плацебо и берберина соответственно, что отражает демографические характеристики язвенного колита. Стабильный клинический статус участников отражает наличие нормального ИМТ 22 и функционального статуса ECOG 0, при этом 4 из 4 (100%) и 10 из 12 (83%) участников имели показатель UCDAI 1 в группе плацебо. и берберина, соответственно, а остальные имели 0 баллов. Хотя средняя продолжительность заболевания составляла 3,0 ± 0,5 (среднее ± SEM) и 9,5 ± 4,8 года для групп берберина и плацебо, соответственно, это не было статистически значимым (Student т тест).В связи с этим важно учитывать, что пациентов, получавших плацебо, было всего четыре, а длительность их заболевания имела широкий разброс: 1,6, 5,9, 9,6 и 20,8 года.

Клинические характеристики участников.

Первичной конечной точкой этого исследования была токсичность.Учитывая, что это было исследование химиопрофилактики, нежелательные явления всех степеней отслеживались, и они показаны в таблице 2. В общей сложности 4 и 14 участников, получавших плацебо и берберин, соответственно, были оценены на предмет нежелательных явлений в течение трех месяцев после начала лечения. агента и 1-месячный период наблюдения после лечения. Два участника выбыли из исследования через 1 и 2,5 месяца, оба принимали берберин, ни один из них не сообщил о нежелательных явлениях, и эти участники не были включены в анализ, представленный в таблице 2.В общей сложности семь различных нежелательных явлений наблюдались у 5 разных участников, и все они принимали берберин. У одного пациента наблюдалось повышение уровня аспартатаминотрансферазы (АСТ, степень 2) и повышение уровня аланинаминотрансферазы (АЛТ, степень 3), наблюдаемые в одном тесте, проведенном на третьем месяце лечения агентом, оба из которых были устранены при последующем посещении через месяц. Считалось, что они, вероятно, связаны с исследуемым лечением. У другого пациента была диарея (1 степень) дважды: эпизоды были с интервалом в 1 месяц, каждый длился 1 день, и этот участник имел базовый дискомфорт в эпигастрии на момент включения в исследование, который присутствовал в течение нескольких лет.Таким образом, два эпизода диареи были сочтены не связанными с лечением. Другой пациент испытал один эпизод тошноты 1-й степени, предположительно связанный с этим, который возник вскоре после начала приема берберина в 1-й день; это было преходящим и больше никогда не повторялось. У одного пациента развилась инфекция (1-я степень, неродственная), а у другого пациента развился панкреатит (2-я степень, неродственная). Все нежелательные явления разрешились в течение периода исследования, за исключением панкреатита, который развился через неделю после прекращения лечения и все еще присутствовал в течение одного месяца наблюдения.

Измерение концентрации берберина в плазме продемонстрировало значительное увеличение концентрации до 1.16 ± 0,40 нг/мл (среднее значение ± стандартная ошибка среднего; 3,46 ± 1,19 нмоль/л) в группе после лечения берберином через 3 месяца по сравнению с последующим лечением плацебо ( P = 0,020) или до лечения берберином ( P < 0,001) группы (рис. 2). Увеличение в группе после лечения берберином представляло собой 6,5-кратное увеличение по сравнению с группой после лечения плацебо и 5,8-кратное увеличение по сравнению с группой до лечения берберином. Забор крови для измерения концентрации берберина произошел 1.9 ± 0,1 часа (среднее значение ± стандартная ошибка среднего) после утреннего приема.

Рисунок 2.

Концентрация берберина в плазме. Данные представляют собой среднюю концентрацию берберина в плазме ± SEM, измеренную исходно, до лечения и через 3 месяца после лечения либо берберином, либо плацебо. *, Значение P ≤ 0,05 для групп, указанных линией.

Рисунок 2.

Концентрация берберина в плазме.Данные представляют собой среднюю концентрацию берберина в плазме ± SEM, измеренную исходно, до лечения и через 3 месяца после лечения либо берберином, либо плацебо. *, Значение P ≤ 0,05 для групп, указанных линией.

Вторичные конечные точки могут быть классифицированы как показатели влияния на клиническое состояние, гистологию тканей, ИГХ тканей и цитокины плазмы, как показано в таблице 3. За исключением Ki-67, все эти маркеры позволяют оценить состояние воспаления.Ki-67 обеспечивает меру клеточной пролиферации. Шкала UCDAI позволяет оценить клиническое состояние пациента с язвенным колитом (54). В группах берберина и плацебо наблюдалось снижение показателя UCDAI на 40% и 50% соответственно. При использовании непараметрического рангового критерия Уилкоксона для согласованных пар это не было статистически значимым ни в одной из групп. Используя параметрический двусторонний парный тест Стьюдента t , снижение в группе берберина было значительным ( P = 0.04), тогда как в группе плацебо этого не было. То, что в группе плацебо всего 4 участника, является фактором отсутствия значимости. Наблюдаемое снижение в обеих группах согласуется с тем фактом, что участники обеих групп также получали месаламин.

Система оценки Geboes обеспечивает измерение воспаления тканей (55). После лечения берберином наблюдалось 30%-ное снижение оценки по шкале Гебоеса, и это было статистически значимым, рис.3. В группе плацебо наблюдалось незначительное снижение на 5%. Не было существенной разницы между группами берберина и плацебо.

Рисунок 3.

Репрезентативные микрофотографии слизистой оболочки толстой кишки. Репрезентативные микрофотографии тканей, окрашенных гематоксилин-эозином, были сделаны под световой микроскопией. Что касается берберина, на предметном стекле до лечения показана ткань с оценкой по Гебоесу 5,1, демонстрирующая разрушение крипт и сильный приток воспалительных клеток, а на предметном стекле после лечения изображена ткань с оценкой по Гебоесу 2.2, демонстрирующий диффузные архитектурные аномалии и умеренный приток воспалительных клеток. Для плацебо на предметном стекле до лечения показана ткань с оценкой по Гебоесу 4,1, демонстрирующая разрушение и деформацию крипт и сильный приток воспалительных клеток, а на предметном стекле после лечения изображена ткань с оценкой по Гебоесу 5,4, демонстрирующая искажение структуры желез, обширный приток воспалительных клеток. клетки и образование абсцесса крипты (стрелка).

Рисунок 3.

Репрезентативные микрофотографии слизистой оболочки толстой кишки.Репрезентативные микрофотографии тканей, окрашенных гематоксилин-эозином, были сделаны под световой микроскопией. Что касается берберина, то на предметном стекле до лечения показана ткань с оценкой по Гебоесу 5,1, демонстрирующая разрушение крипт и сильный приток воспалительных клеток, а на предметном стекле после лечения изображена ткань с оценкой по Гебоесу 2,2, демонстрирующая диффузные архитектурные аномалии и умеренный приток воспалительных клеток. Для плацебо на предметном стекле до лечения изображена ткань с оценкой по Гебоесу 4,1, демонстрирующая разрушение и деформацию крипт и сильный приток воспалительных клеток, а на предметном стекле после лечения изображена ткань с оценкой по Гебоесу 5.4, демонстрирующий нарушение структуры желез, обширный приток воспалительных клеток и образование абсцесса крипты (стрелка).

Маркеры IHC на основе тканей состояли из экспрессии COX-2, NF-kB и Ki-67 в эпителиальных клетках толстой кишки. Существенных изменений не наблюдалось. С Ki-67 снижение на 30% как в группе плацебо, так и в группе берберина через 3 месяца подтвердило мнение о том, что месаламин может опосредовать одинаковый эффект.Сравнение всех 16 участников (плацебо + берберин) продемонстрировало статистическую тенденцию, P = 0,06, с использованием непараметрического рангового критерия Уилкоксона для согласованных пар, и статистическую значимость, P = 0,04, с использованием параметрического двустороннего критерия Стьюдента. парный тест t по экспрессии Ki-67 через 3 месяца по сравнению с предварительным лечением.

Что касается цитокинов плазмы, TNFα, IL6 и IL8 связаны с провоспалительной активностью в патогенезе язвенного колита у людей, тогда как IL10 и IL4 считаются противовоспалительными (58).В целом существенных изменений не произошло, равно как и явных тенденций. Значительное снижение IL6, наблюдаемое при лечении берберином, обусловлено одним значением в момент времени до лечения, которое было более чем в 500 раз выше среднего значения других значений. Удаление этого выброса дает соотношение после/до лечения 1,1 в группе берберина без статистической значимости.

Это первое исследование, в котором проспективно изучается комбинация берберина с месаламин.Это исследование показывает, что китайские пациенты с язвенным колитом хорошо переносят берберин при приеме вместе с месаламин. Повышение уровня трансаминаз 3 степени выявлено 1 раз у 1 участника. Это разовое открытие в сочетании с тем фактом, что берберин широко используется в Китае и не был связан с изменением функции печени, подтверждает мнение о том, что берберин не играет причинной роли. Фактически, метаанализ действия берберина на лечение неалкогольной жировой болезни печени, в котором участвовало более 500 человек, показал, что берберин оказывает положительное терапевтическое действие на функцию печени, включая снижение уровня трансаминаз (59).Единственный эпизод преходящей тошноты 1-й степени, наблюдавшийся у одного участника в день, когда они начали принимать берберин, был расценен как возможно вызванный агентом в зависимости от времени. Учитывая, что у этого человека также был язвенный колит, который вызывает такие симптомы, и что берберин исторически использовался для лечения симптомов желудочно-кишечного тракта, причинно-следственная связь между берберином и преходящей тошнотой совсем не ясна. Если бы дальнейшие исследования поддержали причинно-следственную связь, ее мягкий, преходящий характер не считался бы запретным для использования.

Одной из целей этого исследования было продвижение стратегии, минимизирующей системную токсичность, путем разработки средств для профилактики рака, которые оптимизируют локальную доставку в орган-мишень, подвергающийся риску, но имеют минимальное системное всасывание (47). Берберин обладает этими свойствами, поскольку они связаны с высоким воздействием на кишечник и плохой системной абсорбцией (48). В текущем исследовании мы демонстрируем, что у людей с язвенным колитом (т.е., у которых воспалена слизистая кишечника), средние концентрации берберина в крови очень низкие после общей суточной дозы 900 мг (3,5 нмоль/л, или 1,16 нг/мл). Эти результаты приблизительно соответствуют ранее зарегистрированным концентрациям 1,1 нмоль/л после общей суточной дозы 400 мг (51). Важно учитывать, что фармакокинетика берберина у человека плохо изучена, и что исследования, включающие комплексный фармакокинетический анализ берберина у грызунов, дают ряд результатов (48–50).Несмотря на эти факторы, концентрации в плазме в текущем исследовании измерялись в среднем через 1,9 часа после введения дозы. Поскольку исследования на грызунах показывают, что время достижения пиковой концентрации в крови составляет 1,3–2,0 часа после введения дозы, значения, измеренные в текущем исследовании, скорее всего, приблизительно соответствуют пиковым концентрациям. Хотя отчеты о периоде полураспада берберина в доклинических исследованиях также охватывают диапазон, т. е. 5-14 часов, один отчет на крысах продемонстрировал отсутствие изменений в профилях цитохрома Р450 при хроническом введении (60).Эти результаты согласуются с мнением о том, что при длительном применении у людей можно ожидать незначительных изменений в фармакологии берберина. Для будущих исследований будет важно всесторонне оценить фармакокинетику берберина у людей.

Включение мониторинга концентрации лекарственного средства в дизайн исследования является важной особенностью, особенно когда агент широко доступен без рецепта.Наш анализ концентраций берберина в плазме не обнаружил четких признаков снижения или прекращения приема и продемонстрировал почти 6-кратное увеличение концентрации при лечении по сравнению со значениями до лечения. Неясно, отражают ли низкие исходные значения берберина, обнаруженные в плазме, потребление с пищей и/или использование берберина вне исследования, хотя и в гораздо более низких дозах. Это следует учитывать в будущих исследованиях, в том числе в различных популяциях.

При рассмотрении результатов этого исследования, особенно относящихся к вторичным конечным точкам, важно учитывать, что только 12 и 4 участника получали берберин и плацебо соответственно. Эти небольшие числа накладывают неотъемлемые ограничения на интерпретацию данных. Находка, представляющая наибольший интерес, относится к шкале Geboes. Он уменьшился на 30% при лечении берберином, и это было статистически значимо.Однако по сравнению с плацебо эффекты не были статистически значимыми. Важно учитывать, что небольшое количество участников, принимавших плацебо, существенно ограничивает строгость статистического сравнения между группами берберина и плацебо. Большой интерес представляет то, что у участников, принимавших плацебо, было всего 5% снижение показателя Гебоеса. В совокупности эти результаты следует рассматривать как выдвижение и поддержку гипотезы о том, что берберин оказывает противовоспалительное действие на слизистую оболочку толстой кишки у людей с язвенным колитом.

Улучшения по шкале UCDAI были отмечены в обеих группах, но не были статистически значимыми при использовании непараметрического рангового критерия Уилкоксона для согласованных пар. Величина снижения и его присутствие в обеих группах, то есть снижение на 40% и 50% в группах берберина и плацебо, соответственно, побудили нас изучить значимость с помощью параметрического двустороннего парного теста Стьюдента t , который продемонстрировал значительное снижение в группе берберина, но не в группе плацебо.Однако, учитывая, что в группе плацебо наблюдалось снижение на 50%, весьма вероятно, что при увеличении числа это было бы статистически значимым. Поскольку все участники принимают месаламин, это, вероятно, положительно влияет на участников обеих групп. Данных недостаточно, чтобы сделать вывод о том, что берберин приносит дополнительную пользу.

Тканевые биомаркеры COX-2 и NF-kB связаны с воспалением, тогда как Ki-67 связан с пролиферацией клеток.Существенных изменений не наблюдалось. При Ki-67 наблюдалась тенденция к снижению в обеих группах на 3 месяце по сравнению с долечением, что было статистически значимым при оценке с использованием параметрического двустороннего парного теста Стьюдента t . Это, вероятно, отражало эффект месаламина, и сходные изменения между группами плацебо и берберина не подтверждают мнение о том, что берберин оказывает какой-либо дополнительный эффект.

Цитокины TNFα, IL6 и IL8 связаны с провоспалительной активностью в патогенезе язвенного колита у людей, тогда как IL10 и IL4 считаются противовоспалительными (58).В текущем исследовании не было выявлено значительных изменений концентрации этих цитокинов в плазме. Учитывая, что значительные изменения в показателях воспаления наблюдались при использовании других биомаркеров, одним из возможных объяснений может быть то, что они были изменены на тканевом уровне, но такие изменения не наблюдались системно, что потенциально поддерживает идею местной терапии кишечника с помощью этого перорального агента. который плохо всасывается в кровоток. Наконец, хотя и не являющееся статистически значимым, разница в средней продолжительности заболевания между группами берберина и плацебо составила 6.5 лет. Несмотря на то, что он известен своими масштабами, учитывая только четырех пациентов, получавших плацебо, относительно широкий диапазон продолжительности, т. е. 1,6–20,8 лет, и отсутствие статистической значимости, к любой атрибуции значимости следует подходить с особой осторожностью. Это должно быть оценено в будущих более крупных исследованиях.

Это исследование впервые, насколько нам известно, демонстрирует возможность проведения в Китае испытаний по профилактике рака на ранней стадии при спонсорской поддержке NCI.Это важно по нескольким причинам. Изучение конкретных групп населения имеет большое значение для понимания биологии рака, профилактики и терапевтической модуляции. Китай, например, имеет высокий уровень заболеваемости раком пищевода и низкий уровень рака предстательной железы по сравнению с западными странами (1), что дает важную возможность для выявления основных причин. Кроме того, различия в метаболических процессах и механизмах канцерогенеза, которые могут влиять на эффективность и токсичность терапевтических средств, оправдывают выборочное исследование, как это было предпринято в текущем исследовании.И наоборот, существуют практические трудности, связанные с изучением различных популяций. На примере Китая они включают расстояние, различия в социальных нормах и языке, а также соблюдение правовых и институциональных требований в двух странах. Мы преодолели эти барьеры, организовав для исследователя из США (Р. Бергана) частые посещения исследовательского учреждения в Китае, знакомясь с исследовательской практикой и исследователями. Кроме того, член китайской группы (Л. Сюй) провел несколько лет в США, изучая У.С.-основанные методы исследования. Это исследование демонстрирует, что такие барьеры можно преодолеть, что приведет к потенциально важным достижениям.

Подводя итог, мы демонстрируем возможность проведения в Китае испытаний по профилактике рака на ранней стадии. Мы демонстрируем, что пероральный берберин доставляет в кровь только низкие наномолярные концентрации. Показано, что берберин хорошо переносится китайцами с язвенным колитом, получающими месаламин.Наконец, было показано, что берберин значительно уменьшает воспаление ткани толстой кишки, что измеряется по шкале Geboes. Эти результаты требуют дальнейшего изучения берберина как потенциального средства профилактики колоректального рака.

Концепция и дизайн: Л. Сюй, Г.Я. Ян, Л. М. Родригес, А. Умар, Р. Берган, К. Ву

Разработка методики: Z.Ли, Г.Ю. Ян, Ю. Сонг, Ю. Ма, А. Вэнь, Ю. Цзя, К. Ву

Сбор данных (предоставление животных, приобретение и лечение пациентов, предоставление помещений и т. д.): L. Xu, Y. Zhang, X. Xue, J. Liu, Z. Li, G.Y. Ян, Ю. Сонг, Ю. Пан, Ю. Ма, С. Ху, А. Вэнь, Ю. Цао, К. Ву

Анализ и интерпретация данных (например, статистический анализ, биостатистика, вычислительный анализ): L.Сюй, З. Ли, Г.Ю. Ян, Ю. Сонг, А. Вен, Л. М. Родригес, С. Хан, Б. Йованович, Р. Берган, К. Ву

Написание, рецензирование и/или пересмотр рукописи: L. Xu, Z. Li, G.Y. Ян, Ю. Ма, Л.М. Родригес, М.Б. Талл, К. Бенанте, С. Хан, Б. Йованович, Э. Ричмонд, А. Умар, Р. Берган, К. Ву

Административная, техническая или материальная поддержка (т.е., отчетность или организация данных, построение баз данных): М.Б. Талл, К. Бенанте, Б. Йованович, Э. Ричмонд

Руководство исследованием: Р. Берган, К. Ву

Другое (патологоанатом): Г.-Ю. Ян

Роль разобщающего белка 2

Аннотация

Цели

Сообщается, что берберин, ботанический алкалоид, выделенный из корневища коптидиса, активирует AMP-активируемую протеинкиназу (AMPK).Остается неизвестным, требуется ли AMPK для защитных эффектов берберина при сердечно-сосудистых заболеваниях. Это исследование было разработано, чтобы определить, требуется ли AMPK для индуцированного берберином снижения окислительного стресса и атеросклероза in vivo .

Методы

ApoE (ApoE ^-/- ) и мышей ApoE ^-/- /AMPK альфа 2 ^-/- , которых кормили западной диетой, лечили берберином в течение 8 недель. В изолированных аортах оценивали атеросклеротические поражения аорты, экспрессию разобщающего белка 2 (UCP2) и маркеры окислительного стресса.

Результаты

У мышей ApoE ^-/- хроническое введение берберина значительно уменьшило поражение аорты, заметно уменьшило окислительный стресс и экспрессию молекул адгезии в аорте и значительно увеличило уровни UCP2. Напротив, у мышей ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/- берберин мало влиял на эти конечные точки. В культивируемых эндотелиальных клетках пупочной вены человека (HUVEC) берберин значительно увеличивал экспрессию мРНК и белка UCP2 зависимым от AMPK образом.Трансфекция HUVECs siRNA, специфичной к ядерному респираторному фактору 1 (NRF1), ослабляла индуцированную берберином экспрессию UCP2, тогда как трансфекция контрольной siRNA этого не делала. Наконец, берберин способствовал митохондриальному биогенезу, что способствовало усилению экспрессии UCP2.

Заключение

Мы пришли к выводу, что берберин уменьшает окислительный стресс и воспаление сосудов, а также подавляет атерогенез посредством механизма, который включает стимуляцию AMPK-зависимой экспрессии UCP2.

Образец цитирования: Wang Q, Zhang M, Liang B, Shirwany N, Zhu Y, Zou MH (2011) Активация AMP-активируемой протеинкиназы необходима для индуцированного берберином снижения атеросклероза у мышей: роль разобщающего белка 2 ПЛОС ОДИН 6(9): е25436. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0025436

Редактор: Аймин Сюй, Гонконгский университет, Китай

Получено: 24 мая 2011 г.; Принято: 5 сентября 2011 г.; Опубликовано: 27 сентября 2011 г.

Авторское право: © 2011 Wang et al.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с лицензией Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания оригинального автора и источника.

Финансирование: Эта работа была поддержана Национальным институтом здравоохранения, Американской диабетической ассоциацией и Американской кардиологической ассоциацией. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Берберин представляет собой изохинолоновый алкалоид, обнаруженный в таких растениях, как Phellodendron chinense и Coptis chinensis. В традиционной китайской медицине берберин из Coptidis rhizoma используется в качестве компонента фитотерапии Huanglian. Сообщается, что в этой форме он оказывает противогрибковое, антибактериальное/вирусное и антионкогенное действие, а также благоприятно влияет на диабет [1], [2], [3], [4], [5]. ] и антиатерогенными свойствами [6], [7], [8].Сообщалось также, что берберин снижает частоту сердечно-сосудистых заболеваний [9], [10], [11]. Сообщается, что несколько механизмов связаны с полезными свойствами берберина, включая улучшение эндотелиальной функции и дислипидемии, ингибирование окисления липопротеинов низкой плотности и снижение артериального давления. Однако молекулярные мишени, через которые берберин оказывает свое благотворное действие, не определены.

AMP-активируемая протеинкиназа (AMPK) представляет собой гетеротример, состоящий из субъединиц α, β и γ, каждая из которых имеет по меньшей мере две изоформы.Субъединица α содержит каталитический центр, но все субъединицы необходимы для полной активности. Увеличение отношения AMP/ATP активирует AMPK с помощью ряда механизмов, включая прямую аллостерическую активацию и ковалентную модификацию, при которой AMP-зависимая киназа AMPK (AMPKK) фосфорилирует α-субъединицу на Thr172. AMPK, как правило, находится в состоянии покоя в нормальных условиях, но активируется в ответ на сигналы и стрессы, повышающие соотношение AMP/ATP, такие как гипогликемия, интенсивные физические нагрузки, аноксия и ишемия.После активации AMPK включает катаболические пути, которые генерируют АТФ, одновременно отключая процессы, потребляющие АТФ (например, биосинтез, рост клеток и пролиферацию), и при этом действует как «измеритель энергии». Эта функция гомеостаза считается фундаментальной особенностью множественных AMPK-опосредованных биологических процессов [12].

Хотя эффекты AMPK на ключевые метаболически значимые органы и ткани, такие как печень, скелетные мышцы, жировая ткань и гипоталамус, были относительно хорошо задокументированы [13], представление о том, что активация AMPK может использоваться для улучшения здоровья сосудов, появилось лишь недавно. .Например, в сосудистых тканях активация AMPK, по-видимому, является общей молекулярной мишенью [14] для положительного эффекта нескольких вмешательств, включая физические упражнения [15], статины, тиазолидиндионы (TZD) [16], лептин [17], [18]. , адипонектин [19], [20], [21] и розиглитазон при диабете [22], [23], [24]. AMPK также важен для поддержания активности оксида азота (NO) эндотелиальных клеток и эндотелиальной функции через ось AMPK-эндотелиальная синтаза оксида азота (eNOS)-NO [25]. Более того, активация AMPK может косвенно улучшать функцию эндотелия сосудов за счет улучшения метаболических профилей и чувствительности к инсулину [26], [27], [28].

Недавние исследования, в том числе исследования нашей группы, показали, что берберин вызывает активацию AMPK в зависимости от дозы и времени в культивируемых эндотелиальных клетках [29], [30], [31]. В изолированных аортах берберин-зависимая активация AMPK улучшает эндотелий-зависимую вазорелаксацию, вероятно, посредством AMPK-зависимого фосфорилирования эндотелиальной синтазы оксида азота [32]. Хотя сообщалось о благотворном влиянии берберина на сердечно-сосудистые заболевания [10], [33], на сегодняшний день ни одно исследование не изучало влияние хронического приема берберина на атеросклероз in vivo .Кроме того, важно определить, требуется ли активация AMPK для антиатеросклеротического действия берберина in vivo , чтобы всесторонне выяснить его свойства. В настоящем исследовании изучалось влияние берберина на атеросклероз и относительный вклад AMPK альфа 2 в индуцированное берберином подавление атеросклеротических поражений.

Материалы и методы

Материалы

Антитела против фосфо-AMPK, молекулы межклеточной адгезии (ICAM)-1, молекулы адгезии сосудистых клеток (VCAM)-1, 4-гидрокси-транс-2-ноненаля (4-HNE), 3-нитротриозина (3-NT) и β-актин получали от Cell Signaling Biotechnology (Danvers, MA).Антитела против разобщающего белка (UCP) 2 были получены от Fitzgerald Industries International, Inc. (Acton, MA). Антитела к ядерному респираторному фактору (NRF)1 и митохондриальному фактору транскрипции A (mtTFA), а также специфическая siRNA для AMPK были приобретены у Santa Cruz Biotechnology Inc. (Санта-Крус, Калифорния). AICAR был получен от Toronto Research Chemicals Inc. (Северный Йорк, Онтарио, Канада), а все другие химические вещества, если не указано иное, были приобретены у Sigma-Aldrich (Сент-Луис, Миссури).

Животные

Мышей содержали в клетках с контролируемой температурой при 12-часовом цикле свет-темнота со свободным доступом к воде и либо обычной диетой для грызунов ad libitum , либо модифицированной проатерогенной диетой, как указано.Мыши AMPK alpha 2 ^-/- [5], [34], которые были подвергнуты обратному скрещиванию с фоном C57BL/6 дикого типа, были скрещены с мышами C57BL/6 ApoE ^-/- (The Jackson Laboratory, Bar Harbour, ME) для получения мышей ApoE ^-/-/AMPK альфа 2 ^-/-. Ускоренный атеросклероз вызывали кормлением мышей западной диетой, содержащей 0,21% холестерина и 21% жира (D12079B, Research Diets Inc.). Эту диету вводили, начиная с 5-недельного возраста, и продолжали в течение 8 недель подряд.В возрасте 5 недель в питьевую воду также добавляли берберин (Sigma-Aldrich) (1 ммоль/л) в течение 8 недель. Протокол животных (10-142H) был рассмотрен и одобрен Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Университета Оклахомы (IACUC).

Культура клеток

Эндотелиальные клетки пупочной вены человека (HUVEC), полученные из ATCC (Манассас, Вирджиния), выращивали в базовой среде Игла (Clonetics Inc, Уолкерсвилл, Мэриленд) с добавлением 5% эмбриональной бычьей сыворотки (FBS), пенициллина (100 мкг/мл), и стрептомицин (100 мкг/мл).Во всех экспериментах использовали клетки между пассажами 3 и 8. Клетки инкубировали при 37°C во влажной атмосфере 5% CO ₂ и 95% воздуха и выращивали до слияния от 70% до 80% перед обработкой указанными агентами.

Определение уровня холестерина, триглицеридов и глюкозы в сыворотке крови

Уровни глюкозы в крови у не голодающих мышей определяли путем нанесения хвостовой крови на систему мониторинга уровня глюкозы в крови OneTouch Ultra (LifeScan). Уровни холестерина и триглицеридов в сыворотке измеряли ферментативно с использованием реагентов Infinity (Thermo DMA) в соответствии с инструкциями производителя.

Анализ атеросклеротического поражения

После кормления западной диетой в течение 8 недель мышей анестезировали и усыпили. Ткань сердца и аорты удаляли от восходящей аорты до бифуркации подвздошной кости и помещали в 4% параформальдегид на 16 часов. Для анализа площади поражения дуги аорты поверхность интимы обнажали продольным разрезом от восходящей дуги до 5 мм дистальнее левой подключичной артерии, что позволяло сделать просвет дуги аорты плоским.Аорту промывали в течение 5 мин в 75% этаноле, окрашивали 0,5% Суданом IV в 35% этаноле и 50% ацетоне в течение 15 мин, обесцвечивали в 75% этаноле в течение 5 мин, а затем промывали дистиллированной водой. Цифровые изображения аорты были получены под стереомикроскопом, и площадь поражения была количественно определена от дуги аорты до 5 мм дистальнее левой подключичной артерии с использованием программного обеспечения Alpha Ease FC (версия 4.0 Alpha Innotech). Для оценки образования бляшек в других частях аорты поперечные срезы атеросклеротических поражений проксимального отдела аорты толщиной 8 мкм окрашивали гематоксилином и эозином после фиксации в 4% параформальдегиде.

Иммуноцитохимическое окрашивание

и анализ поражений аорты выполняли, как описано ранее [35].

ПЦР-анализ в реальном времени

Общая мРНК была выделена из клеток HUVEC с использованием набора QIAGEN® RNeasy® Mini. мРНК UCP2 определяли количественно с помощью ПЦР в реальном времени, как описано ранее [36].

Вестерн-блот анализ

Клеточные лизаты и гомогенаты тканей подвергали вестерн-блоттингу, как описано ранее [37].

Статистика

Результаты были проанализированы с помощью однофакторного дисперсионного анализа с соответствующим апостериорным анализом результатов и критерием Стьюдента t . Значения выражали как среднее значение ± стандартная ошибка. Значение p менее 0,05 считалось статистически значимым.

Результаты

Длительное введение берберина значительно ослабляет поражения аорты у мышей ApoE

ApoE ^-/- развивается стойкий аортальный атеросклеротический фенотип при кормлении западной диетой [38].Поэтому мы сначала оценили влияние берберина на тяжесть атеросклероза аорты у мышей ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- , которых содержали на этой диете. У мышей ApoE ^-/- /APMK alpha 2 ^-/- было больше поражений аорты, чем у мышей ApoE ^-/- (фиг. 1A-C). Интересно, что лечение берберином значительно уменьшало тяжесть атеросклеротических поражений дуги аорты у мышей ApoE ^-/- . Смягчающее поражение аорты действие берберина было менее сильным у мышей ApoE ^-/- /APMK alpha 2 ^-/- , чем у мышей ApoE ^-/- (фиг.1A-C), предполагая, что APMK альфа 2 имеет решающее значение для антиатеросклеротического действия берберина у мышей ApoE ^-/- .

Рисунок 1. AMPK-зависимое уменьшение поражений аорты под действием берберина in vivo.

A. Репрезентативные изображения поражения дуги аорты у мышей ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- , получавших HFD. Берберин уменьшал размер поражений как у мышей ApoE ^-/-, так и у мышей ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/-. B. Атеросклеротические поражения дуги аорты измеряли в процентах от диаметра просвета у мышей ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- с лечением берберином или без него. *p<0,05 АроЕ ^-/- против . ApoE ^-/-/AMPK альфа 2 ^-/-, # p<0,05 берберин по сравнению с . транспортное средство. n = 7 или 8 для каждой группы. С . Проксимальный срез аорты с атеросклеротическими поражениями. Показаны репрезентативные поперечные сечения серийных срезов проксимального отдела аорты, визуализированные окрашиванием гематоксилином и эозином.В каждой группе оценивали 4–5 мышей со сходными фенотипами. Д&Э. Срезы аорты мышей ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- , получавших HFD, подвергали иммуногистохимическому исследованию с антителами, специфичными для p-AMPK и p-ACC. n = 7 или 8 для каждой группы.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0025436.g001

Берберин увеличивает фосфорилирование AMPK по Thr172 и ацетил-КоА-карбоксилазы (ACC) по Ser79 в ApoE

Наблюдение за тем, что берберин оказывает меньшее влияние на поражение аорты у мышей ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- , побудило нас определить, активирует ли берберин AMPK в пораженных участках аорты.Поскольку фосфорилирование AMPK Thr172 тесно связано с активацией AMPK и может использоваться в качестве показателя активности AMPK [25], мы сначала отслеживали уровни фосфорилирования AMPK-Thr172 в ткани аорты мышей ApoE-/-, получавших носитель или берберин. с использованием иммуноцитохимического (ИГХ) окрашивания. Берберин заметно увеличивал уровень окрашивания p-AMPK в тканях аорты мышей ApoE ^-/-, но не увеличивал окрашивание тканей аорты мышей ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/- (фиг.1Д).

Ацетил-КоА-карбоксилаза (ACC) является хорошо охарактеризованным субстратом AMPK в эндотелиальных клетках, а фосфорилирование ACC по Ser79 отражает активность AMPK в тканях [39]. Мы отслеживали уровни p-ACC в тканях аорты как у мышей ApoE ^-/-, так и у мышей ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/-. В соответствии с выводами p-AMPK, лечение берберином заметно повышало уровни p-ACC у мышей ApoE ^-/- , но не у мышей ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- (рис.1Е). В целом эти данные свидетельствуют о том, что берберин активирует AMPK в атеросклеротических тканях аорты.

Влияние берберина на сывороточный холестерин, триглицериды и глюкозу

Затем мы определили, изменяет ли постоянное введение берберина уровни липидов и глюкозы, которые влияют на атеросклеротические поражения. Как показано в таблице 1, типичные метаболические параметры (глюкоза в крови, холестерин в сыворотке и триглицерид) не различались между мышами ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/- и мышами ApoE ^-/-.Кроме того, лечение берберином не влияло на уровни глюкозы, холестерина и триглицеридов в крови у мышей ApoE ^-/- или мышей ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- (таблица 1).

Берберин ослабляет экспрессию молекул адгезии VCAM-1 и ICAM-1 в очагах атеросклероза аорты

Экспрессия молекул адгезии межклеточной молекулы адгезии-1 (ICAM-1) и молекулы адгезии сосудистых клеток-1 (VCAM-1) в эндотелиальных клетках является самым ранним известным событием в инициации и прогрессировании атеросклероза [40], [41]. ].Чтобы определить, может ли берберин действовать выше этого события, мы проанализировали уровни VCAM-1 и ICAM-1 в поражениях аорты, выделенных из обработанных берберином ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^{— /-} мыши. И VCAM-1 (фиг. 2A), и ICAM-1 (фиг. 2B) были высоко экспрессированы в срезах атеросклеротических поражений корня аорты, полученных из ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK альфа 2 ^{— /-} мыши получали проатерогенную диету. Однако у животных ApoE ^-/-, которых лечили берберином, наблюдалось значительное подавление экспрессии VCAM-1 в ткани аорты, тогда как у мышей ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/- этого не происходило (фиг.2А). Лечение берберином ослабляло окрашивание ICAM-1 у мышей ApoE ^-/-, но не влияло на окрашивание ICAM-1 у мышей ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/- (фиг. 2B).

Рисунок 2. Берберин снижает экспрессию VCAM-1 и ICAM-1 у мышей ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- .

IHC проводили на срезах атеросклеротических бляшек дуги аорты, полученных от мышей ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- , получавших HFD.Срезы иммуноокрашивали антителами, специфичными к VCAM-1 ( A ) и ICAM-1 ( B ). *p<0,05 АроЕ ^-/- против . ApoE ^-/-/AMPK альфа 2 ^-/-, #p<0,05 берберин по сравнению с . транспортное средство. n = 7 или 8 для каждой группы.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0025436.g002

Берберин снижает уровень 4-гидрокси-2-еналя (4-HNE) и 3-нитротирсоина в атеросклеротических бляшках аорты

Окислительное повреждение полиненасыщенных липидов может привести к образованию сильнодействующих цитотоксических соединений, включая несколько γ-гидрокси-α, β-ненасыщенных альдегидов.Важным примером этих альдегидов является 4-HNE, который, как считается, играет важную роль в атерогенезе [42]. Мы исследовали, влияет ли лечение берберином на уровни 4-HNE при атеросклерозе аорты, используя окрашивание IHC. Как и ожидалось, повреждения, полученные из ApoE ^-/- животных, имели сильное иммунное окрашивание на 4-HNE (фиг. 3A). Окрашивание 4-HNE было заметно сильнее в аортах ApoE ^-/- /AMPK альфа 2 ^-/- , что указывает на то, что изоформа AMPK альфа 2 необходима для защиты эндотелия от повреждающего действия этого альдегида.У мышей ApoE ^-/- , но не у мышей ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- , иммунное окрашивание на 4-HNE было значительно снижено при лечении берберином.

Рисунок 3. Берберин снижает окислительный стресс in vivo.

Берберин блокировал экспрессию 4-HNE ( A ), MDA ( B ) и 3-NT ( C ) в атеросклеротических бляшках аорты из ApoE ^-/- мышей, но не ApoE ^-/- /AMPK alpha2 ^-/- мыши.ИГХ проводили на срезах атеросклеротических бляшек дуги аорты, полученных от мышей ApoE ^-/- и ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/-, получавших HFD. Срезы иммуноокрашивали антителами, специфичными к 4-HNE ( A ), MDA ( B ) или 3-NT ( C ). *p<0,05 АроЕ ^-/- против . ApoE ^-/-/AMPK альфа 2 ^-/-, #p<0,05 берберин по сравнению с . транспортное средство. n = 7 или 8 для каждой группы.

https://дои.org/10.1371/journal.pone.0025436.g003

Чтобы дополнительно подтвердить мнение о том, что стресс, вызванный перекисным окислением, участвует в атерогенезе у этих животных, мы использовали методы ИГХ для исследования поражений аорты на наличие малонового диальдегида (МДА), широко используемого маркера. перекисного окисления. Экспрессия MDA была четко выражена в поражениях как ApoE ^-/-, так и ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/-. Берберин заметно ослаблял окрашивание MDA в поражениях ApoE ^-/- , но не ApoE ^-/- /AMPK альфа 2 ^-/- (рис.3Б).

Нитрование белковых тирозинов считается «следом» активных форм азота, включая пероксинитрит. Чтобы дополнительно установить влияние берберина на окислительный стресс, мы отслеживали уровни 3-нитротирозиновых (NT)-модифицированных белков в аорте. Интенсивное окрашивание NT было обнаружено в аортах, полученных как от ApoE ^-/-, так и от ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/- (фиг. 3C). Лечение берберином устраняло окрашивание 3-NT в поражениях ApoE-/-, но не в поражениях ApoE ^-/- /AMPK альфа 2 ^-/- .Эти данные подтверждают мнение о том, что влияние берберина на окислительный стресс зависит от изоформы AMPK альфа-2.

Экспрессия UCP2, усиленная берберином, зависит от AMPK альфа 2

Разобщающий белок 2 (UCP2) играет важную роль в смягчении окислительного стресса в эндотелии [43]. В более ранней работе нашей группы было установлено, что AMPK регулирует экспрессию UCP2 в эндотелиальных клетках [36]. Поскольку разобщение митохондрий через UCP2, по-видимому, играет критическую роль в моделях атерогенеза у грызунов [36, 44], мы определили, повышает ли лечение берберином экспрессию UCP2.Если это так, то этот результат указывает на участие UCP2 в механизме подавления берберином окислительного стресса и воспаления сосудов. Экспрессия UCP2 почти отсутствовала у обработанных носителем мышей ApoE ^-/- или ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/- (фиг. 4). Лечение берберином значительно увеличивало окрашивание UCP2 в поражениях ApoE ^-/- , но не в поражениях ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- . Интересно, что экспрессия UCP2, усиленная берберином, была очевидна в эндотелиальных слоях, а не в субэндотелиальных структурах или средней оболочке, что указывает на то, что эффект берберина относительно специфичен для эндотелиальных клеток и интимной оболочки сосудистой системы.

Рисунок 4. Берберин увеличивает экспрессию UCP2 у мышей ApoE ^-/- , но не у мышей ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- .

ИГХ проводили на срезах атеросклеротических бляшек дуги аорты, полученных от мышей ApoE ^-/- и ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- , получавших HFD. Срезы иммуноокрашивали антителами, специфичными к UCP2. *p<0,05 АроЕ ^-/- против . АроЕ ^-/-/AMPK альфа 2 ^-/-, #p<0.05 берберин против . транспортное средство. n = 7 или 8 для каждой группы.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0025436.g004

Берберин увеличивает экспрессию UCP2 посредством активации AMPK

Хотя AMPK функционально активна в некоторых сосудистых клетках, включая эндотелиальные клетки, макрофаги и клетки гладких мышц сосудов, а берберин может оказывать антиатеросклеротическое действие, подавляя функции макрофагов и клеток гладких мышц сосудов, мы использовали эндотелиальные клетки, чтобы определить вклад Активация AMPK для индукции берберином экспрессии UCP2.Мы выполнили опосредованное siRNA молчание двух генов субъединиц AMPK альфа, AMPK альфа 1 и AMPK альфа 2, в HUVEC. Как и ожидалось, трансфекция либо siRNA AMPK альфа-1, либо siRNA AMPK альфа-2 подавляла экспрессию AMPK-альфа-1 или AMPK-альфа-2 (фиг. 5А). Важно отметить, что трансфекция либо AMPK альфа 1-, либо AMPK альфа 2-специфических siRNA устраняла индуцированную берберином экспрессию UCP2, тогда как контрольная siRNA не оказывала эффекта.

Рисунок 5. Инактивация AMPK отменяет экспрессию мРНК UCP2 и белка в HUVEC.

A. Иммуноблот-анализ UCP2 при индуцированной берберином трансфекции HUVEC с помощью AMPK alpah2 и альфа-2 siRNA. HUVEC трансфицировали контрольной миРНК или миРНК, специфичной к AMPK альфа 1 или AMPK альфа 2, в течение 48 часов, затем стимулировали берберином (10 мкмоль/л) в течение 2 часов. Лизаты клеток подвергали Вестерн-блот-анализу с использованием антител против AMPK альфа1, AMPK альфа 2, UCP2 и β-актина (n = 3; *p<0,05 носитель по сравнению с обработкой берберином, # p<0,05 контрольная миРНК по сравнению с .AMPK альфа 1 или альфа 2 миРНК). B. Количественный ПЦР-анализ мРНК UCP2 при лечении HUVEC берберином. HUVEC инфицировали миРНК AMPK альфа 1, альфа 2 или контрольной миРНК в течение 48 ч, затем стимулировали берберином (10 мкМоль/л). Суммарную мРНК выделяли в соответствии с инструкциями производителя (QIAGEN). мРНК UCP2 количественно определяли с помощью ПЦР в реальном времени. (n = 4; *p<0,05 носитель по сравнению с . лечение берберином, # p<0,05 контрольная миРНК по сравнению с . AMPK альфа 1 или альфа 2 миРНК).

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0025436.g005

Мы также непосредственно проанализировали мРНК UCP2 в HUVEC с использованием ПЦР в реальном времени. После обработки берберином уровень мРНК UCP2 был в 2,4 раза выше, чем в необработанных клетках. Результаты ПЦР в реальном времени также показали, что siRNAs как AMPK альфа-1, так и AMPK альфа-2 снижают активацию мРНК UCP2 берберином (фиг. 5B). Эти данные предполагают, что AMPK опосредует индукцию транскрипции UCP2 и экспрессию белка берберином.

Активация AMPK увеличивает транскрипцию UCP2

Затем мы исследовали механизм, с помощью которого активация AMPK изменяет экспрессию UCP2 в культивируемых эндотелиальных клетках. Чтобы дополнительно определить влияние AMPK на экспрессию UCP2, HUVEC инкубировали с несколькими структурно неродственными активаторами AMPK, включая аминоимидазолкарбоксамидрибонуклеотид (AICAR), метформин и берберин. AICAR и метформин увеличивали экспрессию UCP2 в 2 раза после 2-часовой обработки (рис. 6А). Более того, и AICAR, и берберин повышали уровни мРНК UCP2.Розиглитазон, агонист рецепторов, активируемых пролиферацией пероксисом (PPAR), использовали в качестве положительного контроля, поскольку известно, что он повышает уровни мРНК UCP2 [45] (рис. 6B). Предварительная обработка HUVEC ингибитором транскрипции актиномицином D резко снижала экспрессию UCP2, усиленную AICAR (рис. 6C). Точно так же циклогексимид, ингибитор трансляции белка, значительно ингибировал как берберин-, так и AICAR-индуцированную экспрессию UCP2 (рис. 6D). В целом, эти данные предполагают, что AMPK-зависимая регуляция экспрессии UCP2 с помощью берберина опосредована эффектами как на транскрипцию, так и на трансляцию.

Рисунок 6. Ингибирование транскрипции ослабляет AMPK-индуцированную мРНК UCP2 и белок UCP2 в HUVEC.

A. Влияние AICAR, метформина и берберина на экспрессию UCP2 в HUVEC. п = 3; *p<0,05, носитель против . лечение. B. Количественный ПЦР-анализ уровней мРНК UCP2 в конфлюэнтных HUVEC, обработанных AICAR (в течение 1 ч), берберином (в течение 1 ч) или розиглитазоном (в течение 24 ч). Общая мРНК была выделена, и мРНК UCP2 была количественно определена с помощью ПЦР в реальном времени по сравнению с GAPDH.п = 4; *p<0,05, носитель против . лечение. C. Влияние актиномицина D на повышающую регуляцию UCP2 берберином. Конфлюэнтные HUVEC предварительно обрабатывали актиномицином D (10 мкг/мл) в течение 1 часа, затем обрабатывали берберином или AICAR в течение 2 часов. Клеточные лизаты подвергали вестерн-блоттингу с использованием антител против UCP2 и β-актина. Блот представляет собой три блота из трех независимых экспериментов. D. Влияние циклогексимида на экспрессию UCP2 берберином и AICAR.Конфлюэнтные HUVEC предварительно обрабатывали циклогексимидом (10 мкмоль/л) в течение 1 ч, затем обрабатывали берберином или AICAR. Клеточные лизаты подвергали вестерн-блоттингу с использованием антител против UCP2 и β-актина. (n = 3; *p<0,05 носитель по сравнению с , обработка берберином или AICAR, #p<0,05 циклогексимид по сравнению с , носитель). E. Иммуноблот-анализ экспрессии UCP2 в клетках HUVEC, трансфицированных миРНК NRF1. HUVEC трансфицировали контрольной миРНК или миРНК NRF1 в течение 48 часов, затем обрабатывали берберином в течение 2 часов.Клеточные лизаты подвергали вестерн-блоттингу с использованием антител против NRF1 и UCP2. Блот представляет собой три блота из трех независимых экспериментов.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0025436.g006

NRF1 необходим для AMPK-зависимой повышающей регуляции UCP2

Фактор транскрипции NRF1 играет важную роль в регуляции ключевых генов, необходимых для митохондриальной дыхательной функции, и в содействии митохондриальному биогенезу, сопровождающему активацию UCP2 [46], [47].Мы использовали сайленсинг siRNA, чтобы выяснить, требуется ли NRF1 для AMPK-опосредованной экспрессии UCP2 в HUVEC. Интересно, что мы обнаружили, что берберин увеличивает экспрессию NRF1 в контрольной группе siRNA, что позволяет предположить, что берберин регулирует NRF1 (рис. 6E). Трансфекция siRNA NRF1, но не контрольной siRNA, устраняет активацию белка UCP2 берберином, указывая на то, что для AMPK-зависимой экспрессии UCP2 может потребоваться NRF1.

Берберин увеличивает маркеры синтеза митохондриального белка и транслокации UCP2

Открытие того, что экспрессия UCP2 повышалась при лечении берберином, привело нас к изучению того, может ли берберин влиять на другие важные митохондриальные белки.Поэтому мы исследовали, увеличивает ли берберин синтез других митохондриальных белков в HUVEC, сравнивая уровни белка в митохондриальной и цитоплазматической фракциях. Вызванная берберином экспрессия UCP2 наблюдалась во фракции митохондрий, но не в цитоплазме, как ожидалось (фиг. 7А). Берберин также увеличивал экспрессию цитохром-С-оксидазы, которая закодирована в митохондриальной ДНК и индуцируется mtTFA, специфическим для митохондрий фактором транскрипции. Активатор AMPK AICAR также повышал экспрессию цитохром-С-оксидазы и UCP2 в митохондриальной фракции (рис.7Б). Этот набор данных свидетельствует о том, что берберин стимулирует митохондриальный биогенез посредством активации AMPK.

Рисунок 7. Митохондриальный биогенез увеличивает экспрессию UCP2 при лечении HUVEC берберином.

А и Б. Иммуноблот-анализ митохондриальных белков в HUVEC. Конфлюэнтные HUVEC обрабатывали берберином ( A ) или AICAR ( B ) и выделяли митохондриальную фракцию из лизированных клеток с использованием набора для выделения митохондрий (Therm, Pockford) в соответствии с инструкциями производителя.Вестерн-блоттинг митохондриальной фракции исследовали антителами, специфичными к цитохрому С, цитохром-С-оксидазе II (ЦОГ II) и UCP2. Блот представляет собой три блота из трех независимых экспериментов. C. Влияние хлорамфеникола на повышающую регуляцию UCP2 берберином. Конфлюэнтные HUVEC предварительно обрабатывали хлорамфениколом (10 мкмоль/л), затем обрабатывали берберином в течение 2 часов. Клеточные лизаты подвергали вестерн-блоттингу с использованием антител против UCP2 и β-актина.Блот представляет собой три блота из трех независимых экспериментов. D. Иммуноблот-анализ UCP2 при индуцированной берберином трансфекции HUVECs с помощью mtTFA siRNA. HUVEC трансфицировали контрольной siRNA или mtTFA siRNA в течение 48 часов, затем обрабатывали берберином в течение 2 часов. Клеточные лизаты подвергали вестерн-блоттингу с использованием антител против UCP2, mtTFA и β-актина. (n = 3; *p<0,05 носитель по сравнению с . берберином, #p<0,05 контрольная миРНК по сравнению с миРНК мтТФУК). E. Динамика экспрессии mtTFA. Конфлюэнтные HUVEC обрабатывали берберином (10 мкмоль/л) в течение указанного времени. Клеточные лизаты подвергали вестерн-блоттингу с использованием антител против mtTFA и β-актина. Блот представляет собой три блота из трех независимых экспериментов.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0025436.g007

Мы также исследовали, может ли митохондриальный биогенез способствовать явному повышению уровней белка UCP2 в митохондриях за счет увеличения транслокации UCP2 из ядра, где он кодируется. в митохондрии, где он действует.Предварительная обработка HUVEC хлорамфениколом, ингибитором транскрипции митохондриальной ДНК, заметно снижала индуцированную берберином экспрессию UCP2 (рис. 7C). Это открытие подтверждает идею о том, что транслокация UCP2 ингибируется в анализе HUVEC.

mtTFA — известный митохондриальный транскрипционный фактор, контролирующий транскрипцию митохондриальной ДНК [48]. Трансфекция HUVEC миРНК, нацеленной на mtTFA, но не контрольной миРНК, резко снижала индуцированное берберином увеличение экспрессии UCP2 (фиг.7Д). Кроме того, индукция берберином экспрессии mtTFA наблюдалась уже через 30 минут после обработки берберином, что свидетельствует о том, что митохондриальный биогенез стимулируется берберином (Fig. 7E).

Обсуждение

Выдающимся и новым открытием этого исследования является то, что берберин, по-видимому, проявляет свои антиатерогенные свойства через AMPK-зависимое подавление АФК, вероятно, через повышенную экспрессию UCP-2. Кроме того, мы обнаружили, что экспрессия UCP2, усиленная AMPK, опосредуется NRF1. Этот вывод согласуется с нашим недавним сообщением о том, что субъединица α2 AMPK имеет решающее значение для смягчения стресса ER и защиты от атеросклероза in vivo [49].Наши результаты согласуются с предыдущими сообщениями о том, что активация AMPK полифенолом S17834 подавляет атеросклероз, вызванный диабетом, у мышей с нокаутом рецептора ЛПНП (LDLr) [50] и что ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- у мышей наблюдается ускоренное развитие поражений аорты, вызванных диетой с высоким содержанием жиров.

UCP2 представляет собой митохондриальный переносчик, присутствующий во внутренней мембране митохондрий и принадлежащий к семейству митохондриальных переносчиков анионов. Сообщалось, что отсутствие UCP2 у мышей увеличивает окислительный стресс [51], [52] и усиливает развитие атеросклеротических бляшек [53].Все больше данных, обобщенных ниже, подтверждают роль UCP2 как модулятора митохондриальных активных форм кислорода (АФК) [54], [55]. Сообщается, что UCP2 снижает АФК не только в митохондриях, но и во всей клетке и даже во внеклеточном пространстве [43], [56], [57]. Недавний отчет указывает, что UCP2-опосредованное разобщение в эндотелиальных клетках может снижать внеклеточные АФК при совместной инкубации с липопротеинами низкой плотности (ЛПНП) [43], [58]. У мышей ob / ob с дефицитом лептина сниженные уровни UCP2 и повышенная продукция митохондриальных АФК по сравнению с нормальными мышами обнаруживаются в сочетании с макрофагами [59].Мыши UCP2 ^-/- [52] и мыши UCP3 ^-/- [60] показали более высокие уровни АФК в макрофагах и мышцах соответственно. Кроме того, мыши с удаленным рецептором ЛПНП демонстрировали обширные атеросклеротические бляшки, вызванные HFD, когда им пересаживали костный мозг от мышей UCP2 ^-/- , и этот фенотип не наблюдался, когда они получали трансплантаты костного мозга от мышей UCP2 ^+/+ . 53]. Таким образом, эти данные подтверждают ключевую роль UCP2 у мышей в смягчении окислительного стресса и ингибировании путей, ведущих к развитию атеросклеротических бляшек [44].

Мы постоянно обнаруживали повышенную экспрессию UCP2, связанную со снижением уровней маркеров окислительного стресса у мышей ApoE ^-/- , получавших берберин. И наоборот, снижение экспрессии UCP2 наблюдалось параллельно усилению воспаления и окислительного стресса. Действительно, мыши ApoE ^-/-/AMPK alpha 2 ^-/- проявляют повышенный окислительный стресс с дефектной экспрессией UCP2. Ускоренные поражения аорты у мышей ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- подавляются антиоксидантом темполом (проницаемым для клеток свободным радикалом нитроксида, который действует как поглотитель радикалов и спиновая ловушка оксида азота) [49], что указывает на причинную роль АФК в поражении аорты у мышей ApoE ^-/- /AMPK alpha 2 ^-/- .Таким образом, разумно предположить, что повышенная экспрессия и активация UCP2 под действием berberine играют главный фактор в смягчении повреждений аорты in vivo . Наводящие на размышления эксперименты с культивируемыми клетками, описанные здесь, не касаются непосредственно того, может ли усиленная берберином экспрессия UCP2 снижать окислительный стресс и атеросклероз in vivo . Таким образом, необходимы дальнейшие исследования, чтобы продемонстрировать эту предполагаемую роль UCP2 in vivo .

Наши опубликованные данные [31] показали, что выработка АФК ответственна за активацию AMPK, индуцированную берберином, что, по-видимому, противоречит ингибирующим эффектам берберина на АФК, описанным здесь.Этот очевидный конфликт может быть разрешен концепцией «ишемического прекондиционирования», при которой субоптимальные концентрации АФК активируют экспрессию генов антиоксидантов или подавляют экспрессию или активность ферментов, продуцирующих окислитель. Например, наши опубликованные отчеты показали, что AMPK может подавлять продукцию АФК путем подавления NAD(P)H-оксидазы [61] и увеличения экспрессии генов антиоксидантов, таких как MnSOD или UCP2 [36]. Недавние доказательства того, что активация AMPK снижает индуцированную гипергликемией продукцию митохондриальных АФК, были предоставлены Kukidome et al., которые показали, что индукция MnSOD и стимулирование митохондриального биогенеза происходит посредством активации пути AMPK-PGC1α в HUVEC [62]. Интересно, что группа Бранд продвигала идею о том, что O ₂ ^— сам активирует UCP-2 с помощью неуказанных механизмов с матричной стороны митохондрии [63]. Хотя молекулярные механизмы могут быть сложными, разумно предположить, что ось ROS-AMPK-UCP2 может быть ключом к поддержанию окислительно-восстановительного гомеостаза и функций сосудов.

Таким образом, мы продемонстрировали, что берберин ограничивает поражение аорты in vivo посредством активации AMPK. Кроме того, уменьшение поражений аорты под действием берберина, по-видимому, опосредовано повышенной экспрессией UCP2, который подавляет окислительный стресс и воспаление сосудов. Представленные здесь данные подтверждают концепцию, что AMPK может быть важной терапевтической мишенью для лечения атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний.

Благодарности

Мы благодарны доктору.Benoit Viollet за предоставление мышей с нокаутом AMPK.

Авторские взносы

Задумал и спроектировал эксперименты: M-HZ. Проведены эксперименты: КВ БЛ МЗ. Проанализированы данные: QW BL MZ. Написал статью: QW NS YZ M-HZ.

Каталожные номера

1. 1. Арайне М.С., Султана Н., Бахадур С.С. (2007) История бербериса: берберис обыкновенный в терапии. Пак J Pharm Sci 20: 83–92.
2. 2. Yin J, Zhang H, Ye J (2008)Традиционная китайская медицина в лечении метаболического синдрома.Endocr Metab Immune Disord Drug Targets 8: 99–111.
3. 3. Yin HQ, Wang B, Zhang JD, Lin HQ, Qiao Y и др. (2008)Влияние традиционной китайской медицины Шу-Май-Тан на ослабление TNF-альфа-индуцированного миокардиального фиброза у крыс с ишемией миокарда. Дж. Этнофармакол 118: 133–139.
4. 4. Серафим Т.Л., Оливейра П.Дж., Сардао В.А., Перкинс Э., Парк Д. и другие. (2008) Различные концентрации берберина приводят к различным моделям клеточной локализации и эффектам клеточного цикла в клеточной линии меланомы.Рак Chemother Pharmacol 61: 1007–1018.
5. 5. Viollet B, Andreelli F, Jorgensen SB, Perrin C, Geloen A, et al. (2003) Каталитическая субъединица AMP-активируемой протеинкиназы альфа2 контролирует чувствительность всего организма к инсулину. Дж. Клин Инвест 111: 91–98.
6. 6. Guo Y, Wang QZ, Li FM, Jiang X, Zuo YF и др. (2008) Биохимические пути антиатеросклеротического действия берберина. Chin Med J (англ.) 121: 1197–1203.
7. 7. Лян К.В., Тинг К.Т., Инь С.К., Чен Ю.Т., Лин С.Дж. и др.(2006)Берберин подавляет MEK/ERK-зависимый сигнальный путь Egr-1 и ингибирует повторный рост гладкомышечных клеток сосудов после механического повреждения in vitro. Биохим Фармакол 71: 806–817.
8. 8. Чо Б.Дж., Им Э.К., Квон Дж.Х., Ли К.Х., Шин Х.Дж. и др. (2005) Берберин ингибирует выработку лизофосфатидилхолином индуцированных активных форм кислорода и путь ERK1/2 в гладкомышечных клетках сосудов. Мол Клетки 20: 429–434.
9. 9. Cicero AF, Rovati LC, Setnikar I (2007)Эвлипидемические эффекты берберина, вводимого отдельно или в сочетании с другими природными средствами, снижающими уровень холестерина.Простое слепое клиническое исследование. Arzneimittelforschung 57: 26–30.
10. 10. Конг В., Вэй Дж., Абиди П., Лин М., Инаба С. и др. (2004) Берберин — новый препарат для снижения уровня холестерина, работающий по уникальному механизму, отличному от статинов. Nat Med 10: 1344–1351.
11. 11. Чжан Х., Вэй Дж., Сюэ Р., Ву Дж. Д., Чжао В. и др. (2010) Берберин снижает уровень глюкозы в крови у пациентов с сахарным диабетом 2 типа за счет увеличения экспрессии рецепторов инсулина. Метаболизм 59: 285–292.
12. 12. Харди Д.Г., Сакамото К. (2006)AMPK: ключевой датчик состояния топлива и энергии в скелетных мышцах. Физиология (Bethesda) 21: 48–60.
13. 13. Canto C, Auwerx J (2010)АМР-активируемая протеинкиназа и ее последующие пути транскрипции. Cell Mol Life Sci 67: 3407–3423.
14. 14. Ширвани Н.А., Зоу М.Х. (2010)AMPK при сердечно-сосудистых заболеваниях. Acta Pharmacol Sin 31: 1075–1084.
15. 15. Lee-Young RS, Griffee SR, Lynes SE, Bracy DP, Ayala JE и др.(2009) Протеинкиназа, активируемая АМФ, в скелетных мышцах необходима для метаболического ответа на физические упражнения in vivo. J Biol Chem 284: 23925–23934.
16. 16. Choi HC, Song P, Xie Z, Wu Y, Xu J и др. (2008) Активные формы азота необходимы для активации AMP-активируемой протеинкиназы статинами in vivo. J Biol Chem 283: 20186–20197.
17. 17. Кусакабе Т., Таниока Х., Эбихара К., Хирата М., Миямото Л. и др. (2009)Благотворное влияние лептина на гликемический и липидный контроль в мышиной модели диабета 2 типа с повышенным ожирением, вызванным стрептозотоцином и диетой с высоким содержанием жиров.Диабетология 52: 675–683.
18. 18. Uotani S, Abe T, Yamaguchi Y (2006)Лептин активирует AMP-активированную протеинкиназу в клетках печени через JAK2-зависимый путь. Biochem Biophys Res Commun 351: 171–175.
19. 19. Авадзава М., Уэки К., Инабэ К., Ямаути Т., Кубота Н. и др. (2011)Адипонектин повышает чувствительность к инсулину за счет увеличения экспрессии IRS-2 в печени через макрофагальный IL-6-зависимый путь. Cell Metab 13: 401–412.
20. 20. Palanivel R, Vu V, Park M, Fang X, Sweeney G (2008)Дифференциальное влияние адипокинов, полученных из первичных адипоцитов дикого типа, по сравнению с диабетическими крысами, индуцированными стрептозотоцином, на метаболизм глюкозы и жирных кислот в кардиомиоцитах.Дж. Эндокринол 199: 389–397.
21. 21. Кубота Н., Яно В., Кубота Т., Ямаути Т., Ито С. и др. (2007) Адипонектин стимулирует AMP-активированную протеинкиназу в гипоталамусе и увеличивает потребление пищи. Cell Metab 6: 55–68.
22. 22. Ye JM, Dzamko N, Hoy AJ, Iglesias MA, Kemp B, et al. (2006) Лечение розиглитазоном усиливает опосредованное AMP-активируемой протеинкиназой поглощение глюкозы мышцами и жировой тканью у крыс с высоким содержанием жира. Диабет 55: 2797–2804.
23. 23.Tsai JS, Chen CY, Chen YL, Chuang LM (2010) Розиглитазон ингибирует адгезию моноцитов/макрофагов за счет образования адипонектина de novo в моноцитах человека. J Cell Biochem 110: 1410–1419.
24. 24. Hardie DG (2008) AMPK: ключевой регулятор энергетического баланса в отдельной клетке и во всем организме. Int J Obes (Лондон) 32: Приложение 4S7–12.
25. 25. Fisslthaler B, Fleming I (2009)Активация и передача сигналов с помощью AMP-активируемой протеинкиназы в эндотелиальных клетках.Циркуляр Рез. 105: 114–127.
26. 26. Gauthier MS, O’Brien EL, Bigornia S, Mott M, Cacicedo JM, et al. (2011)Снижение активности протеинкиназы, активируемой АМФ, связано с усилением воспаления в висцеральной жировой ткани и резистентностью к инсулину всего тела у людей с патологическим ожирением. Biochem Biophys Res Commun 404: 382–387.
27. 27. Еленик Т., Россмайсль М., Куда О., Жилкова З.М., Медрикова Д. и соавт. (2010) Субъединица AMP-активируемой протеинкиназы альфа2 необходима для сохранения чувствительности печени к инсулину за счет n-3 полиненасыщенных жирных кислот.Диабет 59: 2737–2746.
28. 28. Beall C, Piipari K, Al-Qassab H, Smith MA, Parker N, et al. (2010)Потеря субъединицы AMP-активируемой протеинкиназы альфа2 в бета-клетках мыши нарушает стимулированную глюкозой секрецию инсулина и подавляет их чувствительность к гипогликемии. Биохим J 429: 323–333.
29. 29. Cheng Z, Pang T, Gu M, Gao AH, Xie CM и др. (2006) Стимулированное берберином поглощение глюкозы в мышечных трубках L6 включает как AMPK, так и p38 MAPK. Биохим Биофиз Акта 1760: 1682–1689.
30. 30. Lee YS, Kim WS, Kim KH, Yoon MJ, Cho HJ и др. (2006) Берберин, натуральный растительный продукт, активирует АМФ-активированную протеинкиназу с благотворным метаболическим эффектом при диабетических и инсулинорезистентных состояниях. Диабет 55: 2256–2264.
31. 31. Han Y, Wang Q, Song P, Zhu Y, Zou MH (2010)Окислительно-восстановительная регуляция AMP-активируемой протеинкиназы. ПЛОС Один 5: e15420.
32. 32. Wang H, Zhang M, Lv Q, Yue N, Gong B (2009)Определение берберина и изучение механизма тушения флуоресценции между берберином и катализируемым ферментом продуктом.Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc 73: 682–686.
33. 33. Ван И, Хуанг И, Лам К.С., Ли И, Вонг В.Т. и др. (2009)Берберин предотвращает повреждение эндотелия, вызванное гипергликемией, и усиливает вазодилатацию посредством протеинкиназы, активируемой аденозинмонофосфатом, и эндотелиальной синтазы оксида азота. Cardiovasc Res 82: 484–492.
34. 34. Йоргенсен С.Б., Виоллет Б., Андреелли Ф., Фросиг С., Бирк Дж.Б. и др. (2004) Нокаут альфа2, но не альфа1 5′-AMP-активируемой изоформы протеинкиназы отменяет 5-аминоимидазол-4-карбоксамид-1-бета-4-рибофуранозид, но не индуцированное сокращением поглощение глюкозы в скелетных мышцах.J Biol Chem 279: 1070–1079.
35. 35. Фернандес-Эрнандо С., Аках Э., Ю Дж., Суарес Ю., Мурата Т. и др. (2007)Потеря Akt1 приводит к тяжелому атеросклерозу и окклюзионной болезни коронарных артерий. Cell Metab 6: 446–457.
36. 36. Xie Z, Zhang J, Wu J, Viollet B, Zou MH (2008)Повышение регуляции митохондриального разобщающего белка-2 с помощью AMP-активируемой протеинкиназы в эндотелиальных клетках ослабляет окислительный стресс при диабете. Диабет 57: 3222–3230.
37. 37.Zhang M, Dong Y, Xu J, Xie Z, Wu Y и др. (2008)Тромбоксановый рецептор активирует АМФ-активируемую протеинкиназу в гладкомышечных клетках сосудов через перекись водорода. Циркуляр Рез. 102: 328–337.
38. 38. Breslow JL (1996)Модели атеросклероза на мышах. Наука 272: 685–688.
39. 39. Дэвис С.П., Карлинг Д., Харди Д.Г. (1989)Распределение в тканях АМФ-активируемой протеинкиназы и отсутствие активации циклической АМФ-зависимой протеинкиназой, изученное с использованием специфического и чувствительного анализа пептидов.Евр. Дж. Биохим 186: 123–128.
40. 40. Wuthrich RP, Jevnikar AM, Takei F, Glimcher LH, Kelley VE (1990)Экспрессия молекулы межклеточной адгезии-1 (ICAM-1) повышается при аутоиммунном мышином волчаночном нефрите. Ам Дж. Патол 136: 441–450.
41. 41. Росс Р. (1999) Атеросклероз является воспалительным заболеванием. Am Heart J 138: S419–420.
42. 42. Виейра О., Эскаргейл-Блан И., Юргенс Г., Борнер К., Алмейда Л. и др. (2000)Окисленные ЛПНП изменяют активность убиквитин-протеасомного пути: потенциальная роль в апоптозе, индуцированном окисленным ЛПНП.FASEB J 14: 532–542.
43. 43. Дюваль С., Негре-Сальвер А., Догило А., Сальвер Р., Пенико Л. и др. (2002)Увеличение производства активных форм кислорода с помощью антисмысловых олигонуклеотидов, направленных против разобщения белка 2 в мышиных эндотелиальных клетках. Biochem Cell Biol 80: 757–764.
44. 44. Мукдар Ф., Робиду Дж., Лайт О., Пи Дж., Даниэль К.В. и др. (2009)Сниженная антиоксидантная способность и атеросклероз, вызванный диетой, у мышей с дефицитом белка-2.J Lipid Res 50: 59–70.
45. 45. Джо С.Х., Ян С., Мяо К., Марзек М., Васик М.А. и др. (2006) Гамма-рецептор, активируемый пролифератором пероксисом, способствует выживанию лимфоцитов за счет своего воздействия на клеточную метаболическую активность. Дж. Иммунол 177: 3737–3745.
46. 46. Wu Z, Puigserver P, Andersson U, Zhang C, Adelmant G, et al. (1999) Механизмы, контролирующие митохондриальный биогенез и дыхание посредством термогенного коактиватора PGC-1. Ячейка 98: 115–124.
47. 47.Yu L, Yang SJ (2010)АМР-активируемая протеинкиназа опосредует зависящую от активности регуляцию экспрессии гамма-коактиватора-1альфа, активируемого пролифератором пероксисом, и ядерного респираторного фактора 1 в нейронах зрительной коры крысы. Неврология 169: 23–38.
48. 48. Клейтон Д.А. (2000)Транскрипция и репликация митохондриальной ДНК. Hum Reprod 15: Приложение 211–17.
49. 49. Донг И, Чжан М, Лян Б, Се Зи, Чжао Зи и др. Снижение АМФ-активируемой протеинкиназы альфа2 увеличивает стресс эндоплазматического ретикулума и атеросклероз in vivo.Тираж 121: 792–803.
50. 50. Занг М., Сюй С., Мейтленд-Тулан К.А., Зукколло А., Хоу С. и др. (2006) Полифенолы стимулируют AMP-активированную протеинкиназу, снижают уровень липидов и ингибируют ускоренный атеросклероз у мышей с диабетом и дефицитом рецептора ЛПНП. Диабет 55: 2180–2191.
51. 51. Horimoto M, Resnick MB, Konkin TA, Routhier J, Wands JR, et al. (2004)Экспрессия разобщающего белка-2 при раке толстой кишки человека. Clin Cancer Res 10: 6203–6207.
52. 52.Horimoto M, Fulop P, Derdak Z, Wands JR, Baffy G (2004) Дефицит разобщающего белка-2 способствует окислительному стрессу и задерживает регенерацию печени у мышей. Гепатология 39: 386–392.
53. 53. Блан Дж., Алвес-Гуэрра М.С., Эспозито Б., Руссе С., Гурди П. и др. (2003) Защитная роль разобщающего белка 2 при атеросклерозе. Тираж 107: 388–390.
54. 54. Арсениевич Д., Онума Х., Пеккер С., Раймбо С., Мэннинг Б.С. и соавт. (2000) Нарушение гена разобщающего белка-2 у мышей показывает роль в иммунитете и производстве активных форм кислорода.Нат Жене 26: 435–439.
55. 55. Негре-Сальвейр А., Хирц С., Каррера Г., Казенав Р., Троли М. и др. (1997) Роль разобщающего белка-2 в качестве регулятора образования митохондриальной перекиси водорода. FASEB J 11: 809–815.
56. 56. Pecqueur C, Couplan E, Bouillaud F, Ricquier D (2001)Генетический и физиологический анализ роли разобщающих белков в энергетическом гомеостазе человека. J Mol Med 79: 48–56.
57. 57. Лоуэлл Б.Б., Шульман Г.И. (2005)Митохондриальная дисфункция и диабет 2 типа.Наука 307: 384–387.
58. 58. Ружицкая М., Скобисова Е., Дласкова А., Санторова Ю., Смолькова К. и соавт. (2005)Привлечение митохондриального разобщающего белка UCP2 после индукции липополисахарида. Int J Biochem Cell Biol 37: 809–821.
59. 59. Fulop P, Derdak Z, Sheets A, Sabo E, Berthiaume EP и др. (2006) Отсутствие UCP2 уменьшает Fas-опосредованное повреждение печени у мышей ob/ob и показывает важность клеточно-специфической экспрессии UCP2. Гепатология 44: 592–601.
60. 60.Видал-Пуиг А.Дж., Груич Д., Чжан С.И., Хаген Т., Босс О. и др. (2000)Энергетический обмен у мышей с нокаутом гена протеина 3. J Biol Chem 275: 16258–16266.
61. 61. Ван С., Чжан М., Лян Б., Сюй Дж., Се З. и др. (2010) Делеция AMPKalpha2 вызывает аберрантную экспрессию и активацию NAD(P)H оксидазы и последующую эндотелиальную дисфункцию in vivo: роль протеасом 26S. Циркуляр Рез. 106: 1117–1128.
62. 62. Кукидоме Д., Нисикава Т., Сонода К., Имото К., Фудзисава К. и др.(2006)Активация АМФ-активируемой протеинкиназы снижает индуцированную гипергликемией продукцию митохондриальных активных форм кислорода и способствует митохондриальному биогенезу в эндотелиальных клетках пупочной вены человека. Диабет 55: 120–127.
63. 63. Echtay KS, Murphy MP, Smith RA, Talbot DA, Brand MD (2002)Супероксид активирует митохондриальный разобщающий белок 2 со стороны матрицы. Исследования с использованием целевых антиоксидантов. J Biol Chem 277: 47129–47135.