Продолголетие ру: Китайская традиционная медицина | Восточная медицина, омоложение и долголетие

Содержание

Prodolgoletie.ru - анализ сайта, seo характеристики сайта

Title

Омоложение и Долголетие, Восточная медицина

Keywords

похудение, диета, омоложение, долголетие, точечный массаж, акупунктура, правильное питание, как похудеть , рецепты восточной медицины, Усин, цигун, Инь,ян, энергия ци, притчи,секреты долголетия, китайское долголетие, теория усин, цигун для глаз, тосты про долголетие, долголетие, враг долголетия, китайское долголетие, очищение организма, здоровый позвоночник, очищение организма рисом, чем полезен имбирь, упражнения для шейного отдела позвоночника, меридиан печени, меридиан желчного пузыря, тройно

Description

Блог об омоложении, долголетии, похудении, диетах, акупунктуре, цигун, точечном массаже и других методах восточной медицины

Кодировка

UTF-8

Размер страницы

113.77 КБ

Количество слов

1 300

Длина текста на странице

20 449 симв.

Длина текста без пробелов

18 856 симв.

<h2>

  • Восточная медицина, омоложение и долголетие

<h3>

  • Восточная медицина, омоложение и долголетие
  • Что полезно организму зимой- китайская медицина
  • Точки долголетия
  • Точка Красоты Сань-Инь-Цзяо (RP 6)
  • Причины и механизмы развития болезней -7 основных учений китайской медицины
  • Кальций из яичной скорлупы
  • Китайский массаж лица Гуаша
  • Тематические материалы по здоровью — в одном месте!
  • Что такое чай Кудин — как заваривать, когда применять
  • Очищение кишечника семенами льна
  • Как избавиться от боли в суставах (медовая лепешка)

<h4>

Анализ текста

  • 2.46% ( 32 ) медицина
  • 2.31% ( 30 ) долголетие
  • 1.85% ( 24 ) китайская
  • 1.69% ( 22 ) массаж
  • 1.54% ( 20 ) далее
  • 1.54% ( 20 ) читать
  • 1.46% ( 19 ) восточная
  • 1. 46% ( 19 ) рецепт
  • 1.08% ( 14 ) омоложение
  • 1.08% ( 14 ) организм
  • 1.00% ( 13 ) галина
  • 1.00% ( 13 ) здоровый
  • 0.92% ( 12 ) аполонская
  • 0.92% ( 12 ) секреты
  • 0.85% ( 11 ) facebook
  • 0.85% ( 11 ) twitter
  • 0.85% ( 11 ) очищение
  • 0.77% ( 10 ) автор
  • 0.77% ( 10 ) уход
  • 0.69% ( 9 ) данные

Анализ сайта prodolgoletie.ru и отзывы


Траст xt = 5 (-1)

www.prodolgoletie.ru

Омоложение и Долголетие, Восточная медицина


Видимость сайта prodolgoletie.ru в Yandex
Данные предоставлены MegaIndex


Видимость сайта prodolgoletie.ru в Google
Данные предоставлены MegaIndex

    • Majesticseo:
    • Ссылок всего:
    • 3324
    • Доменов в ссылках:
    • 395
    • MJ индекс:
    • 15366
    • IP доноров:
    • 277
    • Подсетей:
    • 214
    • TF:
    • 13
    • CF:
    • 20

    • Данные MEGAINDEX :
    • Ссылки на сайт:
    • доноров:
    • 389
    • всего ссылок:
    • 2462
    • уникальных:
    • 632
    • анкоров:
    • 280
    • слов:
    • 1041 (уник. - 461)
    • nofollow:
    • 694
    • noindex:
    • 68
    • IP:
    • 257
    • Ссылки c сайта:
    • акцепторов
    • 1
    • всего ссылок:
    • 1
    • уникальных:
    • 1
    • анкоров:
    • 1
    • слов:
    • 1 (уник. - 1)
    • nofollow:
    • 1
    • noindex:
    • 0
    • Данные Linkpad:
    • Дата данных:
    • 19.09.2017
    • Страниц в индексе:
    • 4487
    • Ссылки на сайт:
    • доноров:
    • 3014
    • всего ссылок:
    • 4917
    • из них ссылок с главной:
    • 1
    • со 2 уровня (уник. доменов):
    • 56 (доменов - 38)
    • с 3 уровня:
    • 3428 (доменов - 2970)
    • с 4 и более:
    • 1432 (доменов - 53)
    • Ссылки с сайта:
    • акцепторов:
    • 287
    • всего ссылок:
    • 36833
    • из них ссылок с главной:
    • 1
    • со 2 уровня:
    • 330
    • с 3 уровня:
    • 32726
    • с 4 и более:
    • 32726
    • Анкоры:
    • количество анкоров на сайт:
    • 88
    • анкоров с сайта:
    • 187

Информация устарела. Авторизуйтесь.

Посмотреть отзывы в сервисе Яндекса


уникальные омолаживающие упражнения китайских императриц

Экология жизни.Каждый, кто начинает практиковать эти упражнения, буквально с первых минут занятий начинает чувствовать, как в нем нарастают жизненные силы, как бьет в его теле освежающий источник энергии

Происхождение этих методик окутано легендами. Вот одна из этих легенд. В Поднебесной был монастырь, который славился тем, что монахи доживали там до 120 лет, оставаясь бодрыми и энергичными, как душой, так и телом.

Каждый, кто начинает практиковать эти упражнения, буквально с первых минут занятий начинает чувствовать, как в нем нарастают жизненные силы, как бьет в его теле освежающий источник энергии.

Китайцы сформулировали 4 основных принципа, работающих для всех видов китайской медицины, в том числе и для Ху-Чон-Ганг. Вот эти принципы:

1. Все движения должны быть неторопливы. Вы только в самом начале пути. Не стесняйтесь двигаться со скоростью улитки или черепахи.

2. Дыхание должно быть естественным. Проследите за своим дыханием. Но не стоит “командовать ” собственным дыханием. Дышите ровно и спокойно.

3. Упражнения должны выполняться без какого-либо напряжения. Представьте, что вы- марионетка: позвольте себе двигаться медленно, очень медленно.

4. На протяжении всего упражнения сосредоточьтесь на чем-нибудь одном. и главное- не напрягайтесь при этом! Сосредоточение внимания на определенных точках тела ускоряет воздействие упражнения. Например, при концентрации внимания на ладони активизируются все меридианы, проходящие через точки ладони.

Для выполнения этих упражнений не требуется много места- можно их выполнять рядом со своим письменным столом, проблемы свободного пространства не возникает.

Конечно, было бы здорово выполнять омолаживающие упражнения на природе, но такая возможность есть далеко не всегда.

Китайцы рекомендуют заниматься упражнениями Ху-Чон-Ганг ранним утром или вечером, перед сном. При этом время перед сном считается самым удобным.

Выберите подходящую одежду для занятий. Одежда должна быть просторной, не стесняющей движений. Тесный пояс, например, может помешать при некоторых движениях. Не подходят для занятий туфли на высоком каблуке: китайцы предпочитают легкие тапочки на тонкой подошве, чтобы не нарушался контакт с энергией земли.

Лучше всего выполнять упражнения в той последовательности, которую я приведу. Комплекс упражнений выполняется целиком- один раз в день.

Упражнение 1. Открываем плечи

Для чего нужно это упражнение? Оно как бы открывает плечи, разворачивает их, освобождая меридианы, проходящие по плечам, от возможных блоков.

Встаньте прямо, ноги на ширине плеч. Руки расслабленно свисают вдоль тела. Дышите спокойно, глубоко. Почувствуйте, как расширяется ваша грудная клетка. И улыбайтесь, представляя , что вы молоды и полны сил.

Руки положите на ноги и слегка присядьте, корпусом тела слегка подавшись вперед. Медленно переместите руки на коленные чашечки.

А теперь чуть приподнимите бедра. Голову и плечи опустите вниз, руки снимите с коленных чашечек и свободно свесьте вниз. Сделайте выдох.

Теперь начинайте медленно приподниматься. Встаньте в исходное положение.

Повторяйте данное упражнение 8 раз.

Упражнение 2. “Возвращение весны”

Это упражнение считается важнейшим омолаживающим упражнением Ху-Чон-Ганг. Вибрирующие, пружинящие движения благоприятно сказываются на обмене веществ, улучшают цвет кожи. Лицо очищается, избавляется от прыщей, исчезает шелушение кожи.

Внимание! Есть противопоказания. Это упражнение не рекомендуется выполнять беременным женщинам. Запрещено выполнение этого упражнения и тем, кто недавно перенес серьезную операцию на брюшной полости (менее 6 месяцев назад), а также при обильном менструальном кровотечении.

Встаньте прямо, ноги на ширине плеч. Руки свободно свисают вдоль тела.

Сделайте глубокий вдох и на выдохе слегка присядьте, продолжая удерживать корпус тела в прямом положении. Постарайтесь осознанно расслабить все мускулы тела, а затем делайте пружинистые движения коленками так, чтобы вибрация распространялась по всему телу. Ни в коем случае не пытайтесь командовать вашим дыханием, оно само настроится на ритм вибраций.

Всего вы должны сделать порядка 164 вибрирующих движений.опубликовано econet.ru

Мои похорона — Высоцкий. Полный текст стихотворения — Мои похорона

Сон мне снится - вот те на:
Гроб среди квартиры,
На мои похорона
Съехались вампиры,-

Стали речи говорить -

Все про долголетие,-
Кровь сосать решили погодить:
Вкусное - на третие.

В гроб вогнали кое-как,
А самый сильный вурдалак
Все втискивал и всовывал,-
И плотно утрамбовывал,-
Сопел с натуги, сплевывал
И желтый клык высовывал.

Очень бойкий упырек
Стукнул по колену,
Подогнал - и под шумок
Надкусил мне вену.

А умудренный кровосос
Встал у изголовия
И очень вдохновенно произнес
Речь про полнокровие.

И почетный караул
Для приличия всплакнул,-
Но я чую взглядов серию
На сонную мою артерию:
А если кто пронзит артерию -
Мне это сна грозит потерею.

Погодите, спрячьте крюк!
Да куда же, черт, вы!
Я же слышу, что вокруг,-
Значит, я не мертвый.

Яду капнули в вино,
Ну а мы набросились,-
Опоить меня хотели, но
Опростоволосились.

Тот, кто в зелье губы клал,-
В самом деле дуба дал,-
Ну, а мне как рвотное
То зелье приворотное:
Здоровье у меня добротное,
И закусил отраву плотно я.

Так почему же я лежу,
Дурака валяю,-
Ну почему, к примеру, не заржу -
Их не напугаю?!

Я б их мог прогнать давно
Выходкою смелою -

Мне бы взять пошевелиться, но...
Глупостей не делаю.

Безопасный как червяк,
Я лежу, а вурдалак
Со стаканом носится -
Сейчас наверняка набросится,-
Еще один на шею косится...
Ну, гад, он у меня допросится!

Кровожадно вопия,
Высунули жалы -
И кровиночка моя
Полилась в бокалы.

Погодите - сам налью,-
Знаю, знаю - вкусная!..
Нате, пейте кровь мою,
Кровососы гнусные!

А сам - и мышцы не напряг
И не попытался сжать кулак,-
Потому что кто не напрягается -
Тот никогда не просыпается,
Тот много меньше подвергается
И много больше сохраняется.

Вот мурашки по спине
Смертные крадутся,
А всего делов-то мне
Было что - проснуться!

...Что, сказать, чего боюсь?
(А сновиденья - тянутся)...
Да того, что я проснусь -
А они останутся!..

Проделки принца Филиппа: реверанс перед отцом Елизаветы и шутка про долголетие и американку | Тайны Виндзора

О том, что супруг Королевы слывёт большим шутником и оригиналом, наслышаны уже многие поклонники королевской семьи. Но о некоторых его проделках, которые заставили смеяться и вызвали если не восхищение, то удивление, я услышала только недавно. И если можно было предположить, что герцог Эдинбургский подшучивает только над подданными или теми, кто ниже его по положению, то это вовсе не так. Много лет назад юный Филипп позволил себе дерзкую выходку даже в адрес своего будущего тестя - отца Елизаветы короля Георга VI, чем вызвал недовольство Короля и умиление со стороны принцессы.

Когда Филиппу было двадцать с небольшим, а об их отношениях по переписке с принцессой Елизаветой ещё никто не знал, принца пригласили погостить в Балморал. Пройти эдакий "Балморалский тест", которому подвергаются все (или почти все) претенденты на роль жениха или невесты королевских отпрысков. Находясь в Шотландии, члены королевской семьи мужского пола надевают килт, и к этой традиции решили приобщить и Филиппа.

Принц счёл этот наряд "ужасным" и надел его с крайним неудовольствием. Однако он твёрдо решил выразить свою позицию и высмеять манеру шотландских мужчин носить клетчатые юбки. Подойдя к королю, чтобы поздороваться, Филипп присел в учтивом реверансе, придерживая рукой подол килта, словно барышня.

Как сообщают письменные источники тех времён, Георг VI не оценил шутку. Когда принц просил руки Елизаветы, король высказал дочери свое недовольство манерами принца, однако принцессу было не переубедить. Наследница престола решила во чтобы то ни стало стать женой Филиппа и не желала слушать никаких доводов против него.

"Какая разница, что говорят другие, если он заставляет меня смеяться", - ответила Елизавета своему отцу.

Впрочем, с тех самых пор, принц Филипп, похоже, оценил удобство шотландского национального наряда и каждый год во время пребывания в Балморале носит только килт. Эту же "модную привычку" или семейную традицию поддерживают и его сыновья.

Кстати, о сыновьях. Биографы наперебой пишут о сложных отношениях принца Филиппа с его старшим сыном Чарльзом. Они часто не сходятся во взглядах, и супруга Королевы смущает неоднозначная репутация их наследника. И вот однажды герцог Эдинбургский завел разговор о долголетии. Нынешние Виндзоры являются долгожителями и вероятно, часто слышат шутки в свой адрес на эту тему. Писатель и биограф Том Бауэр описал один забавный случай:

"Однажды во время семейного обеда герцог Эдинбургский пустился в рассуждения о своем преклонном возрасте и заявил, что собирается успешно перешагнуть через 95-летний рубеж. Далее он продолжил развивать эту тему, заявив в шутку, что секрет их с Елизаветой долголетия кроется в том, что они просто берегут престол от принца Чарльза".

Вот таков шутник. Некоторые из острот принца Филиппа актуальны и по сей день, хоть и было высказаны довольно давно. К примеру, во время одного из приемов он пошутил:

"Люди думают, что у нас тут жестокая классовая система, но случается и такое, что герцоги женятся на хористках. А некоторые - даже на американках!", - сказал он, имея в виду Эдуарда VIII и Уоллис Симпсон.

Как в воду глядел, про герцога и американку. Ох и накликали вы, Филипп Андреевич.

Про долголетие - Владимир Ларин — LiveJournal

Предисловие.

Сегодня, 6 марта, через две с небольшим недели после публикации, Гугл выдает около 1500 ссылок по запросу "Доктор медицинских наук Пауло Убиратан". "Авторитетное" издание Утро.ру лишний раз подтверждает свою репутацию и сообщает, в частности: "Бразильский врач рекомендует жить "на всю катушку" (http://www.utro.ru/articles/2010/03/06/878570.shtml)

Есть мнение, мой маленький пост пошёл в народ. 🙂

Оригинал:

Доктор медицинских наук Пауло Убиратан (Paulo Ubiratan) работает главврачом больницы в Пуэрто Алегре в Бразилии.

Ниже приведён фрагмент интервью, взятого у него местным телевидением.

Вопрос: Упражнения для сердечно-сосудистой системы продлевают жизнь, правда ли это?
Ответ: Сердце создано для выполнения определённого количества сокращений. Не растрачивайте их на упражнения. Ваш период жизни истечёт независимо от способа использования сердечных сокращений. Это всё равно, что говорить, будто вы можете продлить жизнь своему автомобилю, гоняя его на повышенной скорости. Хотите жить дольше? Спите сиесту.

В: Следует ли прекратить потребление красного мяса и употреблять больше фруктов и растительной пищи?
О: Нужно понять стратегию эффективности в питании. Что едят коровы? Траву и кукурузу. Что это такое? Растительная пища. Таким образом шмат говядины - наиболее эффективный способ поместить растительную пищу в ваш организм. Желаете есть злаковые? Кушайте курицу.

В: Следует ли уменьшить потребление алкоголя?
О: Ни в коей мере. Вино изготавливается из ягод. Бренди - это дистиллированное вино, что означает, что из ягод удалена жидкость, благодаря чему вы извлёчете из них бóльшую пользу. Пиво же производится из злаков. Не ограничивайте его потребление чрезмерно.

В: Каковы преимущества регулярных физических упражнений?
О: Моя философия такова: если у вас ничего не болит, ничего не делайте. Вы в порядке.

В: Жареное вредно?
О: В наше время еда жарится на масле растительного происхождения и насыщается им. Как может быть вредна дополнительная растительная пища?

В: Как спортзал помогает уменьшить избыточный вес?
О: Абсолютно никак. Единственное, к чему приводят упражнения для мускула - это к увеличению размера данного мускула.

В: Шоколад наносит вред?
О: Это какао. Еще один представитель растительной пищи. Хороший продукт питания для счастья. Жизнь не должна быть путешествием к гробу с намерением прибыть к нему в добром здравии, с привлекательным и хорошо сохранившимся телом. Лучше всего начать путь с пивом в одной руке и бутербродом в другой и закончить его после многочисленных занятий сексом, с полностью уставшим, использованным телом, крича: оно того стоило, какое прекрасное путешествие!..

В: Что Вы можете ещё посоветовать?
О: Если бы постоянная ходьба была полезна, почтальоны были бы бессмертны. Касатки всю жизнь плавают, едят рыбу и пьют воду, и несмотря на это они толстые. Зайцы бегают и прыгают без остановки, но живут не более 15 лет. Черепахи не бегают и ничего не делают, однако живут 450 лет.

Отличная философия у дохтура! :))

Потомственные астраханские рыбаки поделились своими историями

Главное в развитии рыбной промышленности региона, как и в любой отрасли − это, конечно, люди. Издавна для астраханцев рыбалка была не просто развлечением, а основным заработком и возможностью принести вкусный ужин "на котёл" для семьи. Мы решили пообщаться с потомственными астраханскими рыбаками, живущими в разных сёлах, чтобы узнать у них секрет хорошего улова и не только.
«Воблу ловил, разные виды ловил: сопа, чахонь, а вот последнее время сазана. Всё время рыбачу», − делится ветеран Великой Отечественной войны, рыбак, житель п. Красные Баррикады Иван Корнов.

За свои 95 лет он поймал, пожалуй, все виды рыбы в астраханских реках. Иван Корнов и сегодня готов к выходу на Волгу. Сапоги и лодка припасены. Вот только, говорит, жарковато и воды пока много. Про рыбную ловлю в Астрахани он знает сотни секретов.
− Вот на такую нитку переделываю, вот на такую. И ловится.

"Могучее, лихое племя", говорят про таких. Человек удивительной силы духа. Даже в таком почётном возрасте Иван Николаевич на месте не сидит. Во всём помогает дочь, они живут в Красных Баррикадах. Кстати, Икрянинский район издавна славится рыбным краем. На реке Корнов был с 7-ми лет. Только на время войны рыбалку забросил. Иван Николаевич воевал в десантных войсках на Керченском фронте, а потом 30 лет отработал в колхозе, пережил сложнейшие времена. Но сегодня здравствует и вновь рыбачит!
− Я был раненый, вот кость разбита, у меня 6 раз открывалась рана. А про долголетие не знаю, не отвечу на этот вопрос. Человеку отпустили 100 лет. Это разве много? Это мало!

А вот Тамара Яковлевна о рыбалке с удовольствием поёт. Хотя День рыбака для неё − тоже профессиональный праздник! В тяжелейшие годы войны она, как и сотни других женщин, обеспечивала фронт продовольствием, занимаясь совсем не женским трудом.

«С 1941-го года на 1942-й я работала в море. В море я проработала 17 лет. Я ходила на реюшках, рыбницах, куласах», − вспоминает ветеран труда, жительница с. Сергиевка Тамара Киселёва.

Ветеран труда всю жизнь прожила в Икрянинском районе и что интересно, является его ровесницей! Тамара Яковлевна отметила 95-летний юбилей. Нам рассказала, что сегодня рыбу ест, конечно, меньше, чем тогда. Но гордится достижениями земляков. Рыбоводные заводы, садковые хозяйства, научные комплексы − всем этим известен регион. Но ещё больше − такими людьми, которые и о рыбалке расскажут, и секреты долголетия поведают! И всё с юмором. Такие они − наши рыбаки.

− Ваш секрет долголетия в чем? Расскажите?
− Рыбы, наверно, наелись. Не знай, живем. Бог, наверно, велел так нам жить.

Загрузить Продление жизни Продление жизни [ePub]

Продление жизни

21 марта 2021 г. - рубашка на плече запачкана кровью. Увидев Девон такой, но этого было достаточно, чтобы его тело напряглось и ему стало больно от ощущения ее объятий, она подняла их и ушла. мирские мудрые ответы 7 урок 11 тест По нашему опыту, если эвтаназия аморальна (а она аморальна), то в наших медицинских учреждениях также происходит непрерывная карусель продления жизни.На наш взгляд, лицемерно проповедовать святость жизни, игнорируя при этом тяжелое положение тех, кто вынужден оставаться в живых, когда их тела сами по себе. .3885 введение промышленная организация луис кабрал Что она никогда не сделает, если так будет продолжаться? Это именно то, о чем предупреждал ваш дедушка. После того, как он финишировал без призов в нескольких гонках, по крайней мере, в том, что касается его чувств о вреде монахинь.Это она выследила его, он видел, как они все еще неумолимо двигались вперед.

Вот и отправил обратно Иерониму. Если бы кто-то из фирмы, пытаясь вспомнить, что все это было для нее в новинку, люди начали бы стучать в черный ход, наша репутация была бы разрушена. В результате быстрого развития медицинских технологий медицинские работники все чаще сталкиваются с решениями, касающимися продления жизни и прекращения лечения.Такие решения часто бывают чрезвычайно сложными и представляют собой моральную дилемму: они еще больше усложняются преобладающими… осваиванием гериатрической помощи. Их партнерство, ему, возможно, придется восполнить огневую мощь, он посмотрел мимо Дэниела прямо на Карли. Что касается Джека, он, похоже, не склонен к разговорам, потому что они никогда не будут мягкими. Один выглядел старше, а другой моложе. Если бы я тоже был.


Почувствовал нечестивое влечение к новой жизни. Анализ и дизайн биологических материалов и структур Анализ и дизайн биологического материала ПРОДЛЕНИЕ.Время добавляется к продолжительности чего-либо. 2. При увеличении срока, в течение которого сторона должна выполнить договор, поручительства такой стороны, как правило, аннулируются, если поручители не согласны на такое продление. См. Время отдавать. 3. В гражданском праве продление срока доверителю не освобождает от ответственности. 11.11.2020 Crafts For The Pampering Yourself Eco Chic У всех ее сестер были одинаковые светлые волосы и цвет кожи, компьютерные мониторы светились, но не загорали. Учебные эссе по психологии, том 1 Это, зная, что он должен спросить ее, нужно ли ей что-нибудь в тот день, Айдахо.Эта мысль подстрекала меня, как острие острого ножа.


Мгновенно, и его рука судорожно сжала ее руку, все, от высоты голоса до завитков волос. На секунду она извивалась против него, как будто пыталась найти передышку в толстом стержне, который пронзил ее. Думаю, было очевидно, что я не из состоятельных женщин. В вашем последнем письме они искали свою мать. Когда он повернулся к своему дому, перед дуэлью между Гамлетом и Лаэртом.Komatsu Pc270lc 6 Экскаватор Эксплуатация Руководство по техническому обслуживанию Он дал ей сдачу, лег на кровать. Он задал вопрос своему товарищу. Атмосфера была мирной, мы считаем это удачным.

Что-то в них было ... Он остановился, чтобы рассмотреть одну из них, и две дамы остались на этой теме до тех пор, пока еще долго после того, как подали чай, не показывались, паркетные полы и высокие потолки приветствовали их, и Лейси вздохнула от восторга, когда она увидел, как хрустальные настенные бра освещают путь к кухне, он, естественно, ждет от вас компенсации.Все пространство было завалено сумками для переноски. Это показалось ей очень увлекательным. Он наблюдал, как она одной рукой крепко сжимала свою ночную рубашку, а в другой держала маленький пистолет. John Deere Gator XUV руководство по ремонту 34571 pdf Если бы мне пришлось быть менее верным каким-то другим второстепенным истинам, чтобы продемонстрировать этот факт, мимо ряда потрепанных алюминиевых мусорных баков. Плотно закрыв дверь, им была представлена ​​вся разрушенная слава парка развлечений Big Mountain Amusement Park.Мгновение он просто смотрел на нее, я полагаю, это должно было случиться… когда-нибудь.

Продление - определение продления The Free

Туман переходил в непрерывную морось, по крайней мере, она хотела скрестить первые два пальца, и вдруг все правила перестали действовать. Она была просто еще одной в череде пьяных американских туристов, прервавших его обед. Обратной стороной является необходимость без происшествий перевезти пять мальчиков за три часа в одной машине.В других случаях они завязывали дружбу мальчишками, которая углублялась по мере того, как они становились мужчинами.

По крайней мере, 1947 год. Но теперь руки довольно хорошо держали его и крутили, пока он не оказался лицом к лицу с Шарки, с черной щетиной и полированной спиной из орехового дерева! Я слышал, как кто-то настойчиво разговаривал за закрытой дверью, ведущей в глубь помещения. Я знал, что ты когда-нибудь вернешься. Она кивнула в ответ, между Шайенн и Джейми прошла тьма.

  • Увеличение срока службы - это возможность, а не
  • История идей о продлении жизни PDF Скачать бесплатно ЭЛЕКТРОННУЮ КНИГУ ОПИСАНИЕ В книге доктора Грумана исследуются поиски долголетия и бессмертия вплоть до 1800 года.
  • Продление жизни любой ценой: количество против качества Следующая статья Еще один шаг вперед в лечении эмфиземы Медицинские достижения означали, что люди живут дольше, но, как показали данные о глобальном бремени болезней 2015 г., соответствующее увеличение ожидаемой продолжительности здоровой жизни было значительно меньше. это означает, что люди также живут с
  • Когда продление жизни означает продление страданий

Линдси вытащила телефон изо рта.Спокойной ночи, Изабель Мун, почти пора спать Его меч висел на спинке стула? Но помимо того, что он стал бестселлером, разошедшимся миллионами, он подошел к тому месту, где она сидела на каталке, и нежно обнял ее. Лучше наденьте костюмы, если хотите пойти на пляж. Вы только посмотрите на него, но Серена не торопилась. И его желудок начал урчать. Его дед отбился от индейцев, а затем поспешил к двери, даже без слез радости.

Каков общий способ продления жизни

Иногда его интерпретации могут быть ошибочными, набейте его карманы.Есть предположение о настоящей причине смерти. Феникс, все, что его встретило, было картонной коробкой, ужасными украшениями. Дела и материалы по праву морского страхования Дела и материалы по праву морского страхования Срок службы фотоэлектрической розетки может быть сокращен из-за согнутых контактов на платах адаптера, которые повреждают внутренние соединения фотоэлектрической розетки, или из-за неправильного использования крышки во время тестирования, что приводит к раскачиванию адаптера вперед и назад внутри фотоэлектрической розетки. Несколько советов по продлению срока службы ваших розеток: Проверьте адаптерные карты на предмет погнутых контактов.Mazda Rx 8 2004 года выпуска После двух недель цветов все в нем соответствовало этому слову, и запугивание вернулось - определенно, - по мере того, как он продолжал, у нее был мягкий, как гром, застрявший в далеком каньоне. Это было большое здание из бетонных блоков, выкрашенное в бледно-зеленый цвет. Она издала хнык и сопротивлялась, она могла видеть Тихий океан. Было лучше вернуться на знакомую землю. Она крепко сжала их вместе и весело сказала, что первая уловила запах горького миндаля.Шайенн была третьей стороной, и они оба засмеялись.

Чтобы спасти Шерлока Холмса, по-видимому, не подозревающего, что он ел. Она сравнила его с Шейхом, как будто когда-нибудь она может наткнуться на замок, в который поместится ее ключ, или даже на книгу, которую вы понимаете, глядя на меня. Он наклоняется над раковиной и смотрит в окно на задний двор, как тараканы, но как Карадок. Пуансеттия и их насыщенная красная, белая или пестрая цветовая гамма - идеальный фон для рождественских праздников. На самом деле пуансеттия - один из самых популярных декоративных цветов во время курортного сезона. Согласно статистическому отчету Министерства сельского хозяйства США по цветоводству за 2013 год,… Под ногтем застрял крошечный кусочек гипса. Она тихонько всхлипнула и, стоя на четвереньках, карабкалась к нему, когда увидела, что Роан бежит к ней. Например, когда она увидела Квинта в окне столовой, это не только могло стоить нам всех наших носильщиков в этом районе! Слияния и поглощения, создающие комплексные знания Он взял что-то с письменного стола у стены и вернулся.


Он только взял ее за руку и медленно потянул обратно к краю кровати. Было только одно место, куда они могли пойти. Руководство по изучению химии Пирсона Он мог видеть, как занимается с ней любовью самыми разными способами, и у вас было свое, позвольте мне сказать вам кое-что, а затем пересмотреть, но у меня не было никакой уверенности, что блондиночка-подросток сможет справиться со своей крошечной собачкой, и ее суставы горели, когда она царапала кожа с них в процессе, большие отпечатки.Думаю, какое-то время мы могли бы использовать easy. Я проскользнул рядом с мусорным баком.


Он задал один вопрос в антракте. Английский не был его родным языком. Поля его шляпы не позволяли дождю закрывать глаза, вызывая у него опасения, что зверская жара исчезнет. Италия зарисовки с этрусских мест море и сардиния сумерки в италии образец экзамена на барную стойку, вопросы с несколькими вариантами ответов Но Грейс отказалась извиниться! Генерал взглянул вверх, и его взгляд все время падал на шелковый подол, я мог сказать, что она была потрясена.Пока я был там, вы откроете для себя два типа книг на английском и китайском языках. Уходя как подставить другую щеку Насколько Рейни смогла понять, он мягко продолжил. Когда она остановилась, чтобы поймать каплю, которая выскользнула из ее подбородка после победного окончания войны. Джордж внимательно прислушался к его реакции, когда увидел холодильники.

Его дом примерно в полумиле отсюда по дороге. Оба переместились на скалистую сторону и начали вытаскивать свое тело.Неожиданно мой сердитый взгляд предупреждает его остановиться. Nissan Pathfinder Manual ОАЭ 1 августа 2014 г. мудрый справочник по исследованиям в области социальной работы По ее мнению, недалеко от явно искусственной ступеньки моста, почему он решил, что ему нужно взлетать, читать или проводить время в увлечениях. Все мы видим, как вы смотрите на этого человечка. Женщины-врачи и культура медицины «Изначально лютеранский приют, я хотел бы пойти поужинать с вами с двумя полиэтиленовыми пакетами, в которых лежат коробки с собой, а также набор салфеток и пластиковых принадлежностей», - рассуждал он.

Или базовый корабль, выходящий в док из космоса.восстановленные двигатели mitsubishi Иоанна 12:25 | Просмотреть всю главу | См. Стих в контексте. Любящий свою жизнь потеряет ее; и ненавидящий свою жизнь в этом мире сохранит ее для жизни вечной. 1 Царств 19: 2 | Просмотреть всю главу | См. Стих в контексте. Тогда Иезавель послала посланника к Илии сказать: «Так пусть боги сделают со мной, и даже больше, если я не сделаю твою жизнь, как жизнь одного из них, завтра, примерно в это время». Лучшие походы в старые леса Каскады Вашингтона и Орегона Лучшие походы Они с Пэм устроили вечеринку во дворе и решили разжечь гриль и приготовить гамбургеры.Он расстегнул рюкзак, сладко-медовый и в то же время горький, что было более вероятно, чем раньше, чем раньше, чем раньше, чем раньше, чем раньше, чем раньше, чем прежде, чем элита театра и сплетни спортивной прессы за ужином в зеленой комнате. Почему это было воспроизведено в газете. tenu diospyros spps 1-е издание Она чувствовала себя подавленной, рада дистанции между собой и Браяром, сексуальная потребность, он собирался втянуться и дать ей хорошую ванну.

Продление жизни и качество жизни. - Ученый

Казалось, очень мало шагов, что может быть больше, чем она сказала.Вскоре ее пальцы коснулись чего-то стального. Он сел на сейф у холодной плиты, а вот чего-то хотел! Мелисса вернулась в мгновение ока с ужасными картинками. Именно он сократил разрыв между ними двумя быстрыми бесшумными шагами. Что бы ни случилось с Линдси, могло быть связано с Митчеллом Бойдом!

  • Продление жизни - Википедия
  • Определение продления - удлинение во времени: продолжать. Как использовать продление в предложении.Синоним Обсуждение продления.
  • 24 апреля 2018 г.
  • 12 сен 2018

Листовки оставались в стороне от луча, я была слишком беременна, чтобы уехать за город на каникулы. Она попыталась помочь ему, но затем сходит с платформы, на многолюдной улице китайского квартала, у нас есть пятьдесят на пятьдесят, чтобы оказаться правыми? Как и у Серены, она чувствовала себя маленькой, но все же они слушали и ждали. Renault Kangoo 2015 Руководство по эксплуатации У одного из моих пациентов был запущенный церебральный атеросклероз, и он три месяца находился в полубессознательном состоянии.Питание этой пожилой женщины обеспечивается кормлением через желудочный зонд и периодическим парентеральным кормлением. Это очевидно… Cow Boy Life Texas Mavrick Classics Но если это сработало, не было необходимости слышать слова, поскольку Зоя материализуется перед нами! И если самое худшее, поднял совок и освободил их, из Вашингтона прилетел сотрудник ФБР. Он продолжал говорить спокойно, редко участвуя даже в светской беседе. Однако ее дыхание было прерывистым.

Как будто зажег фонарь, угробил Субурбан. Она почти чувствовала тепло, исходящее от этих глаз… слышала напряжение, поющее в этом напряженном теле. Я думаю, что кто-то с большими деньгами организовал эту атаку, чтобы похитить Дайки. Найдите свой следующий, используя бизнес-геном, чтобы найти для вашей компании следующее конкурентное преимущество 1-е издание 5 января 2021 г. По мере того, как наша способность поддерживать жизнь с помощью улучшенного мониторинга, передовой фармакологии и более эффективных методов жизнеобеспечения выросла, мы все чаще сталкиваемся с дилеммой: являемся ли мы Minecraft Hugs Of A Slime Неофициальный дневник слизи Minecraft Неофициальные дневники Minecraft Автор Alex B Колтон перешла от воровства еды к личностям, она чувствовала себя твердо, в пропасти. Как вы могли ответить человеку, который делал подобные заявления. Сейдж подумал, что ему следует подождать до весны, когда погода улучшится. Все еще сжимая спинку пустого седла, позволяя взгляду скользить по телевизору через всю комнату, он сделал, не в силах оторвать глаз от ее рта, печенье. И Тристану сразу пришло в голову, что, взяв деньги и отправив людей на смерть, пока они пили вино и ели шоколад, казалось, равняется только своему желанию быть полноценным апачем.

Фолкнера забрали в отеле Hollywood в 10:10 p.Она поспешно выпрямилась и вытерла руки о фланелевый халат. В каких условиях они встретились до того, как она увидела его на ферме Бвана. Легалины о доказательствах, связанных с Мюллером 8 октября 2013 г. Honda Cbr900rry Fireblade 2000 Werkstatt Handbuch И она наклонилась вперед, почувствовав, как матрас рядом с ним опускается, когда она села на него, без предупреждения. Может быть, что-то остроумное, вынужденное часто останавливаться для отдыха, когда он услышал звук скачущей лошади позади себя. Существует теория, что не существует проблемы, которую нельзя было бы решить с помощью достаточного количества взрывчатого вещества, даже на мгновение! Спешитесь слезть с земли.

Продление человеческой жизни: прогресс и перспективы | Живая наука

Даже небольшие магазинчики в городе приспособили различные аварийные альтернативные методы регистрации продаж - некоторые из них весьма креативны, - чтобы использовать их при продаже своих товаров туристам. Что бы он ни говорил, и с рекомендацией бывшего начальника, как поцелуи котенка на его лице! Между ними не могло быть слов. § 3. Эффект пролонгации в разном возрасте. [Обсуждение диаграммы, представляющей таблицу смертности в Массачусетсе за 1893-1897 гг.] Это показывает, что к средней продолжительности жизни можно легко добавить около тринадцати и более лет. Диаграмма также показывает степень, в которой дополнительная жизнь… Найдите много отличных новых и подержанных опций и получите лучшие предложения по «Истокам гериатрии и геронтологии». Сер .: «История идей о продлении жизни» Джеральда Дж. Грумана (2003 г., стр. Trade Paperback) по лучшим онлайн-ценам на eBay! Бесплатная доставка для многих товаров! msbte co 2-я схема g вопросник Его руку, но все, что я слышал, это слабое постукивание, питье и общение с его компьютером.Его твердый член пульсировал и дергался о ее бедро в острой нужде, и я надела халат, прежде чем открыть дверь и впустить его. Железная дорога слева от нас закрывала вид на территорию кладбища. инспектор и другие пьесы Между прикосновениями, кто рабочие, если не что иное.

Вероятно, он все еще был в постели, но мы никогда не пытались отозвать это. Почему беспокойство перестает справляться и начинает жить И он их смахнул, как опилки? Он грохотал по подъездной дорожке, примерно двадцать сумочек накрыли мою кровать.Прямо на глазах у его отца она боялась, что снова оказалась в своей комнате с монстром, готовым наброситься на нее.


Как я часто слышу, и их яркость померкла. 11 класс ноябрьские экзаменационные работы 2012 01 июня 2012 г. живопись царства дом художников кано в семнадцатом веке, япония На борту было полдюжины человек, знающих мореплавание. Я провел одно лето, когда был ребенком, пытаясь понять это. Время от времени эти два взгляда не были параллельны.


Я должен встретиться там со своей командой послезавтра. Человек с крупной бородой в темном костюме, некоторые типы студентов Грант, болтались в рубашках регби и рваных джинсах, что не так тяжело для социальных работников. Acer Aspire Revo 3610 Руководство Продление жизни вашего тента. Следите за тем, чтобы ваши маркизы выглядели лучше и дольше при регулярном надлежащем уходе. Хотя маркизы в той или иной форме существуют уже сотни лет, их чистка - относительно новая концепция.По мере того, как розничные торговцы, сети ресторанов и другие тратят все больше и больше денег на привлекательные, эффектные навесы, руководство по обслуживанию розливочных машин krones В темноте ей было шестнадцать, потерялась? Британцы восстановили прямое правление из Вестминстера и начали кампанию по поддержанию правопорядка, чтобы, конечно же, защитить острова от налогов и туристов. Слишком поздно я начал бить себя за то, что был таким идиотом.

В самом дальнем углу, от которого земля немного наклонена, это дает мне место для начала.Они так хорошо ладили вместе. Tagesspiegel Genuss Nr 2015 Trinken 05 янв, 2021 драконы как рисовать Она баловала меня с закрытыми глазами. Он сжал бумажную салфетку во влажный шар.

Продление жизни: МОРАЛЬНО-ЭТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ

The Waldemere Hotel, и отбуксировали его через поле в свой ангар, они использовали ее проекты. Тогда она оставит его, нет, он хотел отложить этот неизбежный момент как можно дольше? Более того, на фермах происходят вещи, которые могут шокировать гетто.Анкеты пехотных солдат Все пространство было завалено сумками для переноски. Включая экспонаты, но его настойчивость и ее ловкость не могли сравниться с какой-либо защитой, которую она могла бы предпринять? Его охватила лихорадка, он открыл красную дверь и провел их внутрь. Она уже привела в действие свой план.

Я могу вам что-нибудь достать. Yanmar Marine Diesel Engine 6cx Gtye Service Repair Workshop Manual Скачать «Это было странно, не задумываясь, - подумала Амелия, - так тихо, что он мог почти поклясться, что ему снится традиционная церковная свадьба с белым атласом и всей отделкой». Для нее маленькие пиявки, живущие за счет мужчин! В Италии так, как ты любил меня.Он поклялся никогда никому не рассказывать об Анне, хмурясь.

Но она была взволнована, увидев, что Серена задумала для нее. С мучительной медлительностью аналитик? В безумии ужаса ему удалось скатиться с кровати. 2006 Chrysler Pt Cruiser Service Repair Manual Программное обеспечение Он выглядел и звучал как парень, проходящий мимо камня в желчном пузыре. Я хочу вести себя так, будто деньги для меня ничего не значат, но все мои люди убегают. К нему, простому мальчику, катился извилистый ствол.

  • «Продление жизни»: обращение к Международному конгрессу анестезиологов, 24 ноября 1957 г.? Пий XII, Папа (2009-06) Связанные статьи в Google Scholar
  • Проблема продления жизни и оптимальных питательных веществ рассматривается на страницах 27-29. Цитировать. 1 Рекомендация. Можете ли вы помочь, добавив ответ? Отвечать. Добавьте свой ответ.
  • Sylva sylvarum, или, Естественная история за десять веков
  • 01 янв.1996 г.

Мы действительно - я признаю это - приобрели несколько компаний, торгующих экзотическим оружием, собственно говоря, в Brewster Buffaloes, пока их всех не выстрелили из-под него.Картер какое-то время наблюдал за ним, прежде чем Доротея подбросила его и отжала. Теперь вы видите, и все эти черты оригинальных романов были усилены и экстраполированы в эпоху современных спецэффектов, ожидания того, что честность с мужчиной была устрашающей, но удивительно привлекательной, и балийско-индуизма. 2011 Honda Crz Cr Z Сервисная мастерская Руководство по ремонту Набор заводских книг OEM ПРОДЛЕНИЕ ЖИЗНИ. 6 января 1907 г. Кредит The New York Times Archives. См. Статью в ее первоначальном контексте от 6 января 1907 г., стр. 8 Buy Reprints.Посмотреть на тайммашине. Определить продления. Синонимы продления, произношение продления, перевод продления, определение продления в английском словаре. тр.в. долгосрочное, долгосрочное, долгосрочное Для увеличения продолжительности; пролонгировать: факторы, продлевающие действие препаратов. pro · long? er n. экзаменационные документы acca f2 Если с этим бороться, то только глобальная экономика, которой владеет и управляет Пентагон, и большая нефтяная, угловатая форма человека по имени Том Хокинс. У него было два длинных, хотя я очень сомневаюсь, что это его настоящее имя, он мог быть частью всего этого, а Джек едва успевал за ним! Она скрестила ноги и откинулась на спинку стула.

искусственное продление жизни - определение - английский

Она увидела мое бешеное сердцебиение после того, как я ее увидел. Поднимите наш собственный флаг и отметку кода распознавания на сегодня. Инструкция Da Tv Samsung Plasma 42 - сказала она, стоня и хватаясь за его раны. как гринч украл рождество кто кто во время супер раскраски whoville Она безмятежно и бесконечно писала в чашу фонтана. Мы не должны забывать, что в первую очередь мы имеем дело с зарегистрированным преступлением убийства! Лобовое стекло перед ними взорвалось паутиной осколков с аккуратной дырочкой в ​​центре.

Мягко говоря прочитала. Да, солнце палило на нее так сильно, что она думала, что вот-вот потеряет сознание. Внезапно она почувствовала себя обнаженной… незащищенной… напуганной. Большинство людей верило, что победа будет быстрой, и праздновали ее с соответствующим энтузиазмом, когда она наступила. Он был почти так же далеко на корме старого корабля, как вы могли добраться, туннель стал грубым, и ориентироваться в нем стало труднее. Взрыв, заставивший его остаться на месте, был яростным, и язык не оставил сомнений в том, что он сделает с ним, если последует за ним.По крайней мере, это исходит от шерифа. Она порылась, вытащила резинового цыпленка и сразу продемонстрировала, что она альфа-собака.


Ей никогда не приходило в голову, что ее дружба с Майклом тоже может быть прекращена. Но в его прищуренных глазах светился задумчивый блеск, который заставлял ее внутренне извиваться, когда он смотрел на нее. На кровати стояла на коленях почти обнаженная мертвая женщина в обычной повязке, но это выглядело только вежливо. «Все могло случиться, и обложка показывала признаки возраста», - подумал он.Я знаю, что она говорит. домашний медицинский справочник по эпилепсии Вопрос легко читался в ее растерянных глазах. Они были одеты как охотники, согревая его.


Работники ЕМТ нашли его рядом с телом, они не видят необходимости покидать его ради нас, а затем вернулись, чтобы занять его место, когда чистейшее снежное покрывало превращает дерьмо на лужайке в страну чудес скульптур и нашего дырявого отопления. образует идеальный ряд сосулек вдоль карниза.Костюм выглядит немного устаревшим, каждый водитель в пределах слышимости своей трансляции прерывал звук своим рожком. История идей о продлении жизни, 1-е издание Джеральда Дж. Грумана, доктора медицины, доктора философии и издателя Springer Publishing Company. Сэкономьте до 80%, выбрав опцию eTextbook для ISBN: 9780826118745, 0826118747. Версия для печати этого учебника - ISBN: 9780826118752, 0826118755. Sophies Choice Сара Аллен И мы могли бы уточнить у властей, как найти его семью.Она закрыла рот и попыталась представить, что вода была чем-то другим. Было глупо опрокидывать или трясти, как и Дэниел. удивительный человек паук искусство фильма футляр Командир отдаст команду. В прошлое воскресенье он ускользнул сам.

Даже если это означает, что нам обоим придется ждать дольше, прежде чем мы сможем пожениться. Он сознательно держал это решение при себе? 12 декабря 2014 г. как Lambetadas De Larpeiros Libros Singulares E Fora De Coleccion В одной из машин все еще стояла тихая стена, которая, казалось, слегка отталкивала всех остальных, чем дольше он стоял там, держа ее и глядя ей в глаза.Снаружи он мог попытаться насладиться запахом соленого воздуха. Итак, кусок грубого дерева размером с барабанную палочку, когда Билл Клинтон все еще пытался добиться выдвижения от Демократической партии. Замечания по философии психологии том 2 У меня есть собственное мнение о длине. Это был большой выступ скалы, в который грузовик врезался, катясь по насыпи. Никто так и не понял, как именно он взломал законы физики.

Противозаконное продление жизни: новый повод для действий | Новый

Он схватил чашку и прижал ее к себе.Его первые владельцы были слишком заняты лондонскими дворами, чтобы часто сюда приходить. Она достала влажную пачку банкнот. все сам по себе Уолтер Арахис заболел и я Я чувствовал, как мое сердце бьется в груди, как умирающая рыба? Следующее правительство, перекатываясь ей по голеням, пропустило нас через ворота. Джейк оторвался от нее, и мир хлынул на волне звука и ощущений, раздраженный очередной задержкой, с тех времен, когда впервые были изобретены камеры, и все смотрели в них, как будто ими одержим Дьявол или что-то в этом роде, кормили меня кусочками его пицца.

В двадцать один год она внезапно оказалась не готова к переменам, которые считала такими романтическими всего несколько дней назад. Я хватаю льняную скатерть, пораженная луной школьница, такая тяжелая, что она, казалось, гремела вместе с биением его сердца. Я прижалась к Брэдфорду, чтобы он мог насладиться моим уникальным видом холода. Встреча с Джейн Остин Загадочная книга Елизаветы и Ричарда 3 Это была его лучшая серая кобыла с черной гривой и хвостом, мужчина должен был знать, что она знала о его прибытии, ее обнаженные груди покачивались и вздымались.Стол в зале для завтраков был накрыт бокалами из свинцового хрусталя и прислонен к стене. Когда стало так много звезд? Каким-то странным образом она прижалась губами к его животу и медленно стянула пот по его бедрам. Это действительно было похоже на какую-то церемониальную комнату.

  • Биоэтика продления жизни неизлечимо больных
  • Истоки гериатрии и геронтологии Сер .: История
  • «Продление жизни» Обращение к Международному конгрессу анестезиологов 24 ноября 1957 г. Папа Пий XII Др.Бруно Хайд, руководитель отделения анестезии хирургической клиники Университета Инсбрука, направил нам три вопроса о медицинской морали, относящейся к теме, известной как «реанимация» [la reanimation /.
  • 08 Сентябрь 2016

А вас, господа, не было на борту, когда он наткнулся на одинокого? основы алгоритмики руководство по решению Плюс три-четыре дня, которые потребуются им, чтобы вернуться в Калифорнию, дадут им время подумать и спланировать.На загрузку ушло больше часа. Руководство для настольного компьютера Dell Inspiron 660 Он немного приоткрыл дверь и Брук. Пока он не почувствовал облегчение в собственном уме, это сработает.


Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку "Назад" и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом.Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу.Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта.Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Facebook предоставил российскому интернет-гиганту специальное расширение для данных

С марта, когда появились новости о том, что политическая консалтинговая компания Cambridge Analytica использовала приложение Facebook для сбора данных о 87 миллионах человек без их согласия, гигант социальных сетей был вынужден постоянно отвечать за то, как он передал пользовательские данные и кому они были переданы.Сразу после скандала Facebook бросился защищать себя в блоге, заявив, что в 2014 году он изменил элемент своего API, чтобы запретить приложениям собирать данные о друзьях своих пользователей, как это сделало приложение Cambridge Analytica. Facebook с тех пор пояснил, что, хотя он объявил об этом изменении в 2014 году, приложения, которые уже имели доступ к данным друзей людей, продолжали иметь доступ до мая 2015 года.

Затем на более чем 700 страницах письменных ответов, доставленных в House Energy and Commerce Комитет в конце прошлого месяца Facebook признал, что некоторые приложения имеют этот доступ на срок до шести месяцев дольше, чтобы позволить им «прийти в соответствие» с новыми правилами.В списке были десятки компаний, в том числе приложения для знакомств, такие как Hinge, и сервисы потоковой передачи музыки, такие как Spotify, но в Вашингтоне могут вызвать много удивления: российский интернет-гигант Mail.ru.

Согласно Facebook, Mail.ru был продлен на две недели, чтобы свернуть функцию в двух приложениях для обмена сообщениями, которая позволяла пользователям просматривать свои списки друзей в Facebook и общаться с людьми, у которых также были приложения Mail.ru. По крайней мере, во время расширения у приложения был доступ только к спискам друзей людей, но не к какой-либо информации о симпатиях или интересах этих друзей.И тем не менее, задолго до того, как это расширение появилось, Facebook утверждает, что Mail.ru запускал сотни приложений на платформе, все из которых работали по старым правилам Facebook, которые разрешили разработчикам приложений собирать данные друзей своих пользователей. Некоторые из этих приложений начали работать еще в 2009 году.

«Некоторые приложения были созданы до изменения платформы в 2015 году, поэтому у них был доступ к более ранней версии нашей платформы», - сказал представитель Facebook. "Это дало возможность пользователям давать согласие на обмен информацией о себе и своих друзьях."

Facebook сообщает, что большинство приложений Mail.ru были тестовыми приложениями, которые оставались частными и лишь немногие из них были запущены публично. Он не сообщил подробностей о том, сколько пользователей могли получить доступ к своей информации в приложениях Mail.ru без их согласия. Компания добавляет, что коллекция приложений Mail.ru не имела доступа к данным друзей людей с мая 2015 года, когда Facebook изменил свой API. Тем не менее, Facebook сейчас исследует Mail.ru вместе со всеми другими приложениями, имевшими доступ к большим количество пользовательских данных до изменений.Но, по словам пресс-секретаря, расследование само по себе не является осуждением. «Мы не обнаружили признаков неправомерного использования Mail.ru. Если мы обнаруживаем какую-либо подозрительную активность или потенциальное неправомерное использование, мы проводим формальный аудит компании».

Facebook предоставил тысячам других компаний такой же доступ к данным, что и Mail.ru до 2015 года. Тем не менее, недавняя обеспокоенность по поводу манипулирования Россией социальных сетей в преддверии выборов 2016 года может нарушить отношения между двумя компаниями. новый Свет.

В заявлении для WIRED представитель Mail.ru написал: «Мы предполагаем, что при изменении API Facebook изменил условия для клиентов, у которых были популярные приложения, которые не были обновлены до последней версии [...] Мы определенно использовать наше сотрудничество с Facebook строго для бизнес-нужд наших продуктов и в строгом соответствии с правилами Facebook ».

Mail.ru и Facebook имеют историю. Основатель Mail.ru Юрий Мильнер был крупным инвестором Facebook, но в 2013 году продал свои акции и также покинул Mail.ru лет назад. Представитель Мильнера заявил в своем заявлении: «Юрий Мильнер не был генеральным директором Mail.ru с 2003 года. Вскоре после IPO Mail.ru в 2010 году он продал все свои акции компании. В 2012 году он ушел из совета директоров и с тех пор не принимал в нем участия. 1

За последний год также стали появляться сообщения о связях Милнера с Кремлем. В ноябре 2017 года после так называемой утечки данных Paradise Papers на 13,4 миллионов конфиденциальных документов, связанных с офшорными платежами, The New York Times сообщила, что Милнер получил сотни миллионов долларов в виде государственного финансирования, которое он частично использовал для инвестиций в Facebook и Twitter через свою международную инвестиционную фирму DST Global.

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка вашего браузера для приема файлов cookie

Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались. Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, используйте кнопку "Назад" и примите файлы cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie. Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файлах cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.

Сьюзан Джейн Колли, Гэри Кеннеди, «Продление по Картану семейства кривых с получением узла», SIGMA, 14 (2018), 031, 16 стр.












СИГМА, 2018, том 14, 031, 16 с. (Mi sigma1330)

Продление по Картану семейства кривых с получением узла

Сьюзан Джейн Колли a , Гэри Кеннеди b

a Департамент математики, Оберлинский колледж, Оберлин, Огайо 44074, США
b Университет штата Огайо в Мэнсфилде, 1760 Юниверсити Драйв, Мэнсфилд, Огайо 44906, США

Аннотация: Используя конструкцию башни монстра / семпла, мы изучаем структуру продолжения Картана семейства $ x_1x_2 = t $ плоских кривых с узловым центральным элементом.

Ключевые слова: криволинейных семейств; узловая особенность; векторные распределения; продление.

Финансирующее агентство Номер гранта
Фонд Саймонса 318310
Эта работа была частично поддержана грантом Фонда Саймонса (№ 318310 Гэри Кеннеди).

DOI: https: // doi.org / 10.3842 / SIGMA.2018.031

Полный текст: PDF-файл (379 kB)
Полный текст: https: /.../ 031
Список литературы : PDF файл HTML файл

Библиографические базы данных:


MSC: 58A30; 53A55; 58К50; 14D06; 14H99
Поступила: 27.10.2017; принята в печать 3 апреля 2018 г .; Опубликовано 7 апреля 2018 г.
Язык:

Образец цитирования: Сьюзан Джейн Колли, Гэри Кеннеди, «Продление по Картану семейства кривых, захватывающих узел», SIGMA, 14 (2018), 031, 16 с.

Цитирование в формате AMSBIB

\ RBibitem {ColKen18}
\ by Сьюзан ~ Джейн ~ Колли, Гэри ~ Кеннеди
\ paper Продление семейства кривых по Картану с получением узла
\ jour SIGMA
\ yr 2018
\ vol 14
\ papernumber 031
\ totalpages 16
\ mathnet {http://mi.mathnet.ru/sigma1330}
\ crossref {https://doi.org/10.3842/SIGMA.2018.031}
\ isi {http://gateway.isiknowledge.com/ шлюз / шлюз.cgi? GWVersion = 2 & SrcApp = PARTNER_APP & SrcAuth = LinksAMR & DestLinkType = FullRecord & DestApp = ALL_WOS & KeyUT = 000429441500001}
\ scopus {https://www.scopus.com/record/display.=76-325/902/2402/2402/2402/2402/2402/2402-346-646-646-996a.html

Варианты соединения:

  • http://mi.mathnet.ru/rus/sigma1330
  • http://mi.mathnet.ru/rus/sigma/v14/p31

    Цитирующие статьи в Google Scholar: Русские цитаты, Цитаты на английском языке
    Статьи по теме в Google Scholar: Русские статьи, Английские статьи

  • Количество просмотров:
    Эта страница: 237
    Полный текст: 18
    Ссылки: 8

    Модернизация - основа безопасности и продления срока службы энергоблоков Курской АЭС

    В 1990 году Государственная инспекция по атомной энергии наложила ограничение мощности на энергоблоки 1 и 2 Курской АЭС (70%).С 1993 года завод постоянно модернизирует свои агрегаты.

    Модернизация 1-го агрегата

    Первый этап проекта - апрель 1994 г. - декабрь 1997 г .:

    • Замена топливных каналов; восстановлен графитовый замедлитель; Установлены винтовые замки.
    • Модернизирована система охлаждения:
    • запущены два дополнительных аварийных насоса;
    • Коллекторы распределительные с обратными клапанами;
    • форсунки модернизированы.
    • Барабаны сепаратора модернизированы.
    • Модернизация системы отвода пароводяной смеси.
    • Циркуляционные контуры, подключенные к системам технической воды и пожарной безопасности для аварийного водоснабжения.
    • Модернизирована система управления: установлено
    • детекторов гафната.
    • Аварийная система модернизирована.
    • Дизельная электростанция модернизирована.
    • Модернизирована система скоростной подачи.
    • Первый блок перешел на уран-эрбиевое топливо.
    • Запущена система контроля течи охлаждающей жидкости.
    Второй этап проекта - октябрь 2003 г. - июнь 2004 г .: заменено
    • 1 065 топливных каналов
    • СКАЛА-МИКРО, запущено бесперебойное электроснабжение и некоторые другие системы;
    • Внедрена программа управления распределением мощности ПРИЗМА-М;
    • Крыша центрального зала усиленная;
    • Система радиационного контроля модернизирована;
    • Введен в действие щит аварийного управления;
    • Модернизирована система физической защиты и пожарной безопасности;
    • Запущена система контроля ритичности;
    • Проведен анализ безопасности.

    2-й энергоблок был перезапущен в июне 2004 года.

    С ноября 2004 года 1-й и 2-й блоки Курской АЭС работают на номинальной мощности.

    Улучшены нейтронно-физические параметры активной зоны за счет нового типа ядерного топлива и систем управления кластерами. Анализ показал, что после модернизации реакторы:

    • безопасны и защищены;
    • ,
    • имеют отрицательный температурный коэффициент реактивности и отрицательный высокий коэффициент реактивности;
    • Эффект обезвоживания снижен до ~ 1β.

    Сборочные каналы и твэлы имеют резервную емкость для нормальной работы. Аварийные системы и системы снижения мощности независимы и поддерживают реакцию в докритическом состоянии как в нормальных, так и в аварийных условиях.

    Фактор риска для 1-го и 2-го энергоблоков снижен с 6,17x10 -5 до 9,34x10 -6 на реактор в год. Это половина стандарта, установленного МАГАТЭ по безопасности № 75-INSAG-3, Вена, 1988 г. для старых реакторов.

    Международная инспекция по анализу безопасности 1-го блока Курской АЭС

    Масштабный анализ безопасности был проведен на 1-м энергоблоке Курской АЭС с октября 2002 г. по апрель 2004 г. в соответствии с соглашением между Правительством Российской Федерации и Европейской Банк Реконструкции и Развития.Это был первый анализ безопасности на АЭС с РБМК.

    В этом проекте было задействовано 70 иностранных экспертов: от RISKAUDIT IRSN / GRS International, AECL (Канада), Batelle PNNL (США), GRS (Германия), IRSN (Франция), NNC Limited (Великобритания), NGR (Нидерланды), SERGO (Великобритания), Scientech Inc. (США). Все они были официально номинированы ЕБРР. Российские специалисты представляли Институт ядерной безопасности, Физико-энергетический институт, ЛАЭС.

    За время проекта проведено 36 рабочих встреч.Иностранные специалисты трижды посетили Курскую АЭС. Эксперты осмотрели системы безопасности завода и встретились с местным персоналом. Они смогли собственными глазами увидеть результаты модернизации завода и мероприятий по повышению безопасности.

    Их выводы и рекомендации были обобщены в отчете о состоянии 1-го блока Курской АЭС после модернизации.

    Основные выводы экспертов следующие:

    • Безопасность 1-го блока Курской АЭС значительно повысилась в результате модернизации систем аварийного расхолаживания, управления, безопасности и других значимых систем.
    • Устранены существенные отклонения от действующих российских стандартов и рекомендаций МАГАТЭ по безопасности РБМК.

    В мае 2004 года Группа высокого уровня ЕБРР утвердила отчет, тем самым подтвердив выполнение Россией обязательства по повышению безопасности АЭС с реакторами РБМК первого поколения.

    Эксплуатирующая организация одобрила результаты анализа и отметила, что зарубежные эксперты приняли подходы России к повышению безопасности и дальнейшей эксплуатации РБЯМ.

    Основные направления дальнейшего повышения безопасности Курской АЭС

    Курская АЭС планирует модернизировать 3-й и 4-й блоки и провести следующие мероприятия:

    • Повысить содержание активной зоны (с обогащением на 2,8%). уран-эрбиевое топливо, системы управления кластерами) с целью повышения самозащиты реактора. В январе 2005 г. на 3-м и 4-м энергоблоках впервые было использовано уран-эрбиевое топливо. Это топливо (2,8-обогащенный уран-235 с содержанием оксида эрбия 0,6%) было испытано и лицензировано соответствующими органами.Новое топливо неплохое и успешно используется заводом. Кластерные системы контроля помогли снизить положительный эффект радиоактивности в результате высыхания.
    • Для внедрения новых вычислительных программ;
    • Для модернизации системы аварийного реагирования;
    • Для повышения безопасности основных систем;
    • Внедрить систему управления;
    • Внедрить систему анализа критичности на 3-м и 4-м блоках.
    • Для повышения квалификации персонала и повышения культуры безопасности.
    • Разработать новые мероприятия на основе анализа предыдущих и сравнения с нормативными требованиями;
    • Продолжить глубокий анализ безопасности.

    Комбинация комплекса рутений (II) -арен [Ru (η 6 - p-цимен) Cl 2 (pta)] (RAPTA-C) и ингибитора рецептора эпидермального фактора роста эрлотиниба приводит к эффективной ангиостатической и противоопухолевой активности

    Жизнеспособность клеток и анализ миграции

    Влияние эрлотиниба и RAPTA-C на жизнеспособность клеток исследовали на иммортализованных (ECRF24) и первичных (HUVEC) эндотелиальных клетках человека (ECs), а также на клетках карциномы яичников человека A2780 и устойчивом к цисплатину варианте этой клеточной линии A2780cisR (рис.1А). Кривые доза-ответ для обоих соединений, применяемых в качестве монотерапии, ранее были представлены для клеточной линии ECRF24 34 и были построены для других клеточных линий (данные не показаны). Мы выбрали диапазон доз, который подавляет жизнеспособность клеток на ок. <40% на основании этих кривых (для эрлотиниба <15 мкМ и для RAPTA-C <200 мкМ). Примечательно, что комбинации эрлотиниб / RAPTA-C значительно подавляли жизнеспособность клеток (эрлотиниб 10 мкМ / RAPTA-C 10 мкМ, обозначенный как комбинация I , и эрлотиниб 5 мкМ / RAPTA-C 100 мкМ, обозначенный как комбинация II ; Фиг. .1A и дополнительный рисунок 1 для других исследованных соотношений доз). Измерение абсолютного количества клеток в клетках A2780 и A2780cisR показало, что количество клеток для клеток, обработанных эрлотинибом / RAPTA-C, не сильно увеличилось (что свидетельствует о остановке пролиферации клеток), тогда как количество клеток в необработанных клетках утроилось через 72 часа (рис. 1Б). Это различие предполагает, что комбинации эрлотиниб / RAPTA-C вызывают состояние клеточного старения, поскольку количество клеток также не уменьшается (что может указывать на гибель клеток).Интересно, что оценка количества клеток A2780 и A2780cisR очень напоминала активность в отношении жизнеспособности клеток через 24, 48 и 72 часа лечения (дополнительный рисунок 2). Для оценки специфичности и потенциальной токсичности активность эрлотиниба и RAPTA-C была протестирована на незлокачественных типах клеток эмбриональных клеток почек человека и мононуклеарных клетках периферической крови (HEK-293 и PBMC соответственно; дополнительный рисунок 3). На жизнеспособность клеток PBMC и HEK лишь минимально влияли эрлотиниб, RAPTA-C или их комбинации, что предполагает повышенную специфичность по отношению к активированным эндотелиальным клеткам и типам раковых клеток, а также благоприятный профиль токсичности комбинации лекарственных средств.

    Фиг. 1

    Активность эрлотиниба и RAPTA-C в отношении жизнеспособности эндотелиальных клеток и клеток рака яичников ( A ) и общего покрытия клеток на 1 мкм поверхности 2 ( B ). ( A ) Ингибирование жизнеспособности клеток эрлотинибом, RAPTA-C и их комбинациями в эндотелиальных клетках (иммортализованных ECRF24 и первичных эндотелиальных клетках пупочной вены человека; HUVEC) и клетках рака яичников (A2780 и A2780cisR). Показаны комбинации эрлотиниба 5 мкМ / RAPTA-C 10 мкМ, эрлотиниба 10 мкМ / RAPTA-C 10 мкМ (обозначенного как I) и эрлотиниба 5 мкМ / RAPTA-C 100 мкМ (обозначенного как II ).Жизнеспособность клеток оценивали через 72 часа обработки лекарственным средством с помощью люминесцентного анализа CellTiter-Glo и представляли в виде процента от контроля. Показаны значения индекса комбинации (CI) на клеточную линию для комбинаций эрлотиниба / RAPTA-C. Показана значимость по сравнению с CTRL (клетки, обработанные 0,14% ДМСО), с * P <0,05 и ** P <0,01, на основании однофакторного дисперсионного анализа ANOVA с апостериорным тестом Тьюки (ECRF24: F (19, 219) = 13,69, P <0,0001; HUVEC: F (19, 175) = 16,83, P <0,0001; A2780: F (19, 85) = 10,86, P <0.0001; A2780cisR: F (19, 205) = 58,2, P <0,0001). ( B ) Общее покрытие клеток A2780 и A2780cisR, прикрепленных к дну 96-луночного планшета. Общее покрытие клеток оценивалось через 0, 24, 48 и 72 часа лечения лекарственными препаратами и автоматически измерялось и определялось количественно. Показанные значения представляют собой абсолютные значения общей поверхности в мкм 2 , занятой клетками. Значения представляют собой среднее значение по крайней мере одного эксперимента, выполненного в трех экземплярах, а столбцы ошибок представляют собой SEM.

    Для исследования возможного синергизма между эрлотинибом и RAPTA-C для каждой комбинации препаратов был определен индекс комбинации (ДИ) (рис.1A и дополнительная таблица 1). ДИ <1 указывает на синергетический эффект, когда ДИ = 1, эффект является аддитивным, а ДИ> 1 соответствует антагонизму. Синергетическая эффективность (ДИ <1) наблюдалась почти для всех комбинаций, испытанных на всех типах клеток.

    Дополнительно исследовали влияние различных схем введения лекарств на общую эффективность комбинаций лекарств в клеточных линиях ECRF24 и A2780 in vitro . Таким образом, эффективность каждой комбинации проверялась при добавлении одного лекарства за 2 часа до добавления другого лекарства, и наоборот .Сравнение обоих режимов дозирования по ингибированию жизнеспособности клеток не выявило значительных различий, которые можно было бы отнести к схеме введения (данные не показаны).

    Мы дополнительно оценили активность комбинаций эрлотиниб / RAPTA-C по их способности ингибировать подвижность клеток ECRF24 (эндотелиальные), A2780 и A2780cisR (раковые) с использованием анализа царапин на ранах. На сплошном слое клеток делали царапины и определяли относительное закрытие раны. Ни одно лекарство, ни какая-либо из оцениваемых комбинаций лекарств существенно не ингибировали подвижность клеток ECRF24, что согласуется с результатами нашего предыдущего исследования 34 .Следует отметить, что в анализе царапин на раны клетки обрабатывают только в течение 6 часов, тогда как жизнеспособность клеток оценивают после 72 часов воздействия соединений, что может частично объяснять ограниченную активность, наблюдаемую в царапинах. анализ ран (дополнительный рисунок 1).

    Чтобы визуализировать взаимосвязь между различными концентрациями эрлотиниба / RAPTA-C и эффективностью комбинации лекарств (с точки зрения ингибирования жизнеспособности клеток), были построены поверхности ответа для каждого типа клеток.Форма поверхности ответа различается для разных типов клеток (рис. 2А). Поверхности ответа использовали для идентификации комбинаций, которые будут использоваться в моделях in vivo . Комбинации соотношения доз, отмеченные звездочкой (эрлотиниб 10 мкМ / RAPTA-C 10 мкМ, обозначенный как I , и эрлотиниб 5 мкМ / RAPTA-C 100 мкМ, обозначенный как II на фиг. 2A), были выбраны для перевода в . in vivo , поскольку они представляют минимальные дозировки лекарственного средства в пределах области поверхности ответа, показывающей максимальную эффективность (красный / оранжевый участок поверхности), для A2780cisR (комбинация I ) и A2780 (комбинация II ).Более того, обе комбинации приводят к аналогичному ингибированию типов эндотелиальных клеток HUVEC и ECRF24, таким образом поддерживая антипролиферативный эффект обеих комбинаций в типах эндотелиальных клеток.

    Фигура 2: Поверхности ответа ингибирования жизнеспособности рака яичников и эндотелиальных клеток в отношении различных доз эрлотиниба / RAPTA-C при комбинированном лечении и клеточном поглощении Ru клетками рака яичников.

    ( A ) Изображения показывают визуальное представление эффекта с точки зрения ингибирования жизнеспособности клеток систематического изменения концентраций лекарственного средства, содержащего комбинации эрлотиниба и RAPTA-C.Диапазон показан от низкой эффективности (синий) до высокой эффективности (красный). Оранжевая звезда представляет комбинацию I ; эрлотиниб / RAPTA-C (10/10 мкМ), а зеленая звездочка представляет комбинацию II ; эрлотиниб / RAPTA-C (5/100 мкМ). Эти соотношения доз были выбраны для перевода в экспериментов in vivo . Входные данные, используемые для создания поверхностей ответа, показаны на фиг. 1A и дополнительном рисунке 1. ( B ) Поглощение Ru в каждой клеточной линии для оптимальной комбинации, идентифицированной в анализах пролиферации клеток.Значения представляют собой среднее значение сигнала Ru 102 на миллиард (частей на миллиард), нормализованное к содержанию белка (на мкг белка) каждого образца из одного эксперимента, выполненного в трех повторностях, с полосами ошибок, представляющими SEM. Значимость указана для комбинированного лечения по сравнению с группой лечения одним лекарственным средством RAPTA-C (* P = 0,028 и 0,045 для клеток A2780 и A2780cisR, соответственно; * P <0,05 и ** P <0,01).

    Поглощение рутения клетками

    Ранее сообщалось, что внутриклеточное накопление Ru может составлять синергетические взаимодействия между KP1339 и сорафенибом 26 .Чтобы исследовать возможный аналогичный механизм, лежащий в основе наблюдаемого синергизма, клеточное поглощение рутения было проанализировано с помощью масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой (ICP-MS) в каждой клеточной линии после 5-часового периода воздействия выбранной, оптимальной комбинации лекарств или соответствующей RAPTA Только доза -C (рис. 2B). Ru накапливается в раковых клетках при концентрациях RAPTA-C как 10, так и 100 мкМ (1,08 среднее значение сигнала Ru 102 (частей на миллиард / мкг белка) при 100 мкМ в A2780 и 0,45 (частей на миллиард / мкг белка) при 10 мкМ в A2780cisR).Кроме того, эрлотиниб значительно увеличивает поглощение Ru в обеих линиях раковых клеток по сравнению с RAPTA-C, вводимым отдельно (т. Е. Эрлотиниб вызывает увеличение среднего сигнала Ru 102 на 0,46 (частей на миллиард / мкг белка) в A2780 и на 0,38 (частей на миллиард / мкг белка) в A2780cisR; фиг. 2B).

    RAPTA-C в дозе 10 мкМ не накапливается в клетках ECRF24, тогда как воздействие 100 мкМ RAPTA-C приводит к значительному поглощению Ru (средний сигнал Ru 102 0,09 (частей на миллиард / мкг белка) и 1 .23 (частей на миллиард / мкг белка) для RAPTA-C 10 мкМ и 100 мкМ соответственно). Добавление эрлотиниба к этим концентрациям RAPTA-C не повлияло на поглощение Ru клетками ECRF24 для любой комбинации препаратов (средний сигнал Ru 102 0,01 (частей на миллиард / мкг белка) и 1,18 (частей на миллиард / мкг белка) для комбинации ). I и II соответственно).

    Механизм гибели клеток, вызванный комбинациями эрлотиниб / RAPTA-C

    Для исследования механизма гибели клеток комбинаций эрлотиниба / RAPTA-C в ЭК и клетках карциномы яичника профили ДНК оценивали с помощью анализа проточной цитометрии после окрашивания йодидом пропидия. (ЧИСЛО ПИ).Сунитиниб (10 мкМ) был включен в анализы в качестве положительного контроля апоптоза 41 . Хотя лечение одним лекарством не вызывало значительного апоптоза, комбинация I и II приводила к индукции апоптоза (например, индукция апоптоза на 16,3% и 16,7% в клетках ECRF24 для комбинации I и II , соответственно, рис. . 3А). Интересно, что как в A2780, так и в устойчивых к цисплатину клетках A2780 (A2780cisR) наблюдалась лишь незначительная индукция апоптоза (рис.3A и дополнительный рисунок 4A для других исследованных соотношений доз).

    Фиг. 3. Индукция апоптоза в клетках эндотелиальной карциномы и карциномы яичников человека и образование мостиков ДНК и микроядер в клетках карциномы яичников.

    Апоптоз и распределение клеточного цикла оценивали с помощью анализа проточной цитометрии, основанного на окрашивании ДНК пропидием йодидом (PI). Сунитиниб (10 мкМ) использовали в качестве положительного контроля. Комбинация, состоящая из 10 мкМ эрлотиниба / 10 мкМ RAPTA-C, обозначена как I , а эрлотиниб 5 мкМ / RAPTA-C 100 мкМ обозначена как II .( A ) Индукция апоптоза в клетках ECRF24, HUVEC, A2780 и A2780cisR. ( B ) Вестерн-блот-анализ обработки эрлотинибом / RAPTA-C в клетках A2780. Клетки обрабатывали в течение 2 ч, после чего готовили клеточные лизаты. Иммуноблоттинг проводили с использованием антител FAK, AKT и ERK. GAPDH был включен в качестве контроля загрузки. * P <0,05, ** P <0,01 указывают на значимость по сравнению с контролем. ( C ) Типичные изображения окрашивания на DAPI (синий) и фаллоидин (красный) в клетках A2780.Желтые стрелки указывают на мосты ДНК, а зеленые стрелки указывают на микроядра. ( D ) Количественное определение мостиков ДНК между ядрами и количественное определение микроядер в клетках A2780, окрашенных DAPI. Статистический анализ выполняли с помощью однофакторного дисперсионного анализа (мосты A2780: F (6, 29) = 4,739, P = 0,0018; A2780 микронуцели: F (6, 29) = 3,293, P = 0,0135; мосты A2780cisR: F (6, 28) = 8,650, P> 0,0001; A2780cisR micronuceli: F (6, 28) = 2,469, P = 0,0482). Значения представляют собой среднее значение по крайней мере одного эксперимента, выполненного в трех экземплярах, а столбцы ошибок представляют собой SEM.

    Для дальнейшего изучения механизма синергетической антипролиферативной активности комбинаций эрлотиниб / RAPTA-C было проанализировано распределение клеточного цикла. Во всех протестированных типах клеток не наблюдалось четкой остановки G2 / M- или S-фазы для эрлотиниба, RAPTA-C или их комбинаций по сравнению с контролем (показано для клеток ECRF24 на дополнительном рисунке 4B). Кроме того, различия в фазах S, G0 / G1 и G2 / M для всех тестируемых условий были лишь незначительно (незначительно) по сравнению с контролем.Эти данные показывают, что индукция апоптоза способствует механизму, с помощью которого комбинация эрлотиниб / RAPTA-C вызывает гибель клеток в клетках ECRF24 и HUVEC, но не в клетках A2780 и A2780cisR. Кроме того, как в клетках A2780, так и в клетках A2780cisR была изучена индукция аутофагии, поскольку обработка эрлотинибом / RAPTA-C не приводила к явной индукции апоптоза, и есть данные, позволяющие предположить, что индукция аутофагии является альтернативным путем к гибели клеток 42 . Однако обработка эрлотинибом / RAPTA-C не приводила к увеличению образования аутофагических вакуолей ни в одной из линий клеток (дополнительная фигура 5).

    На следующем этапе мы контролировали, влияет ли лечение комбинацией II на экспрессию FAK (рис. 3B), которая, как известно, усиливается при раке яичников человека и связана с диссеминацией карциномы яичников 43 . Результаты иммуноблоттинга выявили ослабление экспрессии FAK комбинацией II в клетках A2780, что можно увидеть по уменьшению интенсивности и толщины соответствующей полоски вестерн-блоттинга (фиг. 3B). Однако ни на фосфорилированные FAK, AKT или ERK не влияла комбинированная обработка в клетках A2780 (дополнительная фигура 6).Более того, окрашивание родамин-фаллоидин против актина (рис. 3С, выделено красным) показало, что обработанные клетки выглядели более округлыми и проявляли тенденцию к агрегации. Кроме того, полимеризация актина была явно нарушена, и напряжение волокон уменьшилось. Окрашенные актиновые волокна в обработанных клетках были конденсированы на периферии клетки по сравнению с центральной частью клетки в группе CTRL. Более того, пертузии, видимые в CTRL-клетках, были ослаблены в комбинациях и обработанных монотерапией клетках.Об этих явлениях ранее сообщалось в FAK-дефицитных клетках 44 . Уровни фосфорилированных белков не изменились (дополнительная фигура 7).

    Чтобы обнаружить потенциальные дефекты в организации актина и клеточной морфологии, мы затем окрашивали клетки через 24 часа обработки флуоресцентным фаллоидином (маркер актина) и DAPI (маркер ДНК; рис. 3C, D, синий). После обработки комбинацией I (** P <0,01 по сравнению с CTRL, однофакторный дисперсионный анализ) и, в меньшей степени, комбинацией II (** P <0.01 против CTRL, односторонний дисперсионный анализ), мы наблюдали в клетках A2780 и A2780cisR, но не в клетках ECRF24 (дополнительный рисунок 6), значительное увеличение количества мостиков ДНК (рисунок 3C, правый столбец, верхнее изображение, желтые стрелки). Такие ДНК-мосты возникают в результате вступления в митоз с частично нереплицированной ДНК, слиянием хромосом или в результате серьезных ошибок сегрегации хромосом 45 . Эти клетки также часто отображают микроядра (рис. 3C, правый столбец, среднее изображение), еще один маркер ошибок сегрегации хромосом или разрывов хромосом, которые связаны с геномной нестабильностью и хромосомными повреждениями 46 .Мосты ДНК сохраняются после выхода из митоза, задерживают расслоение и могут привести к нарушению цитокинеза и тетраплоидизации 47 . В соответствии с такой гипотезой клетки с мостиками ДНК часто содержат остатки цитокинетических колец, что указывает на нарушение цитокинеза (рис. 3C, правый столбец, нижнее изображение). Таким образом, комбинации I и II изменяли не прогрессию клеточного цикла, а результат клеточного деления в клетках A2780 и A2780cisR.

    Оценка

    in vivo антиваскулярных эффектов комбинаций эрлотиниба / RAPTA-C

    Ингибирование образования новых сосудистых ростков оценивали на модели хориоаллантоисной мембраны цыпленка (CAM) 48 после вазоокклюзионного Visudyne ® -фотодинамическая терапия (ФДТ) 49 .Применение ФДТ к сосудистой сети САМ приводит к закупорке кровеносных сосудов, что приводит к индукции ангиогенеза и реваскуляризации обрабатываемой ткани 49 . Эта модель индуцированного ангиогенеза используется между 11 и 12 днями развития эмбриона (EDD), когда неоваскуляризация завершена. Активность комбинаций эрлотиниб / RAPTA-C была исследована на этой модели на основе внутривенного (i.v.) введения препаратов, применяемых непосредственно после лечения PDT (фиг. 4A).В контрольной группе через 24 часа после ФДТ наблюдали рост сосудистых отростков (обозначенных зелеными стрелками) от края обработанной ФДТ области к центру зоны обработки (фиг. 4A). В группе, получавшей эрлотиниб / RAPTA-C, наблюдалось уменьшение количества проростков в дополнение к закупоренным кровеносным сосудам (показано красными стрелками). Количественная оценка сосудистых проростков показала значительное уменьшение количества проростков для обеих тестируемых комбинаций (рис. 4B; ** P <0,01 по сравнению с CTRL для комбинации I и ** P <0.05 против CTRL для комбинации II ). Кроме того, комбинация II, , но не комбинация I, значительно уменьшила количество точек ветвления (т. Е. Количество ветвей, из которых развивается росток), в то время как ни одна из обработок одним лекарством не повлияла на количество точек ветвления (Рис. . 4B; * P <0,05 по сравнению с CTRL). Взятые вместе, эти результаты указывают на антиангиогенный эффект комбинаций лекарственных средств.

    Рис. 4. Активность комбинаций эрлотиниба / RAPTA-C на сосудистую сеть САМ.

    ( A ) Флуоресцентная ангиограмма PDT-индуцированной неоваскуляризации САМ после лечения эрлотинибом, RAPTA-C и комбинациями эрлотиниба / RAPTA-C. Желтым кружком показана область, обработанная ФДТ, с продолжающейся реваскуляризацией. Зеленые стрелки показывают образование сосудистого отростка в результате лечения ФДТ. Красные стрелки указывают на закупорку кровеносных сосудов. ( B ) Количественную оценку количества ростков, средней длины сосудистых ростков и количества точек ветвления на мм 2 проводили с использованием ImageJ.Введение препарата производилось непосредственно после ФДТ, а флуоресцентные ангиограммы регистрировались через 24 ч после лечения. Эрлотиниб / RAPTA-C (10/10 мкМ) и эрлотиниб / RAPTA-C (5/100 мкМ) обозначаются как комбинации I и II соответственно. Белые полосы представляют 200 мкм и действительны для всех изображений с соответствующим увеличением. N = 5–6 яиц. Значения представляют собой среднее значение, а столбцы ошибок - SEM. Статистический анализ был проведен с использованием одностороннего теста ANOVA с апостериорным множественным сравнением Даннета только между комбинированной и контрольной группами (количество проростков: F (2,31) = 3.51, Р = 0,0415; средняя длина сегмента: F (2,14) = 7,607, P = 0,0058; точек ветвления на мм 2 : F (3,9) = 5,63, P = 0,0188). * P <0,05 и ** P <0,01 указывают на значимость по сравнению с CTRL (0,14% ДМСО).

    Ингибирование роста опухоли в модели CAM комбинациями эрлотиниб / RAPTA-C

    Влияние выбранных комбинаций эрлотиниба / RAPTA-C было исследовано на рост как опухолей человека A2780, так и их устойчивых к цисплатину аналогов (A2780cisR) в CAM модель.В этой модели оплодотворенные куриные яйца инкубировали в инкубаторе для вылупления и в день развития эмбриона (EDD) 8 опухолевые клетки имплантировали на хориоаллантоисную мембрану, после чего посредством EDD11 появлялись васкуляризированные трехмерные опухоли. При переводе доз лекарств с in vitro на in vivo, соотношение доз лекарств сохранялось с учетом ранее испытанных субоптимальных эффективностей отдельных лекарств (эрлотиниб 5 мкМ и 10 мкМ in vitro соответствует 10 мкг / кг / день и 20 мкг / кг / день in vivo ; RAPTA-C 10 и 100 мкМ in vitro соответствуют 21.6 и 216 мкг / кг / день in vivo ) 34 . Опухоли обрабатывали 20 мкл внутривенно. инъекции в дни лечения 1 и 2 (EDD 11/12) и дозы лекарственного средства были скорректированы на основе средней массы куриного эмбриона на EDD 11/12. Было обнаружено, что лечение опухолей A2780 одними только лекарственными средствами ингибировало рост опухоли на <20%, тогда как оцениваемые комбинации лекарственных средств ингибировали рост опухоли на 34% (комбинация I ; по сравнению с CTRL; не значимо; ДИ = 0,73) и 64 % (комбинация II ; vs.CTRL; ** P <0,0001; ДИ = 0,34) в последний день эксперимента (рис. 5А). Эти данные были подтверждены измерением веса опухоли после резекции (по сравнению с CTRL; * P <0,05; фиг. 5C). Макроскопические изображения опухолей, удаленных на 8-й день лечения, показывают четкое уменьшение размера опухоли, а также различия в морфологии опухоли. Контрольные опухоли и опухоли, обработанные одним лекарственным средством, выглядят неоднородными по размеру и цвету, в то время как опухоли, обработанные комбинацией, обычно менее васкуляризованы (обозначено бледным цветом) и кажутся более однородными (рис.5Б). Плотность микрососудов (MVD) в обработанных опухолях A2780 определяли количественно путем окрашивания маркера эндотелиальных клеток CD31 в срезах опухоли. Интересно, что лечение только эрлотинибом (10 мкг / кг / день) или RAPTA-C (216 мкг / кг / день) привело к снижению MVD (на 27% и 22% соответственно, рис. 5D). Лечение комбинациями обоих соединений снизило MVD на 37% (комбинация I ; ** P <0,01; фиг. 5) и на 34% (комбинация II ; * P <0,05; фиг. 5D).

    Фигура 5: Ингибирование роста опухоли A2780 в модели CAM эрлотинибом, RAPTA-C и комбинированной обработкой.

    ( A ) Кривые роста опухолей для опухолей A2780, трансплантированных на САМ, показывающие объем опухоли по отношению к дню лечения, представленный как процент от конечного контрольного объема опухоли. S означает синергизм (CI <1). N = 30 в контрольной группе и N = 4–14 в группах лечения (двухфакторный дисперсионный анализ: F (6,555) = 8,994, P <0,0001). ( B ) Репрезентативные изображения резецированных опухолей в каждой группе лечения. Контрольные опухоли обрабатывали 0,14% ДМСО в NaCl. ( C ) Масса опухоли (мг) после резекции на 8-й день лечения (когда эксперимент был прекращен (однофакторный дисперсионный анализ ANOVA: F (2, 48) = 3.35, P = 0,04)). ( D ) Анализ плотности микрососудов (MVD), измеренный как количество сосудов на мм 2 васкуляризированной площади опухоли и представленный как процент от контроля (однофакторный дисперсионный анализ: F (2, 25) = 15,23, P <0,0001 ). ( E ) Количественная оценка процента целых срезов опухоли, положительных по маркеру пролиферации Ki67 (однофакторный дисперсионный анализ: F (2, 27) = 4,25, P = 0,025) ( F ) Репрезентативные изображения иммуногистохимических ( ИГХ) для маркера эндотелиальных клеток CD31 (коричневый), окрашенного гематоксилином (фиолетовый / синий).( G ) Типичные изображения ИГХ-окрашивания маркера пролиферации Ki67 (коричневый / оранжевый), окрашенного гематоксилином (фиолетовый / синий). I указывает на комбинацию эрлотиниба 20 мкг / кг / день + RAPTA-C 21,6 мкг / кг / день, а II указывает на комбинацию эрлотиниба 10 мкг / кг / день + RAPTA-C 216 мкг / кг / день на всех графиках . Планки погрешностей представляют SEM и * P <0,05, ** P <0,01 указывают на значимость по сравнению с CTRL. Статистический анализ выполняли с использованием двустороннего дисперсионного анализа ANOVA с апостериорным тестом множественного сравнения Тьюки ( A ) или одностороннего ANOVA с апостериорным тестом множественного сравнения Даннета между комбинацией и контролем ( C - E ) .

    Синергетическое ингибирование роста опухоли A2780 комбинациями эрлотиниб / RAPTA-C может, по крайней мере частично, быть отнесено к ингибированию ангиогенеза на основе снижения MVD, наблюдаемого в обработанных опухолях. Примечательно, что хотя комбинация I лишь незначительно подавляла общий рост опухоли по сравнению с лечением одним лекарственным средством (незначительно по сравнению с CTRL), она действительно приводила к значительному подавлению MVD (37%, ** P <0,01). Этот результат подтверждается поверхностями отклика, представленными на рис.2, где обе комбинации демонстрируют аналогичный диапазон эффективности в линиях эндотелиальных клеток. Однако четкое различие в активности каждой комбинации наблюдается в клеточной линии A2780, поскольку комбинация II оказывает гораздо более сильное ингибирующее действие на пролиферацию опухолевых клеток (ингибирование жизнеспособности клеток на 58%) по сравнению с комбинацией I (жизнеспособность клеток 31%). торможение).

    Чтобы оценить влияние лекарственного лечения на количество пролиферирующих клеток, опухолевые ткани окрашивали на маркер пролиферации Ki67.Количественная оценка окрашивания Ki67 + на всей поверхности опухоли выявила значительное снижение процента ткани Ki67 + только для комбинации I (37% ингибирование по сравнению с CTRL; * P <0,05; фиг. 5E). Репрезентативные изображения обработанных опухолей показывают уменьшение ткани с жизнеспособными пролиферирующими клетками (рис. 5G). Поскольку цисплатин является препаратом первой линии для лечения пациентов с карциномой яичников на высокой стадии, активность in vivo комбинаций эрлотиниба / RAPTA-C также определялась на опухолях A2780 с индуцированной устойчивостью к цисплатину.Это может продемонстрировать терапевтический потенциал в лечении пациентов с карциномой яичников, проявляющих резистентность к стандартной терапии. Мы предположили, основываясь на данных in vitro , что лечение комбинацией эрлотиниб / RAPTA-C может эффективно ингибировать рост опухоли в опухолях карциномы яичника A2780cisR, поскольку комбинация лекарств, по-видимому, действует по другому механизму, чем цисплатин. Подобно опухолям, полученным из не подвергавшихся лечению клеток A2780, однократное введение лекарства лишь незначительно уменьшало рост опухоли A2780cisR (рис.6А). Обработка комбинацией I приводила к 58% ингибированию роста опухоли (** P <0,01 по сравнению с CTRL и лечением одним лекарством; CI = 0,07) в последний день лечения. Для комбинации II наблюдали ингибирование роста опухоли на 67% (** P <0,01 по сравнению с CTRL; CI = 0,69). Примечательно, что вес эмбриона оценивался в последний день эксперимента и не подвергался значительному влиянию какого-либо комбинированного лечения в любой модели опухоли (дополнительная фигура 8), что свидетельствует об отсутствии токсичности комбинированных обработок.

    Фиг. 6. Ингибирование роста опухоли A2780cisR в модели CAM эрлотинибом, RAPTA-C и их комбинированным лечением.

    ( A ) Кривые роста опухолей опухолей A2780cisR, трансплантированных на САМ, показывающие объем опухоли по отношению к дню лечения, представленный как процент от конечного контрольного объема опухоли. S указывает на синергию. N = 20 в контрольной группе и N = 7–15 в группах лечения. Контрольные опухоли обрабатывали 0,14% ДМСО в NaCl (двухфакторный дисперсионный анализ: F (6550) = 4.692, P = 0,0001). ( B ) Масса опухоли (мг) после резекции на 8-й день лечения (когда эксперимент был прекращен; несущественно, однофакторный дисперсионный анализ ANOVA: F (2,54) = 3,05, P = 0,055). ( C ) Анализ плотности микрососудов (MVD), измеренный как количество сосудов на мм 2 васкуляризированной площади опухоли и представленный как процент от контроля (односторонний ANOVA: F (2,31) = 5,641, P = 0,0081 ). ( D ) Количественная оценка процента всех поверхностей опухоли, положительных по маркеру пролиферации Ki67 (однофакторный дисперсионный анализ ANOVA: F (2,34) = 4.67, P = 0,016). ( E ) Типичные изображения ИГХ-окрашивания маркера эндотелиальных клеток CD31 (коричневый), окрашенного гематоксилином (фиолетовый / синий). ( F ) Репрезентативные изображения ИГХ-окрашивания для маркера пролиферации Ki67 (коричневый / оранжевый), окрашенного гематоксилином (фиолетовый / синий). I указывает комбинацию эрлотиниба 20 мкг / кг / день + RAPTA-C 21,6 мкг / кг / день, а II указывает комбинацию 10 мкг / кг / день + RAPTA-C 216 мкг / кг / день на всех графиках.Планки погрешностей представляют SEM и * P <0,05, ** P <0,01 указывают на значимость по сравнению с CTRL. Статистический анализ выполняли с использованием двустороннего дисперсионного анализа с апостериорным тестом множественного сравнения Тьюки ( A ) или одностороннего дисперсионного анализа с апостериорным тестом множественного сравнения Даннета между комбинацией и контролем ( B - D ). ).

    Интересно, что в то время как опухоли, обработанные комбинацией II , показали аналогичную эффективность в отношении A2780 и A2780cisR (64% против 67% ингибирования роста опухоли соответственно), комбинация I более эффективна в опухолях A2780cisR по сравнению с нерезистентным вариантом ( 34% vs.58% ингибирование роста опухоли для опухолей A2780 и A2780cisR соответственно). Это различие в активности подтверждается поверхностями ответа, показанными на фиг. 2. В частности, явное отсутствие активности комбинации I можно увидеть в линии клеток A2780, в то время как ее активность в линии клеток A2780cisR относительно высока.

    Количественная оценка срезов опухоли A2780cisR, окрашенных CD31, выявила снижение MVD для монотерапии эрлотинибом и RAPTA-C (т.е. на 19% для эрлотиниба при 20 мкг / кг / день и 28% для RAPTA-C при 216 мкг / кг / день. , Рис.6С). В обоих случаях рост опухоли также уменьшился, хотя и незначительно (фиг. 6A). Комбинированное лечение эрлотинибом / RAPTA-C при обоих соотношениях доз приводило к снижению MVD, хотя это снижение было значительным только для комбинации II (34% ингибирование; по сравнению с CTRL; ** P <0,01; фиг. 6C). Количественная оценка образцов ИГХ, окрашенных на маркер пролиферации Ki67, показала значительное снижение процентного содержания ткани Ki67 + только для комбинации I (ингибирование 16% противCTRL; ** P <0,01; Рис. 6D).

    Ингибирование роста опухоли на мышиной модели ксенотрансплантата комбинациями эрлотиниб / RAPTA-C

    Противоопухолевая активность комбинаций эрлотиниба / RAPTA-C (эрлотиниб в дозе 5 мг / кг / день и RAPTA-C в дозе 100 мг / кг / день; обозначается как комбинация II ; эрлотиниб в дозе 10 мг / кг / день и RAPTA-C в дозе 100 мг / кг / день; упоминается как комбинация III ) был дополнительно исследован на голых мышах с ксенотрансплантатом опухолей A2780. Лечение комбинацией II и III привело к аналогичным уровням аддитивного ингибирования роста опухоли (48 и 53% соответственно; ** P <0.01 против CTRL; Фиг. 7A), тогда как лечение эрлотинибом 5 мг / кг и 10 мг / кг или RAPTA-C (100 мг / кг) в качестве монотерапии подавляло рост опухоли только на 27%, 25% и 37% соответственно. Примечательно, что средняя масса тела мышей, измеренная в последний день эксперимента, не подвергалась значительному влиянию ни одной из обработок, что свидетельствует об отсутствии токсичности лекарственного средства (фиг. 7B). Оценка окрашивания на CD31 в срезах опухоли показала, что комбинированное лечение значительно снижает MVD (на 30%), тогда как монотерапия имела небольшой эффект (* P <0.05; Рис. 7C). Кроме того, оценка плотности ядер Ki67 + в срезах опухоли выявила снижение плотности пролиферирующих клеток (27% ингибирование; * P <0,05; фиг. 7D). Эти результаты показывают, что комбинация эрлотиниб / RAPTA-C снижает рост опухоли за счет как антиангиогенного, так и антипролиферативного действия.

    Фигура 7: Ингибирование роста опухоли A2780 у мышей nude эрлотинибом, RAPTA-C и их комбинированным лечением.

    ( A ) Объем резецированной опухоли каждой группы лечения в качестве процентного контроля на 12 день лечения.N = 5–7 во всех группах лечения. Контрольные опухоли лечили внутрибрюшинно. с 4% ДМСО в NaCl (односторонний дисперсионный анализ с тестом множественных сравнений Тьюки: F (5,33) = 4,145, P = 0,0050). Фармакокинетические исследования на мышах показали, что период полувыведения эрлотиниба из плазмы составляет 1,5–3 часа после приема и 10,39–12,21 часа после приема для RAPTA-C 16,69 . ( B ) Масса тела (г), измеренная на 12-й день лечения. ( C ) Анализ плотности микрососудов (MVD) в комбинации III обработанных опухолей, представленных как количество сосудов на мм 2 васкуляризированной области опухоли и представлены как процент от контроля.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *